專利名稱：快速篩選病原微生物敏感藥物的裝置的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本實(shí)用新型涉及一種快速篩選病原微生物敏感藥物的裝置。
背景技術(shù)：
藥敏試驗(yàn)是輔助感染性疾病診斷、處方的重要手段?，F(xiàn)有技術(shù)包括多種輔助感染性疾病處方的藥敏試驗(yàn)方法。但實(shí)施這些方法需要較完備的實(shí)驗(yàn)室條件，如配備無(wú)菌操作臺(tái)、生化培養(yǎng)箱等，必須由具有一般微生物實(shí)驗(yàn)技能的技術(shù)人員才能進(jìn)行操作，在臨床實(shí)踐特別是獸醫(yī)臨床上的應(yīng)用有一定的局限性。
因此，急需一種快速篩選病原微生物(以下簡(jiǎn)稱病原)敏感藥物的裝置用于臨床實(shí)踐和生產(chǎn)實(shí)踐。目前指導(dǎo)養(yǎng)殖者選擇動(dòng)物病害用藥的產(chǎn)品只有一些“病原”檢測(cè)試劑盒。這類產(chǎn)品價(jià)格較高，適用面窄，只能用于某種特定微生物的檢測(cè)。用此類產(chǎn)品指導(dǎo)選藥的缺陷是只能證明患病動(dòng)物體內(nèi)是否含有該微生物，但不能確定該微生物是造成疾病的病原，即使該微生物是所患疾病的一種病原，也不一定是唯一的、主要的病原。另外，微生物的藥物敏感性變化較快，僅根據(jù)以往的經(jīng)驗(yàn)用藥不一定能有效治療疾病。因此，僅憑這種檢測(cè)結(jié)果處方并不可靠。

發(fā)明內(nèi)容
本實(shí)用新型的目的是提供一種快速篩選病原微生物敏感藥物的裝置，該裝置應(yīng)操作簡(jiǎn)便，快捷，不需嚴(yán)格的試驗(yàn)條件和專業(yè)人員操作。
本實(shí)用新型建立了一種簡(jiǎn)便、快捷的選藥裝置，無(wú)需進(jìn)行病原的分離鑒定即可直接進(jìn)行病原敏感藥物的篩選。
本裝置包括裝置A和裝置B，其中裝置A可以獨(dú)立用于藥敏選藥，也可以與裝置B配套使用。裝置B不單獨(dú)使用，是裝置A的附加裝置。分述如下裝置A是一種內(nèi)部有分隔條并帶有盒蓋的盒體，形狀不限，如可以是扁平的圓盒或長(zhǎng)方形或正方形盒。
盒體內(nèi)設(shè)有多個(gè)分隔條，分隔條最好形狀和大小相同，數(shù)目不限，可根據(jù)實(shí)際需要確定，常用數(shù)量為6-30根。分隔條將盒體的內(nèi)部空間分成多個(gè)分隔區(qū)，分隔區(qū)最好形狀大小相同。分隔條的一端與盒內(nèi)壁相連，另一端可與盒內(nèi)壁相連，也可以不相連，以不相連為優(yōu)選。盒內(nèi)裝有固體培養(yǎng)基，其高度不應(yīng)高于分隔條。固體培養(yǎng)基的配方及組成可以包括本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的各種常規(guī)培養(yǎng)基成分。
裝置A可以標(biāo)有刻度，幫助讀取藥敏試驗(yàn)結(jié)果；其中圓形盒體可帶有螺紋和/或密封圈，長(zhǎng)方形或正方形的盒體可帶有卡槽和/或密封圈，保證盒的密封性，減少雜菌等污染，延長(zhǎng)預(yù)先灌注的培養(yǎng)基的保存時(shí)限。
裝置A的材料可以用塑料或玻璃等對(duì)病原和培養(yǎng)基無(wú)影響的材料，用透明或半透明材料最好，無(wú)需開盒即可觀察藥敏試驗(yàn)結(jié)果。塑料為裝置A的最佳材料，既可以避免裝置的磕碰損壞，又易制作螺紋，且造價(jià)低廉，透明度好。
一種實(shí)施方式如圖1-2所示盒體1為圓形，各分隔條3自盒外周向中心排列，外側(cè)與盒體1外周相連，但分隔條3在圓心處互不相連，形成圓形空隙。使用時(shí)從圓心處向盒內(nèi)注入液體，通過旋轉(zhuǎn)盒體，使培養(yǎng)物均勻分布在各分隔區(qū)內(nèi)的培養(yǎng)基4上，但培養(yǎng)物不漫過分隔條，即分隔條3能將其兩邊的培養(yǎng)基分隔開來。
