一種提高人參種子萌發(fā)率的培養(yǎng)基的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于植物組織培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域，特別設(shè)及一種提高人參種子萌發(fā)率的培養(yǎng) 基。
【背景技術(shù)】
[0002] 人參是被子植物口雙子葉植物綱離瓣花亞綱五加科，多年生草本植物，生長(zhǎng)于密 林，多分布于黑龍江、吉林、迂寧和河北北部深山中，含有10多種人參皂武，W及人參快醇、 多種氨基酸和維生素，是名貴的中草藥材。
[0003] 然而人參種子成熟后會(huì)積累大量抑制萌發(fā)的物質(zhì)，阻止人參種子萌發(fā)，使人參種 子進(jìn)入深度休眠，造成人參無(wú)菌播種萌發(fā)率極低，難W滿足市場(chǎng)和科研的需求。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 基于現(xiàn)有技術(shù)存在上述問(wèn)題，本發(fā)明提供一種提高人參種子萌發(fā)率的培養(yǎng)基，W MS培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，并添加2-ip(異戊締基腺嚷嶺）、NAA(糞乙酸）、GA3(赤霉素）、秋葵 果汁提取物、瓊脂粉和白砂糖，利用秋葵果汁提取物中含有一種促進(jìn)型他感物質(zhì) Lepidimoide，可W促進(jìn)人參種子萌發(fā)，具有種子萌發(fā)率高、萌發(fā)時(shí)間短的優(yōu)點(diǎn)。
[0005] -種提高人參種子萌發(fā)率的培養(yǎng)基，其WMS培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，并添加2-ip(異 戊締基腺嚷嶺）、NAA(糞乙酸）、GA3(赤霉素）、秋葵果汁提取物、瓊脂粉和白砂糖。
[0006] 2-19(異戊締基腺嚷嶺）的濃度為1-4111旨/1、酷4(糞乙酸）的濃度為0.1-0.4 111邑/1、 6八3(赤霉素)的濃度為0.05-0.2 111曰/1、秋葵果汁提取物的濃度為20-100曰/1，瓊脂粉的濃度 為8-12g/L、白砂糖的濃度為25-35g/L。
[0007] 2-ip(異戊締基腺嚷嶺）的濃度為1.5-2.5mg/L、NAA(糞乙酸）的濃度為0.2-0.3 mg/L、GA3(赤霉素）的濃度為0.08-0.12 mg/L、秋葵果汁提取物的濃度為30-80g/L，瓊脂粉 的濃度為9-lOg/L、白砂糖的濃度為28-32g/L。
[000引快速誘導(dǎo)人參愈傷組織培養(yǎng)基的pH值為5.8-6.8。
[0009] 秋葵果汁提取物中含有一種促進(jìn)型他感物質(zhì)Lepidimoide,可W促進(jìn)人參種子萌 發(fā)。
[0010] -種上述提高人參種子萌發(fā)率的培養(yǎng)基使用的秋葵果汁提取物的制作方法，其包 括W下步驟： 步驟Sio，取秋葵果實(shí)，用自來(lái)水沖洗干凈，對(duì)秋葵果實(shí)進(jìn)行表面消毒，并放于無(wú)菌環(huán)境 下； 步驟S20,將消毒完畢的秋葵果實(shí)使用2000rpm/60s的速度棒成果汁，向果汁中加入冰 水并溫和攬拌12小時(shí)； 步驟S30，向步驟S20所得的半成品加入等體積的甲醇，攬拌，過(guò)濾，收集沉淀，并于50°C 真空環(huán)境中干燥兩日，獲得棟色凝塊即為秋葵果汁提取物。
[0011] 所述的秋葵果實(shí)為沒成熟的秋葵果實(shí)。
[0012]步驟SlO的表面消毒包括步驟Sll，使用75%酒精浸泡30s，用蒸饋水沖洗4次;還包 括步驟Sl 2，使用0.1%的升隸溶液浸泡5分鐘，用蒸饋水沖洗4次。
[0013]步驟S30過(guò)濾是在化g/cm2的壓力下進(jìn)行過(guò)濾。
