專利名稱：小麥高分子量麥谷蛋白14亞基基因的核酸序列及其應(yīng)用的制作方法
一、所屬領(lǐng)域本發(fā)明屬于生物基因工程技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種小麥高分子量麥谷蛋白14亞基(HMW-GS14)基因的核酸序列，及其基于該序列通過生物技術(shù)方法改良小麥加工品質(zhì)的應(yīng)用。
小麥高分子量麥谷蛋白(HMW glutenin)14和15亞基存在于面包小麥小偃六號(hào)、陜225等品種中，是G1u-b1基因位點(diǎn)的一種變異類型，該亞基類型的出現(xiàn)與面包加工品質(zhì)呈正相關(guān)，是中國(guó)獨(dú)特的優(yōu)質(zhì)基因資源。
本發(fā)明以我國(guó)優(yōu)質(zhì)麥包小麥小偃六號(hào)為材料，以蛋白末端測(cè)序結(jié)果為基礎(chǔ)，通過PCR擴(kuò)增到下列HMW-GS14基因完整的編碼區(qū)，并將該基因克隆入一種克隆載體中。
本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是小麥高分子量麥谷蛋白14亞基(HMW-GS 14)基因序列，其特征在于，該基因序列為1 TCCACCGAGA TGGCTAAGCG CCTGGTCCTC TTTGCGGCAG TAGTCGTCGC51 CCTCATGGCT CTCACCGCCG CTGAAGGTGA GGCCTCTGGA CAACTACAAT101 GTGAGCGCGA GCTCCGGAAG CGCGAGCTCG AGGCATACCA ACAGGTGGTG151 GACCAGCAAC TCCGAGACGT TAGCCCCGGG TACCGCCCCA TCACCGTCAG201 CCCGGGCACG AGACAATACG AGCAGCAACC TGTGGTGCCG TCCAAGGCCG251 GATCCTTCTA CCCCAGCGAG ACTACGCCTT CGCAGCAACT CCAACAAATG301 ATATTTTGGG GAATACCTGC ACTACTAAGA AGGTATTACC CAAGTGTAAC351 TTCTTCGCAG CAGGGGTCAT ACTATCCAGG CCAAGCTTTT CCGCAACAAT401 CAGGACAAGG ACAGCAGCCA GGACAAGGAC AGCAACCAGG ACAAAGGCAA451 CAAGATCAGC AGCCAGGACA AGGACAACAA GGGTACTACC CAACTTCTCC501 GCAACAGCCA GGACAAGGGC AACAACTGGG ACAAGGGCAA CCAGGGTACT551 ACCCAACTTC ACAGCAGCCA GGACAAAAGC AGCAGGCAGG ACAAGGGCAC601 CAATCAGGAC AAGGACAACA AAGGTACTAC CCAACTTCCC GCAACAGTAG651 CAGCAGGCAG GACAAGGGCA ACAATCAGGA CAAGGACAAC AAGGGTACTA701 CCCAACTTCC CCGCAACAGT CAGGACAAGG GCAACAACCG GGACAAGGGC751 AACCAGGGTA CTACCCAACT TCTCCGCAGC AGTCAGGACA ATGGCAGCAA801 CCAGGACAAG GGCAACAACC AGGACAAGGG CAGCAATCAG GACAAGGGCA851 ACAAGGTCAG CAGCAGTCAG GACAATGGCA GCAACCAGGA CAAGGGCAAC901 AACCAGGACA AGGGCAGCAA TCAGGACAAG GGCAACAAGG TCAGCAGCCA951 GGACAAGGGC AACGACCAGG ACAAGGACAA CAAGGGTACT ACCCAATTTC1001 TCCGCAACAG CCGGGACAAG GGCAACAATC AGGACAAGGG CAACCAGGGT1051 ACTACCCAAC TTCTTTGCGG CAGCCAGGAC AATGGCAGCA ACCAGGACAA1101 GGGCAGCAAC CAGGACAAGG GCAACAAGGT CAGCAGCCAG