專利名稱：一個(gè)用于防治作物病害的編碼類光敏色素蛋白的基因的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及植物病害防治領(lǐng)域，更具體地，本發(fā)明涉及一個(gè)用于防治作物病害的編碼類光敏色素蛋白的基因。本發(fā)明還涉及該基因在植物病害防治中的應(yīng)用以及作為用于植物病害防治的藥物的靶標(biāo)的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
植物病害一直是農(nóng)作物減產(chǎn)、品質(zhì)降低的主要因子之一。隨著病原菌對(duì)藥物抗性的增強(qiáng)，農(nóng)藥用量在不斷增加，這不僅加劇了環(huán)境污染、藥物殘留，也大大提高了農(nóng)業(yè)成本，因此，亟待研發(fā)新的防病治病策略和新型的無(wú)公害藥物。弄清植物病原菌侵染寄主的遺傳機(jī)制是開(kāi)發(fā)新型藥物和防病策略的關(guān)鍵。
甘藍(lán)黑腐病黃單胞菌，也稱為甘藍(lán)黑腐病黃單胞菌野油菜致病變種(Xanthomonas campestris pv.campestris，簡(jiǎn)稱Xcc)，是一種能在全球范圍內(nèi)引起所有十字花科植物黑腐病的革蘭氏陰性細(xì)菌(Qian，2005)。該菌能在寄主的任何生長(zhǎng)期通過(guò)水孔、氣孔或傷口侵入植物體內(nèi)，引起病害，寄主包括甘藍(lán)、花椰菜、大白菜、蘿卜、油菜等。典型的黑腐病癥狀是在葉緣上形成V字形病斑，隨著病斑的擴(kuò)大，葉脈變黑，因而被稱為黑腐病。黑腐病被認(rèn)為是對(duì)十字花科植物危害最為嚴(yán)重的病害，尤其在熱帶和亞熱帶地區(qū)，溫度和濕度都適宜于該菌的生長(zhǎng)繁殖，因此發(fā)病更加嚴(yán)重(Alvarez，1987)。由于遺傳穩(wěn)定性和遺傳可操作性，甘藍(lán)黑腐病黃單胞菌一直被用作研究微生物與植物相互作用分子機(jī)理的模式細(xì)菌。因此，鑒定與黃單胞菌致病相關(guān)的新基因，對(duì)防治植物病害具有顯著的意義。
植物發(fā)育生物學(xué)是當(dāng)代植物科學(xué)研究的重點(diǎn)之一，而光控發(fā)育(photomorphogenesis，光形態(tài)建成)又是植物發(fā)育生物學(xué)研究中最為活躍的領(lǐng)域之一。光敏素的發(fā)現(xiàn)是20世紀(jì)植物學(xué)科的一大成就。植物中光控發(fā)育的主要光受體是光敏色素(phytochrome)。感受到光后，光敏色素發(fā)生構(gòu)象變化，轉(zhuǎn)移入核與一系列的轉(zhuǎn)錄因子相互作用激活下游的靶基因產(chǎn)生光形態(tài)建成表型，影響細(xì)胞或發(fā)育過(guò)程。光敏色素街道光信號(hào)傳導(dǎo)，控制植物一系列基因的表達(dá)(Sineshchekov，2004；Nagy，2002)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明鑒定了甘藍(lán)黑腐病黃單胞菌類光敏色素蛋白基因XC4241與致病相關(guān)，提供可能的防治植物病害的藥物靶標(biāo)。
因此，本發(fā)明的一個(gè)目的是提供一種編碼類光敏色素蛋白的基因(XC4241基因)，其是下列核苷酸序列之一1)SEQ ID No.1所示的DNA序列；2)與SEQ ID No.1所示DNA序列具有80％以上同源性的DNA序列。
在一個(gè)實(shí)施方案中，所述的基因具有SEQ ID No.1所示的DNA序列，5’端的第301-2202位核苷酸為開(kāi)放閱讀框。
本發(fā)明還涉及含有上述基因的表達(dá)載體。優(yōu)選為pCXC4241。
本發(fā)明另一個(gè)目的是提供上述基因在植物病害防治中的應(yīng)用。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，所述植物病害是由甘藍(lán)黑腐病黃單胞菌(Xanthomonas campestris pv.campestris)所導(dǎo)致的甘藍(lán)黑腐病。
本發(fā)明還有一個(gè)目的是提供所述的基因作為用于植物病害防治的藥物的靶標(biāo)的應(yīng)用。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述植物病害是由甘藍(lán)黑腐病黃單胞菌所導(dǎo)致的甘藍(lán)黑腐病。
SEQ ID No.1所示的DNA是甘藍(lán)黑腐病黃單胞菌8004菌株的DNA，由1905個(gè)堿基組成。含完整的類光敏色素蛋白基因，自5’端的第301-2202位核苷酸為該基因的開(kāi)放閱讀框(Open Reading Frame，ORF)，自5’端的第301-303位核苷酸為該基因的起始密碼子TTG，自5’端的第2203-2205位核苷酸為終止密碼子TAA。
SEQ ID No.2所示的蛋白質(zhì)是類光敏色素蛋白基因編碼的類光敏色素蛋白產(chǎn)物，由634個(gè)氨基酸組成。該蛋白質(zhì)預(yù)測(cè)分子量為70355.49道爾頓，等電點(diǎn)為5.56。
含有本發(fā)明開(kāi)放閱讀框及其部分序列的表達(dá)載體均屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。


圖1為XC4241基因的克隆酶切電泳圖譜。1100bp標(biāo)準(zhǔn)DNA(片段大小從大到小依次為3kb，2kb，1.5kb，1.2kb，1kb，0.9kb，0.8kb，0.7kb等)；2XC4241基因片段；3λ/HindIII2標(biāo)準(zhǔn)DNA(片段大小從大到小依次為23.1kb，9.4kb，6.6kb，2.4kb，2.0kb)。
圖2為XC4241基因插入突變體064H01的PCR驗(yàn)證凝膠圖。1100bp標(biāo)準(zhǔn)DNA；2XC4241基因插入突變體064H01。
圖3為XC4241基因插入突變體064H01的致病性試驗(yàn)。
A為甘藍(lán)黑腐病黃單胞菌野生型菌株8004；B為XC4241基因插入突變體064H01；C為水(空白對(duì)照)。
具體實(shí)施例方式
下文將參考實(shí)施例詳細(xì)描述本發(fā)明，所述實(shí)施例僅是意圖舉例說(shuō)明本發(fā)明，而不是意圖限制本發(fā)明的范圍。本發(fā)明的范圍由后附的權(quán)利要求具體限定。
實(shí)施例在本發(fā)明的實(shí)施例中所用到的材料包括甘藍(lán)黑腐病黃單胞菌野生型菌株8004，購(gòu)于英國(guó)植物病原細(xì)菌國(guó)家保藏中心(The National Collectionof Plant Pathogenic Bacteria，NCPPB)，保藏號(hào)為NCPPB No.1145；大腸桿菌(Escherichia coli)株系JM109、載體pGEM-3Zf(+)購(gòu)自Promega公司，pLAFR3、pLAFRJ為本研究室保存的柯斯質(zhì)粒(Staskawicz et al，1987)；限制性內(nèi)切酶、修飾酶等試劑購(gòu)自Promega、Stratagene、QIAGEN公司。
實(shí)施例1 甘