另一種實(shí)施方式如圖7-8所示盒體1為長(zhǎng)方形，分隔條3平行排列，一端與盒體的一邊相連，另一端不與盒體的另一邊相連，留有空隙，分隔區(qū)呈鋼琴鍵盤狀，使用時(shí)從空隙處加入培養(yǎng)物。
另一種實(shí)施方式是盒蓋內(nèi)包括有多個(gè)突起部位，可將待選藥物或含藥載體，如含藥濾紙片等，用粘貼等方式附著在其上。當(dāng)盒蓋與盒體密封后，這些突起部位可嵌入盒體的每個(gè)間隔中，與固體培養(yǎng)基表面接觸。
單獨(dú)用裝置A按以上幾種實(shí)施方式操作時(shí)，在各種藥物的作用下，盒體中固體培養(yǎng)基表面的每個(gè)區(qū)域病原群落生長(zhǎng)面積將有所不同。比較各個(gè)分隔區(qū)內(nèi)病原群落的分布情況，就能篩選出較佳的病害治療藥物。
裝置B是與裝置A配套使用的待選藥物攜帶裝置，不單獨(dú)使用。形狀是與裝置A相對(duì)應(yīng)的條狀物，使用時(shí)置于裝置A內(nèi)。
當(dāng)裝置A為圓形時(shí)，裝置B為圖3-4所示的環(huán)形貯藥圈5；圖5-6是貯藥圈放入圓形裝置A的示意圖。當(dāng)裝置A為長(zhǎng)方形時(shí)，裝置B為圖9-10所示的直線形貯藥條6。裝置B有若干個(gè)間隔，每個(gè)間隔內(nèi)設(shè)有一個(gè)貯藥處，用于放置待選藥物或含藥載體，各貯藥處互不相連。貯藥處可以是一個(gè)凹槽7，也可以是可附著藥物或含藥載體的平面或凸起狀等。所述含藥載體指含有藥物的紙片、棉花、瓊脂等。
裝置B的間隔數(shù)量應(yīng)與所用的裝置A中盒體的間隔數(shù)量相同，使用時(shí)可將裝置B固定在盒體的固體培養(yǎng)基上，使裝置B的間隔與盒體的間隔一一對(duì)應(yīng)。裝置B的每個(gè)間隔可設(shè)有凹口，嵌入盒體后藥物或含藥載體可與固體培養(yǎng)基表面接觸。裝置B固定在盒體內(nèi)后，其高度應(yīng)低于裝置A高度，保證盒體密封。
若裝置A的分隔條只有一端與盒體閉合，則裝置B嵌合在分隔條與盒體閉合的一端，以保證待選藥物不會(huì)滲透到其它分隔區(qū)。
現(xiàn)介紹一種裝置A和裝置B配套使用，進(jìn)行選藥的具體步驟1)從患病的人或動(dòng)物體內(nèi)和/或體表取樣樣本可以取自患病個(gè)體(人或動(dòng)物)體表或體內(nèi)的病灶組織，血液、組織液、分泌物等體液，肝臟、腎臟等實(shí)體性內(nèi)臟器官，尿液、糞便等排泄物，也可以是上述一種或幾種成分的混合物。
2)將樣本置于液體培養(yǎng)基中進(jìn)行病原擴(kuò)增培養(yǎng)首先根據(jù)疾病特征初步判斷病原類型，不同類型病原的營(yíng)養(yǎng)需求略有不同，應(yīng)根據(jù)病原類型選擇相應(yīng)的培養(yǎng)基。
將樣本加入液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)，至培養(yǎng)液混濁。培養(yǎng)溫度以與人體或動(dòng)物體溫相近為宜，一般需培養(yǎng)6～12小時(shí)。若培養(yǎng)溫度較低，可適當(dāng)延長(zhǎng)培養(yǎng)時(shí)間。含有固體物的樣本最好先經(jīng)破碎處理，以便其所攜帶的病原微生物能充分釋放。助破碎物可以是碎玻璃等不影響培養(yǎng)液理化性質(zhì)的堅(jiān)硬物質(zhì)，培養(yǎng)容器可以是錐形瓶或試管，以試管為佳。
3)將培養(yǎng)物作為病原替代物進(jìn)行敏感藥物篩選將所取樣本的液體培養(yǎng)物倒入盒體固體培養(yǎng)基上，待培養(yǎng)基表面干燥后將裝置B嵌入盒體中，使裝置B攜帶的每個(gè)待選藥物或含藥載體能直接接觸固體培養(yǎng)基。然后將裝置A閉合密封，倒置培養(yǎng)至培養(yǎng)基表面出現(xiàn)肉眼可見的病原群落。培養(yǎng)溫度以接近患病個(gè)體的體溫為宜，室溫也可。培養(yǎng)時(shí)間一般約8～24小時(shí)。用于藥敏試驗(yàn)的每個(gè)待選藥物既可以是單種藥物，也可以是一種或多種藥物混合，如中西藥混合、兩種以上抗生素混合等。