GACAAGGACA1151 ACAATCAGGA CAAGGACAAC AAGGATACTA CCCAACTTCT CTGCAACAGC1201 CAGGACAAGG GCAACAACTG GGACAAGGGC AACCAGGGTA CTACCCAACT1251 TCGCAGCAGT CGGAACAAGG GCAGCAGCCA GGACAAGGAA AACAACCAGG1301 ACAAGGACAA CAAGGGTACT ACCCAACTTC TCCGCAACAG TCAGGACAAG1351 GGCAACAACT GGGACAAGGG CAACCAGGGT ACTACCCAAC TTCTCCACAG1401 CAGTCAGGAC AAGGACAACA ATCAGGACAA GGACAACAAG GGTACTACCC1451 AACTTCTCCG CAACAGTCAG GACAAGGGCA ACAACCGGGA CAAGGGCAAT1501 CGGGGTACTT CCCAACTTCT CGGCAGCAGT CAGGACAAGG GCAGCAGCCA1551 GGACAAGGAC AACAGTCGGG ACAAGGGCAA CAAGGTCAGC AACCAGGACA1601 AGGACAACAA GCGTACTACC CAACTTCTTC GCAACAGTCA AGACAAAGGC1651 AACAGGCAGG ACAATGGCAA CGACCGGGAC AAGGGCAACC AGGGTACTAC1701 CCAACCTCTC CACAGCAGCC AGGACAAGAG CAACAATCAG GACAAGCGCA1751 ACAATCAGGA CAATGGCAAC AAGTGTACTA CCCAACTTCT CCGCAACAGC1801 CAGGCCAATT GCAACAACCA GCACAAGGGC AACAACCAGC ACAAGGGCAA1851 CAATCAGCAC AAGAGCAACA GCCAGGGGCA ACAAGGGTAC TACCCAACTT1901 CTCCGCAACA GTCAGGACAA GGGCAACAAG GGTACTACCC AACTTCTCCG1951 CAACAGTCAG GACAAGGGCA GCAGCCAGGA CAAGGACAAC AGCCAAGACA2001 AGGGCAACAA GGGTACTACC CAATTTCTCC GCAGCAGTCA GGACAAGGGC2051 AACAAACAGG ACAAGGGCAA CAAGGATACT ACCCAACTTC TCCGCAGCAG2101 TCAGGACAAG GGCAACAACC AAGACATGAG CAACAGCCAG GACAATGGCT2151 GCAACCAGGA CAAGGGCAAC AAGGGTACTA TCCAACCTCT TCACAGCAGT2201 CAGGACAAGG GCAGCAATCA GGACAAGGGC AACAAGGGTA CTACCCAACT2251 TCTCTGTGGC AACCAGGACA AGGGCAACAA CCAGGACAAA GGCAACAAGG2301 CTACGACAGC CCATACCATG TTAGCGCGGA GTACCAGGCG GCCCGCCTAA2351 AGGTGGCAAA GGCGCAGCAG CTCGCGGCAC GGCTGCCGGC AATGTGCCGG2401 CTGGAGGGCA GCGACGCATT GTCGGCCAGG CAGTGATAGA ACTCTCTGCA2451 GCTTGCTTGG TGCTTGGGCA AT蛋白質(zhì)序列1 MAKRLVLFAAVVVALMALTAAEGEASGQLQCERELRKRELEAYQQVVDQQ51 LRDVSPGYRPITVSPGTRQYEQQPVVPSKAGSFYPSETTPSQQLQQMIFW101 GIPALLRRYYPSVTSSQQGSYYPGQAFPQQSGQGQQPGQGQQPGQRQQDQ151 QPGQGQQGYYPTSPQQPGQGQQLGQGQPGYYPTSQQPGQKQQAGQGHQSG201 QGQQRYYPTSRNSSSRQDKGNNQDKDNKGTTQLPRNSQDKGNNRDKGNQG251 TTQLLRSSQDNGSNQDKGNNQDKGSNQDKGNKVSSSQDNGSNQDKGNNQD301 