專利名稱：一種破壁花粉活性物的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及對植物花粉進行加工利用的技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種破壁花粉活性物的制備方法。
背景技術(shù)：
花粉是植物有性繁殖的雄性配子體。當花粉粒被帶到植物雌性生殖器官柱頭上時，在適宜的溫度和濕度下，花粉就會產(chǎn)生萌動，發(fā)出花粉管，精細胞就會沿著花粉管到達胚珠與卵細胞結(jié)合成為受精卵，進而發(fā)育成植物的種子。因此，可以認為花粉細胞內(nèi)貯存著大量的植物遺傳活性物質(zhì)。長期以來，人們一直認為花粉的破壁程度越高，提取活性物就越徹底。但由于花粉的結(jié)構(gòu)致密，外壁富有彈性而異常堅韌，外壁組成的化學(xué)物質(zhì)相當穩(wěn)定，耐酸耐堿，用常規(guī)的粉碎和提取方法，均很難奏效。因此，人們通過知識和實踐的積累，逐漸形成了一套近乎完善的破壁和提取活性物方法。有文獻作了歸納計，大致有七類破壁方法1、溫差破壁法，是利用熱脹冷縮的原理，在深凍后迅速投入熱水中，使花粉炸裂；2、水浸減壓破壁法，將花粉研成小粒，用水浸泡、冷凍、再經(jīng)減壓處理，然后均質(zhì)處理，如此反復(fù)幾次；3、膠體磨破壁法，花粉先經(jīng)冷凍15小時，然后通過膠體磨破壁；4、氣流破壁法，即使用氣流粉碎機破壁花粉；5、膨化破壁法，利用谷物膨化機在膨脹力的作用下，使花粉內(nèi)含物沖破花粉壁進出；6、超聲波破壁法，用超聲儀處理、振動、使花粉內(nèi)含物自萌發(fā)孔溢出；7、發(fā)酵酶解破壁法，該方法包括a酵素液發(fā)酵法，培養(yǎng)基制備—酵素液制備—發(fā)酵花粉—干燥處理；b直接發(fā)酵法，調(diào)節(jié)花粉含水量—花粉發(fā)酵—干燥處理；c蜂糧破壁法，蜂糧—蜜水調(diào)和—花粉發(fā)酵—干燥；d酶化物理破壁法，利用酶法多次酶化，使花粉胞壁變軟變薄，然后干燥，粉碎；e酶制劑酶解破壁法，花粉直接添加酶制劑酶解破壁。
以上這些方法有一個共同缺陷，那就是均沒有注意到花粉在萌動期內(nèi)產(chǎn)生的活性物質(zhì)的利用。因此破壁率仍然不高，活性物的提取率仍然較低。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的就是為了克服上述現(xiàn)有技術(shù)存在的缺陷而提供一種花粉破壁率及活性物提取率均較高的破壁花粉活性物的制備方法。
本發(fā)明的目的可以通過以下技術(shù)方案來實現(xiàn)一種破壁花粉活性物的制備方法，其特征在于，該方法包括以下工藝步驟(1)花粉原料，采集飽滿的花粉粒，并經(jīng)嚴格篩選，確保新鮮；(2)誘導(dǎo)萌動，采用浸泡方法誘導(dǎo)花粉萌動，具體方法為加入清水或蒸溜水、生理鹽水或促進花粉快速萌動的營養(yǎng)液進行浸泡誘導(dǎo)，液體加入量是花粉重量的0.01～3倍，浸泡誘導(dǎo)時間4～8小時，誘導(dǎo)溫度16～43℃；(3)萌動培養(yǎng)，將上述經(jīng)誘導(dǎo)的花粉放置于恒溫恒濕通風的培養(yǎng)箱中進行萌動培養(yǎng)，培養(yǎng)條件為相對濕度60～98％，溫度16～48℃，時間12～24小時，此時花粉外壁的韌性已明顯降低，有利于破壁操作；(4)機械破壁，選用通用的工業(yè)粉碎機械進行粉碎、碾壓或磨碎破壁操作；(5)萃取分離，將上述破壁花粉放入超臨界萃取釜中進行萃取分離，工藝參數(shù)如下萃取壓力5～60MPa，萃取溫度32～85℃，流體流量5～80kg/小時，萃取時間0.5～6小時；(6)收集產(chǎn)物，收集上述萃取分離后得到的呈油脂狀的活性物，該活性物即為破壁花粉活性物。
