一種迷你心香甘薯組織培養(yǎng)快繁的方法
【專利摘要】本發(fā)明是一種迷你心香甘薯組織培養(yǎng)快繁的方法，具體步驟為：從田間采回迷你心香甘薯的幼嫩帶芽莖段，剪取帶芽莖段、剪取頂芽，進行清理及滅菌，得到外植體，備用；對外植體進行消毒與初代培養(yǎng)，獲得無菌培養(yǎng)系；初代培養(yǎng)后的迷你心香甘薯，切取1葉1芽的莖段，接種到繼代培養(yǎng)基上進行增值培養(yǎng)；初代培養(yǎng)和繼代培養(yǎng)的培養(yǎng)溫度為25?28℃，培養(yǎng)時間為30天，前15天光照強度為1600?1800lx，每日12h；后15天光照強度為3100?3800lx，每日15h。本發(fā)明利用初代培養(yǎng)獲得了無菌培養(yǎng)系，通過繼代增值培養(yǎng)將莖切段進行快速增值，增值倍數(shù)可達13倍，建立了一套穩(wěn)定、高效的迷你心香甘薯組織培養(yǎng)快繁的技術體系。
【專利說明】
一種迷你心香甘薯組織培養(yǎng)快繁的方法
技術領域
[0001]本發(fā)明涉及甘薯脫毒領域，尤其涉及一種迷你心香甘薯組織培養(yǎng)快繁的方法。
【背景技術】
[0002]迷你心香甘薯新品種或品系在引種、繁殖和生產(chǎn)過程中主要以薯塊和莖蔓等營養(yǎng)器官進行無性繁殖，因此易于造成病毒病的積累和蔓延，從而導致其產(chǎn)量降低、品質(zhì)下降、種性退化。據(jù)統(tǒng)計，中國因甘薯病毒病而造成的平均減產(chǎn)率達29.4%。近年來在生產(chǎn)迷你心香甘薯過程中受到病毒病的影響，發(fā)展較慢，種植規(guī)模較小，滿足不了加工企業(yè)的需要。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明旨在解決現(xiàn)有技術的不足，而提供一種迷你心香甘薯組織培養(yǎng)快繁的方法。
[0004]本發(fā)明為實現(xiàn)上述目的，采用以下技術方案:
[0005]—種迷你心香甘薯組織培養(yǎng)快繁的方法，具體步驟為:
[0006](I)取材及處理:
[0007]從田間采回迷你心香甘薯的幼嫩帶芽莖段，去掉葉片及多余的葉柄，修剪成0.3-
0.4cm長的帶芽莖段、剪取頂芽，先在自來水下用毛刷洗去表面的灰塵及泥土，再用0.2%濃度的抗壞血酸液浸泡6-8min，用洗衣粉溶液洗凈，自來水流水沖洗40_50min，在無菌條件下用酒精消毒8_9s，得到外植體，備用；
[0008](2)外植體消毒與初代培養(yǎng):
[0009]用0.2%的升汞對迷你心香甘薯外植體進行消毒，時間為9-10min;然后將處理后的外植體放入初代培養(yǎng)基上進行培養(yǎng);培養(yǎng)溫度為25-28°C，培養(yǎng)時間為30天，前15天光照強度為1600-18001x，每日12h;后15天光照強度為3100-38001x，每日15h，獲得無菌培養(yǎng)系；
[0010](3)繼代增值培養(yǎng):
[0011]初代培養(yǎng)后的迷你心香甘薯，切取I葉I芽的莖段，接種到繼代培養(yǎng)基上進行增值培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為25-28°C，培養(yǎng)時間為30天，前15天光照強度為1600-18001x，每日12h;后15天光照強度為3100-38001X，每日15h;迷你心香甘薯進行增值快繁。
[0012]所述初代培養(yǎng)基為MS+BA2mg/L。
[0013]所述繼代培養(yǎng)基為MS+BAlmg/L+NAA0.1-0.2mg/L。
[0014]本發(fā)明的有益效果是:本發(fā)明提供了一種迷你心香甘薯組織培養(yǎng)快繁的方法，為工廠化生產(chǎn)種苗提供技術依據(jù)。本發(fā)明利用初代培養(yǎng)獲得了無菌培養(yǎng)系，通過繼代增值培養(yǎng)將莖切段進行快速增值，增值倍數(shù)可達13倍，建立了一套穩(wěn)定、高效的迷你心香甘薯組織培養(yǎng)快繁的技術體系。
【具體實施方式】
[0015]下面結合實施例對本發(fā)明作進一步說明:
[0016]實施例1:
[0017]—種迷你心香甘薯組織培養(yǎng)快繁的方法，具體步驟為:
[0018](I)取材及處理:
[0019]從田間采回迷你心香甘薯的幼嫩帶芽莖段，去掉葉片及多余的葉柄，修剪成0.3cm長的帶芽莖段、剪取頂芽，先在自來水下用毛刷洗去表面的灰塵及泥土，再用0.2%濃度的抗壞血酸液浸泡6min，用洗衣粉溶液洗凈，自來水流水沖洗40min，在無菌條件下用酒精消毒8s，得到外植體，備用；
[0020](2)外植體消毒與初代培養(yǎng):
[0021 ]用0.2 %的升汞對迷你心香甘薯外植體進行消毒，時間為9min;然后將處理后的外植體放入初代培養(yǎng)基上進行培養(yǎng);培養(yǎng)溫度為25°C，培養(yǎng)時間為30天，前15天光照強度為16001x，每日12h;后15天光照強度為31001x，每日15h，獲得無菌培養(yǎng)系；
[0022](3)繼代增值培養(yǎng):
[0023]初代培養(yǎng)后的迷你心香甘薯，切取I葉I芽的莖段，接種到繼代培養(yǎng)基上進行增值培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為25 °C，培養(yǎng)時間為30天，前15天光照強度為16001X，每日12h;后15天光照強度為31001x，每日15h;迷你心香甘薯進行增值快繁。
[0024]所述初代培養(yǎng)基為MS+BA2mg/L。
[0025]所述繼代培養(yǎng)基為MS+BAlmg/L+NAA0.1-0.2mg/L。
[0026]本發(fā)明提供了一種迷你心香甘薯組織培養(yǎng)快繁的方法，為工廠化生產(chǎn)種苗提供技術依據(jù)。本發(fā)明利用初代培養(yǎng)獲得了無菌培養(yǎng)系，通過繼代增值培養(yǎng)將莖切段進行快速增值，增值倍數(shù)可達13倍，建立了一套穩(wěn)定、高效的迷你心香甘薯組織培養(yǎng)快繁的技術體系。
[0027]實施例2:
[0028]—種迷你心香甘薯組織培養(yǎng)快繁的方法，具體步驟為:
[0029](I)取材及處理:
[0030]從田間采回迷你心香甘薯的幼嫩帶芽莖段，去掉葉片及多余的葉柄，修剪成0.4cm長的帶芽莖段、剪取頂芽，先在自來水下用毛刷洗去表面的灰塵及泥土，再用0.2%濃度的抗壞血酸液浸泡Smin，用洗衣粉溶液洗凈，自來水流水沖洗50min，在無菌條件下用酒精消毒9s，得到外植體，備用；
[0031](2)外植體消毒與初代培養(yǎng):
[0032]用0.2%的升汞對迷你心香甘薯外植體進行消毒，時間為1min;然后將處理后的外植體放入初代培養(yǎng)基上進行培養(yǎng);培養(yǎng)溫度為28°C，培養(yǎng)時間為30天，前15天光照強度為18001x，每日12h;后15天光照強度為38001x，每日15h，獲得無菌培養(yǎng)系；
[0033](3)繼代增值培養(yǎng):
[0034]初代培養(yǎng)后的迷你心香甘薯，切取I葉I芽的莖段，接種到繼代培養(yǎng)基上進行增值培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為280C，培養(yǎng)時間為30天，前15天光照強度為1800Ix，每日12h;后15天光照強度為38001x，每日15h;迷你心香甘薯進行增值快繁。
[0035]所述初代培養(yǎng)基為MS+BA2mg/L。
[0036]所述繼代培養(yǎng)基為MS+BAlmg/L+NAA0.1-0.2mg/L。
[0037]本發(fā)明提供了一種迷你心香甘薯組織培養(yǎng)快繁的方法，為工廠化生產(chǎn)種苗提供技術依據(jù)。本發(fā)明利用初代培養(yǎng)獲得了無菌培養(yǎng)系，通過繼代增值培養(yǎng)將莖切段進行快速增值，增值倍數(shù)可達13倍，建立了一套穩(wěn)定、高效的迷你心香甘薯組織培養(yǎng)快繁的技術體系。
[0038]實施例3:
[0039]—種迷你心香甘薯組織培養(yǎng)快繁的方法，具體步驟為:
[0040](I)取材及處理:
[0041]從田間采回迷你心香甘薯的幼嫩帶芽莖段，去掉葉片及多余的葉柄，修剪成0.3cm長的帶芽莖段、剪取頂芽，先在自來水下用毛刷洗去表面的灰塵及泥土，再用0.2%濃度的抗壞血酸液浸泡7min，用洗衣粉溶液洗凈，自來水流水沖洗45min，在無菌條件下用酒精消毒9s，得到外植體，備用；
[0042](2)外植體消毒與初代培養(yǎng):