KGSNQDKGNKVSSQDKGNDQDKDNKGTTQFLRNSRDKGNNQDKGNQGTTQ351 LLCGSQDNGSNQDKGSNQDKGNKVSSQDKDNNQDKDNKDTTQLLCNSQDK401 GNNWDKGNQGTTQLRSSRNKGSSQDKENNQDKDNKGTTQLLRNSQDKGNN451 WDKGNQGTTQLLHSSQDKDNNQDKDNKGTTQLLRNSQDKGNNRDKGNRGT501 SQLLGSSQDKGSSQDKDNSRDKGNKVSNQDKDNKRTTQLLRNSQDKGNRQ551 DNGNDRDKGNQGTTQPLHSSQDKSNNQDKRNNQDNGNKCTTQLLRNSQAN601 CNNQHKGNNQHKGNNQHKSNSQGQQGYYPTSPQQSGQGQQGYYPTSPQQS651 GQGQQPGQGQQPRQGQQGYYPISPQQSGQGQQTGQGQQGYYPTSPQQSGQ701 GQQPRHEQQPGQWLQPGQGQQGYYPTSSQQSGQGQQSGQGQQGYYPTSLW751 QPGQGQQPGQRQQGYDSPYHVSAEYQAARLKVAKAQQLAARLPAMCRLEG801 SDALSARQ本發(fā)明的小麥高分子量麥谷蛋白14亞基(HMW-GS 14)基因序列可以通過基因槍、農(nóng)桿菌介導(dǎo)、花粉管通道等本領(lǐng)域工作人員共知的方法導(dǎo)入小麥，培育出加工品質(zhì)優(yōu)良的小麥品種和小麥種質(zhì)。
小麥高分子量麥谷蛋白14亞基(HMW-GS 14)基因序列可以建立特異簡(jiǎn)捷的HMW-GS14+15的標(biāo)記體系，并通過該體系進(jìn)行定向育種，獲得加工品質(zhì)優(yōu)良的小麥新品種或新種質(zhì)。
根據(jù)該序列可以構(gòu)建HMW-GS14酵母表達(dá)載體，通過本領(lǐng)域共知的研究方法將HMW-GS14導(dǎo)入酵母，然后通過在面粉中添加該轉(zhuǎn)基因酵母提高面筋彈性。
本發(fā)明經(jīng)測(cè)序結(jié)果表明，HMW-GS14基因是不同于已經(jīng)公布的所有HMW-GS基因的一種新的HMW-GS基因類型，該序列特征顯示該序列的獨(dú)特之處和導(dǎo)致優(yōu)質(zhì)的潛在因素。
具體實(shí)施例方式
以下結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的詳細(xì)描述。
蛋白純化和末端序列分析取20mg小麥，放入1.5ml離心管中，加入150ul無水乙醇，5％的巰基乙醇，50度溫浴1小時(shí)。10％SDS-PAGE分離HMW-GS14亞基蛋白，并以雙向電泳鑒定為單點(diǎn)純?；厥漳康牡鞍?，電轉(zhuǎn)印到PVDF膜。通過Procise491型蛋白測(cè)序儀進(jìn)行蛋白末端序列分析。根據(jù)蛋白序列設(shè)計(jì)引物根據(jù)蛋白序列通過GCG軟件設(shè)計(jì)簡(jiǎn)并引物，序列如下P1 5′-ATG-GCT-AAG-CGC-CTG-GTC-CT-3′P1 5′-GGC-TAG-CCG-ACA-ATG-CGT-CG-3′基因的擴(kuò)增CTAB法提取小麥總DNA，利用下述條件擴(kuò)增目的基因 基因克隆將基因產(chǎn)物通過pGEM-T easy載體進(jìn)行直接克隆，并通過PCR驗(yàn)證克隆產(chǎn)物是否正確。
序列分析序列分析通過ABI370測(cè)序儀完成。序列結(jié)果如下1 TCCACCGAGA TGGCTAAGCG CCTGGTCCTC TTTGCGGCAG TAGTCGTCGC51 CCTCATGGCT CTCACCGCCG CTGAAGGTGA GGCCTCTGGA CAACTACAAT101 GTGAGCGCGA GCTCCGGAAG CGCGAGCTCG AGGCATACCA ACAGGTGGTG151 GACCAGCAAC TCCGAGACGT TAGCCCCGGG TACCGCCCCA TCACCGTCAG201 CCCGGGCACG AGACAATACG AGCAGCAACC TGTGGTGCCG TCCAAGGCCG251 GATCCTTCTA CCCCAGCGAG