一種無甲醛動(dòng)物標(biāo)本固定液及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及動(dòng)物標(biāo)本固定液，具體的說涉及一種無甲醛動(dòng)物標(biāo)本固定液及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]動(dòng)物組織在動(dòng)物死亡后受到細(xì)胞內(nèi)酶(溶酶體酶)的作用而引起各組織器官變軟或液化，這種現(xiàn)象叫自溶。各器官中腦、脊髓、胰腺和腎上腺等自溶發(fā)生較快，甚至細(xì)胞結(jié)構(gòu)完全消失；肌肉、肝、脾、腎等自溶表現(xiàn)為質(zhì)地變軟，結(jié)構(gòu)模糊，最后細(xì)胞溶解消失；胃、腸等器官也會(huì)因消化液的作用而溶解。另外動(dòng)物體內(nèi)的細(xì)菌和環(huán)境中的細(xì)菌在動(dòng)物死亡后會(huì)大量繁殖而引起組織中蛋白質(zhì)的腐敗分解。因此標(biāo)本的保存液要具有殺菌、防霉和蛋白質(zhì)變性的作用。
[0003]目前，動(dòng)物標(biāo)本的保存普遍使用的是甲醛水溶液(福爾馬林)。福爾馬林的滲透能力強(qiáng)，能與蛋白質(zhì)中氨基結(jié)合，使蛋白質(zhì)凝固，防腐效果好。但是甲醛的揮發(fā)性極強(qiáng)，具有強(qiáng)烈的刺激性氣味，能夠?qū)θ说亩喾N器官造成損害。2004年6月，世界衛(wèi)生組織國際癌癥研宄機(jī)構(gòu)(IARC)的153號(hào)公告將甲醛由2類致癌物質(zhì)上升為I類致癌物質(zhì)。由于甲醛的強(qiáng)揮發(fā)性，會(huì)刺激接觸人員的眼結(jié)膜和呼吸道黏膜，導(dǎo)致眼刺痛、流眼淚、頭暈，皮膚接觸會(huì)造成過敏反應(yīng)、皮膚炎和濕瘆，長期接觸還可能導(dǎo)致癌癥，嚴(yán)重危害接觸人員的身體健康；在福爾馬林中長期保存的標(biāo)本還會(huì)變硬，褪色。另外由于甲醛的揮發(fā)性，在標(biāo)本保存的過程中，需要定期補(bǔ)充或更換。
[0004]乙醇(酒精)是醫(yī)學(xué)上常用的消毒劑。用于固定時(shí)濃度以80-95%為好，具有蛋白凝固、硬化、脫水等作用。能夠避免組織器官的自溶和微生物引起的器官腐敗，但其滲透力較弱，用高濃度酒精固定時(shí)，會(huì)使組織變硬，收縮較大。
[0005]專利CN 200910003987.1公開了一種含雙乙酸鹽、硝酸鹽、多元醇的尸體保存液。專利CN 1233391 A公開了一種含有鈉鹽或鉀鹽防腐劑、多羥基類保色劑和水組成的動(dòng)物標(biāo)本保存液，分別以雙乙酸鹽和氯化鈉、苯甲酸鈉、氯化鉀、亞硝酸鉀等作為防腐劑，以乙二醇、丙三醇等多元醇作為保色劑。這兩種保存液均缺少蛋白變性劑，不能很好的保存大體標(biāo)本和內(nèi)臟標(biāo)本。專利CN 102175496 B公開了無甲醛組織標(biāo)本固定液，主要包括乙醇71% -79%,2-4%的冰乙酸、4-6 %的多元醇、4_6 %的表面活性劑。此固定液的主要成分是乙醇，其滲透力較差，對大的器官固定效果較差。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題，就是提供一種不含甲醛和揮發(fā)性試劑的動(dòng)物標(biāo)本固定液及其制備方法。
[0007]為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案:
