專(zhuān)利名稱(chēng)：一種從虎杖中制備白藜蘆醇的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種藥用和保健原料白藜蘆醇的提取制備工藝。
背景技術(shù)：
虎杖中含有白藜蘆醇(resveratrol)及其苷類(lèi)。白藜蘆醇具有降血脂、抗氧化、改善微循環(huán)、降血壓、防治癌癥以及抑制葡萄球菌、鏈球菌等作用。目前，提取白藜蘆醇的方法有以下幾種1.直接用溶媒提取，使用各種色譜方法將白藜蘆醇與白藜蘆醇苷以及虎杖中的其它成分分離。產(chǎn)品收率較低，成本很高。2.將虎杖碾磨成粉末狀，加入復(fù)合酶在恒溫條件下進(jìn)行酶解反應(yīng)，再用溶媒提取、分離和純化。制備成本較高。3.將新鮮虎杖打漿，置于容器中，用自身的酶進(jìn)行水解，然后用乙酸乙酯萃取，經(jīng)進(jìn)一步純化處理，制得白藜蘆醇。該法對(duì)虎杖有特別要求，需要新鮮虎杖，在目前情況下不利于工業(yè)化生產(chǎn)。4.將虎杖用水濕潤(rùn)后進(jìn)行保溫發(fā)酵得白藜蘆醇，若水解為白藜蘆醇后，再用有機(jī)溶媒提取后進(jìn)一步純化處理得白藜蘆醇。產(chǎn)品得率很低。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的就是為了克服上述現(xiàn)有的技術(shù)存在的缺陷而提供一種工藝簡(jiǎn)單、成本低、收得率和純度均較高的從虎杖中制備白藜蘆醇的方法。本發(fā)明是從中藥虎杖中制備白藜蘆醇的生產(chǎn)工藝。其特征在于包括以下工藝步驟將虎杖藥材切片用含乙醇的水溶劑、含丙酮水溶劑、含甲醇水溶劑提取，或者單獨(dú)用乙醇、丙酮、甲醇提取。提取液濃縮回收有機(jī)溶劑后，所得水溶液加入纖維素酶進(jìn)行水解，水解完全后(用TLC進(jìn)行檢識(shí))，分取沉淀，母液用有機(jī)溶劑萃取，有機(jī)層濃縮至干，殘?jiān)c沉淀合并得白藜蘆醇粗品，進(jìn)一步精制得白藜蘆醇產(chǎn)品。
圖一是本發(fā)明的工藝流程圖。
實(shí)施例用以下的實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做具體說(shuō)明，但本發(fā)明不限于下列實(shí)施例包含的內(nèi)容。
取虎杖藥材1kg，用70％乙醇6000ml回流提取3小時(shí)，濾取提取液，藥渣用70％乙醇4000ml回流提取2小時(shí)，濾取提取液并與第一次提取液合并，真空濃縮至500ml，調(diào)節(jié)PH值4.5-4.8，加入纖維素酶50ml，保持溫度為46-48℃，水解72小時(shí)，分取沉淀，用乙酸乙酯500ml，300ml萃取2次，合并乙酸乙酯液，真空濃縮至干，殘?jiān)c沉淀合并得白藜蘆醇粗品，進(jìn)一步精制得白藜蘆醇產(chǎn)品4.3克。
取虎杖藥材1kg，用80％乙醇6000ml回流提取3小時(shí)，濾取提取液，藥渣用80％乙醇4000ml回流提取2小時(shí)，濾取提取液并與第一次提取液合并，真空濃縮至500ml，調(diào)節(jié)PH值4.5-5.0，加入纖維素酶100ml，保持溫度為45-50℃，水解48小時(shí)，分取沉淀，用乙酸乙酯500ml，300ml萃取2次，合并乙酸乙酯液，真空濃縮全干，殘?jiān)c沉淀合并得白藜蘆醇粗品，進(jìn)一步精制得白藜蘆醇產(chǎn)品3.85克。
取虎杖藥材1kg，用95％乙醇6000ml回流提取3小時(shí)，濾取提取液，藥渣用95％乙醇4000ml回流提取2小時(shí)，濾取提取液并與第一次提取液合并，真空濃縮至500ml，調(diào)節(jié)PH值4.5-5.5，加入基因改性的纖維素酶DKT-3692酶20ml，保持溫度為50-60℃，水解48小時(shí)，分取沉淀，用乙酸丁酯500ml，300ml萃取2次，合并乙酸丁酯液，真空濃縮至干，殘?jiān)c沉淀合并得白藜蘆醇粗品，進(jìn)一步精制得白藜蘆醇產(chǎn)品5.6克。
取虎杖藥材1kg，用無(wú)水乙醇6000ml回流提取3小時(shí)，濾取提取液，藥渣用無(wú)水乙醇4000ml回流提取2小時(shí)，濾取提取液并與第一次提取液合并，真空濃縮至500ml，調(diào)節(jié)PH值4.7-5.1，加入基因改性的纖維素酶Super-300酶20ml，保持溫度為50-60℃，水解48小時(shí)，分取沉淀，用乙酸丁酯500ml，300ml萃取2次，合并乙酸丁酯液，真空濃縮至干，殘?jiān)c沉淀合并得白藜蘆醇粗品，進(jìn)一步精制得白藜蘆醇產(chǎn)品3.6克。
