利用蘭花根菌栽培公石松的方法
【專利摘要】本發(fā)明提供利用蘭花根菌栽培公石松的方法，將蘭花菌根用自來(lái)水清洗干凈，用75%的酒精進(jìn)行表面消毒，在超凈工作臺(tái)上切取瘤狀組織，移入真菌平板培養(yǎng)基待菌絲長(zhǎng)出，提取菌絲移入相同平板培養(yǎng)基進(jìn)行提純培養(yǎng)；在25?30℃培養(yǎng)7?8天菌絲長(zhǎng)滿平板培養(yǎng)基，切割平板上菌絲塊接種到混合菌培養(yǎng)菌袋；在24?28℃條件下培養(yǎng)35?40天待菌絲長(zhǎng)透菌袋；將菌絲長(zhǎng)透菌袋與種植過(guò)蘭花的基料混合，作為公石松栽培基質(zhì)；再將公石松組織培養(yǎng)苗接種到基質(zhì)中進(jìn)行培養(yǎng)。本發(fā)明以野生公石松經(jīng)過(guò)組織培養(yǎng)的苗，采用種植過(guò)蘭花基料加入人工培養(yǎng)的內(nèi)生真菌混合基質(zhì)栽培公石松，能明顯的促進(jìn)植株增高增重和提高產(chǎn)品質(zhì)量，從而更好地開(kāi)發(fā)利用公石松的藥用價(jià)值。
【專利說(shuō)明】
利用蘭花根菌栽培公石松的方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明屬于植物栽培領(lǐng)域，具體涉及一種利用蘭花根菌栽培公石松的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]公石松:蘭科植物血葉蘭Ludisia discolor ( Ker-Gawl.) A.Rich.，是閩南民間頗具地方特色的一味草藥。具有清熱涼血、生津降火、利水通絡(luò)、止咳等功效，可用于治療高燒不退、咽喉腫痛、無(wú)名腫痛、脾胃病和炎癥等?！吨腥A本草》記載其功效潤(rùn)肺、健脾、安神，主治肺結(jié)核咳血、神經(jīng)衰弱、食欲不振”。公石松對(duì)生長(zhǎng)環(huán)境要求較苛刻，常常生長(zhǎng)在陰濕的巖石縫中，生長(zhǎng)地多為較豐富的內(nèi)生真菌。其生長(zhǎng)過(guò)程需要與真菌形成共生關(guān)系。
[0003]人工栽培情況根據(jù)部分經(jīng)銷商對(duì)公石松鮮活植株進(jìn)行人工試種栽培的調(diào)查情況，因公石松對(duì)生長(zhǎng)環(huán)境要求較苛刻，沒(méi)有較權(quán)威的成熟技術(shù)可以參考，很少有人進(jìn)行栽培試種研究人工種植技術(shù).市面銷售的公石松一般是通過(guò)進(jìn)貨鮮活植株，以沙培、水培、土培三種形式進(jìn)行短期栽培.沙培以其透氣性好、礦質(zhì)營(yíng)養(yǎng)充分、積水少不會(huì)爛根等優(yōu)點(diǎn)而為多數(shù)人使用，但普遍技術(shù)含量低，生物產(chǎn)量增長(zhǎng)不明顯.且沙培并不是用來(lái)規(guī)模化育苗，而主要是用來(lái)適當(dāng)延長(zhǎng)新鮮植株生命周期，根據(jù)銷量安排鮮活植株的供貨，以保證能長(zhǎng)期不問(wèn)斷供貨.在生產(chǎn)實(shí)踐中，目前還沒(méi)有對(duì)其運(yùn)用扦插、組織培養(yǎng)等無(wú)性繁殖技術(shù)進(jìn)行規(guī)模化育苗的先例。
[0004]由于公石松自然繁殖力差，我們采用組培技術(shù)快繁種苗，因組培苗處于無(wú)菌狀態(tài)下生長(zhǎng)，在移植栽培時(shí)不能很好地利用自身根部來(lái)吸收土壤中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，生長(zhǎng)緩慢，利用種植過(guò)蘭花基料(其基料比較適合內(nèi)生真菌繁殖)加入人工培養(yǎng)的內(nèi)生真菌混合基質(zhì)栽培公石松，真菌侵入公石松根部后可形成一個(gè)共生的菌根系統(tǒng)，為公石松的生長(zhǎng)發(fā)育提供相關(guān)的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，本發(fā)明以野生公石松經(jīng)過(guò)組織培養(yǎng)的苗，采用種植過(guò)蘭花基料加入人工培養(yǎng)的內(nèi)生真菌混合基質(zhì)栽培公石松，能明顯的促進(jìn)植株增高增重和提高產(chǎn)品質(zhì)量，從而更好地開(kāi)發(fā)利用公石松的藥用價(jià)值。