專利名稱：用于鑒定血液中病原菌的基因芯片及其制造方法
技術領域：
本發(fā)明涉及醫(yī)學體外診斷技術，具體地講是一種基因芯片，在芯片上設置多種細菌的探針，其中包括一些常規(guī)培養(yǎng)難以分離的細菌，利用PCR擴增產物進行雜交試驗檢測、鑒定測試樣品。
Anthony.R.M.et al.(Rapid diagnosis of bacteria by universal amplification of 23 sribosomal DNA followed by hybridization to an oligonucleotide array，J.Clinicalmicrobiology，F(xiàn)eb.2000.p781-788)，報道了對菌血癥迅速診斷方面的研究結果，設計出了探針陣列應用于菌血癥的診斷。但是，其中包括的探針較少，覆蓋病原菌種類只有22個，會漏掉許多病原菌，而且準確性差。
本發(fā)明是在基質(尼龍膜)上設置包括有鑒定細菌種、屬特異性探針、假絲酵母探針和細菌通用探針以及革蘭氏陰性細菌通用探針，還包括由此衍生的探針以及每種探針的互補探針或它們的變體。
本發(fā)明實施的具體步驟是1.設計病原體特異性探針
選擇細菌的23S核糖體RNA基因為靶序列，從中選取種，屬特異性和通用序列設計探針用于病原菌的檢測。所述的探針見序列表所示。
2.合成探針使用上海生物工程有限公司合成儀合成。
3.探針處理由于設計的探針比較短，很難固化在膜上，因此我們在3’末端選擇性加了polyT尾巴，使它能夠固化在尼龍膜上。
4.基因芯片的制備使用羅氏公司生產的帶有正點荷的尼龍膜，使用點樣儀按預先設定好的順序進行點樣。
5.將點好的膜在長波紫外燈下進行交聯(lián)5-10分鐘，使探針牢固固定在膜上。
6.將待檢血標本按本試驗室提供的試劑盒(另外申請專利菌血癥檢驗用基因芯片的檢驗方法)處理以抽提獲得用于PCR的病原體DNA備用；7.PCR擴增在PCR反應管中加入PCRmix、處理好的標本和引物，按下列程序進行PCR擴增在94℃，變性10min；然后94℃，30sec；57℃，15 sec；72℃，40sec。這樣進行5個循環(huán)。而后，94℃，30sec，64℃，40sec，這樣進行25個循環(huán)的反應。最后在72℃，延伸5min。
8.探針標記使用羅氏公司生產的地高辛標記試劑，方法參照試劑盒的說明。
9.雜交預雜交為10-15分鐘雜交為1-2小時，在雜交箱中進行。
10.顯色參照BCIP/NBT或DAB檢測方法試劑盒說明書進行。
11.檢測經雜交和顯色后的芯片，可顯示若干蘭色或蘭紫色雜交點。根據雜交點的位置，可人工肉眼判讀，確定病原菌的有無或種類。
本發(fā)明適用于直接從血液，尿液等臨床標本中直接抽提病原菌DNA用PCR擴增靶基因用于雜交檢測?；蛐酒哂性\斷準確、特異性強、信息量高的特點，可以快速，準確，全面地鑒定各種細菌。首先，它用PCR的方法擴增細菌靶基因，避免了費時的培養(yǎng)階段；其次，基于DNA-DNA的雜交鑒定方法較基于生理和生化的鑒定方法更準確，不受培養(yǎng)條件和細菌生理狀態(tài)的影響第三，在芯片上可以設置多種細菌的探針，其中包括一些常規(guī)培養(yǎng)難以分離的細菌，因此具有全面的特點。
本發(fā)明可以檢測、鑒定測試樣品中下列細菌(至少40種細菌)，包括對流感嗜血桿菌，李斯特，產酸克雷伯氏菌，肺炎克雷伯菌，銅綠假單胞菌，糞腸鏈球菌，肺炎鏈球菌，腐生葡萄球菌，表皮葡萄球菌，溶血葡萄球菌，金黃色葡萄球菌，噬麥芽窄食單胞菌，傷寒沙門氏菌，乙型副傷寒沙門氏菌，甲型副傷寒沙門氏菌，嬰兒沙門氏菌，丙型副傷寒沙門氏菌，鼠傷寒沙門氏菌，腸炎沙門氏菌，大腸桿菌，陰溝腸桿菌，肺炎鏈球菌，副流感嗜血桿菌，糞腸球菌，氣單胞菌，屎鏈球菌，屎腸球菌，糞腸球菌，洋蔥伯克霍爾氏菌，嗜熱鏈球菌，奇異變形桿菌，普通變形桿菌，產堿菌，產氣腸桿菌，腦膜炎奈瑟氏菌，淋病奈瑟氏菌，乙型溶血型鏈球菌，黏質沙雷氏菌，蠟樣芽孢桿菌，枯草芽孢桿菌；以及假絲酵母。
本發(fā)明還包括有革蘭氏陰性細菌通用探針以及細菌通用探針，因此可以檢出測試標本中的任何感染細菌，并可以區(qū)分革蘭氏陰性細菌和革蘭氏陽性細菌。
