一種羅漢果組織塊莖生根培養(yǎng)技術(shù)的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明提供的一種羅漢果組織塊莖生根培養(yǎng)技術(shù)，包括使用常規(guī)方法制作羅漢果組培苗；組織塊莖扦插在濾紙上，濾紙延伸到液體培養(yǎng)基溶液中；組織塊莖扦插于固體培養(yǎng)基中培養(yǎng)60～80d，即可移栽至土地中。使用該發(fā)明提供的方法處理的羅漢果組織塊莖能夠?qū)崿F(xiàn)快速生根，得到的羅漢果幼苗的根須長(zhǎng)達(dá)5cm以上，其移栽成活率達(dá)到90％以上。
【專利說明】
一種羅漢果組織塊莖生根培養(yǎng)技術(shù)
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明屬于植物組織培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種羅漢果組織塊莖生根培養(yǎng)技術(shù)。
【背景技術(shù)】
[0002]羅漢果(學(xué)名:Siraitiagrosvenorii)是葫蘆科多年生藤本植物。其葉心形，雌雄異株，夏季開花，秋天結(jié)果。中醫(yī)以其果實(shí)入藥，含有羅漢果甜苷、多種氨基酸和維生素等藥用成分，主治肺熱痰火咳嗽、咽喉炎、扁桃體炎、急性胃炎、便秘等。因?yàn)榱_漢果是雌雄異株，又花期不遇，加之花粉粘重且著生于花藥不易被昆蟲觸及的地方，所以很難像普通的風(fēng)媒花或蟲媒花那樣傳粉，因此自然條件下，結(jié)果的機(jī)率極低(目前人工栽培仍然必須人工授粉)。同時(shí)，羅漢果種子實(shí)生苗有70%左右為雄株，且要等到2?3年之后，開花時(shí)才能判定，生產(chǎn)上基本無(wú)實(shí)用價(jià)值。但是，羅漢果的習(xí)性是，到了秋季分枝藤蔓會(huì)向下垂，并迅速伸長(zhǎng)，一經(jīng)著地就會(huì)膨大變作指頭大小的塊莖(俗稱“薯塊”、“薯仔”)，可以頑強(qiáng)地越冬，來(lái)年萌發(fā)成為獨(dú)立的新植株。這是羅漢果自然繁殖的重要方式。在人工栽培之后，演化成了人工壓蔓，小“塊莖”依然是羅漢果最重要的種源。然而，這些傳統(tǒng)塊莖容易傳播病毒及其它病蟲害，又難以大批量生產(chǎn)，無(wú)法滿足現(xiàn)代規(guī)?；N植的需求。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供了一種羅漢果組織塊莖生根培養(yǎng)技術(shù)。
[0004]本發(fā)明通過以下技術(shù)方案得以實(shí)現(xiàn)。
[0005]本發(fā)明提供的一種羅漢果組織塊莖生根培養(yǎng)技術(shù)，包括以下步驟:
[0006]I)使用常規(guī)方法制作羅漢果組培苗，并取中間健壯部分，分切成帶腋芽單節(jié)莖段，并進(jìn)行滅菌處理，得到組織塊莖；
[0007]2)將組織塊莖扦插在濾紙上，濾紙延伸到液體培養(yǎng)基溶液中；所述的濾紙到液體培養(yǎng)基溶液的高度不超過4cm;先黑暗培養(yǎng)3d，然后在光照強(qiáng)度1000?1200Lx。光照時(shí)間10?12h/d，培養(yǎng)溫度為23?25 °C，培養(yǎng)時(shí)間15?20天；
[0008]3)將組織塊莖扦插于固體培養(yǎng)基中培養(yǎng)60?80d，即可移栽至土地中。
[0009]進(jìn)一步的，所述的液體培養(yǎng)基溶液包含:MS+BA0.5?0.7mg/L、IAA0.I?0.2mg/L、鹿糖30g/L、硝酸錢I?4g/L、芒果泥5?10g/L。
[0010]進(jìn)一步的，所述的液體培養(yǎng)基的pH值為5.7?6.0。
[0011]進(jìn)一步的，所述的固體培養(yǎng)基包括MS+BA1?2mg/L、AD0.5?lmg/L、蔗糖30g/L、硝酸錢I?4g/L、芒果泥20?30g/L、香蕉泥30?45g/L、灰炭土 0.5?1〖凡、卡拉膠5?1(^/匕
[0012]進(jìn)一步的，所述的固體培養(yǎng)基的pH值為6.2?6.4。
[0013]進(jìn)一步的，所述的步驟3)的光照強(qiáng)度1200?1400Lx。光照時(shí)間13?15h/d，培養(yǎng)溫度為27?29°C。
[0014]本發(fā)明的有益效果在于:使用該方法處理的羅漢果組織塊莖能夠?qū)崿F(xiàn)快速生根，得到的羅漢果幼苗的根須長(zhǎng)達(dá)5cm以上，其移栽成活率達(dá)到90%以上。
