一種高效配子/胚胎玻璃化冷凍解凍方法
【技術領域】
[0001 ]本發(fā)明涉及一種高效配子/胚胎玻璃化冷凍解凍方法。
【背景技術】
[0002]現(xiàn)有方法使用的玻璃化冷凍載桿是由高分子材料制成的前端平整的冷凍葉片，在使用的過程中是將卵母細胞或者胚胎放在葉片上進行冷凍保存，同時也便于以后需要的時候進行解凍復蘇，但是該載體裝置是在正常的視力的監(jiān)視下完成的，將帶有卵母細胞或者胚胎的葉片用液氮進行快速冷凍，并在其外面套上塑料管，然后再次投入到冷凍液中進行保存。
[0003]應用上述載體裝置時存在的問題是:由于液氮溫度-196度，需要將存放胚胎的葉片裝在較長的手柄上，由于葉片較軟，必須在葉片外面加入套管，這樣就造成載桿橫截面較大且較長，胚胎冷凍載桿長達21厘米左右。
[0004]—個冷凍支架僅可以存放7根載桿。每個載桿只能存放1-2個胚胎或者卵母細胞，如果一個病人胚胎或者卵母細胞冷凍載桿數(shù)目大于7根，則這個支架只能放置一個病人的卵母細胞或者胚胎，存放效率極低，無法充分利用液氮罐的存儲空間。由于液氮為-196度，在液氮罐中也會隨時產(chǎn)生損耗，每2天都需要重新將液氮罐注滿。這樣就造成液氮罐和液氮的極大浪費。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明要解決的技術問題是:提供一種能夠提高冷凍效率、避免造成胚胎或配子丟失的高效配子/胚胎玻璃化冷凍解凍方法，采用該方法能夠大大節(jié)約用于購買液氮罐和液氮的花費，解決了上述現(xiàn)有技術存在的問題。
[0006]解決上述技術問題的技術方案是:一種高效配子/胚胎玻璃化冷凍解凍方法，該方法使用的冷凍裝置包括冷凍載體和用于裝載配子或胚胎的勺狀體，所述的冷凍載體上開有多個通孔，勺狀體放置在載體的通孔中并通過固定組件固定，勺狀體的數(shù)量與載體通孔的數(shù)量相同；
該方法包括以下步驟:
A、在顯微鏡下，先將經(jīng)過冷凍保護的配子或胚胎裝入勺狀體的底部，然后迅速投入液氮中；
B、在顯微鏡下，在液氮環(huán)境中，將勺狀體置入冷凍載體的通孔中并通過固定組件固定；
C、把冷凍載體放入支架后放入液氮罐即完成冷凍過程；
D、解凍時將冷凍載體從液氮罐中拿出后再從支架中取出，將勺狀體從冷凍載體上取出，放入解凍液中取出胚胎或配子即可。
[0007]所述的勺狀體上還連接有手柄。
[0008]所述的固定組件是位于載體通孔附近的固定桿，所述的勺狀體的手柄底端面開有與固定桿配合的凹槽，勺狀體放置在載體的通孔中，勺狀體的手柄的凹槽套緊在固定桿上。
[0009]所述固定組件包括設置在通孔邊緣的齒I和設置在勺狀體底面的齒Π，勺狀體放置在載體的通孔中，勺狀體底面的齒π位于通孔邊緣的齒I內(nèi)并配合卡緊。
[0010]所述的勺狀體內(nèi)表面設置有防脫層。
[0011]所述的通孔的數(shù)量為3?10個。
[0012]所述的通孔旁的載體上設置有相應的數(shù)字標號。
[0013]所述的冷凍載體的一端設置有用于標記胚胎或配子信息的標記段。
[0014]由于采用上述方法，本發(fā)明具有以下有益效果:
1、現(xiàn)有方法使用的載體一個支架一般可以存放一至兩個人的胚胎或配子、卵母細胞，即7根載體，效率較低。改進后方法采用的冷凍裝置，一個冷凍載體有7個孔，如果一個人凍存胚胎或配子、卵母細胞不超過7孔，即可以存放一個人所有的胚胎或配子、卵母細胞。若一個支架放置5個冷凍載體，則效率提高了 5倍。
[0015]2、本發(fā)明不僅提高了冷凍的效率，還將大大節(jié)約用于購買液氮罐和液氮的花費。
[0016]3、本發(fā)明采用的冷凍裝置的勺狀體與現(xiàn)有的葉片完全不同，葉片太薄會在液氮中晃動，碰到后會造成胚胎或卵母細胞丟失。而勺狀體較硬且厚實，不會造成胚胎或配子、卵母細胞丟失的現(xiàn)象。
