一種壇紫菜純系種苗培育方法
【專利摘要】一種壇紫菜純系種苗培育方法，涉及壇紫菜。將單株壇紫菜葉狀體表面清洗后陰干，冷凍保存后取出，再靜水弱光復(fù)蘇培養(yǎng)；取營養(yǎng)組織塊放置于葡萄糖溶液中浸泡，將營養(yǎng)組織塊剪成小塊，再放置于海螺酶溶液中酶解，觀察細胞解離狀況，當(dāng)觀察到藻體碎片游離出單細胞或多細胞團時，過濾細胞液，濾液離心后棄上清液保留沉淀，洗滌后重復(fù)離心；將收集到的細胞放入消毒海水中黑暗培養(yǎng)后，在1/2MES培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)，直至培養(yǎng)液恢復(fù)正常海水鹽度后繼續(xù)培養(yǎng)20～30d后，將絲狀體吸出，即為純系種質(zhì)絲狀體，再靜水培養(yǎng)，進行保種，然后經(jīng)一級擴增、二級擴增和三級擴增后得純系自由絲狀體；將純系自由絲狀體移植到貝殼進行種苗培育。
【專利說明】
_種壇紫菜純系種苗培育方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明涉及壇紫菜，尤其是涉及一種壇紫菜純系種苗培育方法。
【背景技術(shù)】
[0002]壇紫菜(Pyropia haitanensis)是我國紫菜人工栽培的兩個主要種類之一，原產(chǎn)于我國福建沿海，是我國特有的暖溫帶性種類。自上世紀(jì)60年代全人工栽培取得成功以來，壇紫菜的栽培面積不斷擴大，目前已成為我國南方沿海海水養(yǎng)殖的主要對象之一，其產(chǎn)量占全國紫菜總產(chǎn)量的75%以上。
[0003]壇紫菜的生活史可以分為形態(tài)結(jié)構(gòu)完全不同的兩個世代:葉狀體世代和絲狀體世代。葉狀體世代是海上人工栽培和收獲的對象，而絲狀體則是室內(nèi)人工育苗的對象，可以作為種質(zhì)材料長期保存。在傳統(tǒng)的壇紫菜育苗生產(chǎn)中，一般采用從野生或人工栽培的壇紫菜成熟葉狀體中選取種藻，從這些種藻上采集果孢子進行種苗的培育。采用這種方法培育的種苗，由于葉狀體來源不一致，是個大雜系，種源遺傳背景復(fù)雜，導(dǎo)致培育的種苗良莠不齊，無法實現(xiàn)純種化生產(chǎn)，保證種苗的質(zhì)量(黃春愷，嚴(yán)志洪.壇紫菜苗種室內(nèi)培育技術(shù)[J].水產(chǎn)科技情報，2004,31(5): 200-202.)。
[0004]細胞工程技術(shù)的發(fā)展為壇紫菜培育純系種質(zhì)絲狀體，實現(xiàn)純種化育苗提供了條件。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的在于提供一種壇紫菜純系種苗培育方法。
[0006]本發(fā)明包括以下步驟:
[0007]I)將單株壇紫菜葉狀體表面清洗后陰干，冷凍保存，將冷凍后的單株壇紫菜葉狀體取出，再次清洗后靜水弱光復(fù)蘇培養(yǎng)；
[0008]2)取單株壇紫菜葉狀體的營養(yǎng)組織塊，放置于葡萄糖溶液中浸泡，然后將單株壇紫菜葉狀體的營養(yǎng)組織塊剪成小塊，再放置于海螺酶溶液中酶解，酶解期間觀察細胞解離狀況，當(dāng)在顯微鏡下觀察到藻體碎片游離出單細胞或多細胞團時，過濾細胞液，濾液離心后棄上清液保留沉淀，洗滌后重復(fù)離心；
[0009]3)將收集到的細胞放入消毒海水中黑暗培養(yǎng)后，在1/2MES培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)，直至培養(yǎng)液恢復(fù)正常海水鹽度后繼續(xù)培養(yǎng)20?30d后，將絲狀體吸出，即為純系種質(zhì)絲狀體，再靜水培養(yǎng)，進行保種；
[0010]4)將步驟3)靜水培養(yǎng)后的純系種質(zhì)絲狀體經(jīng)一級擴增、二級擴增和三級擴增后得到純系自由絲狀體；
