一種白芨的培育方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種白芨的培育方法，包括：將白芨鱗莖接種于培養(yǎng)基中進(jìn)行培育，所述培養(yǎng)基包括MS培養(yǎng)基、蔗糖、瓊脂和DA?6。本發(fā)明在MS培養(yǎng)基中添加蔗糖和DA?6用于培育白芨鱗莖，能夠明顯提高白芨苗的成活率、成苗率、苗高、莖粗、葉片數(shù)、葉片質(zhì)地、根數(shù)、根長(zhǎng)、根質(zhì)地、鱗莖重量、鱗莖直徑、鱗莖質(zhì)地、全株重量等性能參數(shù)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā)明提供的培育方法能夠提高白芨苗的成活率、成苗率、苗高、莖粗、葉片數(shù)、葉片質(zhì)地、根數(shù)、根長(zhǎng)、根質(zhì)地、鱗莖重量、鱗莖直徑、鱗莖質(zhì)地、全株重量等，而且以60g/L的蔗糖結(jié)合8mg/L DA?6為培育白芨試管苗的最佳濃度，生產(chǎn)中可利用該濃度對(duì)白芨試管苗進(jìn)行壯苗的培育。
【專利說明】
_種白甚的培育方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明屬于植物種植技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種白芨的培育方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 白發(fā)(Bletill a striata(Thunb. )Reichb.f ·]又名甘根、連及草、紫蘭，為蘭科白 芨屬多年生草本植物。因其根為白色，且多個(gè)連在一起，所以名白芨。白芨花朵一般較大，顏 色鮮艷，白、藍(lán)、黃、粉和紫紅等顏色，可作為觀賞植物做盆栽、插花。其中紫花三叉白芨鱗莖 呈三叉狀，花朵為紫色，故又名紫花三叉白芨。白芨花期一般在4~5月，果莢在7~8月，果莢 成熟收獲期一般在11月底。白芨在世界上從亞洲的緬甸北部經(jīng)我國(guó)至日本都有分布。白芨 喜溫暖濕潤(rùn)的氣候，常生長(zhǎng)于較濕潤(rùn)的苔蘚層、溪邊石壁或林下濕地中，白芨稍耐寒喜陰 涼，耐陰性強(qiáng)，栽培土用排水良好的砂質(zhì)壤土最好。白芨在我國(guó)的分布地區(qū)年降雨量在 IlOOmm以上，年平均氣溫18~20°C，最低日平均氣溫8~10°C，空氣的相對(duì)濕度為70%~ 80%。白芨還有極高的藥用價(jià)值，早在《神農(nóng)本草經(jīng)》中有記載 [6]。近年研究表示，白芨含有 聯(lián)汴類、二氫菲類、聯(lián)菲類和其它含菲化合物等化學(xué)成分，目前已知聯(lián)菲類主要是白芨聯(lián)菲 A、B、C和白芨聯(lián)菲醇六3、(：[7~8]。白芨具有止血、胃黏膜保護(hù)作用；可抗菌、抗癌抗腫瘤；以及 對(duì)于皮膚創(chuàng)傷早期愈合有重要作用。在臨床上可治療:體內(nèi)外出血癥、燒傷、燙傷、腫瘤。還 可以誘導(dǎo)免疫調(diào)節(jié)因子的表達(dá)、增強(qiáng)天然殺傷性細(xì)胞的活性、促進(jìn)網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的吞噬功 能等。白芨也可用于制備可溶性面膜。研究表明，白芨多糖是一種黏性多糖，成膜性良好，可 以在皮膚表面形成一層均勻薄膜，可以減少皮膚水分蒸發(fā)，使角質(zhì)層進(jìn)一步水化進(jìn)而保存 皮膚水分。
[0003] 白芨的傳統(tǒng)繁殖方式有種子繁殖和分株繁殖，實(shí)際生產(chǎn)主要以分株繁殖為主。白 芨種子非常細(xì)小，在自然狀態(tài)下需要必要的共生真菌存在才能成苗。白芨的分株繁殖一般 在春季或秋冬季進(jìn)行，即地上新葉萌發(fā)之前或老葉枯萎之后，通常將帶頂葉的假鱗莖分成3 ~5份進(jìn)行分植。利用老株假鱗莖繁殖的植株生長(zhǎng)周期較長(zhǎng)，一般需要2~4年。組織培養(yǎng)技 術(shù)可以使白芨及其他蘭科植物快速繁殖、縮短植株生長(zhǎng)周期，也有利于種質(zhì)保存和培育新 品種，從而使育苗工作規(guī)模商品化。近年來(lái)，由于白芨經(jīng)濟(jì)價(jià)值的增長(zhǎng)，野生白芨受到嚴(yán)重 的私挖濫采，發(fā)展白芨組培技術(shù)很有必要。目前國(guó)內(nèi)對(duì)白芨組織培養(yǎng)的研究已有一定的進(jìn) 展，采用的外植體多為種子。例如葉靜等建立了采用種子進(jìn)行無(wú)菌播種的白芨快繁體系，并 成功獲得無(wú)菌苗。但是，該方法培育的白芨苗各項(xiàng)性能參數(shù)并不理想。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 有鑒于此，本發(fā)明的目的在于提供一種白芨的培育方法，本發(fā)明提供的方法培育 能夠提高白芨苗的成活率、苗高、莖粗、葉片數(shù)、葉片質(zhì)地、根數(shù)、根長(zhǎng)、根質(zhì)地、鱗莖重量、鱗 莖質(zhì)量、全株重等性能參數(shù)。