ACTACGCCTT CGCAGCAACT CCAACAAATG301 ATATTTTGGG GAATACCTGC ACTACTAAGA AGGTATTACC CAAGTGTAAC351 TTCTTCGCAG CAGGGGTCAT ACTATCCAGG CCAAGCTTTT CCGCAACAAT401 CAGGACAAGG ACAGCAGCCA GGACAAGGAC AGCAACCAGG ACAAAGGCAA451 CAAGATCAGC AGCCAGGACA AGGACAACAA GGGTACTACC CAACTTCTCC501 GCAACAGCCA GGACAAGGGC AACAACTGGG ACAAGGGCAA CCAGGGTACT551 ACCCAACTTC ACAGCAGCCA GGACAAAAGC AGCAGGCAGG ACAAGGGCAC601 CAATCAGGAC AAGGACAACA AAGGTACTAC CCAACTTCCC GCAACAGTAG651 CAGCAGGCAG GACAAGGGCA ACAATCAGGA CAAGGACAAC AAGGGTACTA701 CCCAACTTCC CCGCAACAGT CAGGACAAGG GCAACAACCG GGACAAGGGC751 AACCAGGGTA CTACCCAACT TCTCCGCAGC AGTCAGGACA ATGGCAGCAA801 CCAGGACAAG GGCAACAACC AGGACAAGGG CAGCAATCAG GACAAGGGCA851 ACAAGGTCAG CAGCAGTCAG GACAATGGCA GCAACCAGGA CAAGGGCAAC901 AACCAGGACA AGGGCAGCAA TCAGGACAAG GGCAACAAGG TCAGCAGCCA951 GGACAAGGGC AACGACCAGG ACAAGGACAA CAAGGGTACT ACCCAATTTC1001 TCCGCAACAG CCGGGACAAG GGCAACAATC AGGACAAGGG CAACCAGGGT1051 ACTACCCAAC TTCTTTGCGG CAGCCAGGAC AATGGCAGCA ACCAGGACAA1101 GGGCAGCAAC CAGGACAAGG GCAACAAGGT CAGCAGCCAG GACAAGGACA1151 ACAATCAGGA CAAGGACAAC AAGGATACTA CCCAACTTCT CTGCAACAGC1201 CAGGACAAGG GCAACAACTG GGACAAGGGC AACCAGGGTA CTACCCAACT1251 TCGCAGCAGT CGGAACAAGG GCAGCAGCCA GGACAAGGAA AACAACCAGG1301 ACAAGGACAA CAAGGGTACT ACCCAACTTC TCCGCAACAG TCAGGACAAG1351 GGCAACAACT GGGACAAGGG CAACCAGGGT ACTACCCAAC TTCTCCACAG1401 CAGTCAGGAC AAGGACAACA ATCAGGACAA GGACAACAAG GGTACTACCC1451 AACTTCTCCG CAACAGTCAG GACAAGGGCA ACAACCGGGA CAAGGGCAAT1501 CGGGGTACTT CCCAACTTCT CGGCAGCAGT CAGGACAAGG GCAGCAGCCA1551 GGACAAGGAC AACAGTCGGG ACAAGGGCAA CAAGGTCAGC AACCAGGACA1601 AGGACAACAA GCGTACTACC CAACTTCTTC GCAACAGTCA AGACAAAGGC1651 AACAGGCAGG ACAATGGCAA CGACCGGGAC AAGGGCAACC AGGGTACTAC1701 CCAACCTCTC CACAGCAGCC AGGACAAGAG CAACAATCAG GACAAGCGCA1751 ACAATCAGGA CAATGGCAAC AAGTGTACTA CCCAACTTCT CCGCAACAGC1801 CAGGCCAATT GCAACAACCA GCACAAGGGC AACAACCAGC ACAAGGGCAA1851 CAATCAGCAC AAGAGCAACA GCCAGGGGCA ACAAGGGTAC