上述微生物種、屬基因均是多種臨床標本中相關的和常見的，這些基于DNA的檢測法比較快速、準確，可以用于臨床微生物實驗室中進行常規(guī)診斷。這些新型方法可用于提高微生物感染診斷的速度和準確度，因此可以達到更有效的治療。
圖2本發(fā)明應用實施例2雜交點陣圖譜。
圖3本發(fā)明應用實施例3雜交點陣圖譜。
2.合成探針使用上海生物工程有限公司合成儀合成。
3.探針處理由于設計的探針比較短，很難固化在膜上，因此我們在3’末端選擇性加了polyT(寡聚脫氧胸腺核苷酸)尾巴，使它能夠固化在尼龍膜上。
4.基因芯片的制備使用羅氏公司生產的帶有正點荷的尼龍膜，使用點樣儀按預先設定好的順序進行點樣。
5.將點好的膜在長波紫外燈下進行交聯(lián)5分鐘，使探針牢固固定在膜上。
6.取全血血液標本0.1ml置eppendorf離心管中，補加無菌水1ml在室溫下靜置5分鐘，然后于室溫下離心12000rpm，5分鐘，棄去900ul上清液，加入400ul裂解緩沖液(lysis buffer10mM Tris.HCL pH8.0，10mM EDTA，0.5％SDS)混勻后加6ul 20mg/ml的蛋白酶K(Sigma或上海生工公司產品)，混勻，置56℃水浴中保溫30分，之后加等體積TE溶液飽和酚試劑，強烈震蕩后，于8000r/min室溫離心3分鐘，吸取上清液，重復酚抽提一次，吸取上清液，加1/10體積的甲醇納(3mol/l)，混勻，再加等體積冰冷異丙醇，混勻后，離心12,000rpm，室溫，5分鐘，傾去上清，加70％冷乙醇振蕩洗滌一次，離心12,000rpm，室溫，5分鐘，傾去上清，沉淀加50ulTE溶解。吸出15ul作為模板加入到PCR反應薄壁管中，再加入PCR反應體系，即相繼分別加入5ul PCR buffer，5ul MgCL2，2ul引物I，2ul引物II，2ul引物III，2ul引物IV，0.3ul dNTP，0.3ulDigoxigenin-11-dUTP，0.3ulTaq DNA Polymerase和16ul重蒸蒸餾水，使總反應體積為50ul(引物I5’-CCGATTTCAGATAGGTGCAATCT-3’；引物II5’-TACGCCATTCGCTCCCTGTAAT-3’；引物III5’-GTATCGACGATGAACGGAGC-3’引物IV5’-TTCTCGGCATAATGATGTGA-3’)。
把混合好的PCR待反應物，放入PCR儀中進行PCR擴增。擴增條件為首先在94℃，變性10min；然后94℃，30sec；57℃，15sec；72℃，40sec。這樣進行5個循環(huán)。而后，94℃，30sec，64℃，40sec，這樣進行25個循環(huán)的反應。最后在72℃，延伸5min。擴增好的PCR產物與以制備好的芯片進行雜交反應。
7.雜交預雜交為13分鐘，雜交為1.5小時，在雜交箱中進行。
8.顯色參照BCIP/NBT或DAB檢測方法試劑盒說明書進行。
9.檢測經雜交和顯色后的芯片，可顯示若干蘭色或蘭紫色雜交點。根據雜交點的位置，可人工肉眼判讀，顯色得出雜交點陣圖與數(shù)據庫中的雜交點陣圖相比對，確定對應圖形，確定病原菌的有無或種類，從而完成對此種未知樣品的菌種鑒定。序列表SEQUENCE LISTING<110> 南開大學天津南開基因工程有限公司<120> 用于鑒定血液中病原菌的基因芯片及其制造方法<130> 用于鑒定血液中病原菌的基因芯片及其制造方法<160> 26<170> PatentIn version 3.1<210> 1<211> 19<212> DNA<213> Bacillus anthracis<400> 1gtagacgaag cgacctgga19<210> 2<211> 24<212> DNA<213> Bacillus subtilis<400> 2aggtagatga agaggtctgg aaag 24<210> 3<211> 24<212> DNA<213> Klebsiella pneumoniae<400> 3gaatacatag gttaacgagg