專利名稱：抗微生物性組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及抗微生物性組合物和它們的制備方法。還涉及這些組合物的使用方法，以及由于添加或施用了這些組合物而產(chǎn)生抗微生物性的產(chǎn)品。
背景技術(shù)：
乳過氧化物酶(LP)是一種酶，它是牛奶和粘液分泌物(如唾液、眼淚和小腸分泌物)中天然非免疫防衛(wèi)體系的一部分。LP和各種自然產(chǎn)生的輔助因子形成了具有抗微生物活性的乳過氧化物酶體系(LPS)。
LPS包括LP(從牛奶中提取)、過氧化物源和輔助因子(通常是硫氰酸鹽)。在許多場合，加入葡萄糖氧化酶(來自于微生物)和葡萄糖以提供過氧化氫源。由于要保證過氧化物的持續(xù)遞送，常常要優(yōu)選所使用的酶體系。但是這要求需氧條件，所以在厭氧條件中可能需要過氧化物的直接來源。
輔助因子為硫氰酸鹽時(shí)、由LP催化的反應(yīng)產(chǎn)生壽命短暫的硫氰酸鹽中間氧化產(chǎn)物，它顯示出抗微生物活性。LP利用過氧化物，在水的存在下催化硫氰酸鹽的氧化，從而產(chǎn)生次硫氰酸根離子(OSCN-)。據(jù)認(rèn)為，次硫氰酸鹽接下來與細(xì)菌膜上的巰基反應(yīng)，具有對(duì)細(xì)菌的殺菌作用。該過程重新產(chǎn)生了許多硫氰酸鹽。
LPS被視作革蘭陰性細(xì)菌(如，大腸桿菌、耶爾森菌、腸球菌、假單胞菌屬、沙門菌屬、彎曲菌屬)的殺菌劑和革蘭陽性細(xì)菌(產(chǎn)單核細(xì)胞李斯特菌、金黃色葡萄球菌、鏈球菌屬)的抑菌劑。LPS在一些情況下還具有抗病毒活性。
雖然LPS集中采用乳過氧化物酶，但在一些環(huán)境中，采用其它過氧化物酶特別是那些GRAS(公認(rèn)安全無害)狀態(tài)的過氧化物酶也能令人滿意。這些體系總稱作為過氧化物酶體系(PS)，LPS僅是其中一個(gè)例子。
已經(jīng)很好地證明了許多脂肪酸的抗微生物效力。最具活性的是中等鏈長的脂肪酸月桂酸(十二烷酸)和肉豆蔻酸(十四烷酸)。認(rèn)為脂肪酸對(duì)革蘭陽性細(xì)菌具有特殊的效果，并且其脂肪酸衍生物即甘油一月桂酸酯(monolaurin)(1-單十二烷酰-外消旋-甘油酯(1-monododecanyol-rac-glycerol))通常被認(rèn)為最具活性。另外，還要求脂肪酸衍生物，包括十二烷基硫酸鈉具有抗病毒活性(抗包膜病毒)。
甘油一月桂酸酯具有如乳化劑這樣的GRAS狀態(tài)，主要用于植物性起酥油，在某種程度上還用于冰激淋和烘焙品。
甘油一月桂酸酯的商品名為Lauricidin PE，在食品系統(tǒng)中用作抗微生物劑。但是，由于所需的濃度和對(duì)被處理的食品的器官感覺質(zhì)量的綜合效果，并未見到它作為抗微生物劑被廣泛接受。
現(xiàn)在本申請(qǐng)發(fā)現(xiàn)，PS(如LPS)和脂肪酸/脂肪酸衍生物(如甘油一月桂酸)可以聯(lián)合使用，并且聯(lián)合時(shí)的抗微生物效力超過了根據(jù)這些成分已知性質(zhì)所預(yù)測的抗微生物效力。因此，本發(fā)明的基礎(chǔ)主要是根據(jù)對(duì)其提高的抗微生物效力或協(xié)同性相互作用的這種意外發(fā)現(xiàn)。
發(fā)明概述因此，本發(fā)明的第一方面提供了一種抗微生物性組合物的制備方法，該方法包括形成下列成分的混合物a)過氧化物酶體系(PS)，包括i)過氧化物酶；ii)過氧化物源；iii)能產(chǎn)生抗微生物性氧化產(chǎn)物的輔助因子；b)至少一種脂肪酸或脂肪酸衍生物，其中所述的脂肪酸或衍生物的含量是能與所述的過氧化物酶體系相互作用產(chǎn)生提高的抗微生物效力的有效量。
術(shù)語“提高的抗微生物效力”是指對(duì)至少一種微生物具有比從各個(gè)成分已知性質(zhì)預(yù)測的殺菌效果更強(qiáng)的殺菌效果。
本文使用的術(shù)語“微生物”是指微生物致病體、無效顆粒和腐敗性生物體，包括來源于細(xì)菌、病毒、真菌或原生動(dòng)物的那些物質(zhì)。
所述的脂肪酸優(yōu)選是抗微生物性脂肪酸或脂肪酸的抗微生物性衍生物。
過氧化物酶優(yōu)選乳過氧化物酶。
過氧化物為過氧化氫較方便。
輔助因子優(yōu)選選自硫氰酸鹽或碘化物，最優(yōu)選是硫氰酸鹽。
成分(b)優(yōu)選的是或包括選自C8、C10、C12、C14和C16的抗微生物性脂肪酸及其衍生物。
成分(b)更優(yōu)選的是或包括脂肪酸的抗微生物性酯及其脂肪酸鹽。
成分(b)還要優(yōu)選的是或包括甘油一月桂酸酯(1-單十二烷酰-外消旋-甘油酯)或鹽，如十二烷基硫酸鈉。
在目前最優(yōu)選的實(shí)施方式中，成分(b)是甘油一月桂酸酯。
抗微生物性脂肪酸或脂肪酸衍生物的含量優(yōu)選是至少占該組合物脂質(zhì)總含量的5重量％。
所述的組合物優(yōu)選是將一種或多種成分添加到已經(jīng)含有其余成分的預(yù)制混合物中形成的。
預(yù)制混合物通常是食品、化妝品或保健品。
食品可以是飲食補(bǔ)充物或補(bǔ)品。還可以是奶制品、肉制品或魚制品。
食品還可以是動(dòng)物飼料，其中最簡單的形式可以是水。
或者，所述的組合物在形成時(shí)由混合物中的所述成分組成。
本發(fā)明的另一方面提供了適用于制備抗微生物性組合物的預(yù)制組合物，它包括至少兩個(gè)成分，選自i)過氧化物酶；ii)過氧化物源；iii)能產(chǎn)生抗微生物性氧化產(chǎn)物的輔助因子；iv)至少一種抗微生物性脂肪酸或脂肪酸的抗微生物性衍生物，其中過氧化物酶和過氧化物源如果都存在時(shí)應(yīng)保持分離。
過氧化物酶優(yōu)選乳過氧化物酶。
