專利名稱：一株高生物量富鋅酵母及其選育方法與應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及微生物發(fā)酵工業(yè)技術(shù)領(lǐng)域中的一株富鋅酵母及其選育方法與在生產(chǎn)中的應(yīng)用，特別是涉及一株高生物量富鋅酵母及其選育方法與在生產(chǎn)中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
鋅是人和動物維持生命和發(fā)育的必需營養(yǎng)物質(zhì)，是體內(nèi)必需的微量元素之一。缺鋅會影響體內(nèi)DNA復(fù)制及蛋白質(zhì)合成，嚴重影響皮膚、骨骼及其它器官的正常發(fā)育。兒童生長期、婦女妊娠、哺乳期、外傷、反復(fù)出血等都易引起缺鋅癥狀和免疫功能下降。我國學(xué)齡前兒童普遍存在缺鋅現(xiàn)象。服用無機鋅鹽(如硫酸鋅等)雖然有一定作用，但是吸收利用率低，常有腸胃不適等反應(yīng)，嚴重者會引起腸出血。
富鋅酵母能將無機狀態(tài)的鋅轉(zhuǎn)化成有機狀態(tài)的鋅，可以提高鋅的利用率。利用富鋅酵母將無機狀態(tài)的鋅轉(zhuǎn)化成有機狀態(tài)的鋅是開發(fā)新型鋅源，提高鋅的利用率的主要措施。富鋅酵母在預(yù)防和治療人及動物缺鋅性疾病方面將發(fā)揮顯著的作用。此外，富鋅酵母細胞還含有豐富的核酸、蛋白質(zhì)、氨基酸、維生素等，是一種高營養(yǎng)價值的補鋅蛋白質(zhì)食品和飼料添加劑。
近年來，盡管已有一些稱為“富鋅酵母”的產(chǎn)品問世，但這些產(chǎn)品存在明顯的缺陷和不足一是沒有對酵母菌種進行篩選和育種，經(jīng)常是用隨機得到的酵母菌種發(fā)酵生產(chǎn)富鋅酵母產(chǎn)品。但是由于不同酵母菌種對鋅的抗性差異較大，對鋅離子的吸收轉(zhuǎn)化能力差異也較大，因此產(chǎn)品缺乏穩(wěn)定性，不利于工業(yè)化生產(chǎn)。
二是沒有對發(fā)酵生產(chǎn)富鋅酵母的培養(yǎng)基的鋅離子濃度、培養(yǎng)條件進行優(yōu)化，因此培養(yǎng)的酵母雖然稱為“富鋅酵母”，但是其酵母細胞的鋅含量較低，細胞生物量也較低。
目前，生產(chǎn)稱為“富鋅酵母”的方法大體有三種，第一種是采用混合處理方法，即將一定量的鋅鹽(如硫酸鋅、醋化鋅、氯化鋅、氧化鋅等)與市場上的面包酵母或啤酒酵母細胞混合而成。其主要缺陷在于未將無機鋅轉(zhuǎn)化成為有機鋅，這種將鋅鹽(如硫酸鋅、醋化鋅、氯化鋅、氧化鋅等)與酵母細胞混合在一起的所謂“富鋅酵母”的生物學(xué)作用較差，吸收利用率低。
第二種是采用簡單的吸附方法，將市場上的面包酵母或啤酒酵母細胞懸浮于含有一定濃度的鋅鹽(如硫酸鋅、醋化鋅、氯化鋅、氧化鋅等)的水溶液中處理一定時間，使鋅離子吸附于酵母細胞表面，其主要缺陷在于這種處理仍然不能將無機鋅轉(zhuǎn)化成為有機鋅。這種吸附鋅鹽(如硫酸鋅、醋化鋅、氯化鋅、氧化鋅等)的酵母細胞與上述第一種方法沒有本質(zhì)的區(qū)別，人或動物對其吸收率低，產(chǎn)生的生物學(xué)作用較差。
第三種是在含有一定鋅離子的培養(yǎng)基中培養(yǎng)酵母細胞，但是對酵母菌種沒有進行篩選和育種，隨機選用一種酵母菌種即進行發(fā)酵，其主要缺陷在于由于不同酵母菌種對鋅的抗性能力有較大差異，從而對鋅離子的吸收轉(zhuǎn)化能力差異較大。此外，這種技術(shù)對培養(yǎng)基的鋅離子濃度、培養(yǎng)條件未進行系統(tǒng)優(yōu)化，因此采用這種技術(shù)培養(yǎng)的酵母中，有機鋅含量較低(每克干酵母細胞有機鋅的含量在10毫克以下)、細胞生物量也較低。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一株高生物量的富鋅酵母菌株。