[0017]4、本發(fā)明冷凍過程中，在顯微鏡下將胚胎或者卵母細胞轉(zhuǎn)入冷凍載體，整個過程均可以在顯微鏡下看到，在液氮中冷凍后直接裝到冷凍載體上，避免造成胚胎或配子、卵母細胞地丟失。
[0018]下面，結(jié)合附圖和實施例對本發(fā)明之一種高效配子/胚胎玻璃化冷凍解凍方法的技術特征作進一步的說明。
【附圖說明】
[0019]圖1:本發(fā)明實施例1使用的冷凍裝置結(jié)構(gòu)示意圖。
[0020]圖2:本發(fā)明實施例1使用的冷凍裝置的冷凍載體結(jié)構(gòu)示意圖。
[0021]圖3:圖1的A部放大圖。
[0022]圖4:本發(fā)明實施例1使用的冷凍裝置的勺狀體結(jié)構(gòu)示意圖。
[0023]圖5:本發(fā)明實施例2使用的冷凍裝置的冷凍載體結(jié)構(gòu)示意圖。
[0024]圖6:本發(fā)明實施例2使用的冷凍裝置的冷凍載體尾端放大圖。
[0025]圖7:本發(fā)明實施例2使用的冷凍裝置的勺狀體結(jié)構(gòu)示意圖。
[0026]圖中:1-冷凍載體，11-通孔，111-齒I，12-標記段，2_勺狀體，21-手柄，22-齒Π，3_數(shù)字標號，4-固定桿。
【具體實施方式】
[0027]實施例1:一種高效配子/胚胎玻璃化冷凍解凍方法，該方法使用的冷凍裝置(如圖1-圖4所示)包括冷凍載體I和用于裝載配子或胚胎的勺狀體2，所述的勺狀體內(nèi)表面設置有一防脫層，所述的冷凍載體上開有7個通孔11，所述的通孔旁的載體上設置有相應的數(shù)字標號3。勺狀體放置在載體的通孔中并通過固定組件固定，勺狀體的數(shù)量與載體通孔的數(shù)量相同。所述的勺狀體上還連接有手柄21。所述的固定組件是位于載體通孔11附近的固定桿4，所述的勺狀體的手柄底端面開有與固定桿配合的凹槽，勺狀體放置在載體的通孔中，勺狀體的手柄21的凹槽套緊在固定桿4上；
該方法包括以下步驟:
A、在顯微鏡下，先將經(jīng)過冷凍保護的配子或胚胎裝入勺狀體2的底部，然后迅速投入液氮中；
B、在顯微鏡下，在液氮環(huán)境中，用鑷子或其他輔助工具將勺狀體2置入冷凍載體的通孔11中并通過固定組件固定，由于液氮冷凍后，胚胎或配子會粘掛在勺狀體上，因此勺狀體內(nèi)的胚胎不會丟失；
C、把冷凍載體I放入支架后放入液氮罐即完成冷凍過程；
D、解凍時將冷凍載體I從液氮罐中拿出后再從支架中取出，將勺狀體2從冷凍載體上取出，放入解凍液中取出胚胎或配子即可。
[0028]實施例2:—種高效配子/胚胎玻璃化冷凍解凍方法，該方法使用的冷凍裝置(如圖5-圖7所示)包括冷凍載體I和用于裝載配子或胚胎的勺狀體2，所述的勺狀體內(nèi)表面設置有一防脫層，所述的冷凍載體上開有7個通孔11，勺狀體放置在載體的通孔中并通過固定組件固定，勺狀體的數(shù)量與載體通孔的數(shù)量相同。所述固定組件包括設置在通孔邊緣的齒Illl和設置在勺狀體底面的齒Π 22，勺狀體放置在載體的通孔中，勺狀體底面的齒Π位于通孔邊緣的齒I內(nèi)并配合卡緊。本實施例的具體操作步驟與實施例1相同。
[0029]本發(fā)明各實施例中使用的冷凍裝置，將冷凍載體設計為扁長的長方體，寬為5毫米，厚為2毫米，長為25cm，前端5cm作為標記胚胎或配子相關信息的標記段12(用于標識病人姓名、冷凍日期等)，該標記段面積較大，可以標記更多的相關信息，提高記錄的準確性，降低錯誤率。在標記段后3cm每隔I厘米有一個直徑為3毫米的通孔。在孔的旁邊標有1、2、3、
4、5、6、7號。用于記錄卵母細胞或者胚胎的號數(shù)。方便解凍找到該號的胚胎或者卵母細胞。設計通孔是為了固定載有卵母細胞或者胚胎的勺狀體。
[0030]作為本發(fā)明各實施例的一種變換，所述的通孔的數(shù)量可以根據(jù)實際需要確定，一般為3?10個。