本發(fā)明的還有一個(gè)方面提供了一種適用于制備抗微生物性組合物的預(yù)制包，它包括置于分開的容器中的過氧化物酶和至少一種抗微生物性脂肪酸或脂肪酸的抗微生物性衍生物。
過氧化物酶優(yōu)選乳過氧化物酶。
所述的預(yù)制包優(yōu)選還包括過氧化物源和/或能產(chǎn)生抗微生物性氧化產(chǎn)物的輔助因子。當(dāng)提供它們時(shí)，過氧化物和/或所述輔助因子需置于分開的容器中。
在還有一種實(shí)施方式中，本發(fā)明提供了一種抗微生物性組合物，該組合物包括過氧化物酶、能產(chǎn)生抗微生物性氧化產(chǎn)物的輔助因子和至少一種抗微生物性脂肪酸或脂肪酸的抗微生物性衍生物，其中所述的脂肪酸或其衍生物的含量是能與所述過氧化物酶和所述輔助因子在過氧化物存在下發(fā)生協(xié)同性相互作用從而產(chǎn)生提高的抗微生物效力的有效量。
過氧化物酶優(yōu)選乳過氧化物酶。
所述的抗微生物性組合物優(yōu)選還包括過氧化物源。
該組合物也可以包括抗微生物劑或螯合劑。
所述的抗微生物劑優(yōu)選選自苯酚、有機(jī)酸、桿菌素、這些物質(zhì)的衍生物、和它們的混合物，或者從牛奶中提取的抗微生物成分或抗微生物成分的混合物，如乳鐵蛋白。
螯合劑優(yōu)選EDTA。
在另一實(shí)施方式中，本發(fā)明提供了一種用如上定義的方法制備的抗微生物產(chǎn)品。
本發(fā)明的還有一個(gè)方面提供了一種產(chǎn)品，它包括下列成分i)過氧化物酶；ii)過氧化物源；iii)能產(chǎn)生抗微生物性氧化產(chǎn)物的輔助因子；iv)至少一種抗微生物性脂肪酸或脂肪酸的抗微生物性衍生物，這種產(chǎn)品能阻止微生物生長。
過氧化物酶優(yōu)選乳過氧化物酶。
優(yōu)選地，所述的產(chǎn)品能阻止革蘭陽性和革蘭陰性細(xì)菌生長。
所述產(chǎn)品的一種形式是食品，如飲食補(bǔ)充物、補(bǔ)品、乳制品、肉制品、魚制品或動(dòng)物飼料。
所述產(chǎn)品的另一種形式是化妝品。
所述產(chǎn)品的還有一種形式是保健品。
本發(fā)明的還有一個(gè)方面提供了一種表面處理方法，該方法包括將如上所述的有效量抗微生物性組合物涂敷到所述表面的步驟。
在一個(gè)實(shí)施方式中，該表面是用于制備和/或處理食品的表面。
本發(fā)明的最后一個(gè)方面提供了一種目的是賦予產(chǎn)品抗微生物性的產(chǎn)品處理方法，該方法包括將上述的有效量抗微生物性組合物添加到所述產(chǎn)品中的步驟。


雖然本發(fā)明主要如上所述，但包括下面描述所提供的實(shí)施例的實(shí)施方式也是適宜的。另外，參見下述附圖可獲得對(duì)本發(fā)明的更好了解圖1顯示在接種8×106cfu/毫升金黃色葡萄球菌(等于專門制備的貯存液的1％接種物)的肉湯培養(yǎng)液中，甘油一月桂酸酯的濃度對(duì)細(xì)菌生長的影響。以600納米測量的光密度(OD)作為細(xì)菌細(xì)胞數(shù)指數(shù)。
圖2顯示在接種1.5×106cfu/毫升大腸桿菌(等于專門制備的貯存液的0.05％接種物的肉湯培養(yǎng)液中，各種組合物對(duì)細(xì)菌生長的抑制。
圖3顯示在接種4×105cfu/毫升金黃色葡萄球菌(等于專門制備的貯存液的0.05％接種物)的肉湯培養(yǎng)液中，各種組合物對(duì)細(xì)菌生長的抑制。
圖4顯示在接種8×106cfu/毫升金黃色葡萄球菌(等于專門制備的貯存液的1％接種物)的肉湯培養(yǎng)液中，各種組合物對(duì)細(xì)菌生長的抑制。
圖5顯示在接種1.5×106cfu/毫升產(chǎn)單核細(xì)胞李斯特菌(等于專門制備的貯存液的0.05％接種物)的肉湯培養(yǎng)液中，各種組合物對(duì)細(xì)菌生長的抑制。
圖6顯示在接種3×107cfu/毫升產(chǎn)單核細(xì)胞李斯特菌(等于專門制備的貯存液的1％接種物)的肉湯培養(yǎng)液中，各種組合物對(duì)細(xì)菌生長的抑制。
發(fā)明詳述大致如上所述，本發(fā)明主要關(guān)注的是抗微生物性組合物。這種組合物通過過氧化物酶體系和抗微生物性脂肪酸或脂肪酸衍生物成分的協(xié)同性聯(lián)合發(fā)揮了抗微生物效力。
本申請(qǐng)人取得了令人驚奇的發(fā)現(xiàn)是加入抗微生物性脂肪酸成分可顯著補(bǔ)充過氧化物酶體系的抗微生物效力。在性質(zhì)上加強(qiáng)或協(xié)同了對(duì)抗微生物效力的提高。這種協(xié)同作用對(duì)于革蘭陰性微生物如大腸桿菌特別明顯。
過氧化物酶體系需要三種成分。它們依次是過氧化物酶、過氧化物源和輔助因子。輔助因子能產(chǎn)生抗微生物性氧化中間產(chǎn)物。合適的輔助因子的例子包括硫氰酸鹽和鹵化物(特別是碘化物)。
過氧化物酶自身可以是任何市售的。GRAS狀態(tài)的過氧化物酶是優(yōu)選的，乳過氧化物酶是特別優(yōu)選的。
過氧化物可以是直接加入(例如過氧化氫)，或者可以是適當(dāng)?shù)孜锏拿赶a(chǎn)物。例如，葡萄糖氧化酶和葡萄糖的聯(lián)合可提供過氧化氫來源。以過碳酸鈉為基礎(chǔ)的體系也可用。
過氧化物酶體系的各成分可以本領(lǐng)域的標(biāo)準(zhǔn)量提供。例如，當(dāng)過氧化物酶是乳過氧化物酶時(shí)，過氧化物源是葡萄糖/葡萄糖氧化酶，輔助因子是硫氰酸鹽時(shí)，液體介質(zhì)中可包含以下含量的各成分(毫克/升)
LP 6.85葡萄糖氧化酶3.17葡萄糖 31.7SCN-29.0對(duì)于固體底物，可包含相同成分，例如含量如下LP 205葡萄糖氧化酶9.5葡萄糖 31.7SCN-200脂肪酸或脂肪酸衍生物成分通常是C8-C16脂肪酸或衍生物。但是，C10、C12和C14脂肪酸通常被視作最具抗微生物性，因此，如果脂肪酸成分以脂肪酸本身的形式加入，則這些是優(yōu)選的。
