一種刺鰍人工繁殖方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于水產(chǎn)養(yǎng)殖技術(shù)領(lǐng)域，具體設(shè)及一種刺餓的人工繁殖方法。 技術(shù)背景
[0002] 刺餓（Mastacembeluea州lea1:us)在分類上隸屬驢形目（Perciformes)、刺餓科 (Mastacembelidae)、刺餓屬（MastacembelueScopoli)。俗稱刀餓、刺泥餓、沙餓、豬媽銀 等，肉質(zhì)細(xì)膩，營養(yǎng)價(jià)值高。是W肉食性為主的小型經(jīng)濟(jì)淡水魚類，其自然種群喜棲息于有 石塊的江河底層或岸邊有水草處。在自然水域中不喜在水流較急處生活。在長江流域的浙 江、江蘇、湖北、湖南W及河南幾乎遍布全省水域。由于近年來對(duì)其的大肆捕拱，W及其自然 水體環(huán)境條件的變化，刺餓自然種群數(shù)量明顯減少，市場顯現(xiàn)供不應(yīng)求狀態(tài)。因此，發(fā)展刺 餓養(yǎng)殖業(yè)具有重大意義。目前制約刺餓規(guī)?；B(yǎng)殖的因素，除了養(yǎng)殖技術(shù)、飼料或病害運(yùn)些 因素外，最重要的就是刺餓苗種的人工繁殖問題，目前對(duì)刺餓苗種的人工繁殖缺少系統(tǒng)性 研究，造成刺餓苗種的人工繁殖催產(chǎn)率，受精率及解化率很低。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明的目的在于提供一種刺餓的人工繁殖方法，解決刺餓的人工繁殖難點(diǎn)問 題，提高刺餓人工繁殖的催產(chǎn)率，受精率及解化率。
[0004] 為實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明采用了W下技術(shù)方案： 陽〇化]一種刺餓人工繁殖方法，它包括如下步驟：
[0006] (1)在每年的繁殖高峰時(shí)期，即每年5月中旬至7月初及9月份，從野生捕獲或 家養(yǎng)刺餓中挑選出性成熟良好的親魚，雌性要求30gW上，生殖孔圓形發(fā)紅為佳，雄性要求 50gW上，能擠出精液為佳，雌雄比例為1 : 1.2; 陽007] (2)對(duì)親魚注射人工催產(chǎn)藥物，雌雄親魚注射劑量相同，人工催產(chǎn)藥物的種類和注 射劑量為肥G1500IU/kg+LRH-A250yg/kg+D0M5mg/kg;雌雄親魚均采用背部肌肉二針注 射法，第一針只注射LRH-Az，劑量為總劑量的1/5-2/5,間隔1化后，注射第二針，將剩余催 產(chǎn)藥物注射完畢；
[0008] (3)將注射人工催產(chǎn)藥物后的親魚置于暫養(yǎng)池中遮光和流水刺激，保持水溫 26°C，溶氧 5mg/LW上；
[0009] (4)人工授精時(shí)，先解剖雄魚取出精巢，置于80目紗網(wǎng)之上，用研鉢研碎，然后滴 加少量精子保存液，過濾，收集過濾液即為精液；將雌魚的成熟卵子擠入干燥陶瓷碗中并滴 加入精液，攬拌，待精液和卵子混勻后用黃泥漿水或滑石粉脫粘3分鐘；
[0010] (5)將脫粘后的受精卵置于解化池中避光解化，保持水溫26°C，溶氧5mg/LW上， 微流水，每天換水五分之一，受精卵密度為3000粒/m2,解化池面積不宜過大，一般長寬均為 4~5m，池深WIm為好，使用之前消毒；