TACCCAACTT1901 CTCCGCAACA GTCAGGACAA GGGCAACAAG GGTACTACCC AACTTCTCCG1951 CAACAGTCAG GACAAGGGCA GCAGCCAGGA CAAGGACAAC AGCCAAGACA2001 AGGGCAACAA GGGTACTACC CAATTTCTCC GCAGCAGTCA GGACAAGGGC2051 AACAAACAGG ACAAGGGCAA CAAGGATACT ACCCAACTTC TCCGCAGCAG2101 TCAGGACAAG GGCAACAACC AAGACATGAG CAACAGCCAG GACAATGGCT2151 GCAACCAGGA CAAGGGCAAC AAGGGTACTA TCCAACCTCT TCACAGCAGT2201 CAGGACAAGG GCAGCAATCA GGACAAGGGC AACAAGGGTA CTACCCAACT2251 TCTCTGTGGC AACCAGGACA AGGGCAACAA CCAGGACAAA GGCAACAAGG2301 CTACGACAGC CCATACCATG TTAGCGCGGA GTACCAGGCG GCCCGCCTAA2351 AGGTGGCAAA GGCGCAGCAG CTCGCGGCAC GGCTGCCGGC AATGTGCCGG2401 CTGGAGGGCA GCGACGCATT GTCGGCCAGG CAGTGATAGA ACTCTCTGCA2451 GCTTGCTTGG TGCTTGGGCA AT蛋白質(zhì)序列1 MAKRLVLFAAVVVALMALTAAEGEASGQLQCERELRKRELEAYQQVVDQQ51 LRDVSPGYRPITVSPGTRQYEQQPVVPSKAGSFYPSETTPSQQLQQMIFW
101 GIPALLRRYYPSVTSSQQGSYYPGQAFPQQSGQGQQPGQGQQPGQRQQDQ151 QPGQGQQGYYPTSPQQPGQGQQLGQGQPGYYPTSQQPGQKQQAGQGHQSG201 QGQQRYYPTSRNSSSRQDKGNNQDKDNKGTTQLPRNSQDKGNNRDKGNQG251 TTQLLRSSQDNGSNQDKGNNQDKGSNQDKGNKVSSSQDNGSNQDKGNNQD301 KGSNQDKGNKVSSQDKGNDQDKDNKGTTQFLRNSRDKGNNQDKGNQGTTQ351 LLCGSQDNGSNQDKGSNQDKGNKVSSQDKDNNQDKDNKDTTQLLCNSQDK401 GNNWDKGNQGTTQLRSSRNKGSSQDKENNQDKDNKGTTQLLRNSQDKGNN451 WDKGNQGTTQLLHSSQDKDNNQDKDNKGTTQLLRNSQDKGNNRDKGNRGT501 SQLLGSSQDKGSSQDKDNSRDKGNKVSNQDKDNKRTTQLLRNSQDKGNRQ551 DNGNDRDKGNQGTTQPLHSSQDKSNNQDKRNNQDNGNKCTTQLLRNSQAN601 CNNQHKGNNQHKGNNQHKSNSQGQQGYYPTSPQQSGQGQQGYYPTSPQQS651 GQGQQPGQGQQPRQGQQGYYPISPQQSGQGQQTGQGQQGYYPTSPQQSGQ701 GQQPRHEQQPGQWLQPGQGQQGYYPTSSQQSGQGQQSGQGQQGYYPTSLW751 QPGQGQQPGQRQQGYDSPYHVSAEYQAARLKVAKAQQLAARLPAMCRLEG801 SDALSARQ克隆出的HMW-GS14基因序列可通過以下方法應(yīng)用1 HMW-GS14基因序列可以通過基因槍、農(nóng)桿菌介導(dǎo)、花粉管通道等本領(lǐng)域工作人員共知的方法導(dǎo)入小麥，培育出加工品質(zhì)優(yōu)良的小麥品種和小麥種質(zhì)。
2 根據(jù)HMW-GS14基因序列，可以建立特異簡(jiǎn)捷的HMW-GS14+15的標(biāo)記體系，并通過該體系進(jìn)行定向育種，獲得加工品質(zhì)優(yōu)良的小麥新品種或新種質(zhì)。
3根據(jù)HMW-GS14基因序列，可以構(gòu)建HMW-GS14酵母表達(dá)載體，通過本領(lǐng)域工作人員共知的研究方法將HMW-GS14導(dǎo)入酵母，然后通過在面粉中添加該轉(zhuǎn)基因酵母提高面筋彈性。