cgaa 24<210> 4<211> 25<212> DNA<213> Salmonella enterica<400> 4cagtgtgact cgtcacacta tcatt 25<210> 5<211> 24<212> DNA<213> Aeromonas hydrophila<400> 5gcatcttgga agttagtgga acgg 24<210> 6<211> 25<212> DNA<213> Haemophilus influenzae<400> 6gtgaattcat agcttgttga ggcaa 25<210> 7<211> 23<212> DNA<213> Pasteurella multocida<400> 7gagattctgt gagtagcggc gag23<210> 8<211> 23<212> DNA<213> Pasteurella multocida<400> 8aggacggagc acgagaaact ttg23<210> 9<211> 20<212> DNA<213> Salmonella typhimurium<400> 9gacagccccg tacaaaagcg 20<210> 10<211> 23<212> DNA<213> Salmonella typhimurium<400> 10tgaccatagc gggtgacagt ccc 23<210> 11<211> 25<212> DNA<213> Salmonella typhimurium<400> 11tcaaaacttc gttctctcct gagtg 25<210> 12<211> 25<212> DNA<213> Neisseria gonorrhoeae<400> 12gaatacatag gcttagagaa gcgaa 25<210> 13<211> 24<212> DNA<213> Neisseria meningitidis<400> 13gttgaataca tagacttaga agcg24<210> 14<211> 20<212> DNA<213> Klebsiella<400> 14aagcgtctgg aaagtcgcag 20<210> 15<211> 20<212> DNA<213> Klebsiella<400> 15gtctggaaag tccgacggta 20<210> 16<211> 26<212> DNA<213> Staphylococcus epidermidis<400> 16tgaatttata gcatgtcaga aggcag 26<210> 17<211> 24<212> DNA<213> Staphylococcus aureus<400> 17aatacatagc atatcagaag gcac 24<210> 18<211> 25<212> DNA<213> Bacillus cereus<400> 18acttcgttct ctcttgaatg tatcc25<210> 19<211> 20<212> DNA<213> Bacillus subtilis<400> 19gttctctcct gagtggatcc 20<210> 20<211> 20<212> DNA<213> Bacillus cereus<400> 20ggcgagcgaa acggaacata 20<210> 21<211> 26<212> DNA<213> Gram-negative bacteria<400> 21gaggaaaaga aatcaaccga gattcc26<210> 22<211> 24<212> DNA<213> bacteria<220><221> misc feature<222> (3)..()<223> d＝a，g，t，<220><221> misc_feature<222> (12)..()<223> y＝c/a；<220><221> misc_feature<222> (23)..