[0011] (6)魚苗解化5天之后，向解化池中設(shè)置水草及躲避物，用豐年郵無節(jié)幼體開口， 一天投喂6次，持續(xù)投喂8到10天，之后用水版蝴喂足一個(gè)月，長至3厘米左右，開始用配 合飼料馴化。
[0012] 優(yōu)選地，所述精子保存液的配方為：氯化鋼7. 5g，氯化鐘0. 3g，氯化巧0. 3g，屯水 合硫酸儀0. 3g，葡萄糖3.Og，雙蒸水定容到1000ml。
[0013] 本發(fā)明首次對(duì)刺餓的人工繁殖進(jìn)行系統(tǒng)研究，提供的人工繁殖方法具有高催產(chǎn) 率，高受精率、高解化率、高成活率等特點(diǎn)，同時(shí)還具有親本死亡率低的特點(diǎn)。適宜按需求開 展規(guī)?；甜I苗種繁殖，具有高效、簡便、利于推廣的優(yōu)點(diǎn)。
【附圖說明】
[0014] 圖1是刺餓尿泡照片（箭頭所指），圖中：a為雄性刺餓尿泡；b為雌性刺餓尿泡。
[0015] 圖2是刺餓性腺切化圖中：a為雌性刺餓性腺；b為雄性刺餓性腺。
[0016] 圖3是雌雄刺餓性腺發(fā)育狀態(tài)月份變化曲線，圖中：a為雌性性腺處于第IV期或 第V的個(gè)體數(shù)占總個(gè)體數(shù)的百分比；b為雄性性腺處于第IV期或第V的個(gè)體數(shù)占總個(gè)體數(shù) 的百分比。
[0017] 圖4是刺餓胚胎發(fā)育過程，a-受精卵；b-胚盤隆起；C- 2細(xì)胞期；d- 4細(xì)胞 期；e- 8細(xì)胞期；f- 16細(xì)胞期；g-多細(xì)胞期；h-桑權(quán)胚期；i-囊胚早期；j-囊胚中 期；k-囊胚晚期；1 -原腸早期；m-原腸中期；η-原腸晚期；0 -神經(jīng)胚期；P-胚孔閉合 期；q-體節(jié)出現(xiàn)期；r-眼基出現(xiàn)期；S-眼囊期；t-尾芽期；U-體色素出現(xiàn)期；V-晶體 出現(xiàn)期；W-肌肉效應(yīng)期；X-屯、跳期；y-出膜期。
【具體實(shí)施方式】
[0018] 發(fā)明人于2014年6月至2015年7月在華中農(nóng)業(yè)大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院采用本發(fā)明方法開 展刺餓人工繁殖技術(shù)研究，繁殖親本均由野外捕獲個(gè)體中篩選而來。
[0019] 魚類人工繁殖實(shí)踐生產(chǎn)中，親本的雌雄判別是規(guī)?；a(chǎn)的前提。但是刺餓的雌 雄個(gè)體區(qū)別較難，是刺餓人工繁殖的難點(diǎn)之一。雖然同齡的刺餓中雄性個(gè)體顯著大于雌性 個(gè)體，但在野外捕獲個(gè)體中年齡層次不一，個(gè)體大小不能作為判定雌雄唯一標(biāo)準(zhǔn)。且在生殖 季節(jié)中，與雌性個(gè)體一樣，雄性個(gè)體腹部膨大柔軟，且未發(fā)現(xiàn)類似追星等第二性征。發(fā)明人 通過解剖300余條刺餓無一例外發(fā)現(xiàn)健壯雄性具有巨大尿泡，雌性尿泡則較小，如圖1。因 此在輕擠腹部時(shí)，雄性尿液量大且呈噴射狀，發(fā)明人W此作為判別雌雄的標(biāo)準(zhǔn)之一，再結(jié)合 個(gè)體大小，W及能否擠出精液作為本發(fā)明中判別刺餓雌雄的方法。