為了更清楚的理解和實(shí)施本發(fā)明發(fā)明人給出了以下具體的實(shí)施例。
實(shí)施例1HMW-GS 14基因克隆。
按本發(fā)明的技術(shù)方案，選取含有14+15亞基基因的小麥品種，提取該小麥材料的總DNA，根據(jù)該序列設(shè)計(jì)特異的PCR引物，參考上述的PCR條件擴(kuò)增HMW-GS14基因。
實(shí)施例2基于HMW-GS 14基因序列的分子標(biāo)記輔助育種。
按本發(fā)明的技術(shù)方案，并根據(jù)HMW-GS14基因序列設(shè)計(jì)特異的示蹤HMW-GS14+15的PCR引物，參考上述的PCR條件，建立HMW-GS14+15亞基的分子標(biāo)記體系。然后利用該標(biāo)記體系進(jìn)行定向育種獲得含有該亞基的優(yōu)質(zhì)小麥新種質(zhì)和新品種。
實(shí)施例3基于HMW-GS14基因的作物轉(zhuǎn)基因品質(zhì)改良。
按本發(fā)明的技術(shù)方案，并根據(jù)HMW-GS14基因序列克隆HMW-GS14基因。構(gòu)建胚乳特異表達(dá)的HMW-GS14植物表達(dá)載體，然后通過基因槍、農(nóng)桿菌介導(dǎo)的轉(zhuǎn)化、花粉管通道法等，將HMW-GS14導(dǎo)入小麥或其它糧食作物，最終獲得改良后的糧食作物新品種和新種質(zhì)。
實(shí)施例4基因HMW-GS14轉(zhuǎn)化酵母的品質(zhì)改良。
按本發(fā)明的技術(shù)方案，并根據(jù)HMW-GS14基因序列克隆HMW-GS14基因。構(gòu)建HMW-GS14酵母表達(dá)載體，然后通過電擊轉(zhuǎn)化、磷酸鈣共沉淀等方法，將HMW-GS14導(dǎo)入酵母，然后通過在面粉中添加一定量的酵母提高小麥、水稻等的加工品質(zhì)。
權(quán)利要求
1.一種小麥高分子量麥谷蛋白14亞基(HMW-GS 14)基因的核酸序列，其特征在于，該基因序列為1 TCCACCGAGA TGGCTAAGCG CCTGGTCCTC TTTGCGGCAG TAGTCGTCGC51 CCTCATGGCT CTCACCGCCG CTGAAGGTGA GGCCTCTGGA CAACTACAAT101 GTGAGCGCGA GCTCCGGAAG CGCGAGCTCG AGGCATACCA ACAGGTGGTG151 GACCAGCAAC TCCGAGACGT TAGCCCCGGG TACCGCCCCA TCACCGTCAG201 CCCGGGCACG AGACAATACG AGCAGCAACC TGTGGTGCCG TCCAAGGCCG251 GATCCTTCTA CCCCAGCGAG ACTACGCCTT CGCAGCAACT CCAACAAATG301 ATATTTTGGG GAATACCTGC ACTACTAAGA AGGTATTACC CAAGTGTAAC351 TTCTTCGCAG CAGGGGTCAT ACTATCCAGG CCAAGCTTTT CCGCAACAAT401 CAGGACAAGG ACAGCAGCCA GGACAAGGAC AGCAACCAGG ACAAAGGCAA451 CAAGATCAGC AGCCAGGACA AGGACAACAA GGGTACTACC CAACTTCTCC501 GCAACAGCCA GGACAAGGGC AACAACTGGG ACAAGGGCAA CCAGGGTACT551 ACCCAACTTC ACAGCAGCCA GGACAAAAGC AGCAGGCAGG ACAAGGGCAC601 CAATCAGGAC AAGGACAACA AAGGTACTAC CCAACTTCCC GCAACAGTAG651 CAGCAGGCAG GACAAGGGCA ACAATCAGGA CAAGGACAAC AAGGGTACTA701 CCCAACTTCC CCGCAACAGT CAGGACAAGG GCAACAACCG GGACAAGGGC751 AACCAGGGTA CTACCCAACT TCTCCGCAGC AGTCAGGACA ATGGCAGCAA801 CCAGGACAAG GGCAACAACC AGGACAAGGG CAGCAATCAG