欧美在线观看视频网站,亚洲熟妇色自偷自拍另类,啪啪伊人网,中文字幕第13亚洲另类,中文成人久久久久影院免费观看 ,精品人妻人人做人人爽,亚洲a视频

D-型非天然氨基酸的制備新方法

文檔序號(hào):552357閱讀:263來源:國知局
專利名稱:D-型非天然氨基酸的制備新方法
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明涉及非天然氨基酸的一種新的制備方法,特別是D-型非天然氨基酸的制備方法。
天然的L-氨基酸由于可以從天然提取或發(fā)酵直接得到,目前國內(nèi)外均有大規(guī)模生產(chǎn),產(chǎn)品生產(chǎn)能力大于需求量。非天然氨基酸,D-氨基酸及其衍生物廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥等領(lǐng)域,它是合成新藥如抗菌和抗病毒藥物、食品添加劑如人工甜味劑、農(nóng)藥如殺蟲劑以及擬除蟲菊酯的重要中間物,特別是作為半合成抗生素的側(cè)鏈原料,D-型氨基酸更受到學(xué)術(shù)界與產(chǎn)業(yè)界的關(guān)注。D-氨基酸很難通過天然提取的方法制備,目前研究或產(chǎn)業(yè)化一般通過拆分的方法制備,拆分的方法有化學(xué)拆分、物理拆分及酶拆分。酶拆分的方法較為成熟、穩(wěn)定但酶的價(jià)格太高,酶的用量大,生產(chǎn)周期長效率低,難以大規(guī)?;a(chǎn)?;瘜W(xué)拆分和物理拆分目前方法還不成熟。近年來國內(nèi)外對(duì)D-氨基酸的需求逐步增加,研究新的方法進(jìn)行D-氨基酸的規(guī)模化生產(chǎn)并降低成本具有巨大的市場前景和良好的社會(huì)經(jīng)濟(jì)效益。
本發(fā)明的目的是提供一種非天然氨基酸特別是D-氨基酸的制備新方法。該方法是應(yīng)用化學(xué)合成技術(shù),把廉價(jià)的天然的L-氨基酸通過重氮化反應(yīng)再經(jīng)過氨解、酶拆分的方法轉(zhuǎn)變成非天然的D-氨基酸,該方法成本低、生產(chǎn)周期短,容易實(shí)現(xiàn)規(guī)模化生產(chǎn)。
我們的目的是這樣實(shí)現(xiàn)的把L-氨基酸在一定溫度、酸性環(huán)境、有鹵素離子存在的情況下與亞硝酸鈉進(jìn)行重氮化反應(yīng)得到大量的α-D-鹵代酸及少量的α-L-鹵代酸,鹵代酸再用氨水或液氨進(jìn)行氨解得到大量的D-氨基酸及少量的L-氨基酸,通過水和乙醇(或甲醇)重結(jié)晶可得到占初品30-80%的純D-氨基酸及20-70%的含有少量L-氨基酸的D-氨基酸(以下簡稱不純物),把不純物用常規(guī)化學(xué)方法進(jìn)行氨基乙?;蚵纫阴;?,得到?;被?,?;被嵊妹覆鸱?,用常規(guī)化學(xué)手段分離可以完全去除L-氨基酸,又能得到一批D-氨基酸純品,從而提高收率,該方法與常規(guī)酶拆分方法相比酶的用量大大降低,效率也大大提高。
