一種日本囊對(duì)蝦蝦苗耐氨氮性能的等級(jí)劃分與優(yōu)選方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001 ]本發(fā)明涉及水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)中一種高質(zhì)量日本囊對(duì)蝦的篩選方法，具體為日本囊對(duì)蝦 蝦苗耐氨氮性能的等級(jí)劃分與優(yōu)選方法，屬于農(nóng)業(yè)水產(chǎn)養(yǎng)殖中蝦類水產(chǎn)生物養(yǎng)殖技術(shù)領(lǐng) 域。
【背景技術(shù)】
[0002] 日本囊又名日本對(duì)奸，俗稱"竹節(jié)4下"、"花奸"等， 隸屬于節(jié)肢動(dòng)物門、甲殼綱、十足目、對(duì)蝦科，系廣泛分布于我國(guó)長(zhǎng)江口以南海域的土著種， 是我國(guó)傳統(tǒng)海水養(yǎng)殖蝦類品種和出口創(chuàng)匯的重要水產(chǎn)品。因其體色艷麗、肉鮮味美、營(yíng)養(yǎng)經(jīng) 濟(jì)價(jià)值高，且具生長(zhǎng)迅速、抗逆性強(qiáng)、適宜活蝦長(zhǎng)途干運(yùn)等特點(diǎn)，我國(guó)自上世紀(jì)八十年代中 期開展全人工養(yǎng)殖以來(lái)，養(yǎng)殖地域逐漸拓展，產(chǎn)業(yè)規(guī)模不斷擴(kuò)大，現(xiàn)已與凡納濱對(duì)蝦、中國(guó) 明對(duì)蝦和斑節(jié)明對(duì)蝦一道成為當(dāng)前我國(guó)四大主養(yǎng)海水蝦類。據(jù)統(tǒng)計(jì)，2013年中國(guó)大陸地區(qū) 日本囊對(duì)蝦養(yǎng)殖面積達(dá)1.8925萬(wàn)公頃，年養(yǎng)殖產(chǎn)量為4.5949萬(wàn)噸。
[0003] 氨氮既是評(píng)價(jià)養(yǎng)殖水質(zhì)優(yōu)劣程度的重要監(jiān)測(cè)指標(biāo)，也是影響進(jìn)而威脅水產(chǎn)養(yǎng)殖動(dòng) 物正常存活、生長(zhǎng)和繁衍的重要無(wú)機(jī)污染物。隨著集約化養(yǎng)殖技術(shù)的發(fā)展，特別是設(shè)施化高 密度養(yǎng)殖的開展，水體承載已遠(yuǎn)超過(guò)養(yǎng)殖水生態(tài)調(diào)節(jié)能力范圍；同時(shí)，伴隨養(yǎng)殖尾水無(wú)處理 排放、養(yǎng)殖池塘有機(jī)質(zhì)類淤積等，致使養(yǎng)殖水體氮含量常處于超標(biāo)狀態(tài)。已有研究表明，氨 氮對(duì)日本囊對(duì)蝦幼體具明顯致毒作用，水環(huán)境中過(guò)高的氨氮質(zhì)量濃度常會(huì)引發(fā)日本囊對(duì)蝦 鰓組織排氨作用的受阻和耗氧量的增加、血淋巴蛋白和血藍(lán)蛋白濃度顯著降低、免疫活性 以及對(duì)WSSV抗病力的顯著下降等一系列氨毒生理反應(yīng)，且其血氨含量隨氨氮攻毒時(shí)間的延 長(zhǎng)而上升并造成爆發(fā)性死亡。因此，開展該蝦仔蝦耐氨氮性能的等級(jí)篩選與定向選擇研究 也就顯得十分必要。
[0004] 形態(tài)表型受遺傳因子和環(huán)境因子的共同影響。據(jù)報(bào)道，分布于西太平洋海域的日 本囊對(duì)蝦具很高的遺傳多樣性，可根據(jù)其頭胸甲側(cè)面斜紋的延伸特征將其分型為形態(tài)變異 I型和Π 型；微衛(wèi)星標(biāo)記法研究發(fā)現(xiàn)，取自浙江、福建、廣東和海南等四個(gè)省份的6個(gè)地理居 群野生日本囊對(duì)蝦均具豐富的遺傳多樣性，且遺傳變異貢獻(xiàn)率的93.06 %源自群體內(nèi)；主布 于東海和南海北部的形態(tài)變異I型，其稚蝦的耐高溫性能弱于主布于南海水域的形態(tài)變異 Π 型，且在室內(nèi)同池飼養(yǎng)條件下，形態(tài)變異I型的群體生長(zhǎng)性能優(yōu)于Π 型，但性成熟時(shí)間卻 晚于Π 型;對(duì)取自福建廈門的野生群體和養(yǎng)成于海南而種苗源自福建廈門的人工養(yǎng)成群體 間形態(tài)差異進(jìn)行比較研究，發(fā)現(xiàn)兩者在形態(tài)比例特征上已出現(xiàn)了較大程度的偏離。