一種使用激素含量控制蝴蝶蘭高增殖合格率的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及蝴蝶蘭的繁育，具體涉及一種使用激素含量控制蝴蝶蘭高增殖合格率 的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 蝴蝶蘭又稱蝶蘭，是蘭科植物中栽培最廣泛、最普及的種類之一，由于花大，開花 期長，有的品種一枝花可以開數(shù)月之久，花色艷麗，色澤豐富，花形別致美麗，深受世界各國 人們的喜愛。隨著社會的進(jìn)步和經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，人們的物質(zhì)文化生活不斷豐富，花卉產(chǎn)業(yè)尤其 是蝴蝶蘭等一批所謂的"洋蘭"也漸為消費(fèi)者接受和喜愛，然而蝴蝶蘭產(chǎn)業(yè)卻存在一個嚴(yán)重 的問題：野生資源少、優(yōu)良的品種資源匱乏。
[0003] 雜交育種仍是目前蝴蝶蘭育種中最常用的方法，也是最有效的育種途徑和最重要 的育種方法，主要包括引種、檢測、雜交和選種。目前，隨著國內(nèi)對蝴蝶蘭育種的重視，新品 種和新成果不斷涌現(xiàn)。而蝴蝶蘭組織培養(yǎng)技術(shù)的進(jìn)步，使得蝴蝶蘭離體繁殖時，繁殖速度 快、不受季節(jié)影響，短期內(nèi)即可獲得大量優(yōu)良品種的花卉種苗，滿足生產(chǎn)和市場需要，進(jìn)一 步促進(jìn)了蝴蝶蘭雜交育種技術(shù)的進(jìn)步。
[0004] 蝴蝶蘭組培瓶苗是在密閉無菌、營養(yǎng)供給充分、光照適宜、溫度恒定以及100%相 對濕度的環(huán)境中生長的，一旦出瓶移栽，環(huán)境發(fā)生了不利于其生長的劇烈變化，由于試管苗 組織幼嫩，對新環(huán)境適應(yīng)能力差，極易被病菌侵染，如何創(chuàng)造適宜的移栽條件，提高試管苗 移栽成活率，除了光照、溫度、濕度、病蟲防控、營養(yǎng)供給外，出瓶培養(yǎng)基質(zhì)是影響試管苗生 長狀況的成活率的一個重要因素。
[0005] 目前，蝴蝶蘭組培材料增殖率大約2~2. 3左右，但經(jīng)過統(tǒng)計，玻璃化芽的比例近 10%，有近8%的組培材料分化出現(xiàn)困難，共損失組培材料近20%。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 針對上述情況，本發(fā)明提供一種使用激素含量控制蝴蝶蘭高增殖合格率的方法， 保證了蝴蝶蘭叢生芽高增殖率的同時，低不良苗率，從而更快的生產(chǎn)出優(yōu)質(zhì)種苗。
[0007] 本發(fā)明的技術(shù)方案如下：一種使用激素含量控制蝴蝶蘭高增殖合格率的方法，包 括以下步驟： 1、 取樣與消毒： 將蝴蝶蘭花莖整體切下后，用新潔爾滅消毒液進(jìn)行擦拭，初步消毒后，再將花莖切分為 每個莖段都帶有小芽的小莖段，經(jīng)過〇. 1%的升汞溶液消毒15min后，將其小芽外面包裹的 薄膜剝?nèi)?，將小芽完全露出?2、 芽的誘導(dǎo)： 將消毒后的帶芽莖段扦插到花莖培養(yǎng)基里培養(yǎng)：所述花莖培養(yǎng)基為1/2MS+細(xì)胞分裂 素4~5mg+椰汁100ml/l+白糖30g/l+瓊脂4. 7g/l，在花莖培養(yǎng)基上培養(yǎng)1. 5~2個 月，誘導(dǎo)莖段上的小芽迅速成長； 3、 芽的增殖： a、將已經(jīng)長大、可脫離莖段的芽接種于1/2MS+細(xì)胞分裂素0. 3~0. 35mg+萘乙酸 0? 03~0? 035mg+土豆100g/l+ 白糖15g/l+ 瓊脂4. 7g/l的培養(yǎng)基； b、 待芽增殖出側(cè)芽時接種于1/2MS+細(xì)胞分裂素0. 2~0. 25mg+萘乙酸0. 02~ 0. 025mg+土豆100g/l+白糖15g/l+瓊脂4. 7g/l的培養(yǎng)基，進(jìn)行增殖繼代培養(yǎng)，培養(yǎng)基中 的土豆需去皮，放到攪拌機(jī)里打成糊狀后加入到培養(yǎng)基里； 4、 定植培養(yǎng)： 將增殖的芽接種于1/2MS+細(xì)胞分裂素0. 4~0. 5mg+椰汁50ml/l+ 土豆30g/l+白 糖20g/l+瓊脂4. 70g/l+碳粉0.lg/1的培養(yǎng)基上進(jìn)行芽轉(zhuǎn)變?yōu)樾∶绲呐囵B(yǎng)，所述培養(yǎng)基 中的土豆需去皮，放到攪拌機(jī)里打成糊狀后加入到培養(yǎng)基里； 5、 生根培養(yǎng)： 將定植的小苗接種于花多多2#+花多多36#(所述花多多是進(jìn)口復(fù)合肥料，可以滿足植 株不同生長階段的生理需要，其中2#的氮磷鉀比例為10 :30 :20, 36#是微量元素肥料)+香 蕉15g/l+白糖20g/l+白云石粉0. 3g/l+瓊脂4. 7g/l+碳粉lg/1的培養(yǎng)基上進(jìn)行生 根培養(yǎng)，使得小苗發(fā)出根，并且更加茁壯，所述培養(yǎng)基中的香蕉需去皮后，放到攪拌機(jī)里打 成糊狀后加入到培養(yǎng)基里。