GACAAGGGCA851 ACAAGGTCAG CAGCAGTCAG GACAATGGCA GCAACCAGGA CAAGGGCAAC901 AACCAGGACA AGGGCAGCAA TCAGGACAAG GGCAACAAGG TCAGCAGCCA951 GGACAAGGGC AACGACCAGG ACAAGGACAA CAAGGGTACT ACCCAATTTC1001 TCCGCAACAG CCGGGACAAG GGCAACAATC AGGACAAGGG CAACCAGGGT1051 ACTACCCAAC TTCTTTGCGG CAGCCAGGAC AATGGCAGCA ACCAGGACAA1101 GGGCAGCAAC CAGGACAAGG GCAACAAGGT CAGCAGCCAG GACAAGGACA1151 ACAATCAGGA CAAGGACAAC AAGGATACTA CCCAACTTCT CTGCAACAGC1201 CAGGACAAGG GCAACAACTG GGACAAGGGC AACCAGGGTA CTACCCAACT1251 TCGCAGCAGT CGGAACAAGG GCAGCAGCCA GGACAAGGAA AACAACCAGG1301 ACAAGGACAA CAAGGGTACT ACCCAACTTC TCCGCAACAG TCAGGACAAG1351 GGCAACAACT GGGACAAGGG CAACCAGGGT ACTACCCAAC TTCTCCACAG1401 CAGTCAGGAC AAGGACAACA ATCAGGACAA GGACAACAAG GGTACTACCC1451 AACTTCTCCG CAACAGTCAG GACAAGGGCA ACAACCGGGA CAAGGGCAAT1501 CGGGGTACTT CCCAACTTCT CGGCAGCAGT CAGGACAAGG GCAGCAGCCA1551 GGACAAGGAC AACAGTCGGG ACAAGGGCAA CAAGGTCAGC AACCAGGACA1601 AGGACAACAA GCGTACTACC CAACTTCTTC GCAACAGTCA AGACAAAGGC1651 AACAGGCAGG ACAATGGCAA CGACCGGGAC AAGGGCAACC AGGGTACTAC1701 CCAACCTCTC CACAGCAGCC AGGACAAGAG CAACAATCAG GACAAGCGCA1751 ACAATCAGGA CAATGGCAAC AAGTGTACTA CCCAACTTCT CCGCAACAGC1801 CAGGCCAATT GCAACAACCA GCACAAGGGC AACAACCAGC ACAAGGGCAA1851 CAATCAGCAC AAGAGCAACA GCCAGGGGCA ACAAGGGTAC TACCCAACTT1901 CTCCGCAACA GTCAGGACAA GGGCAACAAG GGTACTACCC AACTTCTCCG1951 CAACAGTCAG GACAAGGGCA GCAGCCAGGA CAAGGACAAC AGCCAAGACA2001 AGGGCAACAA GGGTACTACC CAATTTCTCC GCAGCAGTCA GGACAAGGGC2051 AACAAACAGG ACAAGGGCAA CAAGGATACT ACCCAACTTC TCCGCAGCAG2101 TCAGGACAAG GGCAACAACC AAGACATGAG CAACAGCCAG GACAATGGCT2151 GCAACCAGGA CAAGGGCAAC AAGGGTACTA TCCAACCTCT TCACAGCAGT2201 CAGGACAAGG GCAGCAATCA GGACAAGGGC AACAAGGGTA CTACCCAACT2251 TCTCTGTGGC AACCAGGACA AGGGCAACAA CCAGGACAAA GGCAACAAGG2301 CTACGACAGC CCATACCATG TTAGCGCGGA GTACCAGGCG GCCCGCCTAA2351 AGGTGGCAAA GGCGCAGCAG CTCGCGGCAC GGCTGCCGGC AATGTGCCGG2401 CTGGAGGGCA GCGACGCATT GTCGGCCAGG CAGTGATAGA ACTCTCTGCA2451 