在不同藥物的作用下，盒體1中固體培養(yǎng)基表面的每個(gè)區(qū)域病原群落生長(zhǎng)面積將有所不同。比較各個(gè)分隔區(qū)內(nèi)病原群落的分布情況，就能篩選出較佳的病害治療藥物。
若由取自不同部位的樣本做出的藥敏試驗(yàn)結(jié)果不完全一致，則應(yīng)根據(jù)疾病的癥狀和病原的生長(zhǎng)特性做出選擇。例如a組樣本為病灶組織，b組樣本為血液、內(nèi)臟器官或其組合物，兩組樣本的藥敏試驗(yàn)結(jié)果略有不同，則選藥方法如表1所示。
表1選藥方法

注——代表病原長(zhǎng)勢(shì)好壞不影響選藥方法。
表1所述的三種狀態(tài)均指樣本加入液體培養(yǎng)基中正常培養(yǎng)后的狀態(tài)狀態(tài)①代表病原不侵入機(jī)體組織或血液；狀態(tài)②代表病原侵入機(jī)體組織或血液，由于a組樣本多與外界環(huán)境直接接觸，如體表物質(zhì)、腸道等，取樣時(shí)攜帶雜菌的可能性大，因此其藥敏試驗(yàn)結(jié)果只能作為參考；狀態(tài)③代表所選擇的培養(yǎng)基不能滿足病原的生長(zhǎng)需求，或疾病為非感染性疾病。發(fā)生狀態(tài)③所述情況時(shí)，應(yīng)通過個(gè)體觀察和鏡檢等手段重新判定病原的類型，并更換培養(yǎng)基進(jìn)行試驗(yàn)。如果病原在各種培養(yǎng)基上均不能正常生長(zhǎng)，則說明疾病為非感染性疾病或病原為病毒等不能在培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的微生物。
若患病個(gè)體為動(dòng)物，選藥時(shí)應(yīng)同時(shí)考慮到動(dòng)物品種、動(dòng)物生理、給藥方式、環(huán)境條件等因素，使藥物的選擇更為合理。
操作本裝置無(wú)需使用超凈工作臺(tái)，但需采取簡(jiǎn)單的防止污染措施，如取樣時(shí)對(duì)取樣部位外表面和取樣的器具(如刀具、器皿)進(jìn)行消毒，操作時(shí)應(yīng)盡可能選擇干凈的空間等。
本實(shí)用新型的優(yōu)點(diǎn)是操作簡(jiǎn)便、快捷、準(zhǔn)確，對(duì)細(xì)菌等病原一般可在12～36小時(shí)內(nèi)完成治療藥物的篩選。與傳統(tǒng)的藥敏試驗(yàn)方法相比，使用本裝置不需要逐個(gè)進(jìn)行每種病原的分離、鑒定和藥敏試驗(yàn)，而是將含有所有病原的樣本作為病原替代物擴(kuò)增培養(yǎng)后直接進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，大大縮短了試驗(yàn)周期，同時(shí)也降低了對(duì)試驗(yàn)環(huán)境和操作人員的要求。不具備經(jīng)典藥敏試驗(yàn)條件的養(yǎng)殖單位也可以利用本裝置較容易地選擇出合適的治療藥物，避免了判斷病原種類時(shí)可能產(chǎn)生的人為失誤，提高了用藥的針對(duì)性和準(zhǔn)確性，進(jìn)而減少了經(jīng)濟(jì)損失。本裝置雖然簡(jiǎn)單，但在實(shí)際應(yīng)用中卻取得了難以預(yù)料的準(zhǔn)確結(jié)果。


圖1、圖2是圓形盒體的裝置A的結(jié)構(gòu)示意圖及其剖面圖；圖3、圖4是環(huán)形的裝置B結(jié)構(gòu)示意圖及其剖面圖；圖5、圖6是圓形盒體的裝置A和環(huán)形的裝置B配套使用時(shí)的結(jié)構(gòu)示意圖及其剖面圖；圖7、圖8是長(zhǎng)方形盒體的裝置A的結(jié)構(gòu)示意圖及其剖面圖；圖9、圖10是直線形的裝置B結(jié)構(gòu)示意圖及其剖面圖。
以上各圖中，1是裝置A中盒體、2是盒蓋，3是置于盒體1中的分隔條，4是置于盒體1中的固體培養(yǎng)基，5是裝置B中的環(huán)形貯藥圈，6是直線形的貯藥條，7是位于貯藥圈上的貯藥處，8是貯藥圈上的若干凹口，其數(shù)量與分隔條3數(shù)量相同。
以下結(jié)合附圖和實(shí)施例進(jìn)一步說明本實(shí)用新型如下具體實(shí)施方式