無(wú)疑，日 本囊對(duì)蝦群體內(nèi)豐富的遺傳多樣性可為其表型的強(qiáng)環(huán)境可塑性提供證據(jù)支持，而其表型的 強(qiáng)環(huán)境可塑性則可為具不同抗逆性能的群體分型研究提供線索和標(biāo)記，這就為從表型水平 劃分日本囊對(duì)奸仔奸的抗逆等級(jí)提供了啟示。
[0005] 由此證明，通過(guò)對(duì)日本囊對(duì)4下外部形態(tài)的測(cè)定和計(jì)算，建立起外形與氨氮抗性的 內(nèi)外關(guān)聯(lián)方法是可行并得到事實(shí)支持的。而目前，本領(lǐng)域還沒有針對(duì)氨氮對(duì)日本囊對(duì)蝦質(zhì) 量好壞的影響做出過(guò)評(píng)價(jià)，更沒用針對(duì)抗氨氮的日本囊對(duì)蝦的篩選方法的報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的空白與不足，提供一種將氨氮列為仔蝦抗逆脅迫因子，并 根據(jù)氨氮耐受性能的強(qiáng)弱來(lái)評(píng)價(jià)日本囊對(duì)蝦蝦苗質(zhì)量的好壞，從而獲得日本囊對(duì)蝦蝦苗耐 氨氮性能的等級(jí)劃分與優(yōu)選方法：
[0007] 本發(fā)明采用的技術(shù)解決方案是:一種日本囊對(duì)蝦蝦苗耐氨氮性能的等級(jí)劃分與優(yōu) 選方法，包括以下步驟：
[0008] (1)從各日本囊對(duì)蝦育苗池中每池隨機(jī)抽取蝦苗30尾或以上，在解剖鏡下測(cè)定各 池每尾待測(cè)蝦苗如下形態(tài)比例指標(biāo):注:額劍長(zhǎng)/全長(zhǎng)C 2;頭胸甲長(zhǎng)/全長(zhǎng)C4;第二腹節(jié)長(zhǎng)/全 長(zhǎng)C6;尾節(jié)長(zhǎng)/全長(zhǎng)C 1();額劍長(zhǎng)/頭胸甲長(zhǎng)(：13;眼徑/頭胸甲長(zhǎng)&4;頭胸甲高/頭胸甲長(zhǎng)C 15;腹 節(jié)高/第一腹節(jié)長(zhǎng)Ci6;尾節(jié)高/尾節(jié)長(zhǎng)Ci7;
[0009] (2)將步驟（1)測(cè)定的(^^、(^、(^、(^、(^、(^、(^和⑶對(duì)應(yīng)值代入到如下計(jì)算公 式即耐氨氮選擇模型中：P= ( - 374237 · 401C2+60262 · 529C4 -482 · 009C6 -5837 · 357C10+ 2728 · 598C13+161295 · 154Ci4+6521.543Ci5+575.301Ci6+7363.539Ci7 - 15438.198)/( - 373239.473C2+59971.405C4-204.015C6-5345.370Ci〇+2773.543Ci3+160584.988Ci4+ 6394.044C 15+566.017C16+7468.213Cn -15349.352);將每尾蝦苗獲得的P值進(jìn)行平均獲得 每池蝦苗的平均P值；