取虎杖藥材1kg，用70％甲醇6000ml回流提取3小時(shí)，濾取提取液，藥渣用70％甲醇4000ml回流提取2小時(shí)，濾取提取液并與第一次提取液合并，真空濃縮至500ml，調(diào)節(jié)PH值4.7-5.1，加入基因改性的纖維素酶DKT-3690酶100ml，保持溫度為50-60℃，水解96小時(shí)，分取沉淀，用乙酸丁酯500ml，300ml萃取2次，合并乙酸丁酯液，真空濃縮至干，殘?jiān)c沉淀合并得白藜蘆醇粗品，進(jìn)一步精制得白藜蘆醇產(chǎn)品4.83克。
取虎杖藥材1kg，用85％甲醇6000ml回流提取3小時(shí)，濾取提取液，藥渣用85％甲醇4000ml回流提取2小時(shí)，濾取提取液并與第一次提取液合并，真空濃縮至500ml，調(diào)節(jié)PH值4.5-5.5，加入基因改性的纖維素酶DKT-3691酶50ml，保持溫度為50-60℃，水解96小時(shí)，用乙酸丁酯500ml，300ml萃取2次，合并乙酸丁酯液，真空濃縮至干，得白藜蘆醇粗品，進(jìn)一步精制得白藜蘆醇產(chǎn)品5.25克。
取虎杖藥材1kg，用甲醇6000ml回流提取3小時(shí)，濾取提取液，藥渣用甲醇4000ml回流提取2小時(shí)，濾取提取液并與第一次提取液合并，真空濃縮至500ml，調(diào)節(jié)PH值4.7-5.1，加入基因改性的纖維素酶Super-300酶50ml，保持溫度為50-60℃，水解48小時(shí)，放冷，分取沉淀，用乙酸乙酯500ml，300ml萃取2次，合并乙酸乙酯液，真空濃縮至干，殘?jiān)c沉淀合并得白藜蘆醇粗品，進(jìn)一步精制得白藜蘆醇產(chǎn)品5.30克。
取虎杖藥材1kg，用含丙酮65％的水溶液6000ml回流提取3小時(shí)，濾取提取液，藥渣用含丙酮65％的水溶液4000ml回流提取2小時(shí)，濾取提取液并與第一次提取液合并，真空濃縮至500ml，調(diào)節(jié)PH值4.5-5.5，加入基因改性的纖維素酶DKT-3692酶50ml，保持溫度為55-60℃，水解72小時(shí)，放冷，分取沉淀，用乙酸乙酯500ml，300ml萃取2次，合并乙酸乙酯液，真空濃縮至干，殘?jiān)c沉淀合并得白藜蘆醇粗品，進(jìn)一步精制得白藜蘆醇產(chǎn)品3.70克。
取虎杖藥材1kg，用含丙酮80％的水溶液6000ml回流提取3小時(shí)，濾取提取液，藥渣用含丙酮80％的水溶液4000ml回流提取2小時(shí)，濾取提取液并與第一次提取液合并，真空濃縮至500ml，調(diào)節(jié)PH值6.5-7.5，加入基因改性的纖維素酶Super-200酶50g，保持溫度為45-55℃，水解72小時(shí)，放冷，分取沉淀，用乙酸乙酯500ml，300ml萃取2次，合并乙酸乙酯液，真空濃縮至干，殘?jiān)c沉淀合并得白藜蘆醇粗品，進(jìn)一步精制得白藜蘆醇產(chǎn)品3.70克。
取虎杖藥材1kg，用丙酮6000ml回流提取6小時(shí)，濾取提取液，藥渣用丙酮4000ml回流提取4小時(shí)，濾取提取液并與第一次提取液合并，真空濃縮至500ml，調(diào)節(jié)PH值6.5-7.5，加入基因改性的纖維素酶Super-200酶100g，保持溫度為45-55℃，水解48小時(shí)，放冷，分取沉淀，用乙酸乙酯500ml，300ml萃取2次，合并乙酸乙酯液，真空濃縮至干，殘?jiān)c沉淀合并得白藜蘆醇粗品，進(jìn)一步精制得白藜蘆醇產(chǎn)品3.90克。
權(quán)利要求
1.一種從虎杖中制備白藜蘆醇的方法，其特征在于如下步驟A.虎杖提取液濃縮液制備。取虎杖用甲醇，乙醇或丙酮提取，或者用甲醇、乙醇或者丙酮與水組成的混合溶劑提取。提取液濃縮后的濃縮液(1∶4-4∶1＝藥材重量∶濃縮液體積)。B.虎杖提取液濃縮液酶水解，虎杖提取液濃縮液中加入酶進(jìn)行酶水解。
2.按照權(quán)利要求1所述的虎杖提取液酶水解所用的酶是纖維素酶。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種從虎杖中制備白藜蘆醇的方法，該方法是將虎杖提取液加酶進(jìn)行水解，水解液用有機(jī)溶劑進(jìn)行萃取，回收有機(jī)溶劑進(jìn)一步分離和精制，即得白藜蘆醇產(chǎn)品。本法用虎杖的提取液水解白藜蘆醇苷半合成白藜蘆醇具有操作簡(jiǎn)單，收得率高，成本低等優(yōu)點(diǎn)。
文檔編號(hào)C12P7/22GK1566349SQ03147908
公開(kāi)日2005年1月19日 申請(qǐng)日期2003年6月26日 優(yōu)先權(quán)日2003年6月26日
發(fā)明者羅何生, 童文英 申請(qǐng)人:中國(guó)醫(yī)藥研究開(kāi)發(fā)中心有限公司