[0011]5)將步驟4)得到的純系自由絲狀體移植到貝殼進行種苗培育。
[0012]在步驟I)中，所述清洗可采用毛筆清洗;所述冷凍的溫度可為_18°C;所述再次清洗可采用消毒海水清洗;所述培養(yǎng)的條件可為:溫度20 土 I °C，光照lOOOLx，12L: 12D，時間24h0
[0013]在步驟2)中，所述取單株壇紫菜葉狀體的營養(yǎng)組織塊可采用消毒過的剪刀剪取
0.5?Icm2單株壇紫菜葉狀體的營養(yǎng)組織塊;所述葡萄糖溶液的摩爾濃度可為2mol/L;浸泡的時間可為1min;所述將單株壇紫菜葉狀體的營養(yǎng)組織塊剪成小塊可采用剪刀剪成小塊；所述酶解的酶液配方可為:0.12g海螺酶+1.27g甘露醇+2.2mg無水CaCl2+2.4mgMgS04+10ml鹽度為37的消毒海水，pH 6.0?6.2;酶解的條件可為:黑暗振蕩，溫度為27°C，酶解時間為I?2h;所述酶解期間觀察細胞解離狀況可每隔30min觀察細胞解離狀況;所述過濾可采用300目篩絹過濾;所述離心可在1500r/min下離心3min;所述洗滌可用鹽度37的消毒海水洗滌;所述重復(fù)離心的次數(shù)可為2次。
[0014]在步驟3)中，所述消毒海水可采用鹽度為37的消毒海水;所述黑暗培養(yǎng)的時間可為12h;所述在1/2MES培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)可每隔12h更換1/2MES培養(yǎng)液，連續(xù)更換3?4次，直至培養(yǎng)液恢復(fù)正常海水鹽度;所述繼續(xù)培養(yǎng)的條件可為:光照1000?2000Lx，12L: 12D;溫度20± 1°C ;所述繼續(xù)培養(yǎng)20?30d時，可每7d更換一次培養(yǎng)液;所述靜水培養(yǎng)可將純系種質(zhì)絲狀體放置于125ml廣口瓶中靜水培養(yǎng)。
[0015]在步驟4)中，所述一級擴增的具體方法可為:將步驟3)靜水培養(yǎng)后的純系種質(zhì)絲狀體用消毒后的組織粉碎機切碎至100?500μπι，然后置于500ml的錐形瓶中黑暗靜置培養(yǎng)Id，第2d更換200?300ml培養(yǎng)液后恢復(fù)正常光照靜置培養(yǎng)，培養(yǎng)濃度為每10ml培養(yǎng)液約含Ig濕重自由絲狀體，培養(yǎng)期間每15d更換300?400ml培養(yǎng)液;培養(yǎng)液為MES培養(yǎng)液，使用兩層沙濾海水配制，培養(yǎng)液使用前需高溫消毒(90?95°C )，培養(yǎng)條件:溫度(21 ± I) °C、光強1000?2000Lx，光周期 12L:12D;
[0016]所述二級擴增的具體方法可為:將經(jīng)過一級擴增的純系絲狀體用高溫消毒的組織粉碎機切碎至100?500μπι，然后置于2000ml的錐形瓶中黑暗靜置培養(yǎng)ld，第2d更換1200?1500ml培養(yǎng)液后恢復(fù)正常光照靜置培養(yǎng)，3?5d后加入充氣管進行充氣培養(yǎng)，空氣需要經(jīng)過3道過濾處理，使進入瓶內(nèi)的空氣無污染，培養(yǎng)濃度為每10ml培養(yǎng)液含2?3g濕重自由絲狀體，如絲狀體密度超過3g/100ml培養(yǎng)液時，及時分瓶培養(yǎng)，培養(yǎng)期間每1d更換1200?1500ml培養(yǎng)液;培養(yǎng)液為MES培養(yǎng)液，使用兩層沙濾海水配制，培養(yǎng)液使用前需高溫消毒(90?95 °C)，培養(yǎng)條件:溫度(21 ± I) °C、光強1000?2000Lx，光周期12L: 12D;