[0008]本發(fā)明培養(yǎng)過程中，步驟2芽的誘導(dǎo)階段，溫度控制在20°C~23°C，1個月以內(nèi) 光強(qiáng)控制在500Lux以下，一個月以后光強(qiáng)增加到1000~1500Lux，光照時間10~12小時 /天；步驟3芽的增殖階段，溫度控制在25°C~28°C，光強(qiáng)控制在1500~2000Lux，光照時 間10~12小時/天；步驟4~5定植和生根階段，溫度控制在22°C~25°C，光強(qiáng)控制在 2000~2500Lux，光照時間12~14小時/天。
[0009] 本發(fā)明使用激素含量控制蝴蝶蘭高增殖合格率的方法，芽的增值階段兩種培養(yǎng)基 的交替使用，就會使得植物體內(nèi)的激素濃度通過滲透作用降低與升高，從而既達(dá)到增殖的 目的，又減少激素的累積作用。通過在蝴蝶蘭組培基質(zhì)中利用不同種類及濃度的激素配比， 對增殖率、玻璃化程度，以及材料分化情況等指標(biāo)進(jìn)行測定，得出激素與蝴蝶蘭外植體生長 之間的定性及定量關(guān)系。
【具體實施方式】
[0010] 實施例1 一種使用激素含量控制蝴蝶蘭高增殖合格率的方法，包括以下步驟： 1、 取樣與消毒： 將蝴蝶蘭花莖整體切下后，用新潔爾滅消毒液進(jìn)行擦拭，初步消毒后，再將花莖切分為 每個莖段都帶有小芽的小莖段，經(jīng)過0. 1%的升汞溶液消毒15min后，將其小芽外面包裹的 薄膜剝?nèi)?，將小芽完全露出?2、 芽的誘導(dǎo)： 將消毒后的帶芽莖段扦插到花莖培養(yǎng)基里培養(yǎng)：所述花莖培養(yǎng)基為1/2MS+細(xì)胞分裂 素5mg+椰汁100ml/l+白糖30g/l+瓊脂4. 7g/l，在花莖培養(yǎng)基上培養(yǎng)1. 5~2個月，誘導(dǎo) 莖段上的小芽迅速成長，溫度控制在20°C~23°C，1個月以內(nèi)光強(qiáng)控制在500Lux以下，一 個月以后光強(qiáng)增加到1000~1500Lux，光照時間10~12小時/天； 3、芽的增殖： a、 將已經(jīng)長大、可脫離莖段的芽接種于1/2MS+細(xì)胞分裂素0.3mg+萘乙酸0.03mg+ 土豆100g/l+白糖15g/l+瓊脂4. 7g/l的培養(yǎng)基； b、 待芽增殖新生側(cè)芽達(dá)到2~3個時接種于1/2MS+細(xì)胞分裂素0. 2mg+萘乙酸0. 02mg + 土豆100g/l+白糖15g/l+瓊脂4. 7g/l的培養(yǎng)基，進(jìn)行增殖繼代培養(yǎng)；所述培養(yǎng)基中的土 豆需去皮，放到攪拌機(jī)里打成糊狀后加入到培養(yǎng)基里； 本階段溫度控制在25°C- 28°C，光強(qiáng)控制在1500- 2000Lux，光照時間10 -12小時/ 天； 4、 定植培養(yǎng)： 將增殖的芽接種于1/2MS+細(xì)胞分裂素0? 5mg+椰汁50ml/l+ 土豆30g/l+白糖20g/ 1+瓊脂4. 70g/l+碳粉0.lg/1的培養(yǎng)基上進(jìn)行芽轉(zhuǎn)變?yōu)樾∶绲呐囵B(yǎng)，溫度控制在22°C~ 25°C，光強(qiáng)控制在2000~2500Lux，光照時間12~14小時/天；所述培養(yǎng)基中的土豆需去 皮，放到攪拌機(jī)里打成糊狀后加入到培養(yǎng)基里； 5、 生根培養(yǎng)： 將定植的小苗接種于花多多2#+花多多36#+香蕉15g/l+白糖20g/l+白云石粉0. 3g/ 1+瓊脂4. 7g/l+碳粉lg/1的培養(yǎng)基上進(jìn)行生根培養(yǎng)，使得小苗發(fā)出根，并且更加茁壯，溫度 控制在22°C~25°C，光強(qiáng)控制在2000~2500Lux，光照時間12~14小時/天。所述培養(yǎng) 基中的香蕉需去皮后，放到攪拌機(jī)里打成糊狀后加入到培養(yǎng)基里。