使用的抗微生物性衍生物包括使用脂肪酸的酯或它們的鹽。本申請(qǐng)人發(fā)現(xiàn)一個(gè)特別有用的酯是甘油一月桂酸酯(Lauricidin PE)。十二烷基硫酸鈉也可用作合適的衍生物。
還要強(qiáng)調(diào)的是，脂肪酸成分無需是純凈形式的。有用的脂肪酸/脂肪酸衍生物可包含在混合物中，該混合物如牛奶脂肪或椰子油的提取物，其中脂質(zhì)已經(jīng)過處理，以保證抗微生物成分以所需比例存在。
為了使脂肪酸成分與過氧化物酶體系發(fā)生協(xié)同作用，本申請(qǐng)人發(fā)現(xiàn)脂肪酸/脂肪酸衍生物的含量必須是能發(fā)生協(xié)同作用的有效量。該量大于標(biāo)準(zhǔn)牛奶(其中的脂質(zhì)主要是甘油三酯形式)中抗微生物性脂肪酸的水平，這反映了本申請(qǐng)人發(fā)現(xiàn)當(dāng)過氧化物酶體系和脂肪酸成分一起用于牛奶時(shí)，可達(dá)到顯著提高的和有效的抗微生物效力。
具體地說，本申請(qǐng)人已確定當(dāng)要在含有脂質(zhì)的組合物中產(chǎn)生協(xié)同抗微生物效力時(shí)，抗微生物性脂肪酸/脂肪酸衍生物的含量必須至少占組合物中脂質(zhì)總量的5重量％。
現(xiàn)在參見下述非限制性實(shí)驗(yàn)部分以說明本發(fā)明。
實(shí)施例A部分原料菌株、培養(yǎng)基和化學(xué)制劑產(chǎn)單核細(xì)胞李斯特菌菌株L45和金黃色葡萄球菌菌株R37得自新西蘭肉類加工研究所Roger Cook博士的菌株培養(yǎng)收藏物，大腸桿菌015757菌株NCTC 12900得自O(shè)tago大學(xué)微生物學(xué)系Heather Brooks博士的菌株培養(yǎng)收藏物。所有菌株的儲(chǔ)存液于-70℃保存在脫脂奶中，當(dāng)需要時(shí)在平皿計(jì)數(shù)瓊脂(Plate CountAgar)(PCA)(Difco Laboratories，底特律，密歇根州，美國)上傳代培養(yǎng)，或在血液瓊脂(BA)(添加了5％人全血(Dunedin Public Hospital，Dunedin，新西蘭)的哥倫比亞瓊脂基(Columbia Agar Base)(GIBCO BRL，Life Tech Ltd，Paisly，英國))上傳代培養(yǎng)。菌株在通常使用中，保持平皿培養(yǎng)，并且每兩周進(jìn)行傳代培養(yǎng)。所有的市售培養(yǎng)基按照制造商的說明書制備。甘油一月桂酸酯(1-單十二烷酰-外消旋-甘油酯，Sigma化學(xué)公司，圣路易斯，密蘇里州，美國)的制備方法是將1克溶解于10毫升乙醇中，將其分裝成1毫升體積，于-20℃貯存直至需要時(shí)。所有的LPS成分經(jīng)過濾除菌。葡萄糖(Sigma)的制備方法是將18.016克葡萄糖(Sigma)溶解于100毫升MilliQ水中，分裝成3毫升體積，于室溫(RT)儲(chǔ)存直至使用。葡萄糖氧化酶(GOX)來源于Sigma公司；乳過氧化物酶來源于Tatua Biologics，Morrinsville，新西蘭；硫氰酸鈉或硫氰酸鉀來自Bio Serae SA Limited，Montolieu，法國。
方法測試系統(tǒng)在含有8毫升Todd-Hewitt肉湯(THB)的100×15毫米螺帽加蓋玻璃試管中進(jìn)行生長實(shí)驗(yàn)。根據(jù)需要將甘油一肉桂酸酯加入每個(gè)試管中，然后以121℃對(duì)試管高壓滅菌15分鐘。根據(jù)需要將各成分以下列順序加入滅菌試管中，細(xì)胞接種物、16LPX貯液、葡萄糖貯液、硫氰酸鹽貯液和葡萄糖氧化酶貯液。在所有情況下，試管都接種以0.05％和1.0％(體積/體積)的適當(dāng)菌株的過夜THB培養(yǎng)物。試管以37℃培養(yǎng)48小時(shí)，用分光光度計(jì)(Spectronic 20D+，Milton Roy Company，美國)在適當(dāng)間隔時(shí)間讀出它們的OD600納米。每種菌株活菌計(jì)數(shù)是將其以鹽水稀釋的五份過夜培養(yǎng)物，用螺旋接種儀(Spiral Systems，辛辛那提，美國)將每份稀釋液接種于PCA上確定的。
乳過氧化物酶體系成分在培養(yǎng)液中的濃度(毫克/升)如下乳過氧化物酶為6.85，葡萄糖氧化酶是3.17，葡萄糖是31.7，硫氰酸鹽為29.0。
結(jié)果測試系統(tǒng)對(duì)于實(shí)驗(yàn)用的每種測試菌株，大腸桿菌015757菌株NCTC 12900(“大腸桿菌”)、金黃色葡萄球菌菌株R37(“金黃色葡萄球菌”)和產(chǎn)單核細(xì)胞李斯特菌菌株L45(“產(chǎn)單核細(xì)胞李斯特菌”)的過夜肉湯的活菌計(jì)數(shù)分別是3×109、8×108和3×109cfu/毫升。
如結(jié)果所顯示，對(duì)于在50-150百萬分率(ppm)甘油一月桂酸酯存在下培養(yǎng)的1％的金黃色葡萄球菌接種物(圖1)，甘油一月桂酸酯對(duì)革蘭陽性菌株的抑制程度看來與甘油一月桂酸酯所用的濃度成正比。對(duì)于甘油一月桂酸酯和LPS二者，觀察到的抑制程度與施加到該系統(tǒng)中的細(xì)菌量成反比；也就是說，初始接種物越多，觀察到的抑制程度就越低。對(duì)于甘油一月桂酸酯和LPS二者，產(chǎn)單核細(xì)胞李斯特菌是對(duì)抑制最敏感的菌株，大腸桿菌是對(duì)抑制敏感性最差的菌株。