[0008]一種無甲醛動(dòng)物標(biāo)本固定液，其改進(jìn)之處在于，包括如下成分:殺菌防霉劑，蛋白變性劑，多元醇保濕劑和水，其中若殺菌防霉劑為固態(tài)，則其質(zhì)量濃度為5-20g/L，若殺菌防霉劑為液態(tài)，則其體積濃度為1-2% ;蛋白變性劑的體積濃度為5% -40% ;多元醇保濕劑的體積濃度為2% -10% ;余量為水。
[0009]進(jìn)一步的，所述的殺菌防霉劑為殼聚糖、季銨鹽類表面活性劑、山梨酸鉀、Na2EDTA中的一種或幾種。
[0010]進(jìn)一步的，所述的殼聚糖為殼聚糖乳酸鹽，所述的季銨鹽類表面活性劑為十二烷基二甲基芐基溴化銨、十二烷基三甲基氯化銨、二癸基二甲基溴化銨中的一種或幾種。
[0011 ] 進(jìn)一步的，所述的蛋白變性劑為乙醇、乙酸、丙酮中的一種或幾種，其中乙醇的體積濃度為5 % -40 %、乙酸的體積濃度為0-2 %、丙酮的體積濃度為0-2 %。
[0012]進(jìn)一步的，所述的多元醇保濕劑為乙二醇、二乙二醇、丙二醇、丙三醇中的一種或幾種。
[0013]一種無甲醛動(dòng)物標(biāo)本固定液的制備方法，其改進(jìn)之處在于，包括如下步驟:
[0014](I)稱取殼聚糖乳酸鹽5_20g或山梨酸鉀5_20g，溶解于水中，加入l_3g的Na2EDTA,攪拌均勻；
[0015](2)分別加入1-2%體積濃度的季銨鹽表面活性劑、5% -40%體積濃度的95%乙醇、0-2 %體積濃度的乙酸、0-2 %體積濃度的丙酮、2 % -10 %體積濃度的二乙二醇等試劑，攪拌均勻；
[0016](3)加水定容至 1000ml。
[0017]本發(fā)明的有益效果是:
[0018](I)本發(fā)明所公開的動(dòng)物標(biāo)本固定液配方不含甲醛，無揮發(fā)性的試劑。將新鮮動(dòng)物器官用生理鹽水沖洗后，保存在本固定液中，一年后器官無腐敗，無霉斑，色澤、形狀無明顯變化，固定液顏色無明顯變化，保存效果良好。
[0019](2)本發(fā)明所公開的動(dòng)物標(biāo)本固定液可以用于動(dòng)物解剖學(xué)器官的保存和動(dòng)物組織學(xué)組織切片制作過程中的固定，其不含甲醛，所以無揮發(fā)性氣味，對人體無害，學(xué)生也不會(huì)因?yàn)榇碳ば远辉敢饪壳?，教學(xué)效果良好。
【具體實(shí)施方式】
[0020]實(shí)施例1:
[0021]將殼聚糖5g、十二烷基三甲基氯化銨10ml、95%乙醇100ml、乙酸20ml、二乙二醇1ml加水至1000ml，即得到無甲醛標(biāo)本固定液。
[0022]實(shí)施例2:
[0023]將殼聚糖5g、十二烷基三甲基氯化銨50ml、95%乙醇100ml、乙酸20ml、二乙二醇10ml、丙三醇1ml加水至1000ml，即得到無甲醛標(biāo)本固定液。
[0024]實(shí)施例3:
[0025]將殼聚糖5g、二癸基二甲基溴化銨25ml，95%乙醇100ml、三氯乙酸(5%) 20ml、丙三醇1ml加水至1000ml，即得到無甲醛標(biāo)本固定液。
[0026]實(shí)施例4:
[0027]將殼聚糖5g、二癸基二甲基溴化銨25ml，95%乙醇100ml、乙酸20ml、丙三醇1ml加水至1000ml，即得到無甲醛標(biāo)本固定液。
[0028]實(shí)施例5:
[0029]將殼聚糖5g、二癸基二甲基溴化銨25ml，95%乙醇200ml、乙酸20ml、丙三醇1ml加水至1000ml，即得到無甲醛標(biāo)本固定液。
[0030]實(shí)施例6:
[0031]將山梨酸鉀10g、十二烷基三甲基氯化銨50ml、Na2EDTA 10g、95%乙醇100ml、丙三醇1ml加水至1000ml，即得到無甲醛標(biāo)本固定液。
[0032]實(shí)施例7:
[0033]將山梨酸鉀10g、十二烷基二甲基芐基溴化銨50ml、Na2EDTA 10g、95%乙醇100ml、丙三醇1ml加水至1000ml，即得到無甲醛標(biāo)本固定液。