[0017]所述三級擴增的具體方法可為:二級擴增的純系絲狀體用高溫消毒的組織粉碎機切碎至100?500μπι，然后置于5000ml的錐形瓶中黑暗靜置培養(yǎng)ld，第2d更換3000?4000ml培養(yǎng)液后恢復(fù)正常光照靜置培養(yǎng)，3?5d后加入充氣管進行充氣培養(yǎng)?？諝庑枰?jīng)過3道過濾處理，使進入瓶內(nèi)的空氣無污染。培養(yǎng)濃度約每10ml培養(yǎng)液含4?5g濕重自由絲狀體，如絲狀體密度超過5g/100ml培養(yǎng)液時，及時分瓶培養(yǎng)，培養(yǎng)期間每1d更換3000-4000ml培養(yǎng)液。培養(yǎng)液為MES培養(yǎng)液，使用兩層沙濾海水配制，培養(yǎng)液使用前需高溫消毒(90?95°C )，培養(yǎng)條件:溫度(21 ± I) °C、光強1000?2000Lx，光周期12L: 12D。
[0018]在步驟5)中，所述培育的培養(yǎng)基質(zhì)可采用傳統(tǒng)紫菜育苗使用的貝殼;培育的設(shè)施可采用傳統(tǒng)紫菜育苗使用的育苗設(shè)施；
[0019]所述移植的具體方法可為:
[0020](I)純系自由絲狀體移植前處理:接種前1d用組織粉碎機將自由絲狀體藻團切碎至2000?3000μπι，然后靜置于玻璃瓶中黑暗培養(yǎng)ld，第2d更換3/4培養(yǎng)液，正常光照靜置培養(yǎng)3?5d后加入充氣管進行充氣培養(yǎng)，絲狀體采苗前Id再用組織粉碎機將其切碎到200?500μπι備用；
[0021](2)純系自由絲狀體移植密度:平面采苗絲狀體用量按照300?500段/cm2計算，立體采苗按照60?100段/cm3計算；
[0022](3)純系自由絲狀體移植:移植用的絲狀體計數(shù)后用海水稀釋至約0.1億段/L，用噴壺分4?5遍均勻潑灑至放置好貝殼的池中，再用竹竿攪拌池內(nèi)的海水，使池中的絲狀體片段均勻分布，然后在池子表面蓋上黑布，3d后移走黑布，靜置培養(yǎng)18?25d后即可按常規(guī)育苗方法進行正常管理，直至貝殼絲狀體發(fā)育成熟用于秋季殼孢子采苗。
[0023]采用本發(fā)明可以選擇已知優(yōu)良性狀的單株葉狀體，取微小組織切塊后用一定濃度的海螺酶酶解成單細胞，然后挑選單細胞在控制的條件下進行單細胞克隆培養(yǎng)直接萌發(fā)成絲狀體，然后經(jīng)過絲狀體的逐級擴繁獲得足夠量的絲狀體后，即可取代果孢子移植到貝殼上，進行純系種苗的培育。采用該方法培育的種苗均來自于單株性狀優(yōu)良的葉狀體，培育的種苗性狀均一，質(zhì)量好，有利于推廣純種化生產(chǎn)，避免栽培種質(zhì)退化，保證壇紫菜栽培產(chǎn)量。
【具體實施方式】
[0024]下面結(jié)合具體實施例，進一步闡述本發(fā)明。
[0025]1、在自然海區(qū)選擇壇紫菜“閩豐I號”葉狀體I株，葉狀體表面用毛筆清洗干凈后進行陰干和冷凍保存(_18°C);將冷凍后的藻體取出，再次用消毒海水清洗后靜水弱光復(fù)蘇24h (培養(yǎng)條件為:溫度20 土 I °C，光照 I OOOLx，12L: 12D)。
[0026]2、用消毒過的剪刀剪取0.5?Icm2種藻的營養(yǎng)組織塊，置于2mol/L的葡萄糖溶液中浸泡1min，然后用剪刀將種藻塊剪成小塊，放置于海螺酶溶液中酶解(酶液配方:0.12g海螺酶+1.27g甘露醇+2.2mg無水CaCl2+2.4mgMgS04+10ml鹽度為37的消毒海水，pH 6.0?6.2)，酶解條件:黑暗振蕩，溫度為27°C，酶解時間為I?2h;酶解期間每隔30min觀察細胞解離狀況，當(dāng)在顯微鏡下觀察到藻體碎片游離出大量單細胞或多細胞團時，用300目篩絹過濾細胞液，濾液在1500r/min下離心3min，離心后棄上清液保留沉淀，用鹽度37的消毒海水洗滌后再重復(fù)離心2次。
