專利名稱：酶法測定血氨試劑盒的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種試劑盒，具體涉及一種酶法測定血氨試劑盒。
背景技術：
血氨測定有擴散法、離子交換法、離子選擇電極法和酶法，前三種方法由于測定繁瑣，難于在臨床上大規(guī)模開展，而酶法具有特異性高、微量、快速、準確的特點，但是目前文獻介紹的酶法測定血氨方法，只適合于少量科研使用，因為該方法使用的酶與輔酶只適于短期使用，穩(wěn)定性差，難于在各醫(yī)院化驗室大批量長期使用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種能夠長期保存的酶法測定血氨試劑盒。本發(fā)明的試劑盒由三羥甲基氨基甲烷、吐溫-20、疊氮鈉、乳糖、谷氨酸脫氫酶、α-酮戊二酸、丙酮酸鈉、還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)組分構成，其中各組分的含量為三羥甲基氨基甲烷50～150mmol、吐溫-200.1～2ml、疊氮鈉0.5～2g、乳糖5～50g、谷氨酸脫氫酶500～1500u、α-酮戊二酸2～20mmol、丙酮酸鈉1～10mmol、還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸0.1～1mmol。本發(fā)明的三羥甲基氨基甲烷、吐溫-20對NADPH起保護作用；疊氮鈉、乳糖對谷氨酸脫氫酶有保護作用。使用本發(fā)明的試劑盒，調(diào)節(jié)最佳pH＝8.0，各成分經(jīng)溶解后分裝、冷凍干燥，有效期可達兩年(冷藏)，復溶后，室溫穩(wěn)定一周，冷藏穩(wěn)定一個月，抗干擾能力強，中等程度溶血、乳摩血、血糖20mmol/l以下，膽紅素100μmol/l以下，對測定不產(chǎn)生干擾，凍干試劑冷藏一年，試劑盒中酶活力損失小于5％，NADPH損失小于10％，線性達200μmol/l，批內(nèi)CV＝3.8％，批間CV＝5.1％，回收率為96.1％。
具體實施例方式具體實施方式
一本實施方式的試劑盒由三羥甲基氨基甲烷、吐溫-20、疊氮鈉、乳糖、谷氨酸脫氫酶、α-酮戊二酸、丙酮酸鈉、還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)組分構成，其中各組分的含量為三羥甲基氨基甲烷50～150mmol、吐溫-200.1～2ml、疊氮鈉0.5～2g、乳糖5～50g、谷氨酸脫氫酶500～1500u(u為酶活力的國際單位)、α-酮戊二酸2～20mmol、丙酮酸鈉1～10mmol、還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸0.1～1mmol，取蒸餾水，使用前將蒸餾水加熱至沸騰，密封備用；將三羥甲基氨基甲烷、吐溫-20、疊氮鈉、乳糖、α-酮戊二酸和丙酮酸鈉溶解于上述蒸餾水中，調(diào)節(jié)pH＝8.0，然后再向其中加入谷氨酸脫氫酶和NADPH，定容、分裝，再經(jīng)過冷凍干燥即得成品，有效期達兩年。
具體實施例方式
二本實施方式與具體實施方式
一不同的是，各組分的含量為三羥甲基氨基甲烷55～90mmol、吐溫-200.2～0.8ml、疊氮鈉0.6～1.2g、乳糖6～25g、谷氨酸脫氫酶600～900u、α-酮戊二酸5～10mmol、丙酮酸鈉2～5mmol、還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸0.2～0.5mmol。
具體實施例方式
三本實施方式與具體實施方式
一不同的是，各組分的含量為三羥甲基氨基甲烷100～140mmol、吐溫-201.0～1.8ml、疊氮鈉1.3～1.9g、乳糖30～45g、谷氨酸脫氫酶1000～1400u、α-酮戊二酸12～18mmol、丙酮酸鈉6～9mmol、還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸0.6～0.9mmol。
具體實施例方式
四本實施方式試劑盒中各組分的含量為三羥甲基氨基甲烷60mmol、吐溫-200.4ml、疊氮鈉0.7g、乳糖7g、谷氨酸脫氫酶650u、α-酮戊二酸6mmol、丙酮酸鈉3mmol、還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸0.4mmol。
具體實施例方式
五本實施方式試劑盒中各組分的含量為三羥甲基氨基甲烷135mmol、吐溫-201.7ml、疊氮鈉1.8g、乳糖43g、谷氨酸脫氫酶1350u、α-酮戊二酸17mmol、丙酮酸鈉8mmol、還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸0.8mmol。
