一種防止紫淮山組培褐化的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及淮山組培繁育過程中褐化的控制技術(shù)領(lǐng)域，特別是涉及一種防止紫淮山組培褐化的有效方法。
【背景技術(shù)】
[0002]紫淮山是淮山的一種，為薯芋科薯蕷屬植物。始載《神農(nóng)本草經(jīng)》，原名“薯芋”、“山藥”之名始見于《本草衍義》。山藥性平，味甘，入脾、胃、肺、腎經(jīng)、可補(bǔ)脾胃、益肺腎，主治脾胃虛弱、食少便糖、久瀉、肺虛咳嗽、腎虛腰痛、滑精等癥。山藥為多年生纏繞草本植物，其根壯莖短，根直立，肉肥厚，呈圓柱狀棍棒形，長(zhǎng)可達(dá)I米，直徑2-7厘米，外皮灰褐色，生多數(shù)須根，質(zhì)脆，斷面白色帶粘性。莖細(xì)長(zhǎng)，通常帶紫色，有棱線，光滑無毛皮。葉對(duì)生或三片生，葉腋常生株芽“零余子”，俗稱“山藥豆”。其葉片形大多變，呈三角狀卵形、三角狀寬卵形，長(zhǎng)3.5-7厘米，通常三裂，側(cè)裂片圓耳狀，中裂片先端漸尖，葉脈7-9條自葉基發(fā)出。6-8月開花，花雌雄異株，花小黃綠色，均為穗狀花序，雄花序直立，雌花序下垂，花乳白色。種子扁圓形，有寬翅。
[0003]近年來，隨著淮山產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，外來淮山品種的引進(jìn)以及當(dāng)?shù)剞r(nóng)民種植淮山長(zhǎng)期采用無性繁殖的方式，導(dǎo)致紫淮山生產(chǎn)上存在品種混雜和種性退化等問題，嚴(yán)重阻礙了那紫淮山產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。如何用新技術(shù)、新方法種植，做大淮山產(chǎn)業(yè)助農(nóng)增收，尤其是如何攻克淮山產(chǎn)量低的難題，成了紫淮山產(chǎn)業(yè)發(fā)展需要思考和探索的問題。其中采用組培脫毒的方法繁育紫淮山優(yōu)質(zhì)種苗，是解決這一難題的關(guān)鍵，可使紫淮山產(chǎn)量大幅度提高。但是，在紫淮山組培過程中，試管苗很容易褐化，導(dǎo)致試管苗生長(zhǎng)勢(shì)差，嚴(yán)重的甚至引起植株死亡，極大地影響紫淮山優(yōu)質(zhì)種苗的快速繁育。紫淮山組培過程中的褐化問題，有添加1%活性炭及PvP來抑制褐化的報(bào)道，但仍然有30-40%的褐化問題，且時(shí)間越長(zhǎng)越嚴(yán)重。
[0004]因此，如何徹底解決紫淮山組培過程中的褐化問題，目前依然是困擾著本領(lǐng)域技術(shù)人員的一大難題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的是為了克服目前紫淮山組培過程中的褐化問題，提供一種防止紫淮山組培褐化的有效方法。
[0006]本發(fā)明的技術(shù)方案如下:
本發(fā)明的技術(shù)方案采用的外殖體選用紫淮山植株的莖段，并用0.1%升汞處理6-8分鐘。升汞濃度不能太高，處理時(shí)間不能太長(zhǎng)。其中最關(guān)鍵的是采用莖段繁殖，并將3-5%的獼猴桃汁和0.1-0.5%活性炭添加到MS培養(yǎng)基中，增殖培養(yǎng)和生根培養(yǎng)基按常規(guī)配方，即可有效地防止紫淮山組培的褐化。
[0007]本發(fā)明的技術(shù)方案具體的步驟如下:
I)初代培養(yǎng):選擇健康無病蟲害的紫淮山植株，外殖體選用紫淮山植株的莖段，每個(gè)莖段帶一個(gè)腋芽，滅菌方法采用75%的酒精處理30秒，然后用0.1%升汞處理6-8分鐘，再用無菌水漂洗3-4次，最后接種到添加0.1-0.5%活性炭和3-5%的獼猴桃汁的初代培養(yǎng)基中，初代培養(yǎng)基為 MS+1.0mg/L6-BA+0.lmg/LNAA ；
2)增殖培養(yǎng):采用莖段繁殖，10-15天后腋芽萌發(fā)，待芽長(zhǎng)至5-6cm時(shí)，將其切斷成三段，每個(gè)莖段帶一個(gè)腋芽，然后接種到添加3-5%的獼猴桃汁和0.1-0.5%活性炭的增殖培養(yǎng)基中進(jìn)行繼代增殖，增殖培養(yǎng)基為MS+1.0mg/L6-BA+0.lmg/LNAA，這個(gè)步驟可以反復(fù)多次進(jìn)行繼代增殖，目的是繁育大量紫淮山苗的數(shù)量；
3)生根培養(yǎng):當(dāng)繁育數(shù)量達(dá)到要求后，即可進(jìn)行生根培養(yǎng)，將3-4cm的芽切下，然后轉(zhuǎn)接到生根培養(yǎng)基上進(jìn)行生根培養(yǎng)，生根培養(yǎng)基為MS+0.5mg/LNAA，并添加3_5%的獼猴桃汁和0.1-0.5%活性炭，一個(gè)月后即可獲得無褐化的紫淮山健壯的植株。
[0008]4)煉苗移栽:移栽基質(zhì)采用草炭:河沙=1:1，將紫淮山生根苗洗干凈，移栽到上述基質(zhì)中，第一次澆透水，在遮光70%的溫室中進(jìn)行煉苗，保持基質(zhì)濕潤(rùn)，溫度25?30°C較好。一個(gè)月后煉好的苗即可移栽大田繁育種薯。