[0043]用0.2%的升汞對迷你心香甘薯外植體進行消毒，時間為1min;然后將處理后的外植體放入初代培養(yǎng)基上進行培養(yǎng);培養(yǎng)溫度為27°C，培養(yǎng)時間為30天，前15天光照強度為17001x，每日12h;后15天光照強度為35001x，每日15h，獲得無菌培養(yǎng)系；
[0044](3)繼代增值培養(yǎng):
[0045]初代培養(yǎng)后的迷你心香甘薯，切取I葉I芽的莖段，接種到繼代培養(yǎng)基上進行增值培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為27°C，培養(yǎng)時間為30天，前15天光照強度為17001x，每日12h;后15天光照強度為35001x，每日15h;迷你心香甘薯進行增值快繁。
[0046]所述初代培養(yǎng)基為MS+BA2mg/L。
[0047]所述繼代培養(yǎng)基為MS+BAlmg/L+NAA0.1-0.2mg/L。
[0048]本發(fā)明提供了一種迷你心香甘薯組織培養(yǎng)快繁的方法，為工廠化生產(chǎn)種苗提供技術依據(jù)。本發(fā)明利用初代培養(yǎng)獲得了無菌培養(yǎng)系，通過繼代增值培養(yǎng)將莖切段進行快速增值，增值倍數(shù)可達13倍，建立了一套穩(wěn)定、高效的迷你心香甘薯組織培養(yǎng)快繁的技術體系。
[0049]上面對本發(fā)明進行了示例性描述，顯然本發(fā)明具體實現(xiàn)并不受上述方式的限制，只要采用了本發(fā)明的方法構思和技術方案進行的各種改進，或未經(jīng)改進直接應用于其它場合的，均在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。
【主權項】
1.一種迷你心香甘薯組織培養(yǎng)快繁的方法，其特征在于，具體步驟為: (1)取材及處理: 從田間采回迷你心香甘薯的幼嫩帶芽莖段，去掉葉片及多余的葉柄，修剪成0.3-0.4cm長的帶芽莖段、剪取頂芽，先在自來水下用毛刷洗去表面的灰塵及泥土，再用0.2%濃度的抗壞血酸液浸泡6-8min，用洗衣粉溶液洗凈，自來水流水沖洗40_50min，在無菌條件下用酒精消毒8_9s，得到外植體，備用； (2)外植體消毒與初代培養(yǎng): 用0.2%的升汞對迷你心香甘薯外植體進行消毒，時間為9-10min;然后將處理后的外植體放入初代培養(yǎng)基上進行培養(yǎng);培養(yǎng)溫度為25-28°C，培養(yǎng)時間為30天，前15天光照強度為1600-18001x，每日12h;后15天光照強度為3100-38001x，每日15h，獲得無菌培養(yǎng)系； (3)繼代增值培養(yǎng): 初代培養(yǎng)后的迷你心香甘薯，切取I葉I芽的莖段，接種到繼代培養(yǎng)基上進行增值培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為25-28°C，培養(yǎng)時間為30天，前15天光照強度為1600-18001x，每日12h;后15天光照強度為3100-38001X，每日15h;迷你心香甘薯進行增值快繁。2.根據(jù)權利要求1所述的一種迷你心香甘薯組織培養(yǎng)快繁的方法，其特征在于，所述初代培養(yǎng)基為MS+BA2mg/L。3.根據(jù)權利要求2所述的一種迷你心香甘薯組織培養(yǎng)快繁的方法，其特征在于，所述繼代培養(yǎng)基為 MS+BAlmg/L+NAA0.1-0.2mg/L。
【文檔編號】A01H4/00GK106069781SQ201610632413
【公開日】2016年11月9日
【申請日】2016年8月3日 公開號201610632413.0, CN 106069781 A, CN 106069781A, CN 201610632413, CN-A-106069781, CN106069781 A, CN106069781A, CN201610632413, CN201610632413.0
【發(fā)明人】王立國, 郭子江, 張嘉, 李建軍, 朱永伶, 芮淑會, 王鴻鳴, 李彥陽
【申請人】天津豐華裕隆農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司