本發(fā)明提供的富鋅酵母菌株高生物量富鋅酵母菌株(Saccharomyces cerevisiae)ZGFH-94，該菌株已于2003年02月26日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(簡稱CGMCC)，保藏號為CGMCC №0896。
高生物量富鋅酵母菌株(Saccharomyces cerevisiae)ZGFH-94(CGMCC №0896)的個體細胞形為橢圓形，菌落形態(tài)特征是菌落凸起、光滑、乳白色、邊緣整齊。最適生長溫度30℃。生長最適pH為5.5。
本發(fā)明的第二個目的是提供一種高生物量的富鋅酵母菌株的選育方法。
一種高生物量的富鋅酵母菌株的選育方法，包括如下步驟1)根據(jù)不同酵母菌種的生理生化特性，在含有梯度鋅離子濃度的培養(yǎng)基中分別篩選生物量高的酵母菌種和抗鋅能力強及細胞含鋅量高的酵母菌種；2)對生物量高的酵母菌種和抗鋅能力強及細胞含鋅量高的酵母菌種進行生孢培養(yǎng)、單倍體分離、誘變，篩選具有不同交配型及不同遺傳標(biāo)記的單倍體突變菌株；3)將分離到的生物量高的酵母菌單倍體突變菌株與抗鋅能力強及細胞鋅含量高的酵母菌單倍體突變菌株進行原生質(zhì)體融合；4)在選擇培養(yǎng)基上篩選高生物量和高鋅含量的融合二倍體優(yōu)良菌株，即富鋅酵母菌種。
其中，所述梯度鋅離子濃度為200微克/ml鋅-2000μg/ml。所述生物量高的酵母菌種和抗鋅能力強及細胞含鋅量高的酵母菌種的原生質(zhì)體融合比例為1∶1-1∶2。所述選擇培養(yǎng)基為含有200μg/mL-2000μg/mL鋅離子的YEPD培養(yǎng)基。
本發(fā)明的第三個目的是提供一種利用高生物量富鋅酵母(Saccharomycescerevisiae)ZGFH-94 CGMCC №0896生產(chǎn)富鋅酵母產(chǎn)品的方法。
一種利用高生物量富鋅酵母(Saccharomyces cerevisiae)ZGFH-94 CGMCC №0896生產(chǎn)富鋅酵母產(chǎn)品的方法，包括斜面菌種培養(yǎng)、液體菌種培養(yǎng)、至少二級液體種子培養(yǎng)、發(fā)酵罐發(fā)酵培養(yǎng)、得到產(chǎn)品。
所述液體種子培養(yǎng)為三級-六級種子培養(yǎng)；所述發(fā)酵罐培養(yǎng)完成后，收集酵母細胞并干燥、粉碎得到產(chǎn)品。所述斜面菌種培養(yǎng)、液體菌種培養(yǎng)、液體種子培養(yǎng)和發(fā)酵罐發(fā)酵培養(yǎng)的培養(yǎng)基包括8％-20％總糖量的有機物，200-1000微克/毫升的鋅酸鹽，培養(yǎng)基的pH為3.5-8.5；所述發(fā)酵罐培養(yǎng)的接種量為5％-35％。所述鋅酸鹽為硫酸鋅、醋化鋅、氯化鋅或氧化鋅。所述有機物選自麥芽汁、淀粉水解糖、糖蜜或它們的任意組合。
本發(fā)明使用的高生物量富鋅酵母(Saccharomyces cerevisiae)ZGFH-94 CGMCC №0896，不僅生物量高，而且細胞的有機鋅含量較高，每克干細胞含有機鋅量高達15毫克。
本發(fā)明生產(chǎn)富鋅酵母產(chǎn)品的方法以普通的麥芽汁、淀粉水解糖、糖蜜或它們的任意組合為發(fā)酵底物，只需調(diào)節(jié)其總糖含量，添加鋅鹽(如硫酸鋅、醋化鋅、氯化鋅、氧化鋅等)等即可進行生產(chǎn)，方法簡單，成本低廉。本發(fā)明的生產(chǎn)方法實用性強，操作簡便，對發(fā)酵設(shè)備及生產(chǎn)條件沒有特殊要求，利用一般發(fā)酵廠的設(shè)備和生產(chǎn)條件即可生產(chǎn)，投資少、見效快、效益高，不但適合于大規(guī)模的生產(chǎn)還適合于小批量的生產(chǎn)，具有廣闊的實際應(yīng)用前景。