具體實施例方式
六本實施方式試劑盒中各組分的含量為三羥甲基氨基甲烷100mmol、吐溫-201ml、疊氮鈉1g、乳糖20g、谷氨酸脫氫酶1000u、α-酮戊二酸10mmol、丙酮酸鈉5mmol、還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸0.24mmol。
權利要求
1.酶法測定血氨試劑盒，其特征在于它由三羥甲基氨基甲烷、吐溫-20、疊氮鈉、乳糖、谷氨酸脫氫酶、α-酮戊二酸、丙酮酸鈉、還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸組分構成，其中各組分的含量為三羥甲基氨基甲烷50～150mmol、吐溫-20 0.1～2ml、疊氮鈉0.5～2g、乳糖5～50g、谷氨酸脫氫酶500～1500u、α-酮戊二酸2～20mmol、丙酮酸鈉1～10mmol、還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸0.1～1mmol。
2.根據(jù)權利要求1所述的酶法測定血氨試劑盒，其特征在于它由55～90mmol三羥甲基氨基甲烷、0.2～0.8ml吐溫-20、0.6～1.2g疊氮鈉、6～25g乳糖、600～900u谷氨酸脫氫酶、5～10mmol α-酮戊二酸、2～5mmol丙酮酸鈉、0.2～0.5mmol還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸組分構成。
3.根據(jù)權利要求1所述的酶法測定血氨試劑盒，其特征在于它由100～140mmol三羥甲基氨基甲烷、1.0～1.8ml吐溫-20、1.3～1.9g疊氮鈉、30～45g乳糖、1000～1400u谷氨酸脫氫酶、12～18mmol α-酮戊二酸、6～9mmol丙酮酸鈉、0.6～0.9mmol還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸組分構成。
4.根據(jù)權利要求1所述的酶法測定血氨試劑盒，其特征在于它由60mmol三羥甲基氨基甲烷、0.4ml吐溫-20、0.7g疊氮鈉、7g乳糖、650u谷氨酸脫氫酶、6mmol α-酮戊二酸、3mmol丙酮酸鈉、0.4mmol還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸組分構成。
5.根據(jù)權利要求1所述的酶法測定血氨試劑盒，其特征在于它由135mmol三羥甲基氨基甲烷、1.7ml吐溫-20、1.8g疊氮鈉、43g乳糖、1350u谷氨酸脫氫酶、17mmol α-酮戊二酸、8mmol丙酮酸鈉、0.8mmol還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸組分構成。
6.根據(jù)權利要求1所述的酶法測定血氨試劑盒，其特征在于它由100mmol三羥甲基氨基甲烷、1ml吐溫-20、1g疊氮鈉、20g乳糖、1000u谷氨酸脫氫酶、10mmol α-酮戊二酸、5mmol丙酮酸鈉、0.24mmol還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸組分構成。
全文摘要
酶法測定血氨試劑盒，它涉及一種試劑盒。本發(fā)明的試劑盒由50～150mmol三羥甲基氨基甲烷、0.1～2ml吐溫－20、0.5～2g疊氮鈉、5～50g乳糖、500～1500u谷氨酸脫氫酶、2～20mmolα－酮戊二酸、1～10mmol丙酮酸鈉、0.1～0.5mmol還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸組分構成。使用本發(fā)明的試劑盒，調(diào)節(jié)最佳pH＝8.0，各成分經(jīng)溶解后分裝、冷凍干燥，有效期可達兩年(冷藏)，復溶后，室溫穩(wěn)定一周，冷藏穩(wěn)定一個月，抗干擾能力強，中等程度溶血、乳摩血、血糖20mmol/l以下，膽紅素100μmol/l以下，試劑盒中酶活力損失小于5％，NADPH損失小于10％，線性達200μmol/l，批內(nèi)CV＝3.8％，批間CV＝5.1％，回收率為96.1％。
文檔編號C12Q1/32GK1616673SQ200410043900
公開日2005年5月18日 申請日期2004年9月27日 優(yōu)先權日2004年9月27日
發(fā)明者李曉光, 于永光 申請人:哈爾濱醫(yī)科大學