[0014] 本發(fā)明的有益效果是:在培養(yǎng)基中添加了秋葵果汁提取物，秋葵果汁提取物中含 有大量的促進(jìn)型他感物質(zhì)L邱idimoide，L邱idimoide可W促進(jìn)人參種子萌發(fā)，提高人參無(wú) 菌播種的萌發(fā)率，縮短萌發(fā)時(shí)間。
【具體實(shí)施方式】
[0015] 下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步描述。
[0016] 實(shí)施例一:制備秋葵果汁提取物。
[0017] 取化g秋葵果實(shí)，用自來(lái)水沖洗干凈，使用75%酒精浸泡30s，用蒸饋水沖洗4次，再 使用0.1%的升隸溶液浸泡5分鐘，用蒸饋水沖洗4次，并放于超凈工作臺(tái)中。
[0018] 將上述消毒完畢的秋葵果實(shí)使用2000rpm/60s的速度棒成果汁，向果汁中加入IOL 冰水溫和攬拌12小時(shí)。
[0019] 向上述所得的半成品中加入等體積的甲醇，攬拌，在3kg/cm2的壓力下進(jìn)行過(guò)濾， 收集沉淀，并于50°C真空環(huán)境中干燥兩日，獲得50g棟色凝塊即為秋葵果汁提取物。
[0020] 實(shí)施例二:配制提高人參種子萌發(fā)率的培養(yǎng)基。
[0021] 根據(jù)表1所示的MS培養(yǎng)基配方W及表2所示的提高人參種子萌發(fā)率的培養(yǎng)基配方， 制備本發(fā)明所述的提高人參種子萌發(fā)率的培養(yǎng)基。
[0022] 用天平分別稱取MS培養(yǎng)基中的各成分W及2-1口、魁4、643、瓊脂粉和白砂糖，置于 S角瓶中，加入適量純化水，攬拌溶解，定容至1000血，并調(diào)節(jié)抑值至6.3。將S角瓶封口，置 于高壓滅菌鍋中，于12rc滅菌21min，然后于超凈工作臺(tái)中，待培養(yǎng)基溫度下降至60°C左右 加入實(shí)施例一制作好的秋葵果汁提取物，攬拌均勻，分裝至組織培養(yǎng)瓶中，自然冷卻，待其 凝固后將組織培養(yǎng)瓶封口，備用。
[0023] 表1 MS培養(yǎng)基的成分及其用量。
[0024] 表2提高人參種子萌發(fā)率的培養(yǎng)基的成分及其用量。
[0025] 實(shí)施例本發(fā)明所述的提高人參種子萌發(fā)率的培養(yǎng)基的測(cè)試。
[00%]按實(shí)施例二所述的方法配制提高人參種子萌發(fā)率的培養(yǎng)基，備用。
[0027]取顆粒飽滿的成熟人參種子，使用10°C的冷水對(duì)人參種子進(jìn)行浸泡20小時(shí)，取出 種子，并于超凈工作臺(tái)中將種子用質(zhì)量濃度為75%的酒精浸泡30秒，用無(wú)菌水沖洗4次，再用 質(zhì)量濃度為0.12%的升隸溶液消毒6分鐘，再用無(wú)菌水沖洗4次。
[0028]將消毒完畢的人參種子接種到上述配制好的提高人參種子萌發(fā)率的培養(yǎng)基中，并 放入人工氣候箱中培養(yǎng)，培養(yǎng)條件為光暗周期為Hh光照/1化黑暗、光照強(qiáng)度為2000-23001UX的條件下培養(yǎng)，培養(yǎng)到第15天時(shí)開始有第一顆種子萌發(fā)，培養(yǎng)22天后，超過(guò)90%的人 參種子萌發(fā)，誘導(dǎo)成無(wú)菌苗，種子萌發(fā)率高達(dá)93%，比常規(guī)誘導(dǎo)方法的萌發(fā)率高，常規(guī)誘導(dǎo)方 法平均萌發(fā)時(shí)間在25天W后，使用本發(fā)明提供的提高人參種子萌發(fā)率的培養(yǎng)基可W縮短誘 導(dǎo)時(shí)間。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種提高人參種子萌發(fā)率的培養(yǎng)基，其特征在于，其以MS培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，并添 加2-ip(異戊烯基腺嘌呤）、NAA(萘乙酸）、GA3(赤霉素）、秋葵果汁提取物、瓊脂粉和白砂糖。