GCTTGCTTGG TGCTTGGGCA AT蛋白質(zhì)序列1 MAKRLVLFAAVVVALMALTAAEGEASGQLQCERELRKRELEAYQQVVDQQ51 LRDVSPGYRPITVSPGTRQYEQQPVVPSKAGSFYPSETTPSQQLQQMIFW101 GIPALLRRYYPSVTSSQQGSYYPGQAFPQQSGQGQQPGQGQQPGQRQQDQ151 QPGQGQQGYYPTSPQQPGQGQQLGQGQPGYYPTSQQPGQKQQAGQGHQSG201 QGQQRYYPTSRNSSSRQDKGNNQDKDNKGTTQLPRNSQDKGNNRDKGNQG251 TTQLLRSSQDNGSNQDKGNNQDKGSNQDKGNKVSSSQDNGSNQDKGNNQD301 KGSNQDKGNKVSSQDKGNDQDKDNKGTTQFLRNSRDKGNNQDKGNQGTTQ351 LLCGSQDNGSNQDKGSNQDKGNKVSSQDKDNNQDKDNKDTTQLLCNSQDK401 GNNWDKGNQGTTQLRSSRNKGSSQDKENNQDKDNKGTTQLLRNSQDKGNN451 WDKGNQGTTQLLHSSQDKDNNQDKDNKGTTQLLRNSQDKGNNRDKGNRGT501 SQLLGSSQDKGSSQDKDNSRDKGNKVSNQDKDNKRTTQLLRNSQDKGNRQ551 DNGNDRDKGNQGTTQPLHSSQDKSNNQDKRNNQDNGNKCTTQLLRNSQAN601 CNNQHKGNNQHKGNNQHKSNSQGQQGYYPTSPQQSGQGQQGYYPTSPQQS651 GQGQQPGQGQQPRQGQQGYYPISPQQSGQGQQTGQGQQGYYPTSPQQSGQ701 GQQPRHEQQPGQWLQPGQGQQGYYPTSSQQSGQGQQSGQGQQGYYPTSLW751 QPGQGQQPGQRQQGYDSPYHVSAEYQAARLKVAKAQQLAARLPAMCRLEG801 SDALSARQ
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的HMW-GS14基因的核酸序列，其特征在于，通過以下途徑應(yīng)用1)通過基因槍、農(nóng)桿菌介導(dǎo)、花粉管通道等本領(lǐng)域工作人員共知的方法導(dǎo)入小麥，培育出加工品質(zhì)優(yōu)良的小麥品種和小麥種質(zhì)；2)根據(jù)該基因核酸序列可以建立特異簡(jiǎn)捷的HMW-GS14+15的標(biāo)記體系，并通過該體系進(jìn)行定向育種，獲得加工品質(zhì)優(yōu)良的小麥新品種或新種質(zhì)；3)根據(jù)該基因核酸序列可以構(gòu)建HMW-GS14酵母表達(dá)載體，通過本領(lǐng)域共知的研究方法將HMW-GS14導(dǎo)入酵母，然后通過在面粉中添加該轉(zhuǎn)基因酵母提高面筋彈性。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種小麥儲(chǔ)藏蛋白HMW－GS 14基因的核酸序列和對(duì)應(yīng)的蛋白序列,以及基于該序列通過生物技術(shù)方法改良小麥加工品質(zhì)的應(yīng)用。本發(fā)明涉及的HMW－GS 14基因是出現(xiàn)在中國(guó)優(yōu)質(zhì)面包小麥種子的一種儲(chǔ)藏蛋白基因,該基因產(chǎn)可顯著提高小麥的面筋彈性。根據(jù)該基因序列可以通過基于PCR分子標(biāo)記方法進(jìn)行定向育種,培育出新的優(yōu)質(zhì)小麥。根據(jù)該基因序列可以克隆該基因,構(gòu)建該基因的各種表達(dá)載體,并通過基因槍、農(nóng)桿菌介導(dǎo)、花粉管通道等轉(zhuǎn)化方法將該基因?qū)胄←?以培育出加工品質(zhì)優(yōu)良的小麥品種及種質(zhì)。
文檔編號(hào)C12N15/11GK1382692SQ02114579
公開日2002年12月4日 申請(qǐng)日期2002年5月17日 優(yōu)先權(quán)日2002年5月17日
發(fā)明者郭藹光, 范三紅, 趙會(huì)賢 申請(qǐng)人:西北農(nóng)林科技大學(xué)