[0005] 本發(fā)明提供了 一種白芨的培育方法，包括：
[0006] 將白芨鱗莖接種于培養(yǎng)基中進(jìn)行培育，所述培養(yǎng)基包括MS培養(yǎng)基、蔗糖、瓊脂和 DA-6 ο
[0007] 本發(fā)明在MS培養(yǎng)基中添加蔗糖和DA-6用于白芨的培育，能夠提高白芨苗的成活 率、苗高、莖粗、葉片數(shù)、葉片質(zhì)地、根數(shù)、根長(zhǎng)、根質(zhì)地、鱗莖重量、鱗莖質(zhì)量、全株重等參數(shù)。
[0008] 本發(fā)明提供的培養(yǎng)基包括MS培養(yǎng)基，本發(fā)明對(duì)所述MS培養(yǎng)基沒有特殊限制，本領(lǐng) 域技術(shù)人員熟知的、市場(chǎng)上購(gòu)買的MS培養(yǎng)基即可。
[0009] 本發(fā)明提供的培養(yǎng)基包括瓊脂，所述瓊脂的濃度優(yōu)選為4g/L~5g/L，更優(yōu)選為 4.8g/L〇
[0010] 本發(fā)明提供的培養(yǎng)基包括蔗糖，所述蔗糖的濃度優(yōu)選為30g/L~90g/L，最優(yōu)選為 60g/L〇
[0011] 本發(fā)明提供的培養(yǎng)基包括DA-6,所述DA-6的濃度優(yōu)選為4~12mg/L，更優(yōu)選為4mg/ L、8mg/L 和 12mg/L，最優(yōu)選為 8mg/L。
[0012] 在一個(gè)實(shí)施例中，所述培養(yǎng)基中，所述蔗糖的濃度為60g/L，DA-6濃度為8mg/L。
[0013] 在本發(fā)明中，所述培養(yǎng)基的pH值為5.6~5.8。
[0014]本發(fā)明將白芨鱗莖接種于上述培養(yǎng)基中進(jìn)行培育，所述培育的溫度優(yōu)選為20°C~ 25°C，更優(yōu)選為23°C ;所述培育的光照強(qiáng)度優(yōu)選為1500Lx~2500Lx，更優(yōu)選為2000Lx;所述 培育的光照時(shí)數(shù)優(yōu)選為I Oh~20h，更優(yōu)選為16h。
[0015] 在本發(fā)明中，所述白芨鱗莖優(yōu)選為白芨試管苗的鱗莖，所述白芨試管苗優(yōu)選為紫 花三叉白芨試管苗。
[0016] 在培養(yǎng)基中對(duì)白芨鱗莖進(jìn)行培育，出苗后按照需要更換培養(yǎng)基，然后將獲得的小 苗移栽至培養(yǎng)土苗盤里在大棚中煉苗，再置于林地土壤中自然生長(zhǎng)，待三年成熟后即可收 獲。
[0017] 本發(fā)明提供了一種白芨的培育方法，包括:將白芨鱗莖接種于培養(yǎng)基中進(jìn)行培育， 所述培養(yǎng)基包括MS培養(yǎng)基、蔗糖、瓊脂和DA-6。本發(fā)明在MS培養(yǎng)基中添加蔗糖和DA-6用于培 育白芨鱗莖，能夠明顯提高白芨苗的成活率、成苗率、苗高、莖粗、葉片數(shù)、葉片質(zhì)地、根數(shù)、 根長(zhǎng)、根質(zhì)地、鱗莖重量、鱗莖直徑、鱗莖質(zhì)地、全株重量等性能參數(shù)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā)明 提供的培育方法能夠提高白芨苗的成活率、成苗率、苗高、莖粗、葉片數(shù)、葉片質(zhì)地、根數(shù)、根 長(zhǎng)、根質(zhì)地、鱗莖重量、鱗莖直徑、鱗莖質(zhì)地、全株重量等，而且以60 g//L的蔗糖濃度和8mg/L 的DA-6為培育白芨試管苗的最佳濃度，生產(chǎn)中可利用該濃度對(duì)白芨試管苗進(jìn)行壯苗的培 育。
【附圖說明】
[0018] 圖1為本發(fā)明實(shí)施例提供的白芨鱗莖培養(yǎng)30天的生長(zhǎng)情況；
[0019] 圖2為本發(fā)明實(shí)施例提供的白芨鱗莖培養(yǎng)60天的生長(zhǎng)情況。
【具體實(shí)施方式】
