一種鐵皮石斛多元培養(yǎng)基的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種鐵皮石斛的栽培，特別是一種鐵皮石斛多元培養(yǎng)基，屬于農(nóng)業(yè)種 植領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 鐵皮石斛為多年生草本，屬附生蘭類，俗名鐵皮楓斗，因其老莖外呈黑色，又名為 黑節(jié)草，石斛是常用的名貴中藥，應(yīng)用歷史悠久，在《神農(nóng)本草經(jīng)》中被列為上品，現(xiàn)已證實 它具有滋陰清熱、生津益胃、止咳潤肺、潤喉明目、提高人體免疫功能、防治腫瘤和心血管疾 病以及改善睡眠、防治白內(nèi)障、延年益壽等功效。但由于生長環(huán)境特殊和分布局限，以及長 期采挖，自然資源日趨枯竭，已被國家列為重點保護的野生藥材并鼓勵人工大面積栽培鐵 皮石斛。
[0003] 隨著現(xiàn)代生物學的發(fā)展，通過組織培養(yǎng)進行無性繁殖越來越廣泛。組培繁殖具有 時間短、繁殖系數(shù)高、植株無病毒污染，可進行大量育苗和多季育苗，既經(jīng)濟又簡單，并且保 持母體的優(yōu)良性狀，因而被廣泛用于多種植物的種質(zhì)保存、植株脫毒及農(nóng)業(yè)、園藝和林業(yè)等 生產(chǎn)領(lǐng)域。
[0004] 中國專利201210502454. X公開了一種鐵皮石斛培養(yǎng)液，含有以下組分：硝酸鉀、 硝酸銨、硫酸鎂、硫酸錳、硫酸鋅、磷酸二氫鉀、硫酸銅、碘化鉀、氯化鈷、硼酸、鉬酸鈉、維生 素 VB1、維生素 VB6、維生素 VB5、甘氨酸、硫酸亞鐵、乙二胺四乙酸二鈉、氯化鈣、萘乙酸、香 蕉泥、土豆泥、白糖、肌醇、瓊脂粉。該培養(yǎng)液夠快速促根生莖，提高了鐵皮石斛中多糖含量、 氨基酸含量，但是其鐵皮石斛移栽存活率并沒有顯著提高。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的在于提供一種鐵皮石斛培養(yǎng)液。
[0006] 實現(xiàn)本發(fā)明目的的技術(shù)解決方案為：一種鐵皮石斛多元培養(yǎng)基，包括硝酸銨 18-25g/L、磷酸二氫鉀l-2g/L、硝酸鉀20-30g/L、硝酸鈣6-10g/L、硫酸鎂3-8g/L、硫酸錳 2-4g/L、硫酸鐵 0· 5-lg/L、鉬酸鈉 0· 5-lg/L、維生素 Bl 0· 5-lg/L、維生素 B6 0· 2-0. 5g/ L、維生素 B5 0· 5-lg/L、Na2-EDTA l-2g/L、萘乙酸 0· 5-lg/L、阿魏酸 0· 2-0. 6g/L、香蕉 泥l(xiāng)〇_15g/L、葡萄籽3-8g/L、富硒微藻2-5g/L、水溶性碳納米管0. 1-0. 5g/L、吲哚丁酸 0· 1-0. 9g/L、白糖 5-8g/L、瓊脂 l-3g/L。
[0007] 所述的培養(yǎng)液的pH值范圍在5. 5-6. 0之間。
[0008] 所述的富硒微藻選用藍藻或硅藻。
[0009] 本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，其顯著優(yōu)點：
[0010] 1.在培養(yǎng)基中加入葡萄籽粉，葡萄籽中含有豐富的多種氨基酸、維生素及礦物質(zhì)， 不但可以提高鐵皮石斛的產(chǎn)量與質(zhì)量，還可以提高鐵皮石斛的生物轉(zhuǎn)化率。
[0011] 2.在培養(yǎng)基中添加了阿魏酸，一種天然酚化合物，阿魏酸保護吲哚丁酸免于脫羧 化，使吲哚丁酸充分發(fā)揮誘導(dǎo)作用。