()<223> w＝c/g<400> 22ggdgaactga aycatctaag tawc24<210> 23<211> 23<212> DNA<213> Escherichia coli<400> 23agccccgtac acaaaaatgc aca 23<210> 24<211> 21<212> DNA<213> Salmonella<400> 24cccgtacaca aaagcgcatg t 21<210> 25<211> 20<212> DNA<213> Escherichia coli<400> 25ccagagcctg aatcagtgtg20<210> 26<211> 24<212> DNA<213> Enterobacter cloacae<400> 26acgaaaatgc acaggttgtg aact 24應用實施例一患者劉賈，男，18歲。8月2日高燒入院，體溫38.9℃，醫(yī)生給予丁胺卡那治療，效果不佳，病人仍發(fā)熱。用菌血癥基因芯片進行診斷。診斷過程如下取劉賈血液0.1ml置eppendorf離心管中，補加無菌水1ml在室溫下靜置5分鐘，然后于室溫下離心12,000rpm，5分鐘，棄去900ul上清液，加入400ul裂解緩沖液(lysisbuffer10mM Tris.HCL pH8.0，10mM EDTA，0.5％SDS)混勻后加6ul，20mg/ml的蛋白酶K(Sigma或上海生工公司產品)，混勻，置56℃水浴中保溫30分，之后加等體積TE溶液飽和酚試劑，強烈震蕩后，于8000r/min室溫離心3分鐘，吸取上清液，重復酚抽提一次，吸取上清液，加1/10體積的甲醇納(3mol/l)，混勻，再加等體積冰冷異丙醇，混勻后，離心12,000rpm，室溫，5分鐘，傾去上清，加70％冷乙醇振蕩洗滌一次，離心12,000rpm，室溫，5分鐘，傾去上清，沉淀加50ulTE溶解。吸出15ul作為模板加入到PCR反應薄壁管中，再加入PCR反應體系，即相繼分別加入5ul PCR buffer，5ul Mgcl2，2ul引物I，2ul引物II，2ul引物III，2ul引物IV，0.3ul dNTP，0.3ul Digoxigenin-11-dUTP，0.3ulTaq DNA Polymerase和16ul無菌水，使總反應體積為50ul(引物I5’-CCGATTTCAGATAGGTGCAATCT-3’；引物II5’TACGCCATTCGCTCCCTGTAAT-3’；引物III5’-GTATCGACGATGAACGGAGC-3’；引物IV5’-TTCTCGGCATAATGATG-TGA-3’)。把混合好的PCR待反應物，放入PCR儀中進行PCR擴增。擴增條件為94℃，變性10min；然后94℃，30sec；57℃，15 sec；72℃，40sec。這樣進行5個循環(huán)。而后，94℃，30sec，64℃，40sec，這樣進行25個循環(huán)的反應。最后在72℃，延伸5min。擴增好的PCR產物與以制備好的芯片進行雜交反應。顯色得出雜交點陣圖為

圖1。與數(shù)據庫中的雜交點陣圖相比對，確定結果為金黃色葡萄球菌感染。
換以頭孢他定治療，兩天后，患者退燒。繼續(xù)治療三天后，傳統(tǒng)的血培養(yǎng)也完成鑒定，鑒定結果為金黃色葡萄球菌感染。患者繼續(xù)治療一天后，出院。
用基因芯片的方法鑒定的菌種的結果與醫(yī)院采用BacT/Alert全自動血培養(yǎng)儀方法鑒定的菌種的結果相一致，都是金黃色葡萄球菌感染。
應用實施例二患者，羅建華，男，43歲。7月15日因頸骨髓損傷，發(fā)熱兩天后入院，醫(yī)師對其實行對癥治療及消炎抗菌治療。入院第三天，進行了菌血癥基因芯片診斷取羅建華血液0.1ml置eppendorf離心管中，補加無菌水1ml在室溫下靜置5分鐘，然后于室溫下離心12,000rpm，5分鐘，棄去900ul上清液，加入400ul裂解緩沖液(lysisbuffer10mM Tris.HCL pH8.0，10mM EDTA，0.5％SDS)混勻后加6ul，20mg/ml的蛋白酶K(Sigma或上海生工公司產品)，混勻，置56℃水浴中保溫30分，之后加等體積TE溶液飽和酚試劑，強烈震蕩后，于8000r/min室溫離心3分鐘，吸取上清液，重復酚抽提一次，吸取上清液，加1/10體積的甲醇納(3mol/l)，混勻，再加等體積冰冷異丙醇，混勻后，離心12,000rpm，室溫，5分鐘，傾去上清，加70％冷乙醇振蕩洗滌一次，離心12,000rpm，室溫，5分鐘，傾去上清，沉淀加50ulTE溶解。