[0020] 下面將對(duì)本發(fā)明實(shí)施例中的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實(shí)施 例僅僅是本發(fā)明一部分實(shí)施例，而不是全部的實(shí)施例?；诒景l(fā)明中的實(shí)施例，本領(lǐng)域普通 技術(shù)人員在沒有做出創(chuàng)造性勞動(dòng)前提下所獲得的所有其他實(shí)施例，都屬于本發(fā)明保護(hù)的范 圍。
[0021] 1.材料與方法
[0022] 1.1實(shí)驗(yàn)材料
[0023]實(shí)驗(yàn)材料為紫花三叉白芨試管苗，由四川農(nóng)業(yè)大學(xué)植物生理系組織培養(yǎng)室提供。 [0024] 1.2實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
[0025]本實(shí)驗(yàn)以MS作為基本培養(yǎng)基，附加不同濃度蔗糖(30g/L、60g/L、90g/L)，和不同濃 度的04-6(411^/1、811^/1、1211^/1)配比，共12個(gè)處理組，以不加04-6為對(duì)照（配比濃度見表 1)，瓊脂濃度為4.8g/L，pH為5.6~5.8，分別接入紫花三叉白芨試管苗。
[0026] 1.3實(shí)驗(yàn)方法
[0027] 將苗齡一致的白芨試管苗剪去地上部分，將大小一致的鱗莖接入不同濃度蔗糖的 培養(yǎng)基，每瓶接種2個(gè)白芨鱗莖，每個(gè)蔗糖濃度共接種30個(gè)，以10個(gè)鱗莖為一個(gè)重復(fù)，設(shè)3次 重復(fù)，共接種150個(gè)白芨鱗莖。接種完的培養(yǎng)基放在培養(yǎng)室在溫度為（23 ±2) °C，光照強(qiáng)度 2000LX，光照時(shí)數(shù)16h/d條件下進(jìn)行觀察培養(yǎng)，記錄試管苗生長(zhǎng)情況并統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)。測(cè)量指標(biāo)： 接種株數(shù)、成活率、苗高、莖粗、葉片數(shù)、葉片質(zhì)地、根數(shù)、根長(zhǎng)、根質(zhì)地、鱗莖重量、鱗莖質(zhì)量、 鱗莖質(zhì)地、全株重。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均采用平均數(shù)，培養(yǎng)60d后統(tǒng)計(jì)。
[0028]實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均采用用t檢驗(yàn)進(jìn)行平均數(shù)差異顯著性比較。其中百分?jǐn)?shù)進(jìn)行反正弦轉(zhuǎn) 換后再進(jìn)行檢驗(yàn)。
[0029] 2.實(shí)驗(yàn)結(jié)果及分析
[0030] 2.1不同蔗糖和DA-6濃度對(duì)白芨鱗莖生長(zhǎng)的影響
[0031 ]表1不同蔗糖和DA-6濃度對(duì)白芨鱗莖生長(zhǎng)情況的統(tǒng)計(jì)分析
[0033](注：顯著水平a = 0.05,下同。）
[0034]結(jié)果分析可知，培養(yǎng)基中添加 60g/L鹿糖與8mg/L DA-6效果最佳。
[0035] 由表1可知，在12種不同蔗糖和DA-6濃度配比下培養(yǎng)，試管苗的成活率和成苗率有 所不同，但均較高。在蔗糖濃度為60g/L和DA-68g/L濃度配比下白芨鱗莖的誘導(dǎo)成活個(gè)數(shù)最 多，誘導(dǎo)率為100.〇〇%;成苗率也最高，為90%。
[0036] 2.2蔗糖和DA-6濃度對(duì)白芨組培苗地上部生長(zhǎng)影響
[0037]表2蔗糖和DA-6濃度對(duì)白芨組培苗地上部生長(zhǎng)情況的統(tǒng)計(jì)分析
[0040]由表2可以看出，12種蔗糖和DA-6不同濃度對(duì)白芨試管苗地上部分生長(zhǎng)情況影響 不同，但均較好。苗高在蔗糖濃度為60g/L和8mg/LDA-6時(shí)最高，為2.45cm，葉片數(shù)也最多，為 3.11片，葉片較寬大且平展，顏色呈綠色各實(shí)驗(yàn)組苗高均低于此組合?？捎纱丝芍?，以蔗糖 濃度為60g/L和DA-6 8mg/L為培養(yǎng)白芨組培苗的最佳濃度。
[0041] 2.3不同蔗糖和DA-6不同濃度配比對(duì)白芨組培苗全株重量的影響
[0042] 表3白芨試管苗全株生長(zhǎng)情況的統(tǒng)計(jì)分析