[0031]本發(fā)明各實施例中設置防脫層是為了增加胚胎或者配子與勺狀體之間的摩擦力，使胚胎或者配子更容易粘掛在勺狀體上。作為一種變換，若經(jīng)液氮冷凍后，胚胎或配子能夠順利粘掛在勺狀體上，也可以不設置防脫層。
[0032]作為本發(fā)明各實施例的一種變換，步驟C中，可在冷凍載體I外面套上塑料管，再放入支架中。
【主權項】
1.一種高效配子/胚胎玻璃化冷凍解凍方法，其特征在于:該方法使用的冷凍裝置包括冷凍載體(I)和用于裝載配子或胚胎的勺狀體(2)，所述的冷凍載體上開有多個通孔(11)，勺狀體放置在載體的通孔中并通過固定組件固定，勺狀體的數(shù)量與載體通孔的數(shù)量相同； 該方法包括以下步驟: A、在顯微鏡下，先將經(jīng)過冷凍保護的配子或胚胎裝入勺狀體(2)的底部，然后迅速投入液氮中； B、在顯微鏡下，在液氮環(huán)境中，將勺狀體(2)置入冷凍載體的通孔(11)中并通過固定組件固定； C、把冷凍載體(I)放入支架后放入液氮罐即完成冷凍過程； D、解凍時將冷凍載體(I)從液氮罐中拿出后再從支架中取出，將勺狀體(2)從冷凍載體上取出，放入解凍液中取出胚胎或配子即可。2.根據(jù)權利要求1所述的一種高效配子/胚胎玻璃化冷凍解凍方法，其特征在于:所述的勺狀體上還連接有手柄(21)。3.根據(jù)權利要求2所述的一種高效配子/胚胎玻璃化冷凍解凍方法，其特征在于:所述的固定組件是位于載體通孔(11)附近的固定桿(4)，所述的勺狀體的手柄底端面開有與固定桿配合的凹槽，勺狀體放置在載體的通孔中，勺狀體的手柄(21)的凹槽套緊在固定桿(4 )上。4.根據(jù)權利要求1所述的一種高效配子/胚胎玻璃化冷凍解凍方法，其特征在于:所述固定組件包括設置在通孔邊緣的齒I (111)和設置在勺狀體底面的齒Π (22)，勺狀體放置在載體的通孔中，勺狀體底面的齒Π位于通孔邊緣的齒I內(nèi)并配合卡緊。5.根據(jù)權利要求1-4任一項所述的一種高效配子/胚胎玻璃化冷凍解凍方法，其特征在于:所述的勺狀體內(nèi)表面設置有防脫層。6.根據(jù)權利要求1-4任一項所述的一種高效配子/胚胎玻璃化冷凍解凍方法，其特征在于:所述的通孔的數(shù)量為3?10個。7.根據(jù)權利要求1-4任一項所述的一種高效配子/胚胎玻璃化冷凍解凍方法，其特征在于:所述的通孔旁的載體上設置有相應的數(shù)字標號(3)。8.根據(jù)權利要求1-4任一項所述的一種高效配子/胚胎玻璃化冷凍解凍方法，其特征在于:所述的冷凍載體(I)的一端設置有用于標記胚胎或配子信息的標記段(12)。
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種高效配子/胚胎玻璃化冷凍解凍方法，該方法使用的冷凍裝置包括冷凍載體和用于裝載配子或胚胎的勺狀體，冷凍載體上開有多個通孔，勺狀體放置在載體的通孔中并通過固定組件固定，勺狀體的數(shù)量與載體通孔的數(shù)量相同；該方法包括以下步驟：A、在顯微鏡下，將經(jīng)過冷凍保護的配子或胚胎裝入勺狀體的底部，然后迅速投入液氮中；B、在顯微鏡下，在液氮環(huán)境中，將勺狀體置入冷凍載體的通孔中并通過固定組件固定；C、把冷凍載體放入支架后放入液氮罐；D、解凍步驟。本發(fā)明不僅能夠提高冷凍效率，還大大節(jié)約用于購買液氮罐和液氮的花費。另外本發(fā)明勺狀體厚實，且冷凍操作在顯微鏡下進行，不會造成胚胎或配子、卵母細胞丟失的現(xiàn)象。
【IPC分類】A01N1/02
【公開號】CN105660605
【申請?zhí)枴緾N201610133311
【發(fā)明人】李楠, 李忻琳, 韋立紅, 唐永梅, 牟聯(lián)俊, 王丹, 馮晶, 羅婷
【申請人】柳州市婦幼保健院
【公開日】2016年6月15日
【申請日】2016年3月9日