本發(fā)明所述的L-氨基酸是指L-丙氨酸(alanine)、L-纈氨酸(valine)、L-亮氨酸(leucine)、L-異亮氨酸(isoleucine)、L-苯丙氨酸(phenylalanine)、L-半胱氨酸(cysteine)、L-蘇氨酸(threonine)、L-蛋氨酸(methionine)、L絲氨酸(serine)、L-脯氨酸(proline)、L-酪氨酸(tyrosine)、L-色氨酸(tryptophan)、L-天冬氨酸(aspartic acid)、L-谷氨酸(glutamic acid)、L-賴氨酸(lysine)、L-精氨酸(arginine)、L-組氨酸(histidine)、L-谷氨酰胺(glutamine)、L-天冬酰胺(asparagine)中的任意一種。本發(fā)明進(jìn)行重氮化反應(yīng)的溫度是-30℃--50℃,其中最佳反應(yīng)溫是-5℃--15℃;本發(fā)明把α-D-鹵代酸用氨水或液氨進(jìn)行氨解的溫度是-5℃--100℃,其中最佳反應(yīng)溫是0℃--75℃。本發(fā)明所述的酸性環(huán)境是指重氮化反應(yīng)進(jìn)行時(shí)要用到酸,酸可以是無機(jī)酸或有機(jī)酸,常用的是無機(jī)酸,主要是硫酸、硝酸或氫鹵酸,其用量為L-氨基酸摩爾量的1-10倍,最佳為2-5倍。本發(fā)明所述亞硝酸鈉的用量為L-氨基酸摩爾量的1-5倍,最佳為1-3倍。本發(fā)明所用的鹵素離子為氟、氯、溴、碘離子中的一種單獨(dú)或幾種共同使用,通常使用其無機(jī)鹽如鈉鹽、鉀鹽、鋰鹽或直接使用氫鹵酸如鹽酸、氫溴酸,其用量為L-氨基酸摩爾量的1-10倍,最佳為2-5倍。重氮化反應(yīng)進(jìn)行時(shí)可適當(dāng)加入催化劑如氯化亞銅等。重氮化反應(yīng)形成的α-D-鹵代酸可以用有機(jī)溶劑萃取出來,有機(jī)溶劑可以用乙酸乙酯、乙謎等所有疏水性溶劑。本發(fā)明氨解用氨水或液氨,其用量為α-D-鹵代酸重量的2-20倍,最佳為3-10倍。本發(fā)明所用的酶為?;富虻鞍酌?,?;妇唧w可用豬腰酰化酶及黃曲?;福琁型II型均可,蛋白酶主要枯草桿菌蛋白酶,酶用量為?;被岬?-10%,最佳為1-5%;用蛋白酶時(shí)把?;被嵯刃纬杉柞ズ筮M(jìn)行拆分。
本發(fā)明實(shí)施例如下實(shí)施例一在5000ml園底玻璃燒瓶中加入2molL-丙氨酸,加入1000ml水及10mol氫溴酸,冷卻到0℃,攪拌下慢慢滴加3mol亞硝酸鈉的水溶液,滴加過程維持反應(yīng)溫度0--8℃,加完后在室溫?cái)嚢?小時(shí),用乙酸乙酯萃取出形成的D-溴丙酸,蒸干乙酸乙酯后加入5倍量的氨水在60℃密封氨解10小時(shí)得到初品D-丙氨酸,初品用水及醇重結(jié)晶后得到純品,收率48%,另有30%的含有少量L-氨基酸的D-氨基酸(以下簡稱不純物)用乙酸酐進(jìn)行乙?;?,加入?;锟偭?%的豬腰?;窱進(jìn)行拆分,用常規(guī)氨基酸分離手段分離可以完全去除L-氨基酸,又能得到一批D-氨基酸純品,總收率80%。HPLC檢測含量99%,旋光-14--16℃(C=2,5N HCl)。
實(shí)施例二在5000ml園底玻璃燒瓶中加入2mol L-谷氨酸,加入500ml水及12mol氫溴酸,冷卻到0℃,攪拌下慢慢滴加2.4mol亞硝酸鈉的水溶液,滴加過程維持反應(yīng)溫度0--10℃,加完后在室溫?cái)嚢?小時(shí),用乙醚萃取出形成的D-α-溴代戊二酸,蒸干乙醚后加入3倍量的氨水在60℃密封氨解10小時(shí)得到初品D-谷氨酸,初品用水及醇重結(jié)晶后得到純品,收率53%,另有30%的不純物用乙酐氯進(jìn)行乙?;?,加入?;锟偭?%的豬腰酰化酶II進(jìn)行拆分,用常規(guī)氨基酸分離手段分離可以完全去除L-氨基酸,又能得到一批D-氨基酸純品,總收率90%,HPLC檢測含量99%,旋光-31--33℃(C=2,5N HCl)。