[0044] 從表3可以看出，白芨試管苗全株重量在不同蔗糖和DT-6濃度的影響下數(shù)值變化 較大。全株重量在蔗糖濃度為60g/L和DT-6濃度8m g//L配比時(shí)出現(xiàn)最大值，為412.73mg，其他 處理組合均低于此處理值。
[0045] 參見圖1和圖2,圖1為本發(fā)明實(shí)施例提供的白芨鱗莖培養(yǎng)30天的生長(zhǎng)情況，其中左 側(cè)培養(yǎng)瓶中為白芨鱗莖在蔗糖30g/L的培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)情況，右側(cè)培養(yǎng)瓶為白芨鱗莖在蔗 糖30g/L和DA-68mg/L的培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)情況。圖2為本發(fā)明實(shí)施例提供的白芨鱗莖培養(yǎng)60 天的生長(zhǎng)情況，其中左側(cè)培養(yǎng)瓶中為白芨鱗莖在蔗糖30g/L的培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)情況，右側(cè)培 養(yǎng)瓶為白芨鱗莖在蔗糖30g/L和DA-68mg/L的培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)情況。
[0046] 實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析表明：由各項(xiàng)測(cè)定指標(biāo)所示，本發(fā)明提供的培育方法能夠提高白芨 苗的成活率、成苗率、苗高、莖粗、葉片數(shù)、葉片質(zhì)地、根數(shù)、根長(zhǎng)、根質(zhì)地、鱗莖重量、鱗莖直 徑、鱗莖質(zhì)地、全株重量等，而且以60 g//L的蔗糖濃度配比8mg/L DA-6為培育白芨試管苗的 最佳濃度組合，生產(chǎn)中可利用該濃度對(duì)白芨試管苗進(jìn)行壯苗的培育。
[0047] 以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式，應(yīng)當(dāng)指出，對(duì)于本技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人 員來(lái)說，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可以做出若干改進(jìn)和潤(rùn)飾，這些改進(jìn)和潤(rùn)飾也應(yīng) 視為本發(fā)明的保護(hù)范圍。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種白芨的培育方法，包括： 將白芨鱗莖接種于培養(yǎng)基中進(jìn)行培育，所述培養(yǎng)基包括MS培養(yǎng)基、蔗糖、瓊脂和DA-6。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的培育方法，其特征在于，所述蔗糖的濃度為30g/L~90g/L，DA-6濃度為4~12mg/L。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的培育方法，其特征在于，所述蔗糖的濃度為60g/L，DA-6濃度為 8mg/L〇4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的培育方法，其特征在于，所述瓊脂的濃度為4g/L~5g/L。5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的培育方法，其特征在于，所述培養(yǎng)基的pH值為5.6~5.8。6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的培育方法，其特征在于，所述培育的溫度為20°C~25°C。7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的培育方法，其特征在于，所述培育的光照強(qiáng)度為1500Lx~ 2500Lx〇8. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的培育方法，其特征在于，所述培育的光照時(shí)數(shù)為IOh~20h。
【文檔編號(hào)】A01H4/00GK105941160SQ201610436529
【公開日】2016年9月21日
【申請(qǐng)日】2016年6月17日
【發(fā)明人】田孟良, 劉帆, 楊華, 倪蘇, 鄭順林, 黃雪麗, 趙曉敏
【申請(qǐng)人】四川農(nóng)業(yè)大學(xué)