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的在于提供一種利用蘭花根菌栽培公石松的方法，本發(fā)明以野生公石松經(jīng)過(guò)組織培養(yǎng)的苗，采用種植過(guò)蘭花基料加入人工培養(yǎng)的內(nèi)生真菌混合基質(zhì)栽培公石松，能明顯的促進(jìn)植株增高增重和提高產(chǎn)品質(zhì)量，從而更好地開(kāi)發(fā)利用公石松的藥用價(jià)值。
[0006]為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案:
利用蘭花根菌栽培公石松的方法，包括如下步驟:
(I)共生菌分離培養(yǎng);蘭花菌根用自來(lái)水清洗干凈，用體積分?jǐn)?shù)為75%的酒精進(jìn)行表面消毒，在超凈工作臺(tái)上切取瘤狀組織，移入真菌平板培養(yǎng)基待菌絲長(zhǎng)出，提取菌絲移入相同平板培養(yǎng)基進(jìn)行提純培養(yǎng);在25-30 °C培養(yǎng)7-8天菌絲長(zhǎng)滿平板培養(yǎng)基，切割平板上菌絲塊接種到混合菌培養(yǎng)菌袋;在24-28Γ條件下培養(yǎng)35-40天待菌絲長(zhǎng)透菌袋;將菌絲長(zhǎng)透菌袋與種植過(guò)蘭花的基料混合，作為公石松栽培基質(zhì)； (2)公石松種植栽培；當(dāng)公石松組織培養(yǎng)苗長(zhǎng)自3-3.5cm從培養(yǎng)瓶取出，用自來(lái)水把根部培養(yǎng)基沖洗干凈;在公石松栽培基質(zhì)上面鋪一層Icm黃土壤，把洗凈的公石松組織培養(yǎng)苗種植在基質(zhì)上，澆透水放在沒(méi)有陽(yáng)光直射的地方，保持85%濕度;經(jīng)過(guò)50-60天栽培，根部明顯看到根瘤狀菌根。
[0007]所述的混合菌培養(yǎng)菌袋成分為:木肩87-88%、玉米粉2-3%、石灰粉0.5-1%、麥皮麩7_8%、蔗糖0.5-1%。步驟(I)中菌絲長(zhǎng)透菌袋與種植過(guò)蘭花的基料混合的重量比例為1:30。
[0008]所述的真菌平板培養(yǎng)基成分為:蛋白胨5.0g/L、牛肉膏3.0g/L、瓊脂20.0g/L。
[0009]本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于:
本發(fā)明以野生公石松經(jīng)過(guò)組織培養(yǎng)的苗，采用種植過(guò)蘭花基料(目前大規(guī)模種植文心蘭主要采用小石頭和樹(shù)皮混合基質(zhì)(圖5)，種植過(guò)程需要定期更換基料)加入人工培養(yǎng)的內(nèi)生真菌混合基質(zhì)栽培公石松。這樣本發(fā)明能夠充分利用廢物種植公石松，大大降低種植成本。有效地快繁和規(guī)模栽培公石松，從而更好地開(kāi)發(fā)利用公石松的藥用價(jià)值。
[0010]該發(fā)明實(shí)現(xiàn)了無(wú)菌條件下的種苗快繁和高效栽培，成活率達(dá)到90%以上，種植120天單株重比普通基質(zhì)提高30%左右。克服普通基質(zhì)容易爛根現(xiàn)象，從而解決了公石松自然繁殖力差所導(dǎo)致的自然界野生資源匱乏的問(wèn)題。讓這具有悠久應(yīng)用歷史、藥效確切的中草藥更好地開(kāi)發(fā)利用，填補(bǔ)了無(wú)性繁殖技術(shù)和高效栽培的技術(shù)研究。為公石松人工栽培開(kāi)辟一條全新模式。
【附圖說(shuō)明】
[0011]圖1內(nèi)生真菌菌絲。
[0012]圖2公石松菌根切片可見(jiàn)內(nèi)生真菌。
[0013]圖3公石松菌根。
[0014]圖4混合基料栽培的公石松。
