專利名稱：細胞在常溫條件下長期存活裝置的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種細胞在常溫條件下長期存活裝置。
背景技術(shù)：
目前，纖弱的哺乳動物細胞在體外存活，或放于液氮裝置中凍存，或在哺乳動物體外非常嚴格的條件下培養(yǎng)，培養(yǎng)裝置中的溫度需為36.5±0.5℃，需要氧氣、二氧化碳氣，還要定期更換培養(yǎng)液等等。但在一些特殊的情況下，如長途運送、太空搭載實驗，就很難滿足以上細胞培養(yǎng)所需要的條件，這就限制了人們對細胞的研究和應用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于改進現(xiàn)有技術(shù)之缺點，而提供一種簡便、價廉、易操作的細胞在常溫條件下長期存活裝置。所述裝置可在無電源、無熱源、無氧氣、無二氧化碳氣供應，無需更換培養(yǎng)液的條件下，維持細胞在18℃～22℃常溫存活，當細胞從18℃～22℃常溫返回36.5±0.5℃溫度后可繼續(xù)生長繁殖。
為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采取以下設(shè)計方案本裝置是由容器、容器內(nèi)的培養(yǎng)液和浸在培養(yǎng)液中的具孔微載體三部分組成。所述具孔微載體是球狀或其它形狀的無毒高分子化合物，其直徑為100微米～500微米；孔徑為20微米～60微米；其材質(zhì)可選用纖維素、甲殼素和膠原等。所述培養(yǎng)液可選用下述3種常用基本培養(yǎng)液，即達貝克改良型培養(yǎng)液(Dulbecco’s Modified EagleMedium，DMEM)、海穆-F12(Ham-F12)培養(yǎng)液、1640培養(yǎng)液中的任何一種按比例加入下述兩種成份1、谷氨酰胺 添加量為在每升培養(yǎng)液中加入0.5～3克；2、氫化可的松 添加量為在每升培養(yǎng)液中加入0.5～1.5毫克；所述容器為無菌、無細胞毒性的透明容器，優(yōu)先選用具有彈性的塑料材料。在細胞運輸或太空搭載實驗中，將實驗細胞注入本裝置后密封，細胞進入具孔微載體的微孔中或貼附于具孔微載體的表面，在18℃～22℃的常溫下，細胞可存活至少16天，細胞從18℃～22℃常溫返回36.5±0.5℃后可繼續(xù)生長增殖。
本裝置簡單，但可使哺乳動物的細胞在本裝置內(nèi)長期存活，方便了細胞的運輸和太空科學實驗。


圖1為本發(fā)明裝置結(jié)構(gòu)示意2為具孔微載體結(jié)構(gòu)示意3為常溫培養(yǎng)16天的小鼠黑色素細胞(B16)在37℃繼續(xù)培養(yǎng)形成的克隆(光鏡下觀察)圖4為常溫培養(yǎng)16天的人宮頸癌細胞(Caski)在36℃繼續(xù)培養(yǎng)形成的克隆(光鏡下觀察)圖5為常溫培養(yǎng)16天的人口腔癌細胞(KB)在36.5℃繼續(xù)培養(yǎng)形成的克隆(光鏡下觀察)
具體實施例方式實施例1請參閱圖1～3所示，本裝置容器是采用由聚丙烯材料制的細胞凍存管1，其內(nèi)裝有合成培養(yǎng)液2，該合成培養(yǎng)液是由常用的達貝克改良型培養(yǎng)液(Dulbecco’s Modified Eagle Medium，DMEM)和在上述培養(yǎng)液中按每升加2克的比例加入的谷氨酰胺、按每升加1毫克的比例加入的氫化可的松的合成培養(yǎng)液。在所述合成培養(yǎng)液中浸有具孔微載體3，該微載體3是瑞士Pharmacia公司產(chǎn)品，商品為Cytopore II，微粒成分為Cellulose，微粒直徑230微米，孔徑30微米，在上述裝置內(nèi)加入小鼠黑色素瘤細胞(B16)，維持細胞在18～22℃常溫下存活16天，該細胞從18～22℃常溫返回37℃后，可繼續(xù)生長增殖，光鏡下觀察，細胞形態(tài)未見明顯變化。