在步驟(2)中，所述的營養(yǎng)液選自靈芝實體或菌絲體提取液、茯苓菌絲體提取液、生物素培養(yǎng)液中的一種或幾種。
在步驟(4)中，所述的粉碎機械可選自碾壓機、滾磨機、剪切機、氣流碰撞機、機械撞擊機中的一種或幾種。
在步驟(5)中，所述的萃取分離還可以加入夾帶劑，該夾帶劑選自乙醇或水。
所述的活性物占萃取前花粉總重量的25～35％。
本發(fā)明在進行花粉萌動實驗中發(fā)現(xiàn)
1，萌動期花粉外壁的韌性明顯降低，而且發(fā)現(xiàn)處于休眠狀態(tài)的花粉，當被誘導(dǎo)而萌動后就會被激發(fā)產(chǎn)生極為強烈的生理活性物質(zhì)。
2，及時采集得到的新鮮花粉，由于新鮮程度高，養(yǎng)分供應(yīng)充足，花粉粒成型飽滿。當采用本萌動方法后，可以用市售最簡易的研磨機，即可完成99％的破壁。實驗又發(fā)現(xiàn)，經(jīng)破壁的花粉，可以將貯存在花粉囊內(nèi)呈油脂狀的活性物質(zhì)釋出。當采用超臨界CO2萃取，可獲得高達30％的油狀高活性物質(zhì)。其中EA10活性物質(zhì)含量的提高尤為明顯。
動物和臨床實驗表明處于萌動期破壁花粉的生理活性極強，對細胞免疫和體液免疫系統(tǒng)有較強的調(diào)節(jié)作用。適用于癌癥化放療期的升白、抗花粉過敏、改善腎功能、和換季易感冒等癥狀。
具體實施例方式
下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作進一步詳細說明。
實施例11.篩選飽滿新鮮的玉米花粉100千克；2.加入靈芝菌絲體提取液200千克進行浸泡誘導(dǎo)，浸泡誘導(dǎo)時間6小時，維持溫度32℃；3.將上述經(jīng)誘導(dǎo)的花粉置于恒溫恒濕通風培養(yǎng)箱內(nèi)進行萌動培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度34℃，濕度90％、萌動培養(yǎng)時間為3小時，經(jīng)檢查花粉萌動率達99％，其外壁已明顯軟化；4.經(jīng)市售錘式粉碎機破壁處理，鏡檢花粉破壁率達99％；5.將上述破壁花粉置于超臨界萃取釜中萃取，工藝條件壓力45MPa、溫度53℃、流體流量60千克/小時、萃取時間2小時；6.將萃取物稱重，呈油脂狀活性物質(zhì)重量為30千克。該活性物質(zhì)外觀呈透明油狀物，無異味、無沉淀、無嚎味，有花粉特有香氣。經(jīng)檢測無溶劑殘留。
實施例21.篩選飽滿新鮮的向日葵花粉100千克；
2.加入茯苓菌絲體提取液300千克進行浸泡誘導(dǎo)，浸泡誘導(dǎo)時間4小時，維持溫度43℃；3.將上述經(jīng)誘導(dǎo)的花粉置于恒溫恒濕通風培養(yǎng)箱內(nèi)進行萌動培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度48℃、濕度98％、萌動培養(yǎng)時間為24小時，經(jīng)檢查花粉萌動率達99％，其外壁已明顯軟化；4.經(jīng)市售錘式粉碎機破壁處理，鏡檢花粉破壁率達99％；5.將上述破壁花粉置于超臨界萃取釜中萃取，工藝條件壓力60MPa、溫度85℃、流體流量80千克/小時、萃取時間6小時；6.將萃取物稱重，呈油脂狀活性物質(zhì)重量為35千克。該活性物質(zhì)外觀呈透明油狀物，無異味、無沉淀、無嚎味，有花粉特有香氣。經(jīng)檢測無溶劑殘留。
實施例31.篩選飽滿新鮮的油菜花粉100千克；2.加入靈芝菌絲體提取液、茯苓菌絲體提取液、生物素培養(yǎng)液共100千克進行浸泡誘導(dǎo)，浸泡誘導(dǎo)時間8小時，維持溫度16℃；3.將上述經(jīng)誘導(dǎo)的花粉置于恒溫恒濕通風培養(yǎng)箱內(nèi)進行萌動培養(yǎng)，溫度16℃、濕度60％、萌動培養(yǎng)時間為12小時，經(jīng)檢查花粉萌動率達99％，其外壁已明顯軟化；4.經(jīng)市售錘式粉碎機破壁處理，鏡檢花粉破壁率達99％；5.將上述破壁花粉置超臨界萃取釜中萃取，工藝條件壓力5MPa、溫度32℃、流體流量5千克/小時、萃取時間0.5小時；6.將萃取物稱重，呈油脂狀活性物質(zhì)重量為30千克，該活性物質(zhì)外觀呈透明油狀物，無異味、無沉淀、無嚎味，有花粉特有香氣，經(jīng)檢測無溶劑殘留。