實(shí)施例1 用圓形裝置A和裝置B選藥參照附圖1～附圖6圖中每個(gè)分隔條3從外周向中心方向?qū)⒑畜w1分隔，各分隔條的長(zhǎng)度小于盒的半徑，即在盒中心互不接觸；貯藥圈5是放置待選藥物的貯藥裝置，使用時(shí)固定在盒體1中固體培養(yǎng)基4的表面，貯藥圈5上設(shè)有多個(gè)凹口8，能嵌入盒中每個(gè)分隔條3上。貯藥圈5上有若干貯藥處7，每個(gè)貯藥處上貼有含不同待選藥物的濾紙片。
使用時(shí)將含有細(xì)菌的培養(yǎng)液倒入盒中，均勻分布在培養(yǎng)基4表面，待培養(yǎng)基表面基本干燥后將貯藥圈5卡入盒體1，使貯藥圈5上的含藥濾紙充分接觸培養(yǎng)基表面。將盒體密閉、倒置，在適溫下培養(yǎng)若干時(shí)間，至培養(yǎng)基4表面出現(xiàn)可見菌落。然后根據(jù)各分隔區(qū)內(nèi)抑菌圈的大小選藥。
實(shí)施例2 用長(zhǎng)方形裝置A和裝置B選藥參照附圖7～附圖10圖中每個(gè)分隔條3從長(zhǎng)方形盒體的一條長(zhǎng)邊向?qū)吰叫信帕?，將盒體1分隔(即盒體1的各分隔區(qū)呈鋼琴鍵盤狀平行排列)各分隔條的長(zhǎng)度小于盒的寬度，即分隔條不與盒體的對(duì)邊相連，留有空隙；貯藥條6是放置待選藥物的貯藥裝置，使用時(shí)固定在盒體1中固體培養(yǎng)基4的表面，貯藥條6上設(shè)有多個(gè)凹口8，能嵌入盒中每個(gè)分隔條3上。貯藥條6上有若干貯藥處7，每個(gè)貯藥處上貼有含不同待選藥物的濾紙片。
使用時(shí)將含有細(xì)菌的培養(yǎng)液倒入盒中，使其均勻分布在培養(yǎng)基4表面，待培養(yǎng)基表面基本干燥后將貯藥條6卡入盒體1，使貯藥條6上的含藥濾紙充分接觸培養(yǎng)基表面。將盒體密閉、倒置，其余培養(yǎng)及選藥操作同實(shí)施例1。
實(shí)施例3 用圓形裝置A選藥參照附圖1圖中每個(gè)分隔條3從外周向中心方向?qū)⒑畜w1分隔，各分隔條的長(zhǎng)度小于盒的半徑，即在盒中心互不接觸。
使用時(shí)將含有細(xì)菌的培養(yǎng)液倒入盒中，使其均勻分布在培養(yǎng)基4表面，待培養(yǎng)基表面基本干燥后，將含有不同待選藥物的濾紙片分別放在各分隔區(qū)緊鄰盒外周的培養(yǎng)基表面上。將盒體密閉，其余培養(yǎng)及選藥操作同實(shí)施例1。
實(shí)施例4 魚爛尾病選藥
2000年4月中旬，福建省羅源海星水產(chǎn)苗種場(chǎng)繁育的一月齡花尾胡椒鯛苗出現(xiàn)爛尾病，一周內(nèi)苗種死亡率約達(dá)到60％。爛尾病一般為細(xì)菌性感染引起，根據(jù)魚苗的發(fā)病特點(diǎn)初步診斷后，選取細(xì)菌性培養(yǎng)基進(jìn)行藥敏試驗(yàn)。
1)取樣魚苗體小，取瀕死的整只魚苗經(jīng)體表消毒后置于營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基培養(yǎng)。
2)一次培養(yǎng)取3個(gè)含有4ml營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基的試管，試管中含有助破碎物玻璃渣，每管加入2只瀕死魚苗，加塞密封，振蕩試管至魚苗破碎，室溫下靜置培養(yǎng)6小時(shí)至培養(yǎng)液混濁。
3)二次培養(yǎng)取3個(gè)含有固體營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的裝置A，每個(gè)裝置A有20個(gè)分隔區(qū)，每個(gè)試管對(duì)應(yīng)一個(gè)裝置A進(jìn)行二次培養(yǎng)。輕輕振蕩試管，將培養(yǎng)液搖勻，靜置2分鐘，讓較大固狀物沉淀。打開管塞，將1～2ml培養(yǎng)物倒入盒體的中心部位，旋轉(zhuǎn)盒體，至培養(yǎng)物均勻分布在各分隔區(qū)的培養(yǎng)基上，倒去多余液體，蓋上盒蓋，倒置至培養(yǎng)基表面基本干燥后，將含有不同待選藥物的裝置B嵌入裝置A，使待選藥物能接觸培養(yǎng)基表面。裝置B正面的貯藥處貼有含有待選藥物的濾紙，背面貼有待選藥物編號(hào)。密封，倒置裝置A，室溫下靜置培養(yǎng)10小時(shí)至菌落出現(xiàn)。