實(shí)施例三在5000ml園底玻璃燒瓶中加入2mol L-天冬酸,加入1500ml水及20mol氫溴酸,冷卻到0℃,攪拌下慢慢滴加2.2mol亞硝酸鈉的水溶液,滴加過程維持反應(yīng)溫度0--10℃,加完后在室溫?cái)嚢?小時(shí),用乙酸乙酯萃取出形成的D-α-溴丁二酸,蒸干乙醚后加入10倍量的氨水在25℃密封氨解72小時(shí)得到初品D-天冬酸,初品用水及醇重結(jié)晶后得到純品,收率32%,另有50%的不純物用氯乙酐氯進(jìn)行乙酰化后,加入?;锟偭?%的黃曲?;窱I進(jìn)行拆分,用常規(guī)氨基酸分離手段分離可以完全去除L-氨基酸,又能得到一批D-天冬酸純品,總收率80%,HPLC檢測含量99%,旋光-24.4--26.4℃(C=2,5N HCl)。
實(shí)施例四在5000ml園底玻璃燒瓶中加入2mol L-絲氨酸,加入2000ml水及6mol鹽酸,加入2mol氯化亞酮,冷卻到0℃,攪拌下慢慢滴加6mol亞硝酸鈉的水溶液,滴加過程維持反應(yīng)溫度0--10℃,加完后在室溫?cái)嚢?小時(shí),用乙醚萃取出形成的D-α-氯代-4-羥基丁酸,蒸干乙醚后加入15倍量的氨水在60℃密封氨解10小時(shí)得到初品D-絲氨酸,初品用水及醇重結(jié)晶后得到純品,另有不純物用氯乙酐氯進(jìn)行乙酰化后,加入?;锟偭?%的黃曲酰化酶I進(jìn)行拆分,用常規(guī)氨基酸分離手段分離可以完全去除L-氨基酸,又能得到一批D-絲氨酸純品,總收率90%,HPLC檢測含量99%,旋光-14--16℃(C=2,5N HCl)。
實(shí)施例五
在5000ml園底玻璃燒瓶中加入2mol L-亮氨酸,加入3000ml水及6mol硫酸,加入11mol溴化鈉,冷卻到0℃,攪拌下慢慢滴加3mol亞硝酸鈉的水溶液,滴加過程維持反應(yīng)溫度0--10℃,加完后在室溫?cái)嚢?小時(shí),用乙醚萃取出形成的D-α-溴代酸中間體,蒸干乙醚后加入10倍量的氨水在60℃密封氨解10小時(shí)得到初品D-亮氨酸,初品用水及醇重結(jié)晶后得到純品,把不純物用氯乙酐氯進(jìn)行乙?;螅尤膈;锟偭?%的黃曲?;窱I進(jìn)行拆分,用常規(guī)氨基酸分離手段分離可以完全去除L-氨基酸,又能得到一批D-亮氨酸純品,總收率80%,HPLC檢測含量99%,旋光-15--17℃(C=2,5N HCl)。
實(shí)施例六在5000ml園底玻璃燒瓶中加入2mol L-苯丙氨酸,加入3000ml水及5mol硫酸,加入10mol溴化鈉,冷卻到0℃,攪拌下慢慢滴加3mol亞硝酸鈉的水溶液,滴加過程維持反應(yīng)溫度0--10℃,加完后在室溫?cái)嚢?小時(shí),用乙醚萃取出形成的D-α-溴代酸中間體,蒸干乙醚后加入10倍量的氨水在60℃密封氨解5小時(shí)得到初品D-苯丙氨酸,初品用水及醇重結(jié)晶后得到純品,把不純物用氯乙酐氯進(jìn)行乙?;?,加入?;锟偭?%的豬腰酰化酶I進(jìn)行拆分,用常規(guī)氨基酸分離手段分離可以完全去除L-氨基酸,又能得到一批D-苯丙氨酸純品,總收率80%,HPLC檢測含量99%,旋光+3.5--5.5℃(C=2,5N HCl)。