[0027]3、將收集到的細胞放入鹽度為37的消毒海水中黑暗培養(yǎng)，每隔12h更換1/2MES培養(yǎng)液(配方:)，連續(xù)更換3?4次，直至培養(yǎng)液恢復(fù)正常海水鹽度。接著，繼續(xù)置于正常培養(yǎng)條件(光照1000?2000Lx，12L:12D;溫度20±1°C)培養(yǎng)，每7d更換一次培養(yǎng)液。培養(yǎng)20?30d后，將培養(yǎng)皿中的絲狀體吸出，即獲得壇紫菜“閩豐I號”的純系種質(zhì)絲狀體，將其放置于125ml廣口瓶中靜水培養(yǎng)，進行保種。
[0028]4、獲得的“閩豐I號”純系絲狀體經(jīng)一級擴增、二級擴增和三級擴增:
[0029]一級擴增:將純系絲狀體用高溫消毒后的組織粉碎機切碎至100?500μπι，然后置于500ml的錐形瓶中黑暗靜置培養(yǎng)ld，第2d更換200?300ml培養(yǎng)液后恢復(fù)正常光照靜置培養(yǎng)。培養(yǎng)濃度為每10ml培養(yǎng)液約含Ig濕重自由絲狀體，培養(yǎng)期間每15d更換300?400ml培養(yǎng)液。
[0030]培養(yǎng)液為MES培養(yǎng)液，使用兩層沙濾海水配制，培養(yǎng)液使用前需高溫消毒(90?950C) ο培養(yǎng)條件:溫度(21 ± I) °C、光強1000?2000Lx，光周期12L: 12D。
[0031]二級擴增:將經(jīng)過一級擴增的純系絲狀體用高溫消毒的組織粉碎機切碎至100-500μπι，然后置于2000ml的錐形瓶中黑暗靜置培養(yǎng)ld，第2d更換1200?1500ml培養(yǎng)液后恢復(fù)正常光照靜置培養(yǎng)，3?5d后加入充氣管進行充氣培養(yǎng)?？諝庑枰?jīng)過3道過濾處理，使進入瓶內(nèi)的空氣無污染。培養(yǎng)濃度為每10ml培養(yǎng)液含2?3g濕重自由絲狀體，如絲狀體密度超過3g/100ml培養(yǎng)液時，及時分瓶培養(yǎng)，培養(yǎng)期間每1d更換1200?1500ml培養(yǎng)液。培養(yǎng)液及培養(yǎng)條件同一級培養(yǎng)。
[0032]三級擴增:二級擴增的純系絲狀體用高溫消毒的組織粉碎機切碎至100?500μπι，然后置于5000ml的錐形瓶中黑暗靜置培養(yǎng)ld，第2d更換3000?4000ml培養(yǎng)液后恢復(fù)正常光照靜置培養(yǎng)，3?5d后加入充氣管進行充氣培養(yǎng)?？諝庑枰?jīng)過3道過濾處理，使進入瓶內(nèi)的空氣無污染。培養(yǎng)濃度約每10ml培養(yǎng)液含4?5g濕重自由絲狀體，如絲狀體密度超過5g/10ml培養(yǎng)液時，及時分瓶培養(yǎng)，培養(yǎng)期間每1d更換3000?4000ml培養(yǎng)液。培養(yǎng)液及培養(yǎng)條件同一級培養(yǎng)。
[0033]5、“閩豐I號”純系自由絲狀體移植貝殼進行種苗生產(chǎn)
[0034](I)培養(yǎng)基質(zhì):與傳統(tǒng)紫菜育苗使用的貝殼相同。
[0035](2)育苗設(shè)施:與傳統(tǒng)紫菜育苗使用的育苗設(shè)施相同。
[0036](3) “閩豐I號”自由絲狀體移植貝殼:
[0037]自由絲狀體移植前處理:接種前1d用組織粉碎機將自由絲狀體藻團切碎至2000?3000μπι，然后靜置于玻璃瓶中黑暗培養(yǎng)Id，第2d更換3/4培養(yǎng)液，正常光照靜置培養(yǎng)3?5d后加入充氣管進行充氣培養(yǎng)。絲狀體采苗前Id再用組織粉碎機將其切碎到200?500μπι備用。
[0038]自由絲狀體移植密度:平面采苗絲狀體用量按照300?500段/cm2計算，立體采苗按照60?100段/cm3計算。
[0039]自由絲狀體移植:移植用的絲狀體計數(shù)后用海水稀釋至約0.1億段/升，用噴壺分4?5遍均勻潑灑至放置好貝殼的池中，再用竹竿攪拌池內(nèi)的海水，使池中的絲狀體片段均勻分布，然后在池子表面蓋上黑布，3d后移走黑布，靜置培養(yǎng)18?25d后即可按常規(guī)育苗方法進行正常管理，直至貝殼絲狀體發(fā)育成熟用于殼孢子采苗。
