專利名稱：平菇液的制備方法
技術領域：
本發(fā)明涉及平菇液的培養(yǎng)基，更具體涉及一種平菇液的制備方法。
目前用于臨床微生物檢測的培養(yǎng)基，主要成分多為進口原料，如牛肉膏粉、多價蛋白胨際胨等動物組織提取物作為細菌生長所需的營養(yǎng)物質。由于這些成分依賴進口，增加了實際成本支出，并且極易受潮而失效。
另一種血瓊脂培養(yǎng)基，牛肉膏粉2.5克。多價蛋白胨5克，氯化鈉2.5克，瓊脂粉5克，羊血30克，PH7.2-7.4，蒸餾水600克。首先先將牛肉膏粉、多價蛋白胨、氯化鈉、瓊脂粉混合均勻后，高壓滅菌冷卻至50℃，加上無菌血液，旋轉式充分攪拌均勻后傾制平板；再一種普通營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基，牛肉膏粉1.5克、多價蛋白胨5克，氯化鈉混合均勻后，加蒸餾水600克，高壓滅菌冷卻至50℃，分裝試管中。上述幾種有商品化培養(yǎng)基，但成本高，對臨床標本的檢測及感染監(jiān)測有一定影響和約束，從而影響病人的早期診斷和治療。
本發(fā)明的目的是提供了一種平菇液的制備方法，配制簡便，成本低，能準確對臨床標本的檢測及感染監(jiān)測，解決了病人的早期診斷和治療的問題。
為了達到上述目的，本發(fā)明采用以下技術措施首先將平菇1000-1200克洗凈，切成小塊，將平菇小塊置于容器內加入1500-2000克蒸餾水，煮沸10-40分鐘，冷卻后用紗布、脫脂棉及定性濾紙過濾至清亮透明，再用蒸餾水補足500-1200克，即得平菇基礎液；其次是在平菇基礎液中加入定量氯化鈉，待其溶解后，調整PH值7.0-7.8，用濾紙過濾后分裝于試管中，每管2-8克，高壓滅菌10-30分鐘，冷卻后，隨機抽取2支做無菌試驗，若無菌生長則可供一般細菌培養(yǎng)用，也可以此為基礎液配制系列糖發(fā)酵管及無糖瓊脂培養(yǎng)基；第三是血瓊脂培養(yǎng)基，取平菇基礎液400-600克，氯化鈉1.5-3.5克、瓊脂粉3-7克，待溶解后，調PH值7.0-7.8，高壓滅菌，冷卻至50-65℃后，加入羊血10-40克，搖勻，傾注于無菌培養(yǎng)皿內，此培養(yǎng)基可用于分離營養(yǎng)要求較高的病原菌及一般標本的分離培養(yǎng)。
本發(fā)明與現有技術相比，具有以下優(yōu)點和效果，設計合理，配制簡便，成本低，營養(yǎng)豐富，能滿足實驗室細菌檢測工作的需要，具有廣泛的社會和經濟效益，具有良好的應用前景及推廣價值。
收集病人標本共計220份，其中自行研制的培養(yǎng)基陽性78份，占陽性檢出率的38％(78/220)，傳統(tǒng)培養(yǎng)基陽性73份，陽性檢出率33％(73/220)。以上試驗結果經統(tǒng)計學X2試驗，P＞0.05，無顯著性差異。通過兩種培養(yǎng)基分離出的病原菌主要是葡萄球菌、腸桿菌科，假單胞菌屬等。其對照試驗均達到預期效果。完全可以取代傳統(tǒng)培養(yǎng)基。
實施例首先將平菇1000克洗凈，切成小塊，將平菇小塊置于容器內加入1500克蒸餾水，煮沸30分鐘，冷卻后用紗布、脫脂棉及定性濾紙過濾至清亮透明，再用蒸餾水補足至1000克，即得平菇基礎液；其次是在平菇基礎液中加入氯化鈉，待其溶解后，調整PH7.4-7.6，用濾紙過濾后分裝于試管中，每管5克，高壓滅菌20分鐘，冷卻后，隨機抽取2支做無菌試驗，若無菌生長則或可供一般細菌培養(yǎng)用，也可以此為基礎液配制系列糖發(fā)酵管及無糖瓊脂培養(yǎng)基；第三是血瓊脂培養(yǎng)基，取平菇基礎液500克，氯化鈉2.5克、瓊脂粉5克，待溶解后，調PH值7.4-7.6，高壓滅菌，冷卻至56℃后，加入羊血30克，輕輕搖勻，傾注于無菌培養(yǎng)皿內，此培養(yǎng)基可用于分離營養(yǎng)要求較高的病原菌及一般標本的分離培養(yǎng)。
權利要求
1.一種平菇液的制備方法，包括下列步驟A、將平菇洗凈，切成小塊，將平菇小塊置于容器內加入蒸餾水，煮沸30-40分鐘，冷卻后用紗布、脫脂棉及定性濾紙過濾，再用蒸餾水補足，即得平菇基礎液；B、在平菇基礎液中加入氯化鈉，溶解后，調整PH7.0-7.8，用濾紙過濾后分裝于試管中，每管2-8克，高壓滅菌10-30分鐘；C、血瓊脂培養(yǎng)基，取平菇基礎液400-600克，氯化鈉1.5-3.5克、瓊脂粉3-7克，溶解后，調PH值7.0-7.8，高壓滅菌，冷卻至50-60℃后，加入羊血10-40克，搖勻，傾注于無菌培養(yǎng)皿內。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種平菇液的制備方法，首先將平菇洗凈，切成小塊，將平菇小塊置于容器內加入蒸餾水，煮沸，冷卻后用紗布、脫脂棉及定性濾紙過濾，再用蒸餾水補足即得平菇基礎液；其次是在平菇基礎液中加入氯化鈉，溶解后，調整pH值，用濾紙過濾后分裝于試管中，高壓滅菌；第三是血瓊脂培養(yǎng)基，取平菇基礎液，氯化鈉、瓊脂粉，溶解后，調pH值，高壓滅菌，冷卻后，加入羊血搖勻，傾注于無菌培養(yǎng)皿內。本發(fā)明制備簡便，成本低，營養(yǎng)豐富，能準確對臨床標本的檢測及感染監(jiān)測，具有良好的應用前景和推廣使用價值。
文檔編號C12Q1/04GK1398981SQ0111437
公開日2003年2月26日 申請日期2001年7月25日 優(yōu)先權日2001年7月25日
發(fā)明者申建維, 余新華, 袁瑋, 梅國華, 楊思義 申請人:武漢鋼鐵(集團)公司