專利名稱：評價(jià)中藥復(fù)方基因組技術(shù)平臺的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明評價(jià)中藥復(fù)方基因組技術(shù)平臺，涉及一種采用基因表達(dá)點(diǎn)陣膜(基因芯片)技術(shù)分析中藥復(fù)方對人體多靶點(diǎn)基因表達(dá)方式，用以分析、檢測評價(jià)中藥復(fù)方的方法，是一種現(xiàn)代化的中醫(yī)診斷和治療手段。
評價(jià)中藥復(fù)方基因組技術(shù)平臺，是一種首創(chuàng)性的發(fā)明，是現(xiàn)代生物工程的邊緣科學(xué)，是人類基因組技術(shù)、現(xiàn)代信息電子網(wǎng)絡(luò)技術(shù)、基因芯片技術(shù)、藥物生化拆分技術(shù)、傳統(tǒng)中醫(yī)藥技術(shù)的有機(jī)結(jié)合，及具有實(shí)用性的應(yīng)用技術(shù)。中藥復(fù)方基因組技術(shù)平臺是通過患者用藥前后或用藥者與非用藥者的細(xì)胞，提取RNA標(biāo)記后雜交到點(diǎn)陣膜上，數(shù)碼成像后電腦分析結(jié)果，比較兩者基因表達(dá)圖譜的異同，確定藥物作用的機(jī)理、療效安全性、準(zhǔn)確尋找出功能基因等方面的結(jié)果。
本發(fā)明評價(jià)中藥復(fù)方基因組技術(shù)平臺的目的是提供一種現(xiàn)代化的中醫(yī)診斷和治療手段，全面評價(jià)傳統(tǒng)中藥復(fù)方體系、創(chuàng)新中醫(yī)藥現(xiàn)代理論、重組中藥復(fù)方，產(chǎn)生中醫(yī)藥現(xiàn)代化、國際化的新標(biāo)準(zhǔn)，搶灘國際市場，還可以廣泛應(yīng)用于生物工程、基因工程、醫(yī)藥衛(wèi)生和制藥業(yè)。
本發(fā)明評價(jià)中藥復(fù)方基因組技術(shù)平臺內(nèi)容簡述本發(fā)明評價(jià)中藥復(fù)方基因組技術(shù)平臺，能直觀準(zhǔn)確的分析檢測和評價(jià)中藥復(fù)方對人體多靶點(diǎn)基因的表達(dá)，是人體基因組工程的基因組研究，其特征是應(yīng)用基因組技術(shù)平臺分離出代表人體內(nèi)約10萬個(gè)基因的DNA片斷，在制做人體基因組圖譜以前，基因組技術(shù)平臺首先對每個(gè)克隆逐個(gè)復(fù)制，擴(kuò)增，提純；然后再用平臺高精密度機(jī)器手噴涂到尼龍膜上或雜交到芯片上形成點(diǎn)陣膜，點(diǎn)陣膜上的每個(gè)點(diǎn)就代表一個(gè)基因；利用點(diǎn)陣膜，基因組技術(shù)平臺用采桿檢測基因在被研究細(xì)胞中的表達(dá)情況，從被測細(xì)胞(組織)和對照(陽性或陰性對照)細(xì)胞中提取RNA(基因表達(dá)中介產(chǎn)物)，然后再通過反轉(zhuǎn)錄的方法將RNA標(biāo)記(可以是熒光標(biāo)記或放射性同位素標(biāo)記)，這些標(biāo)記好的RNA就是分子探針；其具體步驟是(1)、RNA提取，中醫(yī)臨床治療時(shí)抽取患者血樣，或其它組織標(biāo)本；(2)、RNA標(biāo)記，采用平臺應(yīng)用反轉(zhuǎn)錄的方法將RNA用熒光或放射性同位素標(biāo)記制作成為分子探針；(3)、將分子探針雜交到點(diǎn)陣膜上，或基因芯片上，產(chǎn)生相應(yīng)信號；(4)、與對照組細(xì)胞比較，通過被測細(xì)胞與對照組細(xì)胞比較的信號判定兩者基因圖譜表達(dá)的差別。