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種提高人參種子萌發(fā)率的培養(yǎng)基，其特征在于，2-ip(異戊 烯基腺嘌呤）的濃度為1 _4mg/L、NAA(萘乙酸）的濃度為0.1 -0.4 mg/L、GA3(赤霉素）的濃度 為0.05-0.2 11^/1、秋葵果汁提取物的濃度為20-10(^/1，瓊脂粉的濃度為8-128/1、白砂糖 的濃度為25-35g/L。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種提高人參種子萌發(fā)率的培養(yǎng)基，其特征在于，2-ip(異戊 烯基腺嘌呤）的濃度為1.5-2.5mg/L、NAA(萘乙酸）的濃度為0.2-0.3 mg/L、GA3(赤霉素）的 濃度為〇.〇8-〇.12 11^/1、秋葵果汁提取物的濃度為3〇-8(^/1，瓊脂粉的濃度為9-1(^/1、白 砂糖的濃度為28-32g/L。4. 根據(jù)權(quán)利要求1至3其中之一所述的一種提高人參種子萌發(fā)率的培養(yǎng)基，其特征在 于，所述的提高人參種子萌發(fā)率的培養(yǎng)基的pH值為5.8-6.8。5. 根據(jù)權(quán)利要求1至3其中之一所述的一種提高人參種子萌發(fā)率的培養(yǎng)基，其特征在 于，所述的秋葵果汁提取物中含有一種促進(jìn)型他感物質(zhì)Lepidimoide，可以促進(jìn)人參種子萌 發(fā)。6. -種上述提高人參種子萌發(fā)率的培養(yǎng)基使用的秋葵果汁提取物的制作方法，其特征 在于，其包括以下步驟： 步驟S10，取秋葵果實(shí)，用自來(lái)水沖洗干凈，對(duì)秋葵果實(shí)進(jìn)行表面消毒，并放于無(wú)菌環(huán)境 下； 步驟S20,將消毒完畢的秋葵果實(shí)使用2000rpm/60s的速度榨成果汁，向果汁中加入冰 水并溫和攪拌12小時(shí)； 步驟S30,向步驟S20所得的半成品加入等體積的甲醇，攪拌，過(guò)濾，收集沉淀，并于50°C 真空環(huán)境中干燥兩日，獲得棕色凝塊即為秋葵果汁提取物。7. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種上述提高人參種子萌發(fā)率的培養(yǎng)基使用的秋葵果汁提取 物的制作方法，其特征在于，所述的秋葵果實(shí)為沒成熟的秋葵果實(shí)。8. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種上述提高人參種子萌發(fā)率的培養(yǎng)基使用的秋葵果汁提取 物的制作方法，其特征在于，步驟S10的表面消毒包括步驟S11，使用75%酒精浸泡30s，用蒸 餾水沖洗4次;還包括步驟S12，使用0.1%的升萊溶液浸泡5分鐘，用蒸餾水沖洗4次。9. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種上述提高人參種子萌發(fā)率的培養(yǎng)基使用的秋葵果汁提取 物的制作方法，其特征在于，步驟S30過(guò)濾是在3kg/cm 2的壓力下進(jìn)行過(guò)濾。
【專利摘要】本發(fā)明提供一種提高人參種子萌發(fā)率的培養(yǎng)基，屬于植物組織培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域，其以MS培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，并添加2-ip（異戊烯基腺嘌呤）、NAA（萘乙酸）、GA3（赤霉素）、秋葵果汁提取物、瓊脂粉和白砂糖，利用秋葵果汁提取物中含有一種促進(jìn)型他感物質(zhì)Lepidimoide，可以促進(jìn)人參種子萌發(fā)，具有種子萌發(fā)率高、萌發(fā)時(shí)間短的優(yōu)點(diǎn)。
【IPC分類】A01G31/00
【公開號(hào)】CN105660330
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201610033521
【發(fā)明人】何志鏗
【申請(qǐng)人】黃慶輝
【公開日】2016年6月15日
【申請(qǐng)日】2016年1月19日