[0020] 發(fā)育良好的刺餓親本獲得也是刺餓人工繁殖難點(diǎn)之一。連續(xù)多個(gè)月進(jìn)行性腺解剖 觀察發(fā)現(xiàn)，雄性刺餓精巢只呈現(xiàn)過細(xì)線狀或圓柱狀（粉紅色），未發(fā)現(xiàn)如其它多數(shù)淡水魚類 第IV期或第V期精巢時(shí)呈現(xiàn)的乳白色，且輕壓時(shí)有大量精液的流出。因此，選擇雄性刺餓 作為繁殖親本的月份是個(gè)難點(diǎn)問題，發(fā)明人通過隨機(jī)對(duì)野外捕獲個(gè)體的性腺進(jìn)行解剖觀察 及組織切片觀察（見圖2)，總結(jié)出多個(gè)月份雌雄刺餓性腺發(fā)育狀況（見圖3)?；赪上結(jié) 果，發(fā)明人選擇于每年5月中旬至7月初期間或者在整個(gè)9月份期間，雌雄刺餓性腺均發(fā)育 較好的時(shí)間段作為挑選刺餓親本的時(shí)間。
[0021] 發(fā)明人通過對(duì)親本進(jìn)行人工催產(chǎn)、受精、解化，先后多次成功繁殖出刺餓，刺餓的 胚胎發(fā)育觀察結(jié)果見圖4。現(xiàn)例舉Ξ次具體實(shí)施例： 陽0巧實(shí)施例1 陽〇2引 1.親本的選擇
[0024] 在野生捕獲的刺餓個(gè)體中挑選出了 98條性成熟良好的親魚。雌性30gW上，腹部 膨大柔軟，生殖孔圓形發(fā)紅，雄性50gW上，健壯靈活，多數(shù)能擠出精液。雌雄比例為1 :1。 陽0巧]2.催產(chǎn)方式 陽0%] 人工催產(chǎn)藥物包括HCG，LRH-Az和D0M。催產(chǎn)藥物劑量見表1。人工催產(chǎn)藥物還包 括每千克親魚0. 3ml0. 7%的氯化鋼溶液。催產(chǎn)方法為背部肌肉二針注射法，第一針只注射LRH-A2,與第二針的注射時(shí)間間隔為12小時(shí)。
[0027] 3.人工授精方法
[0028] 10小時(shí)后每隔兩個(gè)小時(shí)檢查親魚，輕擠腹部即有卵粒流出方可進(jìn)行人工授精。
[0029] 解剖雄魚取出精巢，置于80目紗網(wǎng)之上，用研鉢研碎之后滴加少量精子保存液過 濾，收集過濾液即為精液。精子保存液配方：氯化鋼7. 5g，氯化鐘0. 3g，氯化巧0. 3g，屯水 合硫酸儀〇.3g，葡萄糖3.Og，雙蒸水定容到1000ml。將成熟卵子擠入干燥陶瓷碗中滴加精 液混勻。
[0030] 4.受精卵解化方法
[0031] 待精子和卵子混合之后用黃泥漿水或滑石粉脫粘3分鐘。置于解化池中避光解 化，保持水溫26°C，溶氧5mg/LW上，微流水，每天換水五分之一，魚卵密度3000粒/m2。解 化水泥池面積不宜過大，一般為4mX4m(長X寬）或5mX5m(長X寬）。水泥池池深WIm為 好。
[0032] 解化池用作育苗池。刺餓水花階段體質(zhì)較弱，用解化池作為育苗池可W減少轉(zhuǎn)魚 過程中受到的損傷，提高成活率。 陽〇3引實(shí)施例2
[0034] 在野生捕獲的刺餓個(gè)體中挑選出了 112條性成熟良好的親魚。雌性30gW上，腹 部膨大柔軟，生殖孔圓形發(fā)紅，雄性50gW上，健壯靈活，多數(shù)能擠出精液。雌雄比例為1 : 1. 2。其它各步驟與實(shí)施例1相同。 陽0對(duì)實(shí)施例3
[0036] 在野生捕獲的刺餓個(gè)體中挑選出了 70條性成熟良好的親魚。雌性30gW上，腹部 膨大柔軟，生殖孔圓形發(fā)紅，雄性50gW上，健壯靈活，多數(shù)能擠出精液。雌雄比例為1 :1. 1。 其它各步驟與實(shí)施例1相同。
[0037] 實(shí)施例1~3及人工催產(chǎn)藥物使用劑量對(duì)效應(yīng)時(shí)間、親本催產(chǎn)率、受精率、親本死 亡率、解化率及解化后7天成活率的影響見表1。