圖1為富鋅酵母產(chǎn)品的生產(chǎn)工藝流程示意圖具體實施方式
實施例1、高生物量富鋅酵母(Saccharomyces cerevisiae)ZGFH-94 CGMCC №0896的選育高生物量富鋅酵母(Saccharomyces cerevisiae)ZGFH-94 CGMCC №0896的選育分為以下幾個步驟1)根據(jù)酵母菌對硫酸鋅的抗性測定進行初篩，測定了435株不同種屬的酵母菌在含有200微克/毫升、400微克/毫升、600微克/毫升、800微克/毫升、1000微克/毫升、1200微克/毫升、1400微克/毫升、1600微克/毫升、1800微克/毫升、2000微克/毫升的梯度鋅離子濃度的YEPD固體培養(yǎng)基(酵母粉1％，蛋白胨1％，葡萄糖4％，1％瓊脂粉)上的生長情況，從中選出32株在含有1400微克/毫升鋅離子的YEPD固體培養(yǎng)基上生長好的菌株。
2)測定初篩得到的32株菌株在含有400微克/毫升鋅離子的YEPD液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)的細胞生物量和細胞含鋅量。通過篩選，獲得6株細胞生物量較高的菌株(每升培養(yǎng)液的細胞干重在15克以上，但每克干細胞的含鋅量在5毫克以下)和8株細胞含鋅量較高的菌株(每克干細胞的含鋅量在10毫克以上，但每升培養(yǎng)液的細胞干重在8克以下)。
3)通過生孢實驗，從上述菌株中挑選出一株生物量較高、生孢好的二倍體Y-78(啤酒酵母菌)和一株細胞含鋅量較高、生孢好的二倍體Y-389(葡萄酒酵母菌)，按常規(guī)方法對其進行生孢培養(yǎng)和單倍體分離。分別測定單倍體菌株的細胞生物量和含鋅量，從中選出生物量較高的單倍體Y-78-8(a)和細胞含鋅量較高的單倍體Y-389-15(a)。
4)用亞硝基胍和硫酸二乙酯分別對單倍體Y-78-8(a)和單倍體Y-389-15(a)進行誘變獲得營養(yǎng)缺陷突變株，從突變株中選出帶有不同氨基酸缺陷標(biāo)記的Y-78-8-21(a，his)和Y-389-15-16(a，met)作為融合親株。
5)按常規(guī)方法制備Y-78-8-21(a，his)和Y-389-15-16(a，met)的原生質(zhì)體，將兩菌株的原生質(zhì)體按1∶1比例混合，用聚乙二醇作融合誘導(dǎo)劑進行融合，在基本培養(yǎng)基(YNB培養(yǎng)基)上篩選融合子。
6)測定融合子在含有400微克/毫升鋅離子的YEPD培養(yǎng)基中培養(yǎng)的細胞生物量和細胞鋅含量。從中選育出細胞生物量和細胞鋅含量明顯優(yōu)于融合親株的融合菌株，即高生物量富鋅酵母(Saccharomyces cerevisiae)ZGFH-94 CGMCC №0896。高生物量富鋅酵母(Saccharomyces cerevisiae)ZGFH-94 CGMCC №0896具有雙親株的優(yōu)良性狀。高生物量富鋅酵母(Saccharomyces cerevisiae)ZGFH-94 CGMCC №0896的細胞生物量和細胞鋅含量明顯高于親株Y-78和Y-389，每升培養(yǎng)液的細胞干重達24克以上；每克干細胞的鋅含量在12毫克以上。
7)高生物量富鋅酵母(Saccharomyces cerevisiae)ZGFH-94 CGMCC №0896的遺傳穩(wěn)定性分析將高生物量富鋅酵母(Saccharomyces cerevisiae)ZGFH-94 CGMCC№0896在YEPD固體培養(yǎng)基傳代培養(yǎng)30次，取適量細胞經(jīng)適當(dāng)稀釋后，涂布YEPD平皿，培養(yǎng)后，隨機分別挑取100個單菌落于無菌水中，在室溫條件下饑餓4-6小時。