對(duì)大腸桿菌的效果當(dāng)試管以0.05％或1.0％接種時(shí)，甘油一月桂酸酯不抑制大腸桿菌的生長。當(dāng)試管以0.05％但不以1.0％接種時(shí)，LPS輕度抑制了大腸桿菌的生長。甘油一月桂酸酯和LPS聯(lián)合強(qiáng)烈抑制了大腸桿菌的生長(圖2)。
對(duì)金黃色葡萄球菌的效果濃度為100和500ppm(百萬分率)的甘油一月桂酸酯完全抑制了以0.05％接種的金黃色葡萄球菌的生長(圖3)。這些培養(yǎng)物還受到LPS的強(qiáng)烈抑制，而培養(yǎng)固定相的時(shí)間比不含LPS的培養(yǎng)液大約延長到20小時(shí)。含有甘油一月桂酸酯和LPS二者的試管中未觀察到生長。濃度為500ppm的甘油一月桂酸酯完全抑制了以1.0％接種的金黃色葡萄球菌的生長(圖4)，但濃度為100ppm的甘油一月桂酸酯只能部分抑制。在用100ppm甘油一月桂酸酯、以1％接種的情況下，固定相比對(duì)照試管延長約10小時(shí)，并且這些培養(yǎng)物從未達(dá)到對(duì)照試管相當(dāng)?shù)拿芏?。這些培養(yǎng)物受到LPS的強(qiáng)烈抑制，固定相比不含LPS的試管大約延長13小時(shí)。顯然，在含有甘油一月桂酸酯和乳過氧化物酶體系二者的試管中細(xì)菌的生長只是在100ppm甘油一月桂酸酯+LPS的體系中才能觀察到，在48小時(shí)最終時(shí)點(diǎn)顯示，濁度有輕微但統(tǒng)計(jì)上顯著的增長。
對(duì)產(chǎn)單核細(xì)胞李斯特菌的效果以所有接種密度的含100或500ppm甘油一月桂酸酯的所有體系都完全抑制了產(chǎn)單核細(xì)胞李斯特菌(圖5和6)。當(dāng)接種1％與LPS培養(yǎng)時(shí)，靜止期較未抑制的對(duì)照管延長約22小時(shí)。當(dāng)接種0.05％與LPS培養(yǎng)時(shí)，靜止期較未抑制的對(duì)照管延長約27小時(shí)。這些培養(yǎng)物從未達(dá)到比得上對(duì)照管的密度。
討論選擇了三種細(xì)菌的菌株用于該研究，這是由于它們的身份是食品中的病原體，和報(bào)道的它們對(duì)甘油一月桂酸酯的敏感范圍。濃度高達(dá)500ppm的甘油一月桂酸酯對(duì)用于該研究的大腸桿菌0157h1菌株的生長沒有影響并不奇怪，如Kabera等報(bào)道大腸桿菌的生長不受濃度超過1000ppm的甘油一月桂酸酯的影響(Kabara等，1977)。相反地，據(jù)報(bào)道相對(duì)低濃度的甘油一月桂酸酯抑制了產(chǎn)單核李斯特菌的生長，據(jù)報(bào)道低至5ppm的濃度使肉湯培養(yǎng)液中的細(xì)菌生長停滯延遲8小時(shí)(wang等，1977)。雖然濃度10ppm的甘油一月桂酸酯對(duì)產(chǎn)單核細(xì)胞李斯特菌菌株的生長沒有影響，但濃度為100和500ppm的甘油一月桂酸酯完全抑制了該菌株的生長。金黃色葡萄球菌是對(duì)甘油一月桂酸酯的生長抑制作用具有中等敏感性的一種細(xì)菌，據(jù)報(bào)道它對(duì)濃度約為200ppm的甘油一月桂酸酯的抑制作用敏感(Kabara等，1977)，這是與用于該研究的菌株敏感性比較的結(jié)果。
據(jù)報(bào)導(dǎo)LPS抑制了大范圍細(xì)菌的生長，包括大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和產(chǎn)單核細(xì)胞李斯特菌(Wolfson等，1993)。不幸地是，用于這些研究的大量成分(葡萄糖、H2O2、GOX、LPX和SCN-)濃度、培養(yǎng)基和培養(yǎng)溫度，使得難以與目前研究直接相比較。雖然總體上，在該研究中觀察到的菌株對(duì)乳過氧化物酶體系的相對(duì)敏感程度與其它學(xué)者報(bào)道(Gaya等，1991；Kamau等，1990；Bjork等，1975；Siragu等，1989)的相一致。但盡管LPS對(duì)大腸桿菌有殺菌特性，用于該研究的O157H7菌株的生長受抑制程度明顯低于革蘭陽性菌種所見的受抑制程度。也明顯低于大腸桿菌DH5a(一種常用的實(shí)驗(yàn)室菌株)的受抑制程度(Simmonds和Kennedy，未公開數(shù)據(jù))。其它學(xué)者也注意到大腸桿菌菌株對(duì)LPS的敏感性變化很大，Grieve等報(bào)導(dǎo)在3.6-7.3log單位之間范圍內(nèi)不同產(chǎn)腸毒素菌株的6小時(shí)活菌計(jì)數(shù)下降。
上述報(bào)導(dǎo)的結(jié)果強(qiáng)有力地證明了，甘油一月桂酸酯和LPS聯(lián)合具有用作防腐系統(tǒng)的巨大潛力。單用甘油一月桂酸對(duì)大腸桿菌O157H7沒有抑制作用，并且我們不知道任何大腸桿菌菌株對(duì)單獨(dú)使用的任何濃度的甘油一月桂酸酯的敏感程度。因此，甘油一月桂酸酯+LPS合用對(duì)大腸桿菌O157H7的協(xié)同效應(yīng)(抑制效果遠(yuǎn)超過單用LPS所預(yù)測的效果)是出乎意料的。相反，甘油一月桂酸酯+LPS合用對(duì)金黃色葡萄球菌的抑制作用就不使人感到驚奇，因?yàn)槊糠N試劑單獨(dú)使用都有明顯的抑制效果。但是一個(gè)出乎意料的結(jié)果是該聯(lián)合體系得到的金黃色葡萄球菌的受抑制程度。甘油一月桂酸酯用作食品防腐劑的一個(gè)問題通常是，達(dá)到所需抑制水平需要的甘油一月桂酸酯量可能會(huì)使制造過程不經(jīng)濟(jì)，或在食品中產(chǎn)生不需要的器官感覺性質(zhì)(質(zhì)感、味道)。上述報(bào)導(dǎo)的結(jié)果表明，在甘油一月桂酸酯的濃度大大低于單用甘油一月桂酸酯時(shí)要達(dá)到相同抑制效果所需的濃度時(shí)，甘油一月桂酸酯+LPS合用仍是有效的。