【主權(quán)項】
1.一種壇紫菜純系種苗培育方法，其特征在于包括以下步驟: 1)將單株壇紫菜葉狀體表面清洗后陰干，冷凍保存，將冷凍后的單株壇紫菜葉狀體取出，再次清洗后靜水弱光復(fù)蘇培養(yǎng)； 2)取單株壇紫菜葉狀體的營養(yǎng)組織塊，放置于葡萄糖溶液中浸泡，然后將單株壇紫菜葉狀體的營養(yǎng)組織塊剪成小塊，再放置于海螺酶溶液中酶解，酶解期間觀察細胞解離狀況，當(dāng)在顯微鏡下觀察到藻體碎片游離出單細胞或多細胞團時，過濾細胞液，濾液離心后棄上清液保留沉淀，洗滌后重復(fù)離心； 3)將收集到的細胞放入消毒海水中黑暗培養(yǎng)后，在I/2MES培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)，直至培養(yǎng)液恢復(fù)正常海水鹽度后繼續(xù)培養(yǎng)20?30d后，將絲狀體吸出，即為純系種質(zhì)絲狀體，再靜水培養(yǎng)，進行保種； 4)將步驟3)靜水培養(yǎng)后的純系種質(zhì)絲狀體經(jīng)一級擴增、二級擴增和三級擴增后得到純系自由絲狀體； 5)將步驟4)得到的純系自由絲狀體移植到貝殼進行種苗培育。2.如權(quán)利要求1所述一種壇紫菜純系種苗培育方法，其特征在于在步驟I)中，所述清洗采用毛筆清洗;所述冷凍的溫度可為_18°C;所述再次清洗可采用消毒海水清洗;所述培養(yǎng)的條件可為:溫度20 土 I °C，光照100Lx，12L: 12D，時間24h。3.如權(quán)利要求1所述一種壇紫菜純系種苗培育方法，其特征在于在步驟2)中，所述取單株壇紫菜葉狀體的營養(yǎng)組織塊采用消毒過的剪刀剪取0.5?Icm2單株壇紫菜葉狀體的營養(yǎng)組織塊;所述葡萄糖溶液的摩爾濃度可為2mol/L;浸泡的時間可為1min;所述將單株壇紫菜葉狀體的營養(yǎng)組織塊剪成小塊可采用剪刀剪成小塊。4.如權(quán)利要求1所述一種壇紫菜純系種苗培育方法，其特征在于在步驟2)中，所述酶解的酶液配方為:0.12g海螺酶+1.27g甘露醇+2.2mg無水CaCl2+2.4mgMgS04+10ml鹽度為37的消毒海水，PH 6.0?6.2;酶解的條件可為:黑暗振蕩，溫度為27°C，酶解時間為I?2h;所述酶解期間觀察細胞解離狀況可每隔30min觀察細胞解離狀況;所述過濾可采用300目篩絹過濾;所述離心可在1500r/min下離心3min;所述洗滌可用鹽度37的消毒海水洗滌;所述重復(fù)離心的次數(shù)可為2次。5.如權(quán)利要求1所述一種壇紫菜純系種苗培育方法，其特征在于在步驟3)中，所述消毒海水采用鹽度為37的消毒海水;所述黑暗培養(yǎng)的時間可為12h;所述在I /2MES培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)可每隔12h更換1/2MES培養(yǎng)液，連續(xù)更換3?4次，直至培養(yǎng)液恢復(fù)正常海水鹽度;所述繼續(xù)培養(yǎng)的條件可為:光照1000?2000Lx，12L: 12D;溫度20 ± TC ;所述繼續(xù)培養(yǎng)20?30d時，可每7d更換一次培養(yǎng)液;所述靜水培養(yǎng)可將純系種質(zhì)絲狀體放置于125ml廣口瓶中靜水培養(yǎng)。6.如權(quán)利要求1所述一種壇紫菜純系種苗培育方法，其特征在于在步驟4)中，所述一級擴增的具體方法為:將步驟3)靜水培養(yǎng)后的純系種質(zhì)絲狀體用消毒后的組織粉碎機切碎至100?500μπι，然后置于500ml的錐形瓶中黑暗靜置培養(yǎng)Id，第2d更換200?300ml培養(yǎng)液后恢復(fù)正常光照靜置培養(yǎng)，培養(yǎng)濃度為每10ml培養(yǎng)液約含Ig濕重自由絲狀體，培養(yǎng)期間每15d更換300?400ml培養(yǎng)液;培養(yǎng)液為MES培養(yǎng)液，使用兩層沙濾海水配制，培養(yǎng)液使用前需90?95 °C消毒，培養(yǎng)條件:溫度21 ± 1°C、光強1000?2000Lx，光周期12L: 12D。