裝置B待選藥物編號(hào)對(duì)應(yīng)的藥物如表2所示。
表2 魚爛尾病待選藥物

4)選藥及治療根據(jù)裝置A表面的刻度讀取每個(gè)分隔區(qū)抑菌圈的大小，結(jié)果如表3所示。3個(gè)裝置A的藥敏試驗(yàn)結(jié)果基本一致。抑菌效果較好的抗菌藥有7種，其中環(huán)丙沙星和氯霉素效果最好。考慮到氯霉素有可能造成魚苗造血系統(tǒng)障礙等毒副作用，購(gòu)買環(huán)丙沙星拌餌口服，同時(shí)全池潑灑。第3天開始死亡率大幅下降，5天后病情基本穩(wěn)定。
表3 魚爛尾病藥敏試驗(yàn)結(jié)果
權(quán)利要求1.一種篩選病原微生物敏感藥物的裝置，其特征是所述裝置由內(nèi)部有多個(gè)分隔條(3)并帶有盒蓋(2)的盒體(1)組成；分隔條(3)一端與盒體(1)內(nèi)壁相連，將盒內(nèi)分成多個(gè)分隔區(qū)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種篩選病原微生物敏感藥物的裝置，其特征是形狀是圓形、長(zhǎng)方形或正方形的扁平盒體。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種篩選病原微生物敏感藥物的裝置，其特征是帶有螺紋或卡槽。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種篩選病原微生物敏感藥物的裝置，其特征是帶有密封圈。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種篩選病原微生物敏感藥物的裝置，其特征是所述盒蓋內(nèi)有多個(gè)用于攜帶待選藥物的突起部位。
6.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種篩選病原微生物敏感藥物的裝置，其特征是還包括一個(gè)可內(nèi)置于盒體的待選藥物攜帶裝置，形狀是與盒體相對(duì)應(yīng)的條狀物。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種篩選病原微生物敏感藥物的裝置，其特征是所述藥物攜帶裝置是貯藥圈(5)或貯藥條(6)。
8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種篩選病原微生物敏感藥物的裝置，其特征是所述藥物攜帶裝置分若干區(qū)域，每個(gè)區(qū)域有一個(gè)貯藥處，且各貯藥處互不接觸。
9.根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種篩選病原微生物敏感藥物的裝置，其特征是所述貯藥處是凹槽、平面或凸起。
10.根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種篩選病原微生物敏感藥物的裝置，其特征是所述藥物攜帶裝置設(shè)有凹口，可嵌入盒體(1)的分隔條(3)上。
專利摘要本實(shí)用新型涉及一種快速篩選病原微生物敏感藥物的裝置，包括可密封的盒體及盒內(nèi)的固體培養(yǎng)基；盒內(nèi)有多個(gè)分隔條將內(nèi)部分成多個(gè)分隔區(qū)。該裝置還可包括待選藥物攜帶裝置。本裝置操作簡(jiǎn)單、方便，能在操作條件達(dá)不到專業(yè)要求的場(chǎng)所如家庭、養(yǎng)殖場(chǎng)、野外進(jìn)行快速準(zhǔn)確的藥敏試驗(yàn)。
文檔編號(hào)C12Q1/18GK2682084SQ200320131549

公開日2005年3月2日 申請(qǐng)日期2003年12月30日 優(yōu)先權(quán)日2003年12月30日
發(fā)明者楊小強(qiáng), 郭銀漢 申請(qǐng)人:楊小強(qiáng), 北京東方天甲科技發(fā)展有限公司