[0015]圖5小石頭和樹(shù)皮混合基質(zhì)種植的文心蘭。
[0016]圖6上面鋪一層黃土壤下層混合基質(zhì)。
【具體實(shí)施方式】
[0017]實(shí)施例1
利用蘭花根菌栽培公石松的方法，包括如下步驟:
(1)共生菌分離培養(yǎng);蘭花菌根用自來(lái)水清洗干凈，用體積分?jǐn)?shù)為75%的酒精進(jìn)行表面消毒，在超凈工作臺(tái)上切取瘤狀組織，移入真菌平板培養(yǎng)基待菌絲長(zhǎng)出，提取菌絲移入相同平板培養(yǎng)基進(jìn)行提純培養(yǎng);在25 °C培養(yǎng)7天菌絲長(zhǎng)滿平板培養(yǎng)基，切割平板上菌絲塊接種到混合菌培養(yǎng)菌袋;在24°C條件下培養(yǎng)35天待菌絲長(zhǎng)透菌袋;將菌絲長(zhǎng)透菌袋與種植過(guò)蘭花的基料混合(1:30),作為公石松栽培基質(zhì)；
(2)公石松種植栽培；當(dāng)公石松組織培養(yǎng)苗長(zhǎng)自3cm從培養(yǎng)瓶取出，用自來(lái)水把根部培養(yǎng)基沖洗干凈;在公石松栽培基質(zhì)上面鋪一層Icm黃土壤，把洗凈的公石松組織培養(yǎng)苗種植在基質(zhì)上，澆透水放在沒(méi)有陽(yáng)光直射的地方，保持85%濕度;經(jīng)過(guò)50天栽培，根部明顯看到根瘤狀菌根。
[0018]所述的混合菌培養(yǎng)菌袋成分為:木肩87%、玉米粉3%、石灰粉1%、麥皮麩8%、蔗糖1%。步驟(I)中菌絲長(zhǎng)透菌袋與種植過(guò)蘭花的基料混合的重量比例為1:30。
[0019]所述的真菌平板培養(yǎng)基成分為:蛋白胨5.0g/L、牛肉膏3.0g/L、瓊脂20.0g/L。
[0020]該發(fā)明實(shí)現(xiàn)了無(wú)菌條件下的種苗快繁和高效栽培，成活率達(dá)到96%，種植120天單株重比普通基質(zhì)提高35%。
[0021]實(shí)施例2
利用蘭花根菌栽培公石松的方法，包括如下步驟:
(1)共生菌分離培養(yǎng);蘭花菌根用自來(lái)水清洗干凈，用體積分?jǐn)?shù)為75%的酒精進(jìn)行表面消毒，在超凈工作臺(tái)上切取瘤狀組織，移入真菌平板培養(yǎng)基待菌絲長(zhǎng)出，提取菌絲移入相同平板培養(yǎng)基進(jìn)行提純培養(yǎng);在30 °C培養(yǎng)8天菌絲長(zhǎng)滿平板培養(yǎng)基，切割平板上菌絲塊接種到混合菌培養(yǎng)菌袋;在28°C條件下培養(yǎng)40天待菌絲長(zhǎng)透菌袋;將菌絲長(zhǎng)透菌袋與種植過(guò)蘭花的基料混合(1:30),作為公石松栽培基質(zhì)；
(2)公石松種植栽培；當(dāng)公石松組織培養(yǎng)苗長(zhǎng)自3.5cm從培養(yǎng)瓶取出，用自來(lái)水把根部培養(yǎng)基沖洗干凈;在公石松栽培基質(zhì)上面鋪一層Icm黃土壤，把洗凈的公石松組織培養(yǎng)苗種植在基質(zhì)上，澆透水放在沒(méi)有陽(yáng)光直射的地方，保持85%濕度;經(jīng)過(guò)60天栽培，根部明顯看到根瘤狀菌根。
[0022]所述的混合菌培養(yǎng)菌袋成分為:木肩88%、玉米粉2%、石灰粉0.5%、麥皮麩7%、蔗糖
0.5%。步驟(I)中菌絲長(zhǎng)透菌袋與種植過(guò)蘭花的基料混合的重量比例為I:30。
[0023]所述的真菌平板培養(yǎng)基成分為:蛋白胨5.0g/L、牛肉膏3.0g/L、瓊脂20.0g/L。
[0024]該發(fā)明實(shí)現(xiàn)了無(wú)菌條件下的種苗快繁和高效栽培，成活率達(dá)到96%，種植120天單株重比普通基質(zhì)提高35%。
[0025]實(shí)施例3
利用蘭花根菌栽培公石松的方法，包括如下步驟:
(1)共生菌分離培養(yǎng);蘭花菌根用自來(lái)水清洗干凈，用體積分?jǐn)?shù)為75%的酒精進(jìn)行表面消毒，在超凈工作臺(tái)上切取瘤狀組織，移入真菌平板培養(yǎng)基待菌絲長(zhǎng)出，提取菌絲移入相同平板培養(yǎng)基進(jìn)行提純培養(yǎng);在28 °C培養(yǎng)8天菌絲長(zhǎng)滿平板培養(yǎng)基，切割平板上菌絲塊接種到混合菌培養(yǎng)菌袋;在25°C條件下培養(yǎng)38天待菌絲長(zhǎng)透菌袋;將菌絲長(zhǎng)透菌袋與種植過(guò)蘭花的基料混合(1:30),作為公石松栽培基質(zhì)；
(2)公石松種植栽培；當(dāng)公石松組織培養(yǎng)苗長(zhǎng)自3.5cm從培養(yǎng)瓶取出，用自來(lái)水把根部培養(yǎng)基沖洗干凈;在公石松栽培基質(zhì)上面鋪一層Icm黃土壤，把洗凈的公石松組織培養(yǎng)苗種植在基質(zhì)上，澆透水放在沒(méi)有陽(yáng)光直射的地方，保持85%濕度;經(jīng)過(guò)55天栽培，根部明顯看到根瘤狀菌根。
[0026]所述的混合菌培養(yǎng)菌袋成分為:木肩87%、玉米粉3%、石灰粉1%、麥皮麩8%、蔗糖1%。步驟(I)中菌絲長(zhǎng)透菌袋與種植過(guò)蘭花的基料混合的重量比例為1:30。
[0027]所述的真菌平板培養(yǎng)基成分為:蛋白胨5.0g/L、牛肉膏3.0g/L、瓊脂20.0g/L。
[0028]該發(fā)明實(shí)現(xiàn)了無(wú)菌條件下的種苗快繁和高效栽培，成活率達(dá)到96%，種植120天單株重比普通基質(zhì)提高35%。
[0029]以上所述僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例，凡依本發(fā)明申請(qǐng)專利范圍所做的均等變化與修飾，皆應(yīng)屬本發(fā)明的涵蓋范圍。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.利用蘭花根菌栽培公石松的方法，其特征在于:所述方法包括如下步驟: (1)共生菌分離培養(yǎng);蘭花菌根用自來(lái)水清洗干凈，用體積分?jǐn)?shù)為75%的酒精進(jìn)行表面消毒，在超凈工作臺(tái)上切取瘤狀組織，移入真菌平板培養(yǎng)基待菌絲長(zhǎng)出，提取菌絲移入相同平板培養(yǎng)基進(jìn)行提純培養(yǎng);在25-30 °C培養(yǎng)7-8天菌絲長(zhǎng)滿平板培養(yǎng)基，切割平板上菌絲塊接種到混合菌培養(yǎng)菌袋;在24-28Γ條件下培養(yǎng)35-40天待菌絲長(zhǎng)透菌袋;將菌絲長(zhǎng)透菌袋與種植過(guò)蘭花的基料混合，作為公石松栽培基質(zhì)； (2)公石松種植栽培；當(dāng)公石松組織培養(yǎng)苗長(zhǎng)自3-3.5cm從培養(yǎng)瓶取出，用自來(lái)水把根部培養(yǎng)基沖洗干凈;在公石松栽培基質(zhì)上面鋪一層Icm黃土壤，把洗凈的公石松組織培養(yǎng)苗種植在基質(zhì)上，澆透水放在沒(méi)有陽(yáng)光直射的地方，保持85%濕度;經(jīng)過(guò)50-60天栽培，根部明顯看到根瘤狀菌根。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用蘭花根菌栽培公石松的方法，其特征在于:所述的混合菌培養(yǎng)菌袋成分為:木肩87-88%、玉米粉2-3%、石灰粉0.5-1%、麥皮麩7-8%、蔗糖0.5-1%。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用蘭花根菌栽培公石松的方法，其特征在于:步驟(I)中菌絲長(zhǎng)透菌袋與種植過(guò)蘭花的基料混合的重量比例為1:30。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用蘭花根菌栽培公石松的方法，其特征在于:所述的真菌平板培養(yǎng)基成分為:蛋白胨5.0g/L、牛肉膏3.0g/L、瓊脂20.0g/L。
【文檔編號(hào)】A01G1/00GK105961010SQ201610400150
【公開(kāi)日】2016年9月28日
【申請(qǐng)日】2016年6月8日
【發(fā)明人】林成輝, 吳祖建, 潘賢, 廖琳琳
【申請(qǐng)人】福建農(nóng)林大學(xué)