一種日本楓橙之夢的組培苗微嫁接方法
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及嫁接繁殖技術領域，具體涉及一種日本楓橙之夢的組培苗微嫁接方 法。
【背景技術】
[0002] 日本楓橙之夢(Acer palmatum〃Orange Dream〃）的觀賞價值高，品種獨特，春天葉 色黃中帶綠，越受日光照射，葉色越變?yōu)辄S色，葉邊泛紅，漸漸為橙黃，到夏天變?yōu)榉浅Ｆ?的橙色，葉脈黃色，秋天為金黃色，三季葉色變化明顯，而且烈日下無日焦現(xiàn)象，很受市場歡 迎。
[0003] 目前，日本楓橙之夢主要通過傳統(tǒng)嫁接方式，受季節(jié)限制，繁殖數(shù)量少，成活率低， 人工成本較高的缺陷，且砧木規(guī)格最小為Icm左右，不能生產(chǎn)小規(guī)格嫁接苗，不能滿足微盆 栽需要。

【發(fā)明內容】

[0004] 有鑒于此，本申請?zhí)峁┮环N日本楓橙之夢的組培苗微嫁接方法，所述方法能提高 嫁接的效率，提高繁殖數(shù)量，環(huán)境可控，成活率高，嫁接苗培育周期短，可以不受季節(jié)限制， 克服了傳統(tǒng)嫁接方式受季節(jié)限制，繁殖數(shù)量少，成活率低，人工成本較高的缺陷，可進行大 規(guī)模的工業(yè)化育苗及深加工。
[0005] 為解決以上技術問題，本發(fā)明提供的技術方案是一種日本楓橙之夢的組培苗微嫁 接方法，所述方法包括以下步驟：
[0006] (1)無菌砧木培育:切取秀麗槭帶芽枝段，進行組織培養(yǎng)，得秀麗槭無菌苗，將秀麗 槭無菌苗斜切截斷，得無菌站木；
[0007] (2)無菌接穗培育：切取日本楓橙之夢帶芽枝段，進行組織培養(yǎng)，得日本楓橙之夢 無菌苗，將日本楓橙之夢無菌苗斜切截斷，得無菌接穗；
[0008] (3)組培苗微嫁接:將步驟（1)所述的無菌砧木的斜截面與步驟(2)所述無菌接穗 的斜截面對齊，并固定，得到微嫁接苗，將所述嫁接苗接種于培養(yǎng)基上培養(yǎng)4一5周，所述培 養(yǎng)基的組成為:MS基本培養(yǎng)基，補充0·25-1 ·50mg/L 6-BA、0.02-0· 10mg/L NAA、5-30g/L 蔗糖；
[0009] (4)煉苗移栽:將步驟(3)所得微嫁接苗轉入溫室初期煉苗5-8天，再轉入苗床中 煉苗4一5周，在所述苗床中煉苗期間，進行噴霧處理和殺菌處理，煉苗結束后即可移栽。 [0010]優(yōu)選的，所述組培苗微嫁接中，微嫁接苗在培養(yǎng)基中培養(yǎng)的條件為:溫度為23-27 °C，光照強度為2300-2600Lx，光照時間為12h/d。
[0011] 優(yōu)選的，所述組培苗微嫁接中，所述培養(yǎng)基的組成為:MS基本培養(yǎng)基，補充0.5- 1.25mg/L 6-ΒΑ、0·03-0.07mg/L NAA、10-25g/L蔗糖。
[0012] 更為優(yōu)選的，所述組培苗微嫁接中，所述培養(yǎng)基的組成為:MS基本培養(yǎng)基，補充 1.0mg/L 6_BA、0.05mg/L NAA、20g/L鹿糖。
[0013]優(yōu)選的，所述組培苗微嫁接中，所述培養(yǎng)基中還補充3-7g/L瓊脂，所述瓊脂的pH 值為6.5。
[0014]優(yōu)選的，所述無菌站木的莖粗為1.5mm以上，所述無菌接穗的莖粗為1mm以上。
[0015] 優(yōu)選的，所述煉苗移栽中，所述苗床的基質為體積比為2: (2-4)的珍珠巖和腐殖 質的混合物。
[0016] 優(yōu)選的，所述煉苗移栽中，所述噴霧處理的方法為:晴天時，每間隔10-15min噴霧 3一4s;雨天或陰天時，每間隔18-25min噴霧3-4s，噴霧處理的時間為6-12天。