[0010] (3)將蝦苗質(zhì)量劃分為以100分滿分的6個(gè)等級(jí)，91-100分第一等級(jí)，81-90分第二 等級(jí)，61-80分第三等級(jí)，41-60分第四等級(jí)，21-40分第五等級(jí)，0-20分第六等級(jí)；第六至一 等級(jí)依次對(duì)應(yīng)的P值的區(qū)間范圍為：（1.00370，1.00372]，（ 1.00372，1.00374]，（1.00374， 1.00376]，（1.00376,1.00378]，（1.00378,1.00380]，（1.00380,1.00382];將步驟（2)計(jì)算 出來(lái)的平均P值對(duì)應(yīng)到上述P值區(qū)間，從而判斷出每池蝦苗耐氨氮能力的等級(jí)；
[0011] (4)按上述（1)至(3)步驟，抽測(cè)并計(jì)算各育苗池中的待養(yǎng)殖蝦苗，并依計(jì)算結(jié)果， 將P值得分最高的育苗池中的蝦苗判為耐氨氮能力強(qiáng)的優(yōu)質(zhì)蝦苗，并要求所選優(yōu)質(zhì)蝦苗的 耐氨氮等級(jí)達(dá)到第一或第二等級(jí)。
[0012 ]本發(fā)明步驟(1)所述的奸苗為放養(yǎng)前苗種，規(guī)格為5mm~20mm(仔奸的體長(zhǎng)）。
[0013]本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)和優(yōu)異效果:本發(fā)明通過(guò)測(cè)定每個(gè)育苗池中30及以上尾數(shù)蝦苗的如 下平均值:額劍長(zhǎng)/全長(zhǎng)c2;頭胸甲長(zhǎng)/全長(zhǎng)C4;第二腹節(jié)長(zhǎng)/全長(zhǎng)C6;尾節(jié)長(zhǎng)/全長(zhǎng)C 1Q;額劍長(zhǎng)/ 頭胸甲長(zhǎng)&3;眼徑/頭胸甲長(zhǎng)C14;頭胸甲高/頭胸甲長(zhǎng)C 15;腹節(jié)高/第一腹節(jié)長(zhǎng)C16;尾節(jié)高/尾 節(jié)長(zhǎng)C17;然后直接代入到耐氨氮選擇模型為：P = ( -374237.401C2+60262.529C4 - 482.009C6-5837.357Ci〇+2728.598Ci3 + 161295.154Ci4+6521,543Ci5+575.301Ci6+ 7363.539Ci7 -15438.198)/( - 373239.473C2+59971.405C4 -204.015C6 -5345.370Ci〇+ 2773 · 543Ci3+160584 · 988Ci4+6394 · 044Ci5+566 · 017Ci6+7468 · 213Ci7-15349 · 352);然后獲 得蝦苗對(duì)應(yīng)的P值大小，再通過(guò)將蝦苗質(zhì)量劃分為以100分滿分的6個(gè)等級(jí)，91-100分第一等 級(jí)，81-90分第二等級(jí)，61-80分第三等級(jí)，41-60分第四等級(jí)，21-40分第五等級(jí)，0-20分第六 等級(jí)；第六至一等級(jí)依次對(duì)應(yīng)的P值的區(qū)間范圍為：（1.00370，1.00372]，（ 1.00372， 1.00374],(1.00374,1.00376],(1.00376,1.00378],(1.00378,1.00380],(1.00380, 1.00382];進(jìn)而輕松判斷奸苗所屬的等級(jí)，從而得到奸苗抗氨氮能力的大小，為奸苗選擇具 體投放環(huán)境，如適合氨氮含量小的海洋，還是相對(duì)氨氮含量大的池塘養(yǎng)殖環(huán)境作出有力判 斷，提高奸苗成活率和產(chǎn)量。
【附圖說(shuō)明】
[0014] 圖1實(shí)驗(yàn)測(cè)定樣本形態(tài)比例指標(biāo)的主成分散布圖；
[0015] 注:①+: A實(shí)驗(yàn)群體;②?: B實(shí)驗(yàn)群體;③Λ : C實(shí)驗(yàn)群體;④〇:D實(shí)驗(yàn)群體;⑤*: E實(shí) 驗(yàn)群體;其中，A、B、C、D實(shí)驗(yàn)群體分別為氨氮攻毒0-2411、24-4811、48-7211、72-9611的死亡個(gè) 體，E實(shí)驗(yàn)群體為氨氮攻毒96h時(shí)的存活個(gè)體。