本發(fā)明評價(jià)中藥復(fù)方基因組技術(shù)平臺經(jīng)對國內(nèi)外文獻(xiàn)檢索均未查到有關(guān)本發(fā)明文獻(xiàn)報(bào)道，屬國內(nèi)外首創(chuàng)。評價(jià)中藥復(fù)方基因組技術(shù)平臺，是將傳統(tǒng)中醫(yī)藥辯證施治的經(jīng)驗(yàn)理論轉(zhuǎn)化為現(xiàn)代中醫(yī)藥學(xué)理論，對實(shí)現(xiàn)中醫(yī)藥現(xiàn)代化具有推進(jìn)作用，用基因表達(dá)點(diǎn)陣膜研究中藥或復(fù)方，是對中醫(yī)藥方法學(xué)的創(chuàng)新，是在堅(jiān)持中醫(yī)理論的前提下對中藥進(jìn)行現(xiàn)代化分析探討，通過基因組技術(shù)平臺可對中藥復(fù)方劑的重組獲得最佳的劑量配比和標(biāo)準(zhǔn)劑量，是一種現(xiàn)代化的中醫(yī)診斷和治療手段。采用基因組技術(shù)平臺可以全面評價(jià)傳統(tǒng)中藥復(fù)方體系、創(chuàng)新中醫(yī)藥現(xiàn)代理論、重組中藥復(fù)方，產(chǎn)生中醫(yī)藥現(xiàn)代化、國際化的新標(biāo)準(zhǔn)，搶灘國際市場，還可以廣泛應(yīng)用于生物工程、基因工程、醫(yī)藥衛(wèi)生和制藥業(yè)。
實(shí)施例評價(jià)中藥復(fù)方基因組技術(shù)平臺的工作路線為1、選擇公認(rèn)有效的中藥復(fù)方，為患者的臨床用藥；2、采集患者用藥后的血樣，從血樣中提取RNA；3、標(biāo)記RNA，采用平臺應(yīng)用反轉(zhuǎn)錄的方法將RNA用放射性同位素標(biāo)記制作成為分子探針；4、與點(diǎn)陣膜雜交，將分子探針雜交到點(diǎn)陣膜上，產(chǎn)生相應(yīng)信號；5、結(jié)果分析，采用電腦軟件進(jìn)行分析；6、尋找出功能基因，得出療效機(jī)理、作用靶點(diǎn)、及服藥后的安全性；7、將評價(jià)出的結(jié)果存入電腦信息庫；8、服務(wù)平臺，開展技術(shù)信息服務(wù)及成果應(yīng)用，用以研究中醫(yī)中藥的策略和方法。
權(quán)利要求
1.一種評價(jià)中藥復(fù)方基因組技術(shù)平臺，能直觀準(zhǔn)確的分析檢測和評價(jià)中藥復(fù)方對人體多靶點(diǎn)基因的表達(dá)，是人體基因組工程的基因組研究，其特征是應(yīng)用基因組技術(shù)平臺分離出代表人體內(nèi)約10萬個(gè)基因的DNA片斷，在制做人體基因組圖譜以前，基因組技術(shù)平臺首先對每個(gè)克隆逐個(gè)復(fù)制，擴(kuò)增，提純；然后再用平臺高精密度機(jī)器手噴涂到尼龍膜上或雜交到芯片上形成點(diǎn)陣膜，點(diǎn)陣膜上的每個(gè)點(diǎn)就代表一個(gè)基因；利用點(diǎn)陣膜，基因組技術(shù)平臺用采桿檢測基因在被研究細(xì)胞中的表達(dá)情況，從被測細(xì)胞組織和對照細(xì)胞中提取RNA，然后再通過反轉(zhuǎn)錄的方法將RNA標(biāo)記，可以是熒光標(biāo)記或放射性同位素標(biāo)記，這些標(biāo)記好的RNA就是分子探針；其具體步驟是(1)、RNA提取，中醫(yī)臨床治療時(shí)抽取患者血樣，或細(xì)胞組織標(biāo)本；(2)、RNA標(biāo)記，采用平臺應(yīng)用反轉(zhuǎn)錄的方法將RNA用熒光或放射性同位素標(biāo)記制作成為分子探針；(3)、將分子探針雜交到點(diǎn)陣膜上，或基因芯片上，產(chǎn)生相應(yīng)信號；(4)、與對照組細(xì)胞比較，通過被測細(xì)胞與對照組細(xì)胞比較的信號判定兩者基因圖譜表達(dá)的差別。
全文摘要
本發(fā)明評價(jià)中藥復(fù)方基因組技術(shù)平臺,涉及一種采用基因表達(dá)點(diǎn)陣膜技術(shù)分析中藥復(fù)方對人體多靶點(diǎn)基因表達(dá)方式,是一種現(xiàn)代化的中醫(yī)診斷和治療手段,其特征是:RNA提取;RNA標(biāo)記;將分子探針雜交到點(diǎn)陣膜上,產(chǎn)生相應(yīng)信號;與對照組細(xì)胞比較,判定兩者基因圖譜表達(dá)的差別?？蓪χ兴帍?fù)方劑的重組獲得最佳的劑量配比和標(biāo)準(zhǔn)劑量,是一種現(xiàn)代化的中醫(yī)診斷和治療手段,還可以廣泛應(yīng)用于生物工程、基因工程、醫(yī)藥衛(wèi)生和制藥業(yè)。
文檔編號C12Q1/68GK1297057SQ0012326
公開日2001年5月30日 申請日期2000年11月17日 優(yōu)先權(quán)日2000年11月17日
發(fā)明者張士振, 陳大宇, 常明, 韓健, 韓喜志, 劉桐華, 劉保延, 周杰 申請人:張士振