吸出15ul作為模板加入到PCR反應薄壁管中，再加入PCR反應體系，即相繼分別加入5ul PCR buffer，5ulMgcl2，2ul引物I，2ul引物II，2ul引物III，2ul引物IV，0.3ul dNTP，0.3ulDigoxigenin-11-dUTP，0.3ulTaq DNA Polymerase和16ul無菌水，使總反應體積為50ul。把混合好的PCR待反應物，放入PCR儀中進行PCR擴增。擴增條件為94℃，變性10min；然后94℃，30sec；57℃，15sec；72℃，40sec。這樣進行5個循環(huán)。而后，94℃，30sec，64℃，40sec，這樣進行25個循環(huán)的反應。最后在72℃，延伸5min。擴增好的PCR產物與以制備好的芯片進行雜交反應。顯色得出雜交點陣圖為圖2。與數(shù)據庫中的雜交點陣圖相比對，確定結果為銅綠假單胞菌。
隨后，醫(yī)師對羅建華的治療進行了調整，除對癥治療外，以頭孢他定進行抗菌消炎治療。一周后，患者病情穩(wěn)定，無發(fā)熱現(xiàn)象，停用抗菌素繼續(xù)針對頸髓損傷進行對癥治療。
傳統(tǒng)血培養(yǎng)診斷結果為陰性。
用基因芯片方法鑒定菌種的結果為銅綠假單胞菌，而醫(yī)院采用BacT/Alert全自動血培養(yǎng)儀方法進行鑒定，結果顯示為陰性，即無菌生長。
此例說明，基因芯片的鑒定方法比全自動血培養(yǎng)儀的鑒定方法要靈敏。因為傳統(tǒng)的方法要求的是活菌，并且要可以在適宜的條件下生長和繁殖。因此，很有可能，被檢測的血液中的細菌進行鑒定的時候已經死亡，或是所用培養(yǎng)瓶的條件并不能使其繼續(xù)生長繁殖。然而，基因芯片的鑒定方法，并不需要是活菌，當然也不需要菌的繁殖和生長。無論是死亡的細菌還是存活的細菌，只要有DNA存在，就可以被鑒定出來。因而，基因芯片的鑒定方法比全自動血培養(yǎng)儀的鑒定方法要靈敏。對152病例的鑒定就是可靠的證據。應用實施例三患者，劉連弟，男，73歲。7月10日入院，臨床診斷為肺炎，有輕微發(fā)熱情況。進行菌血癥基因芯片診斷，診斷過程如下7月10日取劉連弟血樣0.1ml置eppendorf離心管中，補加無菌水1ml在室溫下靜置5分鐘，然后于室溫下離心12,000rpm，5分鐘，棄去900ul上清液，加入400ul裂解緩沖液(lysis buffer10mM Tris.HCL pH8.0，10mM EDTA，0.5％SDS)混勻后加6ul，20mg/ml的蛋白酶K(Sigma或上海生工公司產品)，混勻，置56℃水浴中保溫30分，之后加等體積TE溶液飽和酚試劑，強烈震蕩后，于8000r/min室溫離心3分鐘，吸取上清液，重復酚抽提一次，吸取上清液，加1/10體積的甲醇納(3mol/l)，混勻，再加等體積冰冷異丙醇，混勻后，離心12,000rpm，室溫，5分鐘，傾去上清，加70％冷乙醇振蕩洗滌一次，離心12,000rpm，室溫，5分鐘，傾去上清，沉淀加50ulTE溶解。吸出15ul作為模板加入到PCR反應薄壁管中，再加入PCR反應體系，即相繼分別加入5ul PCRbuffer，5ul Mgcl2，2ul引物I，2ul引物II，2ul引物III，2ul引物IV，0.3ul dNTP，0.3ulDigoxigenin-11-dUTP，0.3ulTaq DNA Polymerase和16ul無菌水，使總反應體積為50ul。把混合好的PCR待反應物，放入PCR儀中進行PCR擴增。擴增條件為94℃，變性10min；然后94℃，30sec；57℃，15sec；72℃，40sec。這樣進行5個循環(huán)。而后，94℃，30sec，64℃，40sec，這樣進行25個循環(huán)的反應。最后在72℃，延伸5min。擴增好的PCR產物與以制備好的芯片進行雜交反應。顯色得出雜交點陣圖為圖3。只有質控點顯色，診斷結果為沒有細菌或真菌感染。