[0017]優(yōu)選的，所述煉苗移栽中，所述殺菌處理方法為:每隔5-8天使用殺菌劑溶液全面 噴施嫁接苗。
[0018] 更為優(yōu)選的，所述殺菌劑溶液為任意一種選自70 %甲基托布津800倍溶液、50 %多 菌靈800倍溶液、75 %百菌清800倍溶液。
[0019] 其中，所述無菌砧木培育中，所述組織培養(yǎng)的方法為:將秀麗槭帶芽枝段消毒滅菌 后接種至腋芽誘導培養(yǎng)基上培養(yǎng);將萌發(fā)的腋芽切下，接種至叢生芽誘導培養(yǎng)基上培養(yǎng);將 分化出的叢生芽切成單株，接種生根培養(yǎng)基培養(yǎng)，即得秀麗槭無菌苗。
[0020] 所述無菌接穗培育中，所述組織培養(yǎng)的方法為:將日本楓橙之夢帶芽枝段消毒滅 菌后接種至腋芽誘導培養(yǎng)基上培養(yǎng);將萌發(fā)的腋芽切下，接種至叢生芽誘導培養(yǎng)基上培養(yǎng)； 將分化出的叢生芽切成單株，接種生根培養(yǎng)基培養(yǎng)，即得日本楓橙之夢無菌苗。
[0021] 本申請所述的MS基本培養(yǎng)基具有較高的無機鹽濃度，能夠保證組織生長所需的礦 質營養(yǎng)，還能加速愈傷組織的生長，是較穩(wěn)定的離子平衡溶液，它的硝酸鹽含量高，其養(yǎng)分 的數(shù)量和比例合適，能滿足植物細胞的營養(yǎng)和生理需要，因而適用范圍比較廣，多數(shù)植物組 織培養(yǎng)快速繁殖用它作為培養(yǎng)基的基本培養(yǎng)基。
[0022]所述6-BA為6-芐氨基腺嘌呤，是一種植物生長激素，其主要作用是促進芽的形成， 也可以誘導愈傷組織發(fā)生，促進細胞分裂，促進非分化組織分化，促進生物體內物質的積 累，促進側芽發(fā)生，防止老化，是植物組織和細胞培養(yǎng)中的細胞分裂素。
[0023]所述NAA為萘乙酸，是一種植物生長激素，在植物使用扦插法繁殖時使用，也可用 于植物組織培養(yǎng)，能促進細胞分裂與擴大，誘導形成不定根增加座果，防止落果，改變雌、雄 花比率等，可經(jīng)葉片、樹枝的嫩表皮，種子進入到植株內，隨營養(yǎng)流輸導到全株。
[0024] 本申請與現(xiàn)有技術相比，其詳細說明如下:本申請技術方案提供了一種日本楓橙 之夢的組培苗微嫁接方法，包括無菌砧木培育、無菌接穗培育、組培苗微嫁接、煉苗移栽的 步驟，通過對組培苗微嫁接步驟中，培養(yǎng)基的篩選，得到最佳的培養(yǎng)基組分和配比，采用前 述植物生長激素配比形成的培養(yǎng)基，配方簡單，培養(yǎng)基成本低，能加快微嫁接傷口的愈合， 保證微嫁接的成活率在90%以上，因而提高了嫁接的效率，提高繁殖數(shù)量，由于其環(huán)境可 控，成活率高，嫁接苗培育周期短，可以不受季節(jié)限制，因此克服了傳統(tǒng)嫁接方式受季節(jié)限 制，繁殖數(shù)量少，成活率低，人工成本較高的缺陷，可生產(chǎn)規(guī)格更小的嫁接苗用于微盆景、微 盆栽，解決組培生根難問題，可進行大規(guī)模的工業(yè)化育苗及深加工，具有很好的應用前景。
【具體實施方式】
[0025] 為了使本領域的技術人員更好地理解本發(fā)明的技術方案，下面結合具體實施例對 本發(fā)明作進一步的詳細說明。
[0026] 實施例1
[0027] 本實施例所述的日本楓橙之夢的組培苗微嫁接方法，包括以下步驟：
[0028] (1)無菌砧木培育:切取秀麗槭帶芽枝段，消毒滅菌后接種至腋芽誘導培養(yǎng)基上培 養(yǎng);將萌發(fā)的腋芽切下，接種至叢生芽誘導培養(yǎng)基上培養(yǎng);將分化出的叢生芽切成單株，接 種生根培養(yǎng)基培養(yǎng)，得秀麗槭無菌苗，將秀麗槭無菌苗斜切截斷，得無菌砧木，莖粗為1.5mm 以上；