取饑餓后的菌液分別接種含有1400微克/毫升鋅離子的YEPD培養(yǎng)基、YNB培養(yǎng)基、YNB+HIS培養(yǎng)基和YNB+MET培養(yǎng)基，培養(yǎng)結(jié)果證明挑取的100個單菌落在這四種培養(yǎng)基都生長，沒有出現(xiàn)分離現(xiàn)象。隨機挑10個單落在含有600微克/毫升鋅離子的YEPD培養(yǎng)基中培養(yǎng)培養(yǎng)后測定細胞生物量和細胞含鋅量，結(jié)果表明細胞生物量和細胞含鋅量無明顯變化。上述結(jié)果證明高生物量富鋅酵母(Saccharomyces cerevisiae)ZGFH-94 CGMCC №0896是一株遺傳穩(wěn)定的、細胞生物量高、細胞鋅含量高的優(yōu)良富鋅酵母菌。
實施例2、高生物量富鋅酵母(Saccharomyces cerevisiae)ZGFH-94 CGMCC №0896的優(yōu)化培養(yǎng)條件1)采用單因子發(fā)酵實驗和多因子正交實驗進行高生物量富鋅酵母(Saccharomycescerevisiae)ZGFH-94 CGMCC №0896的培養(yǎng)條件(包括培養(yǎng)基組分、鐵酸鹽濃度、培養(yǎng)基的pH值、通氣量、接種量及發(fā)酵時間等)實驗，通過的培養(yǎng)條件實驗，確定了優(yōu)化培養(yǎng)條件糖蜜培養(yǎng)基(或麥芽汁培養(yǎng)基或淀粉水解糖培養(yǎng)基)，總糖含量為8％-20％，培養(yǎng)基中鋅鹽(如硫酸鋅、醋化鋅、氯化鋅、氧化鋅等)濃度為200微克-1000微克/毫升，培養(yǎng)基的pH為4.0-7.0，接種量為5％-30％，25℃-35℃攪拌培養(yǎng)16-30小時。
2)在優(yōu)化的發(fā)酵培養(yǎng)條件下發(fā)酵培養(yǎng)高生物量和高含鋅量的富鋅酵母在優(yōu)化培養(yǎng)條件下，每升培養(yǎng)液的細胞干重達28克以上，每克干細胞的鋅含量達15毫克以上。
實施例3、富鋅酵母的生產(chǎn)高生物量和高鋅含量的富鋅酵母產(chǎn)品的生產(chǎn)工藝包括斜面菌種→液體菌種→一級液體種子培養(yǎng)→二級液體種子培養(yǎng)→三級液體種子培養(yǎng)→發(fā)酵罐發(fā)酵培養(yǎng)→收集酵母細胞及干燥→粉碎→高生物量及高鋅含量的富鋅酵母。下面對各生產(chǎn)工藝進一步說明如下(1)斜面菌種培養(yǎng)高生物量富鋅酵母(Saccharomyces cerevisiae)ZGFH-94 CGMCC №0896接種于含有總糖含量為16％、鋅鹽(如硫酸鋅、醋化鋅、氯化鋅、氧化鋅等)濃度為800微克/毫升的麥芽汁固體斜面上，在25-35℃培養(yǎng)48小時后，放入4℃冰箱保存；(2)液體菌種培養(yǎng)將保存的高生物量富鋅酵母(Saccharomyces cerevisiae)ZGFH-94 CGMCC №0896菌種活化后，接一環(huán)細胞于裝有150毫升總糖含量為10％、鋅鹽(如硫酸鋅、醋化鋅、氯化鋅、氧化鋅等)濃度為400微克/毫升的麥芽汁培養(yǎng)基的三角瓶中，于25-35℃攪拌培養(yǎng)16小時即為液體菌種；(3)一級液體種子培養(yǎng)按5％的接種量將液體菌種接入30個裝有150毫升總糖含量為12％、鋅鹽(如硫酸鋅、醋化鋅、氯化鋅、氧化鋅等)濃度為600微克/毫升的麥芽汁培養(yǎng)基的三角瓶中，在25-35℃攪拌培養(yǎng)18小時，即為一級液體種子培養(yǎng)物；(4)二級液體種子培養(yǎng)按15％的接種量將一級種子培養(yǎng)液接入裝有45升總糖含量為12％、鋅鹽(如硫酸鋅、醋化鋅、氯化鋅、氧化鋅等)濃度為800微克/毫升的麥芽汁培養(yǎng)基的小卡氏發(fā)酵罐，在25-35℃攪拌培養(yǎng)17小時，即為二級液體種子培養(yǎng)物；(5)三級液體種子培養(yǎng)按20％的接種量將二級種子培養(yǎng)液接入裝有450升總糖含量