實(shí)施例七在5000ml園底玻璃燒瓶中加入2mol L-組氨酸,加入3000ml水及5mol硫酸,加入14mol溴化鈉,冷卻到0℃,攪拌下慢慢滴加2.4mol亞硝酸鈉的水溶液,滴加過程維持反應(yīng)溫度0--10℃,加完后在室溫?cái)嚢?小時(shí),用乙醚萃取出形成的D-α-溴代酸中間體,蒸干乙醚后加入10倍量的氨水在60℃密封氨解5小時(shí)得到初品D-苯丙氨酸,初品用水及醇重結(jié)晶后得到純品,把不純物用氯乙酐氯進(jìn)行乙?;螅尤膈;锟偭?%的豬腰?;窱進(jìn)行拆分,用常規(guī)氨基酸分離手段分離可以完全去除L-氨基酸,又能得到一批D-組氨酸純品,總收率95%,HPLC檢測含量99%,旋光-11--13℃(C=2,5N HCl)。
實(shí)施例八在5000ml園底玻璃燒瓶中加入2mol L-色氨酸,加入3000ml水及5mol硫酸,加入14mol溴化鈉,冷卻到0℃,攪拌下慢慢滴加2.4mol亞硝酸鈉的水溶液,滴加過程維持反應(yīng)溫度0--10℃,加完后在室溫?cái)嚢?小時(shí),用乙醚萃取出形成的D-α-溴代酸中間體,蒸干乙醚后加入10倍量的氨水在60℃密封氨解5小時(shí)得到初品D-色氨酸,初品用水及醇重結(jié)晶后得到純品,把不純物用氯乙酐氯進(jìn)行乙酰化后,再進(jìn)行甲酯化后加入?;锟偭?%的枯草桿菌蛋白酶進(jìn)行拆分,用常規(guī)氨基酸分離手段分離可以完全去除L-氨基酸,又能得到一批D-色氨酸純品,總收率95%,,HPLC檢測含量99%,旋光-2.1--3.5℃(C=2,5N HCl)。
權(quán)利要求
1.一種非天然氨基酸特別是D-氨基酸的制備新方法,應(yīng)用化學(xué)合成技術(shù),把L-氨基酸在一定溫度、酸性環(huán)境、有鹵素離子存在的情況下與亞硝酸鈉進(jìn)行重氮化反應(yīng)得到α-D-鹵代酸,鹵代酸再用氨水或液氨進(jìn)行氨解得到大量的D-氨基酸及少量的L-氨基酸,通過水和乙醇(或甲醇)重結(jié)晶可得到占初品30-80%的純D-氨基酸及20-70%的含有少量L-氨基酸的D-氨基酸(以下簡稱不純物),把不純物用常規(guī)化學(xué)方法進(jìn)行氨基乙?;蚵纫阴;?,得到?;被幔;被嵊妹覆鸱?,用常規(guī)化學(xué)手段分離可以完全去除L-氨基酸,又能得到一批D-氨基酸純品,從而提高收率。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的D-氨基酸的制備新方法,其特征在于,L-氨基酸是指L-丙氨酸(alanine)、L-纈氨酸(valine)、L-亮氨酸(leucine)、L-異亮氨酸(isoleucine)、L-苯丙氨酸(phenylalanine)、L-半胱氨酸(cysteine)、L-蘇氨酸(threonine)、L-蛋氨酸(methionine)、L-絲氨酸(serine)、L-脯氨酸(proline)、L-酪氨酸(tyrosine)、L-色氨酸(tryptophan)、L-天冬氨酸(aspartic acid)、L-谷氨酸(glutamic acid)、L-賴氨酸(lysine)、L-精氨酸(arginine)、L-組氨酸(histidine)、L-谷氨酰胺(glutamine)、L-天冬酰胺(asparagine)中的任意一種。