[0012] 3..在培養(yǎng)基中加入富硒海洋微藻，富硒海洋微藻中富含有機硒化合物，對許多微 量元素及化合物均具有較強的富集作用，是一類選擇性好、高效、成本低、操作簡便的生物 富集體，可以起到殺蟲滅菌和提供鐵皮石斛生長營養(yǎng)的作用，特別是針對炭疽病、腐根病、 枯萎病、菲蚧盾等十幾種病蟲害具有非常顯著的效果。
[0013] 4.培養(yǎng)基富含鐵皮石斛生根成長所需的各種營養(yǎng)物質(zhì)和植物激素，能夠確保鐵皮 石斛極高的生根率和根莖的良好生長。
【具體實施方式】
[0014] 實施例1
[0015] -種鐵皮石斛多元培養(yǎng)基，包括硝酸銨18g/L、磷酸二氫鉀2g/L、硝酸鉀30g/L、硝 酸鈣8g/L、硫酸鎂5g/L、硫酸錳3g/L、硫酸鐵0. 5g/L、鉬酸鈉 lg/L、維生素 Bl 0. 8g/L、維 生素 B6 0· 2g/L、維生素 B5 0· 5g/L、Na2-EDTA2g/L、萘乙酸 0· 5g/L、阿魏酸 0· 2g/L、香蕉泥 l〇g/L、葡萄籽8g/L、富硒微藻2g/L、水溶性碳納米管0. 5g/L、吲哚丁酸0. 8g/L、白糖5g/L、 瓊脂2g/L。
[0016] 實施例2
[0017] -種鐵皮石斛多元培養(yǎng)基，包括硝酸銨21g/L、磷酸二氫鉀lg/L、硝酸鉀25g/L、硝 酸鈣l〇g/L、硫酸鎂3g/L、硫酸錳4g/L、硫酸鐵0. 5g/L、鉬酸鈉0. 5g/L、維生素 Bl 0. 5g/L、 維生素 B6 0· 5g/L、維生素 B5 lg/L、Na2-EDTA lg/L、萘乙酸lg/L、阿魏酸0· 5g/L、香蕉泥 15g/L、葡萄籽3g/L、富硒微藻4g/L、水溶性碳納米管0. 4g/L、吲哚丁酸0. lg/L、白糖5g/L、 瓊脂3g/L。
[0018] 實施例3
[0019] -種鐵皮石斛多元培養(yǎng)基，包括硝酸銨25g/L、磷酸二氫鉀I. 5g/L、硝酸鉀20g/L、 硝酸鈣6g/L、硫酸鎂8g/L、硫酸錳2g/L、硫酸鐵lg/L、鉬酸鈉0. 6g/L、維生素 BI 0. 6g/L、維 生素 B6 (λ 4g/L、維生素 B5 (λ 6g/L、Na2-EDTAL 2g/L、萘乙酸(λ 8g/L、阿魏酸(λ 3g/L、香蕉 泥12g/L、葡萄籽5g/L、富硒微藻5g/L、水溶性碳納米管0. lg/L、吲哚丁酸0. 9g/L、白糖Sg/ L、瓊脂 lg/L。
[0020] 對比例1
[0021] -種鐵皮石斛培養(yǎng)液，包括硝酸銨25g/L、磷酸二氫鉀3g/L、硝酸鉀30g/L、硝酸鈣 8g/L、硫酸鎂5g/L、硫酸錳3g/L、硫酸鐵0. 5g/L、鉬酸鈉 lg/L、維生素 Bl 0. 8g/L、維生素 B6 0· 2g/L、維生素 B5 0· 5g/L、Na2-EDTA2g/L、萘乙酸 0· 5g/L、阿魏酸 0· 2g/L、香蕉泥 10g/L、富 硒微藻2g/L、水溶性碳納米管0. 5g/L、吲哚丁酸0. 8g/L、白糖5g/L、瓊脂2g/L。
[0022] 對比例2
[0023] -種鐵皮石斛培養(yǎng)液，包括硝酸銨20g/L、磷酸二氫鉀2g/L、硝酸鉀30g/L、硝酸鈣 8g/L、硫酸鎂5g/L、硫酸錳3g/L、硫酸鐵0. 5g/L、鉬酸鈉 lg/L、維生素 Bl 0. 8g/L、維生素 B6 0· 2g/L、維生素 B5 0· 5g/L、Na2-EDTA2g/L、萘乙酸 0· 5g/L、阿魏酸 0· 2g/L、香蕉泥 10g/L、葡 萄籽8g/L、水溶性碳納米管0. 5g/L、吲哚丁酸0. 8g/L、白糖5g/L、瓊脂2g/L。