[0029] (2)無菌接穗培育:切取日本楓橙之夢帶芽枝段，消毒滅菌后接種至腋芽誘導培養(yǎng) 基上培養(yǎng);將萌發(fā)的腋芽切下，接種至叢生芽誘導培養(yǎng)基上培養(yǎng);將分化出的叢生芽切成單 株，接種生根培養(yǎng)基培養(yǎng)，得日本楓橙之夢無菌苗，將日本楓橙之夢無菌苗斜切截斷，得無 菌接穗，莖粗為1mm以上；
[0030] (3)組培苗微嫁接:將步驟（1)所述的無菌砧木的斜截面與步驟(2)所述無菌接穗 的斜截面對齊，并采用無菌乳膠管固定，得到微嫁接苗，將所述嫁接苗接種于培養(yǎng)基上培養(yǎng) 4一5周，培養(yǎng)溫度為23-27°C，光照強度為2300-2600Lx，光照時間為12h/d。所述培養(yǎng)基的 組成為:MS基本培養(yǎng)基，補充1 · Omg/L 6-BA、0 · 05mg/L NAA、20g/L蔗糖、5g/L瓊脂，其中瓊脂 的pH值為6.5;
[0031 ] (4)煉苗移栽:將步驟(3)所得微嫁接苗轉入溫室初期煉苗7天，再轉入苗床中煉苗 4一5周，提前7天對苗床進行消毒，苗床的基質為體積比為2:3的珍珠巖和腐殖質的混合物， 在所述苗床中煉苗期間，進行噴霧處理和殺菌處理，煉苗結束后即可移栽，其中所述噴霧處 理的方法為:晴天時，每間隔IOmin噴霧3s;雨天或陰天時，每間隔20min噴霧3s，噴霧處理的 時間為10天，所述殺菌處理方法為:每隔7天使用殺菌劑溶液全面噴施嫁接苗，所述殺菌劑 溶液為70 %甲基托布津800倍溶液。
[0032] 實施例2
[0033]本實施例所述的日本楓橙之夢的組培苗微嫁接方法，與實施例1的區(qū)別在于：
[0034]步驟(3)組培苗微嫁接中，所述培養(yǎng)基的組成為:MS基本培養(yǎng)基，補充1.〇11^/16-BA、0 · 05mg/L NAA、20g/L鹿糖、4g/L瓊脂。
[0035] 實施例3
[0036] 本實施例所述的日本楓橙之夢的組培苗微嫁接方法，與實施例1的區(qū)別在于：
[0037]步驟(3)組培苗微嫁接中，所述培養(yǎng)基的組成為:MS基本培養(yǎng)基，補充0.511^/16-ΒΑ、0 · 03mg/L NAA、10g/L鹿糖、4g/L瓊脂。
[0038] 實施例4
[0039] 本實施例所述的日本楓橙之夢的組培苗微嫁接方法，與實施例1的區(qū)別在于：
[0040] 步驟⑶組培苗微嫁接中，所述培養(yǎng)基的組成為:MS基本培養(yǎng)基，補充1.2511^/16-BA、0 · 07mg/L NAA、25g/L蔗糖、5g/L瓊脂。
[0041 ] 實施例5
[0042]本實施例所述的日本楓橙之夢的組培苗微嫁接方法，與實施例1的區(qū)別在于：
[0043]步驟(3)組培苗微嫁接中，所述培養(yǎng)基的組成為:MS基本培養(yǎng)基，補充0.2511^/16-BA、0 · 02mg/L NAA、5g/L鹿糖、4g/L瓊脂。
[0044] 實施例6
[0045] 本實施例所述的日本楓橙之夢的組培苗微嫁接方法，與實施例1的區(qū)別在于：
[0046] 步驟⑶組培苗微嫁接中，所述培養(yǎng)基的組成為:MS基本培養(yǎng)基，補充1.5〇11^/16-BA、0.10mg/L NAA、30g/L鹿糖、5g/L瓊脂。
[0047] 實施例7
[0048] 本實施例所述的日本楓橙之夢的組培苗微嫁接方法，與實施例1的區(qū)別在于：
[0049] 步驟(3)組培苗微嫁接中，MS基本培養(yǎng)基，補充O.lmg/L 6-BA、0.08mg/L NAA、20g/ L蔗糖、5g/L瓊脂。
[0050] 實施例8
[0051] 本實施例所述的日本楓橙之夢的組培苗微嫁接方法，與實施例1的區(qū)別在于：
[0052] 步驟(3)組培苗微嫁接中，MS基本培養(yǎng)基，補充O.lmg/L 6-B