7.如權(quán)利要求1所述一種壇紫菜純系種苗培育方法，其特征在于在步驟4)中，所述二級擴增的具體方法為:將經(jīng)過一級擴增的純系絲狀體用高溫消毒的組織粉碎機切碎至100?500μπι，然后置于2000ml的錐形瓶中黑暗靜置培養(yǎng)ld，第2d更換1200?1500ml培養(yǎng)液后恢復(fù)正常光照靜置培養(yǎng)，3?5d后加入充氣管進行充氣培養(yǎng)，空氣需要經(jīng)過3道過濾處理，使進入瓶內(nèi)的空氣無污染，培養(yǎng)濃度為每10ml培養(yǎng)液含2?3g濕重自由絲狀體，如絲狀體密度超過3g/100ml培養(yǎng)液時，及時分瓶培養(yǎng)，培養(yǎng)期間每1d更換1200?1500ml培養(yǎng)液;培養(yǎng)液為MES培養(yǎng)液，使用兩層沙濾海水配制，培養(yǎng)液使用前需90?95 0C消毒，培養(yǎng)條件:溫度21 土 I0C、光強 1000?2000Lx，光周期 12L: 12D。8.如權(quán)利要求1所述一種壇紫菜純系種苗培育方法，其特征在于在步驟4)中，所述三級擴增的具體方法為:二級擴增的純系絲狀體用高溫消毒的組織粉碎機切碎至100?500μπι，然后置于5000ml的錐形瓶中黑暗靜置培養(yǎng)ld，第2d更換3000?4000ml培養(yǎng)液后恢復(fù)正常光照靜置培養(yǎng)，3?5d后加入充氣管進行充氣培養(yǎng)，空氣需要經(jīng)過3道過濾處理，使進入瓶內(nèi)的空氣無污染;培養(yǎng)濃度約每10ml培養(yǎng)液含4?5g濕重自由絲狀體，如絲狀體密度超過5g/10ml培養(yǎng)液時，及時分瓶培養(yǎng)，培養(yǎng)期間每1d更換3000-4000ml培養(yǎng)液;培養(yǎng)液為MES培養(yǎng)液，使用兩層沙濾海水配制，培養(yǎng)液使用前需90?95°C消毒，培養(yǎng)條件:溫度21± TC、光強1000 ?2000Lx，光周期 12L:12D。9.如權(quán)利要求1所述一種壇紫菜純系種苗培育方法，其特征在于在步驟5)中，所述培育的培養(yǎng)基質(zhì)采用傳統(tǒng)紫菜育苗使用的貝殼；培育的設(shè)施采用傳統(tǒng)紫菜育苗使用的育苗設(shè)施。10.如權(quán)利要求1所述一種壇紫菜純系種苗培育方法，其特征在于在步驟5)中，所述移植的具體方法為: (1)純系自由絲狀體移植前處理:接種前1d用組織粉碎機將自由絲狀體藻團切碎至2000?3000μπι，然后靜置于玻璃瓶中黑暗培養(yǎng)Id，第2d更換3/4培養(yǎng)液，正常光照靜置培養(yǎng)3?5d后加入充氣管進行充氣培養(yǎng)，絲狀體采苗前Id再用組織粉碎機將其切碎到200?500μπι備用; (2)純系自由絲狀體移植密度:平面采苗絲狀體用量按照300?500段/cm2計算，立體采苗按照60?100段/cm3計算； (3)純系自由絲狀體移植:移植用的絲狀體計數(shù)后用海水稀釋至約0.1億段/L，用噴壺分4?5遍均勻潑灑至放置好貝殼的池中，再用竹竿攪拌池內(nèi)的海水，使池中的絲狀體片段均勻分布，然后在池子表面蓋上黑布，3d后移走黑布，靜置培養(yǎng)18?25d后即可按常規(guī)育苗方法進行正常管理，直至貝殼絲狀體發(fā)育成熟用于秋季殼孢子采苗。
【文檔編號】A01G33/02GK105993909SQ201610319288
【公開日】2016年10月12日
【申請日】2016年5月13日
【發(fā)明人】謝潮添, 徐燕, 紀(jì)德華, 陳昌生
【申請人】集美大學(xué)