[0016] 圖2淘汰群與選留群實(shí)驗(yàn)樣本的典型判別函數(shù)判別得分散布圖；
[0017] 注：判別函數(shù) 1/判別函數(shù)2 得分P = (- 374237 · 401C2+60262 · 529C4-482 · 009C6 - 5837.357Ci〇+2728.598Ci3+161295.154Ci4+6521.543Ci5+575.301Ci6+7363.539Ci7-15438.198)/( - 373239.473C2+59971.405C4 - 204.015C6 - 5345.370Ciq+2773.543Ci3+ 160584 · 988Ci4+6394 · 044Ci5+566 · 017Ci6+7468 · 213Cn -15349 · 352)。
【具體實(shí)施方式】
[0018] 下面通過(guò)具體實(shí)施例進(jìn)一步詳細(xì)描述本發(fā)明，但本發(fā)明不僅僅局限于以下實(shí)施 例。
[0019] 實(shí)施例
[0020] 本發(fā)明的一種日本囊對(duì)蝦蝦苗耐氨氮性能的等級(jí)劃分與優(yōu)選方法，包括以下步 驟：
[0021] (1)從各日本囊對(duì)蝦育苗池中每池隨機(jī)抽取蝦苗30尾或以上，在解剖鏡下測(cè)定各 池每尾待測(cè)蝦苗如下形態(tài)比例指標(biāo):注:額劍長(zhǎng)/全長(zhǎng)C 2;頭胸甲長(zhǎng)/全長(zhǎng)C4;第二腹節(jié)長(zhǎng)/全 長(zhǎng)C6;尾節(jié)長(zhǎng)/全長(zhǎng)C 1();額劍長(zhǎng)/頭胸甲長(zhǎng)(：13;眼徑/頭胸甲長(zhǎng)&4;頭胸甲高/頭胸甲長(zhǎng)C 15;腹 節(jié)高/第一腹節(jié)長(zhǎng)Cl6 ;尾節(jié)高/尾節(jié)長(zhǎng)Cl7 ;
[0022] (2)將步驟（1)測(cè)定的C2、C4、C6、C1Q、C 13、Cm、C15、(：16和&7對(duì)應(yīng)值代入到如下計(jì)算公 式：耐氨氮選擇模型為：P= ( - 374237 · 401C2+60262 · 529C4 -482 · 009C6 -5837 · 357C10+ 2728 · 598Ci3+161295 · 154Ci4+6521.543Ci5+575.301Ci6+7363.539Ci7 - 15438.198)/( - 373239.473C2+59971.405C4-204.015C6-5345.370Ci〇+2773.543Ci3+160584.988Ci4+ 6394 · 044Ci5+566 · 017Ci6+7468 · 213Cn -15349 · 352);以同一池體中的蝦苗為一個(gè)群體，將 同一池體中每尾蝦苗獲得的P值進(jìn)行加和求平均，獲得每池蝦苗的平均P值；
[0023] (3)將蝦苗質(zhì)量劃分為以100分滿分的6個(gè)等級(jí)，91-100分第一等級(jí)，81-90分第二 等級(jí)，61-80分第三等級(jí)，41-60分第四等級(jí)，21-40分第五等級(jí)，0-20分第六等級(jí)；第六至一 等級(jí)依次對(duì)應(yīng)的P值的區(qū)間范圍為：（1.00370，1.00372]，（ 1.00372，1.00374]，（1.00374， 1.00376]，（1.00376,1.00378]，（1.00378,1.00380]，（1.00380,1.00382];將步驟（2)計(jì)算 出來(lái)的平均P值對(duì)應(yīng)到上述P值區(qū)間，從而判斷出蝦苗耐氨氮能力的等級(jí)；
[0024] (4)按上述（1)至(3)步驟，抽測(cè)并計(jì)算各育苗池中的待養(yǎng)殖蝦苗，并