[0011]用實施例1的方法芽的增值階段采用兩種培養(yǎng)基交替使用，對增殖率進(jìn)行縱向整 體控制，與現(xiàn)有培養(yǎng)方法對比數(shù)據(jù)如下：
從表格中的數(shù)據(jù)可以看出，本發(fā)明方法的增值合格率達(dá)到了 96%，遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于現(xiàn)有方法的 合格率。
【主權(quán)項】
1. 一種使用激素含量控制蝴蝶蘭高增殖合格率的方法，其特征在于包括以下步驟： 1、 取樣與消毒： 將蝴蝶蘭花莖整體切下后，用新潔爾滅消毒液進(jìn)行擦拭，初步消毒后，再將花莖切分為 每個莖段都帶有小芽的小莖段，經(jīng)過0. 1%的升汞溶液消毒15min后，將其小芽外面包裹的 薄膜剝?nèi)?，將小芽完全露出? 2、 芽的誘導(dǎo)： 將消毒后的帶芽莖段扦插到花莖培養(yǎng)基里培養(yǎng)：所述花莖培養(yǎng)基為1/2MS+細(xì)胞分裂 素4~5mg+椰汁lOOml/1+白糖30g/l+瓊脂4. 7g/l，在花莖培養(yǎng)基上培養(yǎng)1. 5~2個月， 誘導(dǎo)莖段上的小芽迅速成長； 3、 芽的增殖： a、 將已經(jīng)長大、可脫離莖段的芽接種于1/2MS+細(xì)胞分裂素0. 3~0. 35mg+萘乙酸 0? 03 ~0? 035mg+ 土豆 100g/l + 白糖 15g/l + 瓊脂 4. 7g/l 的培養(yǎng)基； b、 待芽增殖出側(cè)芽時接種于1/2MS+細(xì)胞分裂素0. 2~0. 25mg+萘乙酸0. 02~ 0? 025mg+土豆100g/l +白糖15g/l +瓊脂4. 7g/l的培養(yǎng)基，進(jìn)行增殖繼代培養(yǎng)； 4、定植培養(yǎng)： 將增殖的芽接種于1/2MS+細(xì)胞分裂素0. 4~0. 5mg+椰汁50ml/l + 土豆30g/l +白 糖20g/l +瓊脂4. 70g/l +碳粉0. lg/1的培養(yǎng)基上進(jìn)行芽轉(zhuǎn)變?yōu)樾∶绲呐囵B(yǎng)； 5、生根培養(yǎng)： 將定植的小苗接種于花多多2#+花多多36#+香蕉15g/l +白糖20g/l +白云石粉 〇.3g/l +瓊脂4.7g/l +碳粉lg/1的培養(yǎng)基上進(jìn)行生根培養(yǎng)，使得小苗發(fā)出根。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種使用激素含量控制蝴蝶蘭高增殖合格率的方法，其特征 在于，所述步驟2芽的誘導(dǎo)階段的培養(yǎng)條件，溫度控制在20°C~23°C，1個月以內(nèi)光強(qiáng)控制 在500Lux以下，一個月以后光強(qiáng)增加到1000~1500Lux，光照時間10~12小時/天；所述 步驟3芽的增殖階段的培養(yǎng)條件，溫度控制在25°C~28°C，光強(qiáng)控制在1500~2000Lux，光 照時間10~12小時/天；所述步驟4~5定植和生根階段的培養(yǎng)條件，溫度控制在22°C~ 25°C，光強(qiáng)控制在2000~2500Lux，光照時間12~14小時/天。
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種使用激素含量控制蝴蝶蘭高增殖合格率的方法，其包括操作步驟，取樣與消毒、芽的誘導(dǎo)、芽的增殖、定植培養(yǎng)、生根培養(yǎng)，在芽的增殖階段包括兩個步驟，a、將已經(jīng)長大、可脫離莖段的芽接種于1/2MS+細(xì)胞分裂素0.3～0.35mg+萘乙酸0.03～0.035mg+土豆100g/l+白糖15g/l+瓊脂4.7g/l的培養(yǎng)基；b、待芽增殖出側(cè)芽時接種于1/2MS+細(xì)胞分裂素0.2～0.25mg+萘乙酸0.02～0.025mg+土豆100g/l+白糖15g/l+瓊脂4.7g/l的培養(yǎng)基，進(jìn)行增殖繼代培養(yǎng)，本發(fā)明的方法保證了蝴蝶蘭叢生芽高增殖率的同時，低不良苗率，從而更快的生產(chǎn)出優(yōu)質(zhì)種苗。
【IPC分類】A01H4/00
【公開號】CN105104212
【申請?zhí)枴緾N201510663645
【發(fā)明人】劉小妹, 鄭梅梅, 李小云
【申請人】山西梅芝園藝有限公司
【公開日】2015年12月2日
【申請日】2015年10月15日