醫(yī)師給予患者抗病毒等治療，情況有所緩解，患者病情穩(wěn)定。七天后，傳統(tǒng)血培養(yǎng)方法鑒定結果為陰性。
以上實例表明，基因芯片檢驗病原菌的方法，其鑒定結果比醫(yī)院采用全自動血培養(yǎng)儀方法鑒定的結果陽性率更高，更準確。
權利要求
1.一種用于鑒定血液中病原菌基因芯片，其特征在于它是在基質上設置包括有鑒定細菌的種、屬特異性的探針、特異性假絲酵母探針和細菌通用探針以及革蘭氏陰性細菌通用探針。
2.按照權利要求1所述的用于鑒定血液中病原菌基因芯片，其特征在于它還包括由權利要求1衍生的探針以及每種探針的互補探針或它們的變體。
3.按照權利要求1所述的用于鑒定血液中病原菌基因芯片，其特征在于所述的探針如序列表所示的探針。
4.按照權利要求1所述的用于鑒定血液中病原菌基因芯片，其特征在于所述的基質是尼龍膜。
5.如權利要求1所述的用于鑒定血液中病原菌基因芯片的應用，其特征在于它是用于鑒定以下細菌流感嗜血桿菌，李斯特，產酸克雷伯氏菌，肺炎克雷伯菌，銅綠假單胞菌，糞腸鏈球菌，肺炎鏈球菌，腐生葡萄球菌，表皮葡萄球菌，溶血葡萄球菌，金黃色葡萄球菌，噬麥芽窄食單胞菌，傷寒沙門氏菌，乙型副傷寒沙門氏菌，甲型副傷寒沙門氏菌，嬰兒沙門氏菌，丙型副傷寒沙門氏菌，鼠傷寒沙門氏菌，腸炎沙門氏菌，大腸桿菌，陰溝腸桿菌，肺炎鏈球菌，副流感嗜血桿菌，糞腸球菌，氣單胞菌，屎鏈球菌，屎腸球菌，糞腸球菌，洋蔥伯克霍爾氏菌，嗜熱鏈球菌，奇異變形桿菌，普通變形桿菌，產堿菌， 產氣腸桿菌，腦膜炎奈瑟氏菌，淋病奈瑟氏菌，乙型溶血型鏈球菌，黏質沙雷氏菌，蠟樣芽孢桿菌，枯草芽孢桿菌；以及病原真菌假絲酵母。
6.如權利要求1所述的用于鑒定血液中病原菌基因芯片的制備方法，其特征在于包括以下步驟1)設計病原體特異性探針選擇細菌的23S核糖體RNA基因為靶序列，從中選取種，屬特異性和通用序列設計；2)合成探針使用上海生物工程有限公司合成儀合成；3)探針處理在3’末端選擇性加polyT尾巴，使它能夠固化在基質上；4)基因芯片的制備使用點樣儀在基質上按預先設定好的順序進行點樣；5)將點好的膜在長波紫外燈下進行交聯(lián)5-10分鐘，使探針牢固固定在膜上；
7.如權利要求1所述的用于鑒定血液中病原菌基因芯片的使用方法，其特征在于包括以下步驟1)將待檢血標本按本試驗室提供的試劑盒處理以抽提獲得用于PCR的病原體DNA備用；2)PCR擴增在PCR反應管中加入PCRmix、處理好的標本和引物，按下列程序進行PCR擴增在94℃，變性10min；然后94℃，30sec；57℃，15sec；72℃，40sec。這樣進行5個循環(huán)。而后，94℃，30sec，64℃，40sec，這樣進行25個循環(huán)的反應。最后在72℃，延伸5min；3)探針標記使用羅氏公司生產的地高辛標記試劑；4)雜交在雜交箱中，使用所述的芯片與擴增樣品接觸，預雜交為10-15分鐘，雜交為1-2小時；5)顯色參照BCIP/NBT或DAB檢測方法試劑盒說明書進行，顯色得出雜交點陣圖與數(shù)據庫中的雜交點陣圖相比對，確定對應圖形，完成對此種未知樣品的菌種鑒定。
全文摘要
本發(fā)明涉及醫(yī)學體外診斷技術，具體地講是一種基因芯片。它是在尼龍膜上設置包括有鑒定細菌的種，屬特異性的探針，還包括由此衍生的探針以及每種探針的互補探針或它們的變體。特異性探針可以鑒定包括流感嗜血桿菌、肺炎克雷伯菌、銅綠假單胞菌、肺炎鏈球菌、金黃色葡萄球菌、甲型副傷寒沙門氏菌、腦膜炎奈瑟氏菌等至少40細菌，還包括有革蘭氏陰性細菌通用探針、細菌通用探針以及假絲酵母探針。基于基因探針構成的基因芯片檢測法比較快速、準確，可以用于臨床微生物實驗室中進行常規(guī)診斷，可用于提高微生物感染診斷的速度和準確度，因此可以達到更有效的治療。
文檔編號C12Q1/68GK1414112SQ0212931
公開日2003年4月30日 申請日期2002年8月30日 優(yōu)先權日2002年8月30日
發(fā)明者黃熙泰, 黃志剛 申請人:南開大學, 天津南開基因工程有限公司