實施例2請參閱圖1、圖2、圖4所示，本裝置容器是采用由聚丙烯材料制的細胞凍存管1，其內(nèi)裝有合成培養(yǎng)液2，該合成培養(yǎng)液是由常用的1640培養(yǎng)液和在上述培養(yǎng)液中按每升加3克的比例加入的谷氨酰胺、按每升加1.5毫克的比例加入的氫化可的松的合成培養(yǎng)液。在所述合成培養(yǎng)液中浸有具孔微載體3，該微載體3是瑞士Pharmacia公司產(chǎn)品，商品為Cytopore II，微粒成分為Cellulose，微粒直徑100微米，孔徑20微米，在上述裝置內(nèi)加入人宮頸癌細胞(Caski)，維持細胞在18～22℃常溫下存活16天，該細胞從18～22℃常溫返回36℃后，可繼續(xù)生長增殖，光鏡下觀察，細胞形態(tài)未見明顯變化。
實施例3請參閱圖1、圖2、圖5所示，本裝置容器是采用由聚丙烯材料制的細胞凍存管1，其內(nèi)裝有合成培養(yǎng)液2，該合成培養(yǎng)液是由常用的海穆-F12(Ham-F12)培養(yǎng)液和在上述培養(yǎng)液中按每升加0.5克的比例加入的谷氨酰胺、按每升加0.5毫克的比例加入的氫化可的松的合成培養(yǎng)液。在所述合成培養(yǎng)液中浸有具孔微載體3，該微載體3是瑞士Pharmacia公司產(chǎn)品，商品為CytoporeII，微粒成分Cellulose，微粒直徑500微米，孔徑60微米，在上述裝置內(nèi)加入人口腔癌細胞(KB)，維持細胞在18～22℃常溫下存活16天，該細胞從18～22℃常溫返回36.5℃后，可繼續(xù)生長增殖，光鏡下觀察，細胞形態(tài)末見明顯變化。
權(quán)利要求
1.一種細胞在常溫條件下長期存活裝置，其特征在于本裝置是由容器、容器內(nèi)的培養(yǎng)液和浸在培養(yǎng)液中的具孔微載體三部分組成；所述具孔微載體是球狀或其它形狀的無毒高分子化合物；所述培養(yǎng)液選用下述3種常用基本培養(yǎng)液，即達貝克改良型培養(yǎng)液(Dulbeccos Modified Eagle Mediunm，DMEM)、海穆-F12(Ham-F12)培養(yǎng)液、1640培養(yǎng)液中的任何一種按比例加入下述兩種成份(1)谷氨酰胺 添加量為在每升上述基本培養(yǎng)液中加入0.5～3克；(2)氫化可的松 添加量為在每升上述基本培養(yǎng)液中加入0.5～1.5毫克；所述容器為無菌、無細胞毒性的透明容器。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種細胞在常溫條件下長期存活裝置，其特征在于所述具孔微載體其材質(zhì)選用纖維素、甲殼素和膠原等。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種細胞在常溫條件下長期存活裝置，其特征在于所述具孔微載體其直徑為100微米～500微米，孔徑20微米～60微米。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種細胞在常溫條件下長期存活裝置，其特征在于所述容器采用由聚丙烯材料制的細胞凍存管。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種細胞在常溫條件下長期存活裝置，它是由容器、容器內(nèi)的培養(yǎng)液和浸在培養(yǎng)液中的具孔微載體三部分組成；所述具孔微載體是球狀或其它形狀的無毒高分子化合物；所述培養(yǎng)液選用下述3種常用基本培養(yǎng)液，即達貝克改良型培養(yǎng)液(Dulbeccos Modified Eagle Medium，DMEM)、海穆－F12(Ham－F12)培養(yǎng)液、1640培養(yǎng)液中的任何一種按比例加入下述兩種成分(1)谷氨酰胺添加量為在每升上述基本培養(yǎng)液中加入0.5～3克；(2)氫化可的松添加量為在每升上述基本培養(yǎng)液中加入0.5～1.5毫克；所述容器為無菌、無細胞毒性的透明容器；本裝置簡單，但可使哺乳動物的細胞在本裝置內(nèi)長期存活，方便了細胞的運輸和太空科學實驗。
文檔編號C12M3/00GK1532276SQ0312090
公開日2004年9月29日 申請日期2003年3月25日 優(yōu)先權(quán)日2003年3月25日
發(fā)明者房青, 向青, 唐勁天, 趙天德, 徐梅, 陳志華, 房 青 申請人:中日友好醫(yī)院