為16％、鋅鹽(如硫酸鋅、醋化鋅、氯化鋅、氧化鋅等)濃度為700微克/毫升的麥芽汁培養(yǎng)基的大卡氏發(fā)酵罐，在25-35℃攪拌培養(yǎng)19小時，即為三級液體種子培養(yǎng)物；(6)發(fā)酵罐發(fā)酵培養(yǎng)按30％的接種量將三級種子培養(yǎng)液接入裝有2250升總糖含量為14％、鋅鹽(如硫酸鋅、醋化鋅、氯化鋅、氧化鋅等)濃度為500微克/毫升的麥芽汁培養(yǎng)基的發(fā)酵罐，在25-35℃攪拌培養(yǎng)18小時；(7)收集酵母細胞及干燥采用板框壓榨或離心收集富鋅酵母細胞，在45～85℃風(fēng)干使其含水量小于5％；(8)粉碎用粉碎機將風(fēng)干的富鋅酵母細胞粉碎；(9)包裝用不透氣的包裝袋包裝，即為高生物量、高富鋅含量的富鋅酵母(每克干富鋅酵母細胞含有機鋅高達15毫克以上)。
實施例4、富鋅酵母的生產(chǎn)以淀粉水解糖為培養(yǎng)基，其發(fā)酵培養(yǎng)基配方和培養(yǎng)條件是總糖量為8％的淀粉水解糖，0.5％的玉米水解液，0.4％硫酸銨，200微克/毫升的鋅鹽(如硫酸鋅、醋化鋅、氯化鋅、氧化鋅等)，培養(yǎng)基的pH為6，接種量為15％，在25-35℃的條件下，攪拌培養(yǎng)22小時。
其生產(chǎn)工藝包括斜面菌種→液體菌種→一級液體種子培養(yǎng)→二級液體種子培養(yǎng)→三級液體種子培養(yǎng)→四級液體種子培養(yǎng)→發(fā)酵罐發(fā)酵培養(yǎng)→收集酵母細胞及干燥→粉碎→高生物量高鋅含量的富鋅酵母。
本實施例的生產(chǎn)工藝增加四級液體種子培養(yǎng)，其條件與三級液體種子培養(yǎng)大體相同，其他工藝條件與實施例3相同。
實施例5、富鋅酵母的生產(chǎn)以淀粉水解糖和甜菜糖蜜為培養(yǎng)基，其發(fā)酵培養(yǎng)基配方和培養(yǎng)條件是總糖量20％的淀粉水解糖和甜菜糖蜜，其重量份數(shù)比為1∶3，0.5％的玉米水解液，0.8％硫酸銨，0.10％磷酸，1000微克/毫升的鋅鹽(如硫酸鋅、醋化鋅、氯化鋅、氧化鋅等)，培養(yǎng)基的pH為7.0，接種量為20％，在25-35℃攪拌培養(yǎng)20小時。
其生產(chǎn)工藝包括液體菌種→一級液體種子培養(yǎng)→二級液體種子培養(yǎng)→三級液體種子培養(yǎng)→四級液體種子培養(yǎng)→五級液體種子培養(yǎng)→發(fā)酵罐發(fā)酵培養(yǎng)→收集酵母細胞及干燥→粉碎→高生物量高鋅含量的富鋅酵母。
本實施例的生產(chǎn)工藝增加五級液體種子培養(yǎng)，其條件與三級液體種子培養(yǎng)大體相同，其他工藝條件與實施例4相同。
實施例6、富鋅酵母的生產(chǎn)以蔗糖糖蜜和麥芽汁為培養(yǎng)基，其發(fā)酵培養(yǎng)基配方和培養(yǎng)條件是總糖量16％的蔗糖糖蜜和麥芽汁，其重量份數(shù)比為4∶1，1.0％的玉米水解液，0.6％硫酸銨，0.05％磷酸，400微克/毫升的鋅鹽(如硫酸鋅、醋化鋅、氯化鋅、氧化鋅等)，培養(yǎng)基的pH為7.5，接種量為30％，在25-35℃攪拌培養(yǎng)18小時。
其生產(chǎn)工藝包括液體菌種→一級液體種子培養(yǎng)→二級液體種子培養(yǎng)→三級液體種子培養(yǎng)→四級液體種子培養(yǎng)→五級液體種子培養(yǎng)→發(fā)酵罐發(fā)酵培養(yǎng)→收集酵母細胞及干燥→粉碎→高生物量高鋅含量的富鋅酵母。
本實施例的生產(chǎn)工藝增加五級液體種子培養(yǎng)，其條件與三級液體種子培養(yǎng)大體相同，其他工藝條件與實施例4相同。
權(quán)利要求
1.高生物量富鋅酵母(Saccharomyces cerevisiae)ZGFH-94 CGMCC №0896。