B部分本部分進(jìn)一步說明了本發(fā)明的各方面內(nèi)容。
將接種金黃色葡萄球菌R37或大腸桿菌O157H7(-vt)的肉湯培養(yǎng)系統(tǒng)(Todd-Hewitt肉湯，THB)用作篩選系統(tǒng)，來評(píng)價(jià)不同脂質(zhì)成分。在THB中以37℃過夜培養(yǎng)菌株，并將其分裝到試管中。金黃色葡萄球菌和大腸桿菌的初始裝量都是1×105每毫升。
乳過氧化物酶體系即LPS所含成分的濃度為20毫克/升乳過氧化物酶(c.3000單位活性/升)、葡萄糖氧化酶(c.300單位活性/升)、290毫克/升硫氰酸根離子(496毫克/升NaSCN)和12000毫克/升葡萄糖。使微生物生長，然后用分光光度計(jì)(Spectronic 20D)定期測量肉湯的吸光度(600納米)的增加48小時(shí)，并附上了數(shù)據(jù)列表。
如表1總結(jié)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明，許多脂質(zhì)成分(脂肪酸和一元酯)與乳過氧化物酶體系合用時(shí)，顯示了抗微生物效力。甘油一月桂酸酯是對(duì)金黃色葡萄球菌最有效的脂質(zhì)成分，并且在該簡單體系中，它的效力和含有和不含有乳過氧化物酶體系的單一體系的相同。表1數(shù)據(jù)顯示，對(duì)于革蘭陽性金黃色葡萄球菌和革蘭陰性大腸桿菌的協(xié)同作用是明顯的，但對(duì)金黃色葡萄球菌的殺菌效果更大。甘油一月桂酸酯的效力近似于單獨(dú)使用或在LPS存在時(shí)的甘油一月桂酸酯對(duì)大腸桿菌的效力。但是，無論LPS存在與否，十二烷基硫酸鈉對(duì)大腸桿菌都很有效。
表1脂質(zhì)成分與乳過氧化物酶體系合用對(duì)肉湯培養(yǎng)液中細(xì)菌生長的抑制作用。該數(shù)據(jù)表示為48小時(shí)后細(xì)菌生長受到50％或100％抑制時(shí)脂質(zhì)成分的濃度；例如100/250是指生長受到約50％抑制時(shí)脂質(zhì)成分濃度為100ppm，受到完全抑制時(shí)脂質(zhì)成分為250ppm；*表明脂質(zhì)成分的濃度高達(dá)1000ppm時(shí)微生物也未受抑制。

表2和表3提供了用金黃色葡萄球菌R37接種牛奶和碎肉的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。LPS/甘油一月桂酸酯聯(lián)合的協(xié)同效應(yīng)是明顯的。
表2對(duì)牛奶中甘油一月桂酸酯(1000ppm)+LPS(含有20毫克/升乳過氧化物酶的LPS)體系的評(píng)價(jià)(金黃色葡萄球菌R37，37℃；cfu/毫升)。

表3對(duì)肉糜(金黃色葡萄球菌R37，37℃；cfu/克)中甘油一月桂酸酯(1000ppm)+乳過氧化物酶(含200毫克/千克乳過氧化物酶體系的LPS)體系的評(píng)價(jià)。

表4和表5提供了牛奶用大腸桿菌O157H7(革蘭陰性組織)或金黃色葡萄球菌R37(革蘭陽性組織)接種的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
表4對(duì)牛奶(大腸桿菌O157H712℃；cfu/毫升)中一元月桂酸酯+LPS對(duì)革蘭陰性組織抗微生物效果的評(píng)價(jià)。LPX與GOX(酶的活性單位)之比為9∶1，硫氰酸根離子和葡萄糖的含量均為12毫克/升。

表5對(duì)牛奶中一元月桂酸酯+LPS對(duì)革蘭陽性菌(金黃色葡萄球菌R37，12℃；cfu/毫升；成分濃度和表4的一樣)抗微生物效果的評(píng)價(jià)。

LPS/甘油一月桂酸酯合用的效力還是明顯的。
表6提供了兩次實(shí)驗(yàn)結(jié)果，它顯示在特定環(huán)境中，牛奶本身的存在實(shí)際上對(duì)甘油一月桂酸酯的處理效力有抑制作用。也就是說，甘油一月桂酸酯的抗微生物效力會(huì)受到天然存在于牛奶中的正常水平脂質(zhì)(通常是甘油三酯形式)的不利影響。相似地，甘油一月桂酸酯和LPS聯(lián)合的效力也會(huì)受到培養(yǎng)基中牛奶(因此是脂質(zhì))濃度的影響(表7)。但是(競爭)脂質(zhì)含量對(duì)甘油一月桂酸酯+LPS合用的影響要小于它對(duì)單用的甘油一月桂酸酯的影響；換句話說，協(xié)同效應(yīng)更大。
表637℃時(shí)Todd-Hewitt肉湯(THB)牛奶混合物中不同牛奶(即脂質(zhì)量)含量對(duì)甘油一月桂酸酯體系抗金黃色葡萄球菌R37(cfu/毫升)的影響比較。

表737℃時(shí)THB/牛奶混合物中不同牛奶(即脂質(zhì))含量對(duì)甘油一月桂酸酯+乳過氧化物酶體系(含有5ppmLPX)抗金黃色葡萄球菌R37(cfu/毫升)的影響比較。

表8和表9報(bào)告的實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)一步證明了LPS/甘油一月桂酸酯合用的協(xié)同效應(yīng)。
表8通過比較37℃時(shí)LPS、或單用的甘油一月桂酸酯體系、和甘油一月桂酸酯+LPS的抗牛奶中革蘭陽性細(xì)菌金黃色葡萄球菌R37的效果，得出的諸成分的協(xié)同效應(yīng)。

表9通過比較37℃時(shí)單用甘油一月桂酸酯體系、和甘油一月桂酸酯+LPS在抗牛奶中革蘭陽性細(xì)菌金黃色葡萄球菌R37的效果，得出的諸成分的協(xié)同效應(yīng)。