【具體實(shí)施方式】
[0015]下面進(jìn)一步描述本發(fā)明的技術(shù)方案，但要求保護(hù)的范圍并不局限于所述。
[0016]實(shí)施例一
[0017]本發(fā)明提供的一種羅漢果組織塊莖生根培養(yǎng)技術(shù)，包括以下步驟:
[0018]1、使用常規(guī)方法制作羅漢果組培苗，并取中間健壯部分，分切成帶腋芽單節(jié)莖段，并進(jìn)行滅菌處理，得到組織塊莖;具體方法為:
[0019]I)使用常規(guī)方法制作羅漢果組培苗，并取中間健壯部分，分切成帶腋芽單節(jié)莖段；
[0020]2)用濃度為3%的肥皂水浸泡5min，撈起后使用無(wú)菌水沖洗一次；
[0021 ] 3)再用濃度為0.05%的檸檬酸溶液浸泡5min，撈起后使用無(wú)菌水沖洗一次；
[0022]4)再用濃度50?60%的酒精溶液浸泡15s，撈起后使用無(wú)菌水沖洗一次；
[0023]5)再使用濃度為0.1%的高錳酸鉀溶液浸泡3min，撈起后使用無(wú)菌水沖洗一次，得到滅菌的羅漢果外植體。
[0024]6 )得到的滅菌的羅漢果外植體用濾紙包裹，并對(duì)濾紙噴灑MS + BA0.6mg/L+IAA0.2mg/L+蔗糖30g/L的溶液噴灑，使得濾紙足夠濕潤(rùn)。
[0025]2、將組織塊莖扦插在濾紙上，濾紙延伸到液體培養(yǎng)基溶液中；所述的濾紙到液體培養(yǎng)基溶液的高度不超過4cm;先黑暗培養(yǎng)3d，然后在光照強(qiáng)度lOOOLx。光照時(shí)間10h/d，培養(yǎng)溫度為230C，培養(yǎng)時(shí)間15天;所述的液體培養(yǎng)基溶液包含:MS+BA0.5mg/L、IAA0.lmg/L、蔗糖308/1、硝酸銨18/1、芒果泥58/1，？!1值為5.7。
[0026]3、將組織塊莖扦插于固體培養(yǎng)基，光照強(qiáng)度1200LX。光照時(shí)間13h/d，培養(yǎng)溫度為27°C，培養(yǎng)60d，即可移栽至土地中，所述的固體培養(yǎng)基包括MS+BAlmg/L、AD0.5mg/L、蔗糖3(^/1、硝酸錢1〖/1、芒果泥20〖/1、香蕉泥30〖/1、灰炭土0.5〖/1、卡拉膠5〖/1;?!1值為6.2。
[0027]實(shí)施例二
[0028]本發(fā)明提供的一種羅漢果組織塊莖生根培養(yǎng)技術(shù)，包括以下步驟:
[0029]1、使用常規(guī)方法制作羅漢果組培苗，并取中間健壯部分，分切成帶腋芽單節(jié)莖段，并進(jìn)行滅菌處理，得到組織塊莖;具體方法為:
[0030]I)使用常規(guī)方法制作羅漢果組培苗，并取中間健壯部分，分切成帶腋芽單節(jié)莖段；
[0031]2)用濃度為3%的肥皂水浸泡5min，撈起后使用無(wú)菌水沖洗一次；
[0032]3)再用濃度為0.05%的檸檬酸溶液浸泡5min，撈起后使用無(wú)菌水沖洗一次；
[0033]4)再用濃度50?60%的酒精溶液浸泡15s，撈起后使用無(wú)菌水沖洗一次；
[0034]5)再使用濃度為0.1%的高錳酸鉀溶液浸泡3min，撈起后使用無(wú)菌水沖洗一次，得到滅菌的羅漢果外植體。
[0035]6 )得到的滅菌的羅漢果外植體用濾紙包裹，并對(duì)濾紙噴灑MS + BA0.6mg/L+IAA0.2mg/L+蔗糖30g/L的溶液噴灑，使得濾紙足夠濕潤(rùn)。
[0036]2、將組織塊莖扦插在濾紙上，濾紙延伸到液體培養(yǎng)基溶液中；所述的濾紙到液體培養(yǎng)基溶液的高度不超過4cm;先黑暗培養(yǎng)3d，然后在光照強(qiáng)度1200Lx。光照時(shí)間12h/d，培養(yǎng)溫度為25°C，培養(yǎng)時(shí)間15?20天;所述的液體培養(yǎng)基溶液包含:MS+BA0.7mg/L、IAA0.2mg/L、蔗糖30g/L、硝酸銨4g/L、芒果泥I Og/L; pH值為6.0。
[0037]3、將組織塊莖扦插于固體培養(yǎng)基，光照強(qiáng)度1400Lx。光照時(shí)間15h/d，培養(yǎng)溫度為29 0C，培養(yǎng)80d，即可移栽至土地中；所述的固體培養(yǎng)基包括MS+BA2mg/L、ADlmg/L、蔗糖30g/1^、硝酸錢4〖/1、芒果泥30〖/1、香蕉泥45〖/1、灰炭土1〖/1、卡拉膠10〖/1;?!1值為6.4。
[0038]實(shí)施例三
