一種靈芝原生態(tài)仿野生栽培方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，特別是涉及一種靈芝原生態(tài)仿野生栽培方法。
【背景技術(shù)】
[0002]靈芝，又稱木靈芝、菌靈芝、靈芝草，素有“仙草”、“瑞草”、“還魂草”之美譽(yù)，是我國傳統(tǒng)名貴中藥，具有多種生理活性和藥理作用。靈芝的生物活性成分十分豐富，目前已分離至IJ150余種活性成分，有多糖類、核苷類、生物堿類、氨基酸蛋白質(zhì)類、三萜類和礦質(zhì)元素等。其中，靈芝多糖能提高機(jī)體免疫力，刺激干擾素的形成，抗病毒，抗氧化，抗腫瘤，提高機(jī)體耐缺氧能力，增強(qiáng)肝臟、骨髓、血液合成DNA、RAN和蛋白質(zhì)的能力，從而延長壽命。近年來，靈芝的開發(fā)利用越來越受到人們的重視，消費(fèi)量增長迅速。但由于野生靈芝資源數(shù)量有限，且受生理狀態(tài)的特殊性和復(fù)雜性以及外部環(huán)境的制約，靈芝在自然界中形成子實(shí)體困難，造成天然的靈芝數(shù)量非常稀少，因此通過人工培植來彌補(bǔ)野生資源的不足顯得尤為重要。但由于其先天的缺陷，目前人工栽培的靈芝只是“得其形而失其實(shí)”，藥用效果遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能和野生靈芝想媲美。因此，模擬靈芝生長的天然環(huán)境，創(chuàng)建一種靈芝仿生學(xué)的在么陪方法迫在眉睫。
[0003]靈芝為腐生菌，常腐生在闊葉樹的倒木、枯木和樹粧上，其以碳源、氮源和無機(jī)鹽類為營養(yǎng)基礎(chǔ)，也需要極少量的維生素。在菌絲生長時期，只能吸收利用一些低碳化合物，但很快就可以產(chǎn)生各種酶類來分解、轉(zhuǎn)化、吸收、利用纖維素、半纖維素、木質(zhì)素及一些礦物元素。因此在野生自然條件下，常在棟、鍛、樺、楊和白松，桑樹等腐木上生長，或以這些樹種的鋸木肩為生長基質(zhì)。
[0004]目前靈芝的人工栽培主要有兩種，一種是以楊樹、櫟樹的段木栽培為主，但段木栽培需要大量的木材資源，資源浪費(fèi)比較嚴(yán)重，難以規(guī)?；耘?；另一種是袋料栽培，但是存在培養(yǎng)基營養(yǎng)供給不充分，子實(shí)體發(fā)育較小、易染雜菌等問題。又由于桑枝靈芝的靈芝多糖比雜木或椴木靈芝高30%以上，而且桑枝靈芝面市后，價格要比一般靈芝高50%以上。利用桑枝栽培靈芝，不但可變廢為寶、增加蠶桑產(chǎn)業(yè)的附加值，而且還可以取得良好的社會效益和生態(tài)效益。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的是提供一種靈芝原生態(tài)仿野生栽培方法，該方法以桑木肩和桑木條作為靈芝栽培的主要原料，人為增加這些主要原料感染靈芝菌的機(jī)率，栽培方式更加仿野生，子實(shí)體與野生相似，栽培的靈芝干燥后靈芝質(zhì)地厚實(shí)、堅硬、營養(yǎng)及藥效成分齊全，藥用價值高且產(chǎn)量穩(wěn)定。
[0006]本發(fā)明的目的通過以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn):
一種靈芝原生態(tài)仿野生栽培方法，該方法包括如下步驟:
(1)從野生靈芝子實(shí)體上分離的菌株經(jīng)純化后接種到母種培養(yǎng)基中培養(yǎng)獲得靈芝母種； (2)靈芝母種接種到原種培養(yǎng)基上培養(yǎng)獲得靈芝原種；
(3)將靈芝原種接種到栽培袋內(nèi)的裝袋培養(yǎng)基中培養(yǎng)獲得栽培種；
(4)將所述的長滿靈芝菌絲體的栽培種接種到桑木肩和桑木條混合物上。
[0007]所述母種培養(yǎng)基的原料為:桑木肩浸汁100ml、馬鈴薯300g、葡萄糖30g、瓊脂18g?23g、硫酸錢1.5 g、磷酸二氫鉀1 g、硫酸鎂0.5 g，加水至1000ml;
所述母種培養(yǎng)基的制作方法為:按配方稱取所需原料，馬鈴薯去皮切片，馬鈴薯片煮后用紗布過濾，取其濾液加入瓊脂、葡萄糖，加熱至瓊脂溶化;桑木肩煮汁得到桑木肩浸汁，與其它組分混合后，補(bǔ)足水至1000ml，調(diào)pH5?6.5。
[0008]所述原種培養(yǎng)基的配方為:桑木肩77%、麩皮15%、玉米粉15%、硫酸銨0.5%、糖1%、碳酸鈣1 %，另加0.5%的硫酸銨。