如表8和表9所總結(jié)的那樣，單用LPS對(duì)金黃色葡萄球菌R37沒有抑制效力。單用1000ppm的甘油一月桂酸酯，如表8所報(bào)告有少許效力(1-2log)，但低于500ppm，如表9報(bào)告沒有效力。而甘油一月桂酸酯和LPS合用的協(xié)同效應(yīng)(與單用甘油一月桂酸酯或單用LPS相比)十分明顯。脂質(zhì)的存在和脂質(zhì)量都會(huì)影響協(xié)同效應(yīng)的程度。脂質(zhì)存在時(shí)，該聯(lián)合組合物的抗微生物效力比單用甘油一月桂酸酯的抗微生物效力大大增強(qiáng)。而且，抗微生物性組合物的效力還受脂質(zhì)含量比例的影響。
表10提供了評(píng)價(jià)單用甘油一月桂酸酯時(shí)濃度對(duì)THB中金黃色葡萄球菌的效力的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。在該實(shí)驗(yàn)中，要求濃度僅為25或50ppm的甘油一月桂酸酯對(duì)金黃色葡萄球菌數(shù)有顯著作用。50ppm的甘油一月桂酸酯處理的效力等于表6中500ppm達(dá)到的效力。如表10報(bào)告的實(shí)驗(yàn)在無脂肪培養(yǎng)液中進(jìn)行，這些比較進(jìn)一步證明了其它脂質(zhì)的存在對(duì)甘油一月桂酸酯效力有折衷影響。
表1037℃時(shí)甘油一月桂酸酯的不同濃度對(duì)金黃色葡萄球菌R37數(shù)(cfu/毫升)的影響比較。

參見表6-10，100％牛奶溶液含有3％左右的牛奶脂質(zhì)。濃度為500ppm的甘油一月桂酸酯表示0.05克/100毫升(0.05％)。由上述可清楚地知道，所選的抗微生物性脂質(zhì)成分必須超過某種臨界濃度(以占總脂質(zhì)的百分?jǐn)?shù)表示)，以保證整個(gè)組合物的顯著抗微生物效力。
表11提供了根據(jù)所加入的抗微生物性脂質(zhì)(此例中是甘油一月桂酸酯)水平分類的有關(guān)數(shù)據(jù)總結(jié)，以實(shí)際含量和占總脂質(zhì)的百分?jǐn)?shù)計(jì)。表11的數(shù)據(jù)表明，3.2％甘油一月桂酸酯是濃度邊緣，因?yàn)榇藭r(shí)的效力是變量，對(duì)于單用甘油一月桂酸酯，5或6小時(shí)的細(xì)菌數(shù)下降范圍是1log-4log，對(duì)于甘油一月桂酸酯+LPS，細(xì)菌數(shù)下降范圍是3log-8log。
表11，表2、8、9和10數(shù)據(jù)的總結(jié)它證明了該抗微生物性組合物的效力和受存在的甘油一月桂酸酯的量和總脂質(zhì)與甘油一月桂酸酯比例的影響(37℃時(shí)5或6小時(shí)后金黃色葡萄球菌數(shù)的下降)。

因此本申請(qǐng)人提出，所選的抗微生物性脂質(zhì)成分的濃度必須等于或大于脂質(zhì)總含量的5％，從而將協(xié)同抗微生物效應(yīng)包括在內(nèi)。
因此就牛奶而言，具有抗微生物性能的游離脂肪酸(或它們的衍生物)必須占脂質(zhì)總含量的5％以上，使牛奶轉(zhuǎn)化成抗微生物性組合物，以得到基本的和穩(wěn)定的抗微生物效果。這種組合物能有效抗革蘭陽性(如金黃色葡萄球菌)和革蘭陰性(如大腸桿菌，見表5)細(xì)菌。
該含量的抗微生物性脂質(zhì)只能通過加入本發(fā)明所選的抗微生物性脂質(zhì)或其衍生物而達(dá)到。
實(shí)驗(yàn)測試了該體系所有成分的存在對(duì)保證有效抗微生物性組合物的重要性，結(jié)果總結(jié)于表12。
制備了含下述組合物的簡單培養(yǎng)基含有細(xì)菌培養(yǎng)用胰化蛋白胨的磷酸鹽緩沖鹽水(pH 7)和酵母提取物(PBS/T/Y)用MilliQ水將195毫升0.2摩爾NaH2PO4、305毫升0.2摩爾NaH2PO4和8.994克NaCl、10克細(xì)菌培養(yǎng)用胰化蛋白胨、5克酵母提取物制成1升組合物，在帶有螺帽蓋的試管中以121℃高壓滅菌處理15分鐘。試管放置培養(yǎng)溫度(37℃)直至使用。
在實(shí)驗(yàn)中使用金黃色葡萄球菌R37或大腸桿菌O157H7(-vt)兩個(gè)菌株(如表1的實(shí)驗(yàn))，然后根據(jù)微生物抗甘油一月桂酸酯+LPS的滴定，選出甘油一月桂酸酯和LPS對(duì)此二菌株的基本聯(lián)合，以確定對(duì)此二種細(xì)菌的敏感度金黃色葡萄球菌(含有100毫克LPX(乳過氧化物酶)/升的LPS和20毫克/升甘油一月桂酸酯)和大腸桿菌(含有100毫克LPX/升的LPS和50毫克/升甘油一月桂酸酯)。LPX與葡萄糖氧化酶(GOX)之比為9∶1，并且以12毫克/升加入硫氰酸鹽和葡萄糖。
表12各成分對(duì)保證該抗微生物體系效力的重要性。抑制程度用微生物對(duì)數(shù)增長期的初始時(shí)間和平臺(tái)(最大吸光值)時(shí)間來定義(37℃培養(yǎng)小時(shí))。
大腸桿菌O157H7

金黃色葡萄球菌R37

再次證明了本申請(qǐng)中方法的效果。
工業(yè)實(shí)用性本申請(qǐng)人發(fā)現(xiàn)關(guān)于LPS和甘油一月桂酸酯之間的協(xié)同效應(yīng)(它會(huì)如過氧化物酶體系和抗微生物性脂肪酸/脂肪酸衍生物之間的相互作用)具有許多應(yīng)用價(jià)值。其中主要優(yōu)點(diǎn)在于這種協(xié)同性抗微生物效力能在易于產(chǎn)生污染或損壞的產(chǎn)品中再生。這類產(chǎn)品包括食品、化妝品和保健品。