[0024] 對比例3
[0025] -種鐵皮石斛培養(yǎng)液，包括硝酸銨18g/L、磷酸二氫鉀2g/L、硝酸鉀30g/L、硝酸鈣 8g/L、硫酸鎂5g/L、硫酸錳3g/L、硫酸鐵0. 5g/L、鉬酸鈉 lg/L、維生素 Bl 0. 8g/L、維生素 B6 0· 2g/L、維生素 B5 0· 5g/L、Na2-EDTA2g/L、萘乙酸 0· 5g/L、香蕉泥 10g/L、葡萄籽 8g/L、富硒 微藻2g/L、水溶性碳納米管0. 5g/L、白糖5g/L、瓊脂3g/L。
[0026] 在無菌條件下取長有3~5節(jié)莖段的長度2~2. 5cm的有腋芽的鐵皮石斛莖段作 為外植體，將外植體分別置于實施例1-3和對比例1-3的培養(yǎng)液及普通MS培養(yǎng)液進行培 養(yǎng)，培養(yǎng)條件：溫度25°C、光照條件2000LX、光照時間12h/d，培養(yǎng)25天后進行比較。所得 實驗數(shù)據(jù)如下表所示：
[0027]
【主權(quán)項】
1. 一種鐵皮石斛多元培養(yǎng)基，其特征在于，包括硝酸銨18_25g/L、磷酸二氫鉀l-2g/L、 硝酸鉀20-30g/L、硝酸鈣6-10g/L、硫酸鎂3-8g/L、硫酸錳2-4g/L、硫酸鐵0. 5-lg/L、鉬酸 鈉 0? 5-lg/L、維生素 Bl 0? 5-lg/L、維生素 B6 0? 2-0. 5g/L、維生素 B5 0? 5-lg/L、Na2-EDTA 1- 2g/L、萘乙酸0? 5-lg/L、阿魏酸0? 2-0. 6g/L、香蕉泥l(xiāng)〇-15g/L、葡萄籽3-8g/L、富硒微藻 2- 5g/L、水溶性碳納米管 0. 1-0. 5g/L、吲哚丁酸 0. 1-0. 9g/L、白糖 5-8g/L、瓊脂 l-3g/L。2. 如權(quán)利要求1所述的鐵皮石斛多元培養(yǎng)基，其特征在于，培養(yǎng)基的pH值范圍在 5. 5-6. 0 之間。3. 如權(quán)利要求1所述的鐵皮石斛多元培養(yǎng)基，其特征在于，所述的富硒微藻選用藍藻 或硅藻。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種鐵皮石斛多元培養(yǎng)基，包括硝酸銨18-25g/L、磷酸二氫鉀1-2g/L、硝酸鉀20-30g/L、硝酸鈣6-10g/L、硫酸鎂3-8g/L、硫酸錳2-4g/L、硫酸鐵0.5-1g/L、鉬酸鈉0.5-1g/L、維生素B1？0.5-1g/L、維生素B6？0.2-0.5g/L、維生素B5？0.5-1g/L、Na2-EDTA？1-2g/L、萘乙酸0.5-1g/L、阿魏酸0.2-0.6g/L、香蕉泥10-15g/L、葡萄籽3-8g/L、富硒微藻2-5g/L、水溶性碳納米管0.1-0.5g/L、吲哚丁酸0.1-0.9g/L、白糖5-8g/L、瓊脂1-3g/L。本發(fā)明在培養(yǎng)基中加入葡萄籽粉，不但可以提高鐵皮石斛的產(chǎn)量與質(zhì)量，還可以提高鐵皮石斛的生物轉(zhuǎn)化率；在培養(yǎng)基中添加了阿魏酸，保護了吲哚丁酸免于脫羧化，使吲哚丁酸充分發(fā)揮誘導(dǎo)作用；在培養(yǎng)基中加入富硒海洋微藻，可以殺蟲滅菌和提供鐵皮石斛生長營養(yǎng)；所述培養(yǎng)基能夠確保鐵皮石斛極高的生根率和根莖的良好生長。
【IPC分類】A01H4/00
【公開號】CN104996297
【申請?zhí)枴緾N201510375351
【發(fā)明人】傅明堯
【申請人】傅明堯
【公開日】2015年10月28日
【申請日】2015年6月30日