一種土人參無菌苗的煉苗移栽方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及植物的組織培養(yǎng)、育種繁殖和栽培等領域，具體指一種土人參無菌苗的煉苗移栽方法，能提高土人參無菌苗的移栽成苗率。
【背景技術】
[0002]土人參(Talinum paniculatum)，又名土洋參、假人參、人參菜、參草、土高麗參等，是馬齒莧科多年生的草本植物。根、葉均可食用，可炒、可做湯、可涮、可燉，藥蔬兼用。土人參的葉中，草酸含量較高，富含鈣、磷、鐵、抗壞血酸、硫胺素等營養(yǎng)成分;其根類似人參，含有糖類物質，可以燉湯或泡酒;嫩葉、嫩梢可食用，也可涼拌、炒食，味道鮮嫩。土人參也是一味極好的中草藥，具有滋補強壯作用，能補氣血、助消化、生津止渴、健脾潤肺、止咳、治咳痰帶血、調經等，被譽為“南方人參”，美食家認為“土人參補勝似人參”，其開發(fā)利用潛力很大，越來越受到人們的關注，土人參的功能基因和育種是其研究的重要內容。
[0003]功能基因和育種等研究過程中，組織培養(yǎng)是很重要的手段，但是，組織培養(yǎng)的土人參無菌苗在馴化煉苗時，由于莖葉嫩而脆，清洗培養(yǎng)基的過程中很容易折斷莖葉；同時，用珍珠巖等普通的辦法馴化煉苗，容易導致嫩苗缺水或染病死亡，成苗率較低，一般在50%左右，而且，相對弱小的土人參無菌苗(I厘米高度以下)，更加難以煉苗成功。并且，常規(guī)的煉苗移栽操作過程較慢而復雜，耗費時間和人力較多，存在不利于土人參的育種繁殖和栽培的問題。

【發(fā)明內容】

[0004]—種土人參無菌苗的煉苗移栽方法，具體包含以下步驟。
[0005]I)無菌土壤的準備
用0.5毫米直徑網孔的篩子篩過的細小土壤，其細小土壤的粘性泥土體積和細沙體積比為:0.2 <粘性泥土體積:細沙體積< 10，加入蒸餾水，直到土壤濕潤但無積水流出為止，然后高壓滅菌，冷卻至25°C備用。
[0006]2)無菌土壤的添加
用無菌鑷子將以上滅菌的土壤，輕輕加入已生根的土人參無菌苗的培養(yǎng)瓶中，其培養(yǎng)瓶中的土人參無菌苗植株高于5毫米即可;邊加土壤，邊輕輕震動培養(yǎng)瓶，使土壤均勻覆蓋培養(yǎng)基，土壤厚度約5毫米，輕輕蓋上瓶蓋，瓶內與瓶外有約0.5毫米的縫隙相通，即瓶蓋外邊緣與瓶口內壁有0.5毫米縫隙。
[0007]3)光照培養(yǎng)
置于2000Lux白光下，光照12小時，黑暗12小時，溫度20-25°C，連續(xù)培養(yǎng)10天，這十天內，每天觀察土壤的濕潤程度，如果土壤表層部分干燥至變?yōu)榘咨?，就補充蒸餾水至濕潤即可，土壤中不要有積水。1天后，打開瓶蓋，繼續(xù)置于2000LUX白光下，光照12小時，黑暗12小時，溫度20-25°C，連續(xù)培養(yǎng)7天，這7天內，每天觀察土壤的濕潤程度，如果土壤表層部分干燥至變白色，就補充蒸餾水至濕潤即可，土壤中不要有積水。
[0008]4)無菌苗移栽與管理
經過上述培養(yǎng)后的無菌苗直接連同培養(yǎng)基和添加的無菌土壤，像移栽普通種子發(fā)芽所得的幼苗一樣，保護根系，移栽到地里，移栽深度為培養(yǎng)基上覆蓋I厘米左右厚的土壤，露出葉片，慢慢澆水至排水溝流水為止，蓋上遮陽度大于70%的遮陽網，遮陽網高度離地0.3-0.4米，15天后可以去掉遮陽網，無菌苗就長成了室外經得起風吹雨打的小苗了，成苗率90%以上。
[0009]本發(fā)明與現(xiàn)有技術相比，具有以下的優(yōu)點和效果:
I)由于不需要清洗培養(yǎng)基，土人參無菌苗的根莖葉不會受到機械損傷;而且，加入培養(yǎng)瓶的細小土壤給無菌苗的生長提供了部分無機鹽，并保持培養(yǎng)基水分，促進新根向土壤中生長，產生根毛，形成較發(fā)達的根系。
[0010]2)瓶內與瓶外有約0.5毫米的縫隙相通，可以使得土人參無菌苗有較多的二氧化碳和氧氣吸收，培養(yǎng)室空間的雜菌進入瓶內的機會較少，同時使得瓶內維持在85%左右的相對濕度，與煉苗前90%以上相比，相對濕度明顯降低，加大了無菌苗的蒸騰作用，促進葉片氣孔產生、新根生長;同時，2000LUX的較強光照，增強嫩莖葉的光合作用，使得植物生長健壯，增強抗逆能力，經過10天，完成無菌苗從相對密閉的培養(yǎng)瓶到與外界少量空氣相通的煉苗過渡階段。
[0011]3)開瓶煉苗7天，保持加入土壤濕潤而無積水，加大了無菌苗和外界的空氣的接觸面積，同時加入的無菌土壤除了保濕、提供無機鹽的作用外，使得原來培養(yǎng)基和外界空氣隔絕，培養(yǎng)基不容易滋生雜菌，不容易長霉菌或其他病菌，無菌苗慢慢變成較老的幼苗，順利完成無菌苗適應較大蒸騰面積的煉苗過渡階段。
[0012]4) 土人參無菌苗連同培養(yǎng)基和添加的無菌土壤一起移栽，保護了根系的完整性；蓋上遮陽度大于70%的遮陽網，遮陽網高度離地0.3-0.4米，保持土壤的濕度和適度的光照；而且，加入的土壤和大量澆水，使得原培養(yǎng)基的糖類、大量元素等充分稀釋，不容易產生根腐病等疾病，順利完成無菌苗適應較大蒸騰面積到完全適應露天栽培土壤的煉苗過渡階段，保證了很高的成苗率。
[0013]5)上述每一個煉苗過渡階段都緊密聯(lián)系，循序漸進，巧妙地應用土壤無機鹽、水分、光照、溫度、濕度、空氣等無菌苗生長的條件，遵循了無菌苗到露天苗生長過程中根毛發(fā)育、根系發(fā)育、氣孔發(fā)育、葉片表皮細胞細胞壁加厚等煉苗發(fā)育規(guī)律。而且減少一道清洗培養(yǎng)基轉入煉苗盤的工序，節(jié)約了時間和人力資源，降低了生產成本，提高煉苗成功的效率(50%提升到90%以上)。
[0014]6)減少一道清洗培養(yǎng)基轉入煉苗盤的工序，避免了清洗培養(yǎng)基時水資源的浪費和培養(yǎng)基作為垃圾的污染。
[0015]7)本發(fā)明同樣適應野百合、長壽花和紫萁等植物無菌苗的煉苗移栽(參見說明書附圖的圖1-圖8)，煉苗成功率也超過90%，而且較小(如0.5-2厘米高的植株)的無菌苗也能煉苗成功，打破了野百合等許多植物無菌苗煉苗移栽過程中無菌苗必須大于一定尺度(如5厘米以上