在食品用途中，當(dāng)脂肪酸成分是甘油一月桂酸酯時(shí)本發(fā)明特別有益。這反映了以下事實(shí)甘油一月桂酸酯具有GRAS狀態(tài)，并已經(jīng)用于一些食品中作為乳化劑了。
可使用本發(fā)明成分的食品可以是任何易于損壞的食品和飲食補(bǔ)充物及補(bǔ)品。本發(fā)明特別適用于乳制品(如酸奶)、魚制品(特別是水生有殼類動(dòng)物)和肉制品(包括碎肉和肉骨(carcasses))、以及動(dòng)物飼料。應(yīng)當(dāng)理解，這種“飼料”指的是最通用的意思，可包括水，該飼料所喂養(yǎng)的家畜包括、但不限于牛、綿羊、豬、公山羊、馬和鳥類(如家禽)。
對(duì)于這種產(chǎn)品，各成分可一起加入，也可單獨(dú)加入。在一些例子中，當(dāng)其產(chǎn)品天然含有一種或多種合適量的成分時(shí)，只需要僅加入其余成分。
也可加入諸成分，形成一種混合物，作為產(chǎn)品(如乳制品)的一部分，或可以應(yīng)用于至少部分地涂敷到產(chǎn)品(如魚制品)上。
當(dāng)諸成分是單獨(dú)加入時(shí)，可至少將過氧化物酶和脂肪酸/脂肪酸衍生物置于不同容器中，以提供預(yù)制包。
也可用抗微生物性組合物的形式將本發(fā)明用于一般用途。這種組合物可包括合理量的所有四種成分。然后，可將該組合物用于處理表面(如，用于制備或處理食品的表面或保健品的表面)，以保證至少是減少細(xì)菌菌降，如果不是消除所有細(xì)菌的話。
本發(fā)明的抗微生物性組合物也可用于補(bǔ)充其它制劑的活性，在這種情況下，另外的試劑可分開使用，或更常地作為與現(xiàn)有成分的混合物部分。
還可以包含其它任選成分，理想的是包括其它抗微生物劑、螯合劑、酶和營養(yǎng)補(bǔ)品成分。具體地說，該組合物還可以包括任何下列物質(zhì)· 螯合劑，如EDTA；· 酚，如對(duì)羥基苯甲酸的酯(對(duì)羥基苯甲酸酯)，包括羥基苯甲酸甲酯、羥基苯甲酸乙酯、羥基苯甲酸丙酯、羥基苯甲酸丁酯，或叔丁基羥基苯甲醚(BHA)的庚酯。
· 有機(jī)酸，(稱作防腐劑)，如富馬酸、醋酸、丙炔酸、乳酸、山梨酸、苯甲酸、檸檬酸或這些酸的任何衍生物；· 桿菌素，如乳酸鏈球菌肽；· 溶菌酶；· 牛奶提取物。
本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該知道，上述描述只是以實(shí)施例方式提供的，在不違背本發(fā)明范圍的情況下可以對(duì)其進(jìn)行改進(jìn)和/改變，這些只受權(quán)利要求的法定范圍的限制。
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權(quán)利要求
1.抗微生物性組合物的制備方法，其特征在于該方法包括形成下列成分的混合物a)過氧化物酶體系(PS)，包括i)過氧化物酶；ii)過氧化物源；iii)能產(chǎn)生抗微生物性氧化產(chǎn)物的輔助因子；b)至少一種脂肪酸或脂肪酸衍生物，其中所述的脂肪酸或衍生物的含量是有效量，能有效地與所述的過氧化物酶體系相互作用，產(chǎn)生更高的抗微生物效力。
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述的過氧化物酶是乳過氧化物酶。
3.如權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于所述的過氧化物是過氧化氫。
4.如權(quán)利要求1-3中任何一項(xiàng)所述的方法，其特征在于所述的輔助因子選自硫氰酸鹽或碘化物。
5.如權(quán)利要求1-4中任何一項(xiàng)所述的方法，其特征在于所述的輔助因子是硫氰酸鹽。
6.如權(quán)利要求1-5中任何一項(xiàng)所述的方法，其特征在于所述的脂肪酸是抗微生物性脂肪酸或脂肪酸的抗微生物性衍生物。
7.如權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于所述的抗微生物性脂肪酸或脂肪酸的抗微生物性衍生物的含量至少占所述組合物中脂質(zhì)總含量的重量5％。
8.如權(quán)利要求1-7中任何一項(xiàng)所述的方法，其特征在于所述的成分(b)是或包括選自C8、C10、C12、C14和C16脂肪酸的抗微生物性脂肪酸或其衍生物、或它們的混合物。
9.如權(quán)利要求1-8中任何一項(xiàng)所述的方法，其特征在于所述的成分(b)是或包括脂肪酸的抗微生物性酯或它們的鹽。
10.如權(quán)利要求1-5中任何一項(xiàng)所述的方法，其特征在于所述的成分(b)是或包括甘油一月桂酸酯即1-單十二烷酰-外消旋-甘油酯或其鹽，十二烷基硫酸鈉。
11.如權(quán)利要求10所述的方法，其特征在于所述的成分(b)是甘油一月桂酸酯。
12.如前述權(quán)利要求中任何一項(xiàng)所述的方法，其特征在于所述的組合物是將一種或多種成分加入到已經(jīng)含有其余成分的預(yù)制混合物中形成的。
13.如權(quán)利要求12所述的方法，其特征在于所述的預(yù)制混合物是食品、化妝品或保健品。
14.如權(quán)利要求13所述的方法，其特征在于所述的食品是飲食補(bǔ)充物、補(bǔ)品、奶制品、肉制品或魚制品。
15.如權(quán)利要求13所述的方法，其特征在于所述的食品是動(dòng)物飼料。
16.如權(quán)利要求1-11中任何一項(xiàng)所述的方法，其特征在于所述的組合物在形成時(shí)由混合的所述成分組成。
17.抗微生物性組合物，其特征在于它用權(quán)利要求1-16中任何一項(xiàng)所定義的方法制備。