[0009]所述裝袋培養(yǎng)基中，原料按按重量百分比，桑木肩35-45%、桑木條25-30%、麩皮15-20%、玉米粉12-15%、糖0.6-1.0%、碳酸鈣0.8-1.6%，總重量計100%，另加硫酸銨0.5%。
[0010]所述裝袋培養(yǎng)基中，原料按按重量百分比，桑木肩40%、桑木條28%、麩皮15%、玉米粉15%、糖1 %、碳酸鈣1 %，總重量計100%，另加硫酸銨0.5%。
[0011]本發(fā)明的有益效果是:本發(fā)明的一種靈芝原生態(tài)仿野生栽培方法，該方法以桑木肩和桑木條作為靈芝栽培的主要原料，人為增加這些主要原料感染靈芝菌的機(jī)率，栽培方式更加仿野生，子實(shí)體與野生相似，栽培的靈芝干燥后靈芝質(zhì)地厚實(shí)、堅硬、營養(yǎng)及藥效成分齊全，藥用價值高且產(chǎn)量穩(wěn)定。
[0012]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于:
1、蠶桑業(yè)是我國有5500多年歷史的傳統(tǒng)產(chǎn)業(yè)，截至2010年為止，我國有1210萬畝桑園，利用昂書肩和桑樹枝接種靈芝菌，可快速、規(guī)?；耘囔`芝子實(shí)體。
[0013]2、本發(fā)明培養(yǎng)方式簡單，處于自然野生環(huán)境，因此近似野生靈芝，藥用價值高且產(chǎn)量穩(wěn)定，解決了目前人工袋料栽培技術(shù)中靈芝子實(shí)體難形成，袋料、段木人工栽培中靈芝子實(shí)體形態(tài)和藥用成份差異的難題。
[0014]3、仿生態(tài)栽培靈芝及靈芝深加工產(chǎn)品良好的市場前景，將為桑園帶來巨大經(jīng)濟(jì)效益，促進(jìn)農(nóng)民種桑保桑的積極性，對穩(wěn)定我國桑園面積，實(shí)現(xiàn)蠶桑產(chǎn)業(yè)與藥用菌產(chǎn)業(yè)的雙贏作出一定成績。
【具體實(shí)施方式】
[0015]為了使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案及優(yōu)點(diǎn)更加清楚明白，以下結(jié)合實(shí)施例，對本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步詳細(xì)說明。應(yīng)當(dāng)理解，此處所述描述的具體實(shí)施例僅僅用以解釋本發(fā)明，并不用于限定本發(fā)明。
[0016]實(shí)施例1
1、靈芝菌種分離及靈芝母種的培養(yǎng)
以野生靈芝子實(shí)體作為分離材料。對靈芝子實(shí)體的表面沖洗消毒后，在無菌條件下將子實(shí)體切開，在子實(shí)體中間層挑取約0.5厘米見方的組織塊按一定距離放在母種培養(yǎng)基平板上，每皿六塊，置28°C左右條件下培養(yǎng)，24小時后組織塊上長出細(xì)密絨毛菌絲，用接種刀將先端菌絲移接入母種培養(yǎng)基上，置25°C左右條件下培養(yǎng)10天，菌絲布滿斜面。如發(fā)現(xiàn)糊狀粘稠菌落或生長很快的真菌菌落則不予轉(zhuǎn)管，需重新分離。靈芝菌種分離也可采用孢子分離、基內(nèi)菌絲分離，無論哪種分離方法，在大面積栽培前必須進(jìn)行出菇試驗(yàn)，證實(shí)確無異常現(xiàn)象，菌種才能擴(kuò)大投入生產(chǎn)。
[0017]母種培養(yǎng)基可選擇PDA培養(yǎng)基。本實(shí)施例采用如下配方(PDA改良培養(yǎng)基):椴木肩浸汁適量、馬鈴薯250g、葡萄糖20g、瓊脂18 g?23g、硫酸銨1.5g、磷酸二氫鉀lg、硫酸鎂0.5g，加水至1000ml，121°C滅菌。
[0018]母種培養(yǎng)基的配制方法:按配方稱取所需原料，馬鈴薯去皮挖切片，馬鈴薯片經(jīng)煮后用紗布過濾，取其濾液加入瓊脂、葡萄糖，加熱至瓊脂溶化;桑木肩煮汁得到桑枝肩浸汁，與其他組分混合后，補(bǔ)足水至1000ml，調(diào)pH5?6.5。趁熱分裝入試管內(nèi)，每支試管的培養(yǎng)基容量約占試管高度的1/5，一般1000ml培養(yǎng)基可裝20X200試管100支、管塞上棉塞，用薄膜包扎，121°C滅菌。
[0019]靈芝原種生產(chǎn):取分離