[0038] 表1催產(chǎn)藥物劑量對(duì)的刺餓繁殖效果的影響
[0039]
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種刺鰍人工繁殖方法，其特征在于包括如下步驟： (1) 在每年的繁殖高峰時(shí)期，即每年5月中旬至7月初及9月份，從野生捕獲或家養(yǎng)刺 鰍中挑選出性成熟良好的親魚，雌性要求30g以上，生殖孔圓形發(fā)紅為佳，雄性要求50g以 上，能擠出精液為佳，雌雄比例為1 : 1.2; (2) 對(duì)親魚注射人工催產(chǎn)藥物，雌雄親魚注射劑量相同，人工催產(chǎn)藥物的種類和注射劑 量為HCG1500IU/kg+LRH-A250yg/kg+D0M5mg/kg;雌雄親魚均采用背部肌肉二針注射法， 第一針只注射LRH-A2，劑量為總劑量的1/5-2/5,間隔12h后，注射第二針，將剩余催產(chǎn)藥物 注射完畢； (3) 將注射人工催產(chǎn)藥物后的親魚置于暫養(yǎng)池中遮光和流水刺激，保持水溫26°C，溶 氧5mg/L以上； (4) 人工授精時(shí)，先解剖雄魚取出精巢，置于80目紗網(wǎng)之上，用研缽研碎，然后滴加少 量精子保存液，過濾，收集過濾液即為精液；將雌魚的成熟卵子擠入干燥陶瓷碗中并滴加入 精液，攪拌，待精液和卵子混勻后用黃泥漿水或滑石粉脫粘3分鐘； (5) 將脫粘后的受精卵置于孵化池中避光孵化，保持水溫26°C，溶氧5mg/L以上，微流 水，每天換水五分之一，受精卵密度為3000粒/m2,孵化池面積不宜過大，一般長寬均為4~ 5m，池深以lm為好，使用之前消毒； (6) 魚苗孵化5天之后，向孵化池中設(shè)置水草及躲避物，用豐年蝦無節(jié)幼體開口，一天 投喂6次，持續(xù)投喂8到10天，之后用水蚯蚓喂足一個(gè)月，長至3厘米左右，開始用配合飼 料馴化。2. 如權(quán)利要求1所述的刺鰍人工繁殖方法，其特征在于：所述精子保存液的配方為： 氯化鈉7. 5g，氯化鉀0. 3g，氯化媽0. 3g，七水合硫酸鎂0. 3g，葡萄糖3. 0g，雙蒸水定容到 1000ml〇
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種刺鰍人工繁殖方法，在每年的繁殖高峰時(shí)期，即每年5月中旬至7月初及9月份，從野生捕獲或家養(yǎng)刺鰍中挑選出性成熟良好的親魚，雌雄比例為1∶1.2；然后對(duì)親魚注射人工催產(chǎn)藥物，分別取雄魚和雌魚的精液和卵子進(jìn)行人工授精，孵化后用豐年蝦無節(jié)幼體開口，之后用水蚯蚓喂足一個(gè)月，長至3厘米左右，開始用配合飼料馴化。本發(fā)明所公開的人工繁殖方法具有高催產(chǎn)率，高受精率、高孵化率、高成活率等特點(diǎn)，同時(shí)還具有親本死亡率低的特點(diǎn)。適宜按需求開展規(guī)?；迢q苗種繁殖，具有高效、簡便、利于推廣的優(yōu)點(diǎn)。
【IPC分類】A01K61/00
【公開號(hào)】CN105409839
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510812385
【發(fā)明人】高堅(jiān), 徐秀文, 曹小娟, 彭鑫, 王衛(wèi)民
【申請(qǐng)人】華中農(nóng)業(yè)大學(xué)
【公開日】2016年3月23日
【申請(qǐng)日】2015年11月20日