2.一種選育高生物量富鋅酵母的方法，包括以下步驟1)在梯度鋅離子濃度的培養(yǎng)基中分別篩選生物量高的酵母菌種和抗鋅能力強及細胞含鋅量高的酵母菌種；2)對生物量高的酵母菌種和抗鋅能力強及細胞含鋅量高的酵母菌種進行生孢培養(yǎng)、單倍體分離、誘變，篩選具有不同交配型及不同遺傳標(biāo)記的單倍體突變菌株；3)將生物量高的酵母菌單倍體突變菌株與抗鋅能力強及細胞鋅含量高的酵母菌單倍體突變菌株進行原生質(zhì)體融合；4)在選擇培養(yǎng)基上篩選高生物量和高鋅含量的融合二倍體優(yōu)良菌株，即富鋅酵母菌株。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于所述梯度鋅離子濃度為200微克/毫升-2000微克/毫升。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于所述生物量高的酵母菌種和抗鋅能力強及細胞含鋅量高的酵母菌種的原生質(zhì)體融合比例為1∶1-1∶2。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于所述選擇培養(yǎng)基所含鋅離子濃度400微克/毫升-2000微克/毫升的YEPD培養(yǎng)基。
6.一種利用高生物量富鋅酵母(Saccharomyces cerevisiae)ZGFH-94 CGMCC №0896生產(chǎn)富鋅酵母產(chǎn)品的方法，包括斜面菌種培養(yǎng)、液體菌種培養(yǎng)、至少二級液體種子培養(yǎng)、發(fā)酵罐發(fā)酵培養(yǎng)、得到產(chǎn)品。
7.根據(jù)權(quán)利要求6述的方法，其特征在于所述液體種子培養(yǎng)為三級-六級種子培養(yǎng)；所述發(fā)酵罐培養(yǎng)完成后，收集酵母細胞并干燥、粉碎得到產(chǎn)品。
8.根據(jù)權(quán)利要求6或7所述的方法，其特征在于所述斜面菌種培養(yǎng)、液體菌種培養(yǎng)、液體種子培養(yǎng)和發(fā)酵罐發(fā)酵培養(yǎng)的培養(yǎng)基包括8％-20％總糖量的有機物，200-1000微克/毫升的鋅酸鹽，培養(yǎng)基的pH為3.5-8.5；所述發(fā)酵罐培養(yǎng)的接種量為5％-35％。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于所述鋅酸鹽為硫酸鋅、醋化鋅、氯化鋅或氧化鋅。
10.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于所述有機物選自麥芽汁、淀粉水解糖、糖蜜或它們的任意組合。
全文摘要
本發(fā)明公開了一株富鋅酵母及其選育方法與應(yīng)用，本發(fā)明提供的菌株為高生物量富鋅酵母(Saccharomycescerevisiae)ZGFH－94 CGMCC №0896。其選育方法包括1)分別篩選生物量高的酵母菌種和抗鋅能力強及細胞含鋅量高的酵母菌種；2)篩選生物量高的酵母菌種和抗鋅能力強及細胞含鋅量高的酵母菌種的單倍體突變菌株；3)生物量高的酵母菌單倍體突變菌株與抗鋅能力強及細胞含鋅量高的酵母菌單倍體突變菌株進行原生質(zhì)體融合；4)在選擇培養(yǎng)基上篩選高生物量和高含鋅量的融合二倍體優(yōu)良菌株，即富鋅酵母菌種。本發(fā)明利用高生物量富鋅酵母(Saccharomyces cerevisiae)ZGFH－94 CGMCC №0896生產(chǎn)富鋅酵母產(chǎn)品的方法，具有廣闊的實際應(yīng)用前景。
文檔編號C12N15/08GK1530435SQ03119428
公開日2004年9月22日 申請日期2003年3月12日 優(yōu)先權(quán)日2003年3月12日
發(fā)明者張博潤, 郭雪娜, 傅秀輝, 何秀萍 申請人:中國科學(xué)院微生物研究所