[0039]本發(fā)明提供的一種羅漢果組織塊莖生根培養(yǎng)技術(shù)，包括以下步驟:
[0040]1、使用常規(guī)方法制作羅漢果組培苗，并取中間健壯部分，分切成帶腋芽單節(jié)莖段，并進(jìn)行滅菌處理，得到組織塊莖;具體方法為:
[0041 ] I)使用常規(guī)方法制作羅漢果組培苗，并取中間健壯部分，分切成帶腋芽單節(jié)莖段；
[0042]2)用濃度為3%的肥皂水浸泡5min，撈起后使用無(wú)菌水沖洗一次；
[0043]3)再用濃度為0.05%的梓檬酸溶液浸泡5min，撈起后使用無(wú)菌水沖洗一次；
[0044]4)再用濃度50?60%的酒精溶液浸泡15s，撈起后使用無(wú)菌水沖洗一次；
[0045]5)再使用濃度為0.1 %的高猛酸鉀溶液浸泡3min，撈起后使用無(wú)菌水沖洗一次，得到滅菌的羅漢果外植體。
[0046]6 )得到的滅菌的羅漢果外植體用濾紙包裹，并對(duì)濾紙噴灑MS + BA0.6mg/L+IAA0.2mg/L+蔗糖30g/L的溶液噴灑，使得濾紙足夠濕潤(rùn)。
[0047]2、將組織塊莖扦插在濾紙上，濾紙延伸到液體培養(yǎng)基溶液中；所述的濾紙到液體培養(yǎng)基溶液的高度不超過4cm;先黑暗培養(yǎng)3d，然后在光照強(qiáng)度I 10Lx。光照時(shí)間I lh/d，培養(yǎng)溫度為2 4 °C，培養(yǎng)時(shí)間I 5?2 O天；所述的液體培養(yǎng)基溶液包含:M S + B A 0.6 m g / L、IAA0.15mg/L、蔗糖 30g/L、硝酸銨 3g/L、芒果泥 8g/L。
[0048]3、將組織塊莖扦插于固體培養(yǎng)基，光照強(qiáng)度1300Lx。光照時(shí)間14h/d，培養(yǎng)溫度為28 0C，培養(yǎng)70d，即可移栽至土地中；所述的固體培養(yǎng)基包括MS+BA1.5mg/L、AD0.8mg/L、蔗糖30g/L、硝酸錢2g/L、芒果泥20?30g/L、香蕉泥40g/L、灰炭土 0.8g/L、卡拉膠8g/L;pH值為
6.3ο
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種羅漢果組織塊莖生根培養(yǎng)技術(shù)，其特征在于包括以下步驟: 1)使用常規(guī)方法制作羅漢果組培苗，并取中間健壯部分，分切成帶腋芽單節(jié)莖段，并進(jìn)行滅菌處理，得到組織塊莖； 2)將組織塊莖扦插在濾紙上，濾紙延伸到液體培養(yǎng)基溶液中；所述的濾紙到液體培養(yǎng)基溶液的高度不超過4cm;先黑暗培養(yǎng)3d，然后在光照強(qiáng)度1000?1200Lx。光照時(shí)間10?12h/d，培養(yǎng)溫度為23?25 °C，培養(yǎng)時(shí)間15?20天； 3)將組織塊莖扦插于固體培養(yǎng)基中培養(yǎng)60?SOd，即可移栽至土地中。2.如權(quán)利要求1所述的羅漢果組織塊莖生根培養(yǎng)技術(shù)，其特征在于:所述的液體培養(yǎng)基溶液包含:MS+BA0.5?0.7mg/L、IAA0.1?0.2mg/L、蔗糖30g/L、硝酸銨I?4g/L、芒果泥5?10g/Lo3.如權(quán)利要求2所述的羅漢果組織塊莖生根培養(yǎng)技術(shù)，其特征在于:所述的液體培養(yǎng)基的pH值為5.7?6.0。4.如權(quán)利要求1所述的羅漢果組織塊莖生根培養(yǎng)技術(shù)，其特征在于:所述的固體培養(yǎng)基包括MS+BA1?2mg/L、AD0.5?lmg/L、鹿糖30g/L、硝酸錢I?4g/L、芒果泥20?30g/L、香蕉泥30?45g/L、灰炭土0.5?lg/L、卡拉膠5?10g/L。5.如權(quán)利要求4所述的羅漢果組織塊莖生根培養(yǎng)技術(shù)，其特征在于:所述的固體培養(yǎng)基的pH值為6.2?6.4。6.如權(quán)利要求1所述的羅漢果組織塊莖生根培養(yǎng)技術(shù)，其特征在于:所述的步驟3)的光照強(qiáng)度1200?1400Lx。光照時(shí)間13?15h/d，培養(yǎng)溫度為27?29°C。
【文檔編號(hào)】A01H4/00GK105993950SQ201610362516
【公開日】2016年10月12日
【申請(qǐng)日】2016年5月27日
【發(fā)明人】張俊連, 羅小廷, 張俊蛟, 邵先強(qiáng)
【申請(qǐng)人】貴州德江易盛農(nóng)業(yè)科技發(fā)展有限公司