實施例41.篩選飽滿新鮮的玉米花粉100千克；2.加入蒸餾水或生理鹽水1千克進行浸泡誘導(dǎo)，浸泡誘導(dǎo)時間8小時，維持誘導(dǎo)溫度43℃；其余工藝步驟及參數(shù)與實施例1相同，得到油脂狀活性物質(zhì)重量為25千克，該活性物質(zhì)外觀呈透明油狀物，無異味、無沉淀、無嚎味，有花粉特有香氣，經(jīng)檢測無溶劑殘留。
權(quán)利要求
1.一種破壁花粉活性物的制備方法，其特征在于，該方法包括以下工藝步驟(1)花粉原料，采集飽滿的花粉粒，并經(jīng)嚴格篩選，確保新鮮；(2)誘導(dǎo)萌動，采用浸泡方法誘導(dǎo)花粉萌動，具體方法為加入清水或蒸溜水、生理鹽水或促進花粉快速萌動的營養(yǎng)液進行浸泡誘導(dǎo)，液體加入量是花粉重量的0.01～3倍，浸泡誘導(dǎo)時間4～8小時，誘導(dǎo)溫度16～43℃；(3)萌動培養(yǎng)，將上述經(jīng)誘導(dǎo)的花粉放置于恒溫恒濕通風的培養(yǎng)箱中進行萌動培養(yǎng)，培養(yǎng)條件為相對濕度60～98％，溫度16～48℃，時間12～24小時，此時花粉外壁的韌性已明顯降低，有利于破壁操作；(4)機械破壁，選用通用的工業(yè)粉碎機械進行粉碎、碾壓或磨碎破壁操作；(5)萃取分離，將上述破壁花粉放入超臨界萃取釜中進行萃取分離，工藝參數(shù)如下萃取壓力5～60MPa，萃取溫度32～85℃，流體流量5～80kg/小時，萃取時間0.5～6小時；(6)收集產(chǎn)物，收集上述萃取分離后得到的呈油脂狀的活性物，該活性物即為破壁花粉活性物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種破壁花粉活性物的制備方法，其特征在于，在步驟(2)中，所述的營養(yǎng)液選自靈芝實體或菌絲體提取液、茯苓菌絲體提取液、生物素培養(yǎng)液中的一種或幾種。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種破壁花粉活性物的制備方法，其特征在于，在步驟(4)中，所述的粉碎機械可選自碾壓機、滾磨機、剪切機、氣流碰撞機、機械撞擊機中的一種或幾種。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種破壁花粉活性物的制備方法，其特征在于，在步驟(5)中，所述的萃取分離還可以加入夾帶劑，該夾帶劑選自乙醇或水。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種破壁花粉活性物的制備方法，其特征在于，所述的活性物占萃取前花粉總重量的25～35％。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種破壁花粉活性物的制備方法，該方法包括花粉原料、誘導(dǎo)萌動、萌動培養(yǎng)、機械破壁、萃取分離、收集產(chǎn)物等工藝步驟；與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明充分利用了花粉萌動期的一些特點，采用誘導(dǎo)、培養(yǎng)、破壁、萃取等工藝，從而大大提高了花粉的破壁率及活性物的提取率。
文檔編號C12N15/10GK1778897SQ200410084600
公開日2006年5月31日 申請日期2004年11月26日 優(yōu)先權(quán)日2004年11月26日
發(fā)明者黃亮 申請人:黃亮