[0034]保存效果:
[0035]采用實(shí)施例1的無甲醛標(biāo)本固定液保存兔子的肝臟組織。2013年6月16日保存，一年后觀察保存效果。將兔子新鮮肝臟組織用生理鹽水沖洗后，保存在本固定液中，一年后肝臟無腐敗，無霉斑，色澤、形狀無明顯變化，固定液顏色無明顯變化，保存效果良好。而70 %酒精保存的廣口瓶中溶液顏色變黃。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種無甲醛動(dòng)物標(biāo)本固定液，其特征在于，包括如下成分:殺菌防霉劑，蛋白變性劑，多元醇保濕劑和水，其中若殺菌防霉劑為固態(tài)，則其質(zhì)量濃度為5-20g/L，若殺菌防霉劑為液態(tài)，則其體積濃度為1-2% ;蛋白變性劑的體積濃度為5% -40% ;多元醇保濕劑的體積濃度為2% -10% ;余量為水。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的無甲醛動(dòng)物標(biāo)本固定液，其特征在于:所述的殺菌防霉劑為殼聚糖、季銨鹽類表面活性劑、山梨酸鉀、Na2EDTA中的一種或幾種。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的無甲醛動(dòng)物標(biāo)本固定液，其特征在于:所述的殼聚糖為殼聚糖乳酸鹽，所述的季銨鹽類表面活性劑為十二烷基二甲基芐基溴化銨、十二烷基三甲基氯化銨、二癸基二甲基溴化銨中的一種或幾種。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的無甲醛動(dòng)物標(biāo)本固定液，其特征在于:所述的蛋白變性劑為乙醇、乙酸、丙酮中的一種或幾種，其中乙醇的體積濃度為5% -40%、乙酸的體積濃度為0-2 %、丙酮的體積濃度為0-2 %。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的無甲醛動(dòng)物標(biāo)本固定液，其特征在于:所述的多元醇保濕劑為乙二醇、二乙二醇、丙二醇、丙三醇中的一種或幾種。6.一種無甲醛動(dòng)物標(biāo)本固定液的制備方法，其特征在于，包括如下步驟: (1)稱取殼聚糖乳酸鹽5-20g或山梨酸鉀5-20g，溶解于水中，加入l_3g的Na2EDTA,攪拌均勻； (2)分別加入1-2%體積濃度的季銨鹽表面活性劑、5%-40%體積濃度的95%乙醇、0-2%體積濃度的乙酸、0-2%體積濃度的丙酮、2% -10%體積濃度的二乙二醇等試劑，攪拌均勻； (3)加水定容至1000ml。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種無甲醛動(dòng)物標(biāo)本固定液及其制備方法，包括如下成分：殺菌防霉劑，蛋白變性劑，多元醇保濕劑和水，其中若殺菌防霉劑為固態(tài)，則其質(zhì)量濃度為5-20g/L，若殺菌防霉劑為液態(tài)，則其體積濃度為1-2％；蛋白變性劑的體積濃度為5％-40％；多元醇保濕劑的體積濃度為2％-10％；余量為水。本發(fā)明所公開的動(dòng)物標(biāo)本固定液配方不含甲醛，無揮發(fā)性，對人體無害；將新鮮動(dòng)物器官用生理鹽水沖洗后，保存在本固定液中，一年后器官無腐敗，無霉斑，色澤、形狀無明顯變化，固定液顏色無明顯變化，保存效果良好。
【IPC分類】A01N1/00
【公開號(hào)】CN104904706
【申請?zhí)枴緾N201510200832
【發(fā)明人】李方正, 劉春英
【申請人】青島農(nóng)業(yè)大學(xué)
【公開日】2015年9月16日
【申請日】2015年4月22日