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的D-氨基酸的制備新方法,其特征在于,進(jìn)行重氮化反應(yīng)的溫度是-30℃--50℃,其中最佳反應(yīng)溫是-5℃--15℃;本發(fā)明把α-D-鹵代酸用氨水或液氨進(jìn)行氨解的溫度是-5℃--100℃,其中最佳反應(yīng)溫是0℃--75℃。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的D-氨基酸的制備新方法,其特征在于,酸性環(huán)境是指重氮化反應(yīng)進(jìn)行時(shí)要用到酸,酸可以是無機(jī)酸或有機(jī)酸,常用的是無機(jī)酸,主要是硫酸、硝酸或氫鹵酸,其用量為L-氨基酸摩爾量的1-10倍,最佳為2-5倍。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的D-氨基酸的制備新方法,其特征在于,亞硝酸鈉的用量為L-氨基酸摩爾量的1-5倍,最佳為1-3倍。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的D-氨基酸的制備新方法,其特征在于,所用的鹵素離子為氟、氯、溴、碘離子中的一種單獨(dú)或幾種共同使用,通常使用其無機(jī)鹽如鈉鹽、鉀鹽、鋰鹽或直接使用氫鹵酸如鹽酸、氫溴酸,其用量為L-氨基酸摩爾量的1-10倍,最佳為2-5倍。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的D-氨基酸的制備新方法,其特征在于,氨解用氨水或液氨,其用量為α-D-鹵代酸重量的2-20倍,最佳為3-10倍。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的D-氨基酸的制備新方法,其特征在于,酶為?;富虻鞍酌?,酰化酶具體可用豬腰?;讣包S曲酰化酶,I型II型均可,蛋白酶主要枯草桿菌蛋白酶,酶用量為酰化氨基酸的1-10%,最佳為1-5%;用蛋白酶時(shí)把酰化氨基酸先形成甲酯后進(jìn)行拆分。
全文摘要
本發(fā)明提供一種非天然氨基酸特別是D-氨基酸的制備新方法。該方法是應(yīng)用化學(xué)合成技術(shù),把廉價(jià)的天然的L-氨基酸通過重氮化反應(yīng)再經(jīng)過氨解、酶拆分的方法轉(zhuǎn)變成非天然的D-氨基酸,該方法成本低、生產(chǎn)周期短,容易實(shí)現(xiàn)規(guī)?;a(chǎn)。
文檔編號(hào)C12P13/00GK1827588SQ20051002043
公開日2006年9月6日 申請(qǐng)日期2005年3月3日 優(yōu)先權(quán)日2005年3月3日
發(fā)明者袁明龍, 袁明偉, 杜碧林, 朱延新, 鄭玲 申請(qǐng)人:四川琢新生物材料研究有限公司
網(wǎng)友詢問留言 已有0條留言
  • 還沒有人留言評(píng)論。精彩留言會(huì)獲得點(diǎn)贊!
1
泰和县| 武义县| 乐陵市| 沭阳县| 朝阳市| 碌曲县| 金门县| 保靖县| 修水县| 大丰市| 井陉县| 贺兰县| 郑州市| 北辰区| 甘谷县| 仁寿县| 中阳县| 怀化市| 乌鲁木齐市| 元江| 柘城县| 富宁县| 娄烦县| 扬中市| 广西| 工布江达县| 金溪县| 体育| 称多县| 黄梅县| 开阳县| 凭祥市| 新密市| 安乡县| 紫云| 鹿泉市| 湘潭县| 西乌珠穆沁旗| 泸西县| 喀喇沁旗| 赞皇县|