18.適用于制備抗微生物性組合物的預(yù)制組合物，其特征在于它包括至少兩種選自以下成分i)過氧化物酶；ii)過氧化物源；iii)能產(chǎn)生抗微生物性氧化產(chǎn)物的輔助因子；iv)至少一種抗微生物性脂肪酸或脂肪酸的抗微生物性衍生物，其中過氧化物酶和過氧化物源都存在時(shí)要保持分離。
19.如權(quán)利要求18所述的預(yù)制組合物，其特征在于所述的過氧化物酶是乳過氧化物酶。
20.適用于制備抗微生物性組合物的預(yù)制包，其特征在于它包括置于隔離容器中的過氧化物酶和至少一種抗微生物性脂肪酸或脂肪酸的抗微生物性衍生物。
21.如權(quán)利要求20所述的預(yù)制包，其特征在于所述的過氧化物酶是乳過氧化物酶。
22.如權(quán)利要求20或21所述的預(yù)制包，其特征在于所述的套組還包括過氧化物源和/或能產(chǎn)生抗微生物性氧化產(chǎn)物的輔助因子。
23.抗微生物性組合物，其特征在于該組合物包括過氧化物酶、能產(chǎn)生抗微生物性氧化產(chǎn)物的輔助因子和至少一種抗微生物性脂肪酸或脂肪酸的抗微生物性衍生物，其中所述的脂肪酸及其衍生物的含量能有效地與所述的過氧化物酶和所述的輔助因子在過氧化物存在下發(fā)生協(xié)同性相互作用，從而產(chǎn)生提高的抗微生物效力。
24.如權(quán)利要求23所述的抗微生物性組合物，其特征在于該組合物還包含過氧化物源。
25.如權(quán)利要求23或24所述的抗微生物性組合物，其特征在于所述的過氧化物酶是乳過氧化物酶。
26.如權(quán)利要求23-25中任何一項(xiàng)所述的抗微生物性組合物，其特征在于所述的組合物包括其它抗微生物劑或螯合劑或兩者。
27.如權(quán)利要求26所述的抗微生物性組合物，其特征在于所述的其它抗微生物劑選自苯酚、有機(jī)酸、桿菌素、這些物質(zhì)的衍生物、和它們的混合物，或者從牛奶中提取的或發(fā)現(xiàn)的抗微生物成分或這些成分的混合物。
28.如權(quán)利要求26所述的抗微生物性組合物，其特征在于所述的螯合劑是EDTA。
29.如權(quán)利要求23-28中任何一項(xiàng)所述的抗微生物性組合物，其特征在于所述的抗微生物性脂肪酸或衍生物選自C8、C10、C12、C14和C16脂肪酸或其衍生物、或它們的混合物。
30.如權(quán)利要求23-28中任何一項(xiàng)所述的抗微生物性組合物，其特征在于所述的抗微生物性脂肪酸或衍生物是脂肪酸的抗微生物性酯或其鹽。
31.如權(quán)利要求23-28中任何一項(xiàng)所述的抗微生物性組合物，其特征在于所述的抗微生物性脂肪酸或衍生物是或包括甘油一月桂酸酯即1-單十二烷酰-外消旋-甘油酯，或其鹽。
32.如權(quán)利要求31所述的抗微生物性組合物，其特征在于所述的抗微生物性脂肪酸或衍生物是或包括十二烷基硫酸鈉，作為甘油一月桂酸酯的鹽。
33.如權(quán)利要求23-32中任何一項(xiàng)所述的抗微生物性組合物，其特征在于所述的抗微生物性脂肪酸或脂肪酸的抗微生物性衍生物的含量至少占所述組合物中脂質(zhì)總含量的5重量％。
34.產(chǎn)品，其特征在于它包括下列成分i)過氧化物酶；ii)過氧化物源；iii)能產(chǎn)生抗微生物性氧化產(chǎn)物的輔助因子；iv)至少一種抗微生物性脂肪酸或脂肪酸的抗微生物性衍生物，這種產(chǎn)品能阻止微生物生長。
35.如權(quán)利要求34所述的產(chǎn)品，其特征在于所述的過氧化物酶是乳過氧化物酶。
36.如權(quán)利要求34或35所述的產(chǎn)品，其特征在于所述的產(chǎn)品能阻止革蘭陽性和革蘭陰性細(xì)菌生長。
37.如權(quán)利要求34-36中任何一項(xiàng)所述的產(chǎn)品，其特征在于所述的抗微生物性脂肪酸或脂肪酸的抗微生物性衍生物的含量至少占所述組合物中脂質(zhì)總含量的5重量％。
38.如權(quán)利要求34-37中任何一項(xiàng)所述的產(chǎn)品，其特征在于所述的產(chǎn)品是食品。
39.如權(quán)利要求38所述的產(chǎn)品，其特征在于所述的產(chǎn)品是飲食補(bǔ)充物、補(bǔ)品乳制品、肉制品、魚制品或動(dòng)物飼料。
40.如權(quán)利要求34-37中任何一項(xiàng)所述的產(chǎn)品，其特征在于所述產(chǎn)品是化妝品。
41.如權(quán)利要求34-37中任何一項(xiàng)所述的產(chǎn)品，其特征在于所述的產(chǎn)品是保健品。
42.表面處理方法，其特征在于該方法包括將有效量的權(quán)利要求23-33中任何一項(xiàng)所述的抗微生物性組合物涂敷到所述表面的步驟。
43.如權(quán)利要求42所述的方法，其特征在于所述的表面是用于制備和/或處理食品的表面。
44.使產(chǎn)品產(chǎn)生抗微生物性的產(chǎn)品處理方法，其特征在于該方法包括將權(quán)利要求23-33中任何一項(xiàng)所述的有效量的抗微生物性組合物加入到所述產(chǎn)品中的步驟。
全文摘要
過氧化物酶體系如乳過氧化物酶體系(LPS)與抗微生物性脂肪酸或脂肪酸衍生物結(jié)合,產(chǎn)生了一種協(xié)同性抗微生物性組合物。經(jīng)披露,這些組合物可用于使表面、以及諸如食品或化妝品類產(chǎn)品有微生物抵抗力。該組合物的優(yōu)選形式包含過氧化物酶、甘油一月桂酸酯過氧化物源的十二烷基硫酸鈉和硫氰酸根離子。
文檔編號(hào)A23L3/3508GK1350428SQ00807544
公開日2002年5月22日 申請(qǐng)日期2000年5月15日 優(yōu)先權(quán)日1999年5月14日
發(fā)明者P·F·芬尼塞, R·S·西蒙茲 申請(qǐng)人:奧它古大學(xué), 塔圖阿合作奶制品有限公司