[0009]本發(fā)明最關(guān)鍵的是采用莖段繁殖，并將3-5%的獼猴桃汁和0.1-0.5%活性炭添加到初代培養(yǎng)、增殖培養(yǎng)和生根培養(yǎng)的培養(yǎng)基中，即可有效地防止紫淮山組培過程中的褐化問題。
[0010]
【具體實(shí)施方式】
[0011]下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的詳細(xì)說明。
[0012]實(shí)施例1:
1)選擇健康無病蟲害的紫淮山植株，外殖體選用紫淮山植株的莖段，每個(gè)莖段帶一個(gè)腋芽，滅菌方法采用75%的酒精處理30秒，然后用0.1%升汞處理6-8分鐘，再用無菌水漂洗3-4次(應(yīng)注意的是升汞濃度不能太高，處理時(shí)間不能太長(zhǎng)，否則易引起外殖體培養(yǎng)過程中的褐化)。最后接種到添加3-5%的獼猴桃汁和0.1-0.5%活性炭的初代培養(yǎng)基中，初代培養(yǎng)基為MS+1.0mg/L6-BA+0.lmg/LNAA，添加0.1-0.5%活性炭和3_5%的獼猴桃汁可有效地防止紫淮山初代培養(yǎng)過程中的褐化問題；
2)采用莖段繁殖:10-15天后腋芽萌發(fā)，待芽長(zhǎng)至5-6cm時(shí)，將其切斷成三段，每個(gè)莖段帶一個(gè)腋芽，然后接種到添加3-5%的獼猴桃汁和0.1-0.5%活性炭的常規(guī)增殖培養(yǎng)基中進(jìn)行繼代增殖，增殖培養(yǎng)基為MS+1.0mg/L6-BA+0.lmg/LNAA,添加0.1-0.5%活性炭和3_5%的獼猴桃汁可有效地防止紫淮山增殖培養(yǎng)過程中的褐化問題。這個(gè)步驟可以反復(fù)多次進(jìn)行繼代增殖，目的是繁育大量紫淮山苗的數(shù)量；
3)當(dāng)繁育數(shù)量達(dá)到要求后，即可進(jìn)行生根培養(yǎng)，將3-4cm的芽切下，然后轉(zhuǎn)接到生根培養(yǎng)基上進(jìn)行生根培養(yǎng)，生根培養(yǎng)基為MS+0.5mg/LNAA，并添加3_5%的獼猴桃汁和0.1-0.5%活性炭，一個(gè)月后即可獲得無褐化的紫淮山健壯的植株，添加3-5%的獼猴桃汁和0.1-0.5%活性炭可有效地防止紫淮山生根培養(yǎng)過程中的褐化問題。
[0013]4)煉苗移栽:移栽基質(zhì)采用草炭:河沙=1:1，將紫淮山生根苗洗干凈，移栽到上述基質(zhì)中，第一次澆透水，在遮光70%的溫室中進(jìn)行煉苗，保持基質(zhì)濕潤(rùn)，溫度25?30°C較好。一個(gè)月后煉好的苗即可移栽大田繁育種薯。
[0014]當(dāng)然，以上只是本發(fā)明的具體應(yīng)用范例，本發(fā)明還有其他的實(shí)施方式，凡采用等同替換或等效變換形成的技術(shù)方案，均落在本發(fā)明所要求的保護(hù)范圍之內(nèi)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種防止紫淮山組培褐化的方法，其特征在于:采用紫淮山植株的莖段繁殖，并將3-5%的獼猴桃汁和0.1-0.5%活性炭添加到初代培養(yǎng)、增殖培養(yǎng)和生根培養(yǎng)的培養(yǎng)基中；初代培養(yǎng)的培養(yǎng)基為MS+1.0mg/L6-BA+0.lmg/LNAA ;增殖培養(yǎng)的培養(yǎng)基為MS+1.0mg/L6-BA+0.lmg/LNAA ;生根培養(yǎng)的培養(yǎng)基為 MS+0.5mg/LNAA。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的防止紫淮山組培褐化的方法，其特征在于:初代培養(yǎng)的外殖體選用紫淮山植株的莖段，每個(gè)莖段帶一個(gè)腋芽；培養(yǎng)前先采用75%的酒精進(jìn)行滅菌處理，然后用0.1%升汞處理6-8分鐘，再用無菌水漂洗3-4次。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的防止紫淮山組培褐化的方法，其特征在于:生根培養(yǎng)獲得無褐化的紫淮山健壯的植株后進(jìn)行煉苗移栽，移栽基質(zhì)采用草炭:河沙=1:1。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種防止紫淮山組培褐化的方法，它采用的外殖體選用紫淮山植株的莖段，并用0.1%升汞處理6-8分鐘。升汞濃度不能太高，處理時(shí)間不能太長(zhǎng)。其中最關(guān)鍵的是采用莖段繁殖，并將3-5%的獼猴桃汁和0.1-0.5%活性炭添加到MS培養(yǎng)基中，增殖培養(yǎng)和生根培養(yǎng)基按常規(guī)配方，即可有效地防止紫淮山組培的褐化。
【IPC分類】A01H4/00
【公開號(hào)】CN105191791
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510519394
【發(fā)明人】鄭思鄉(xiāng), 林慶丹, 廖曉姍, 龍彬, 龔建華, 楊永紅
【申請(qǐng)人】株洲市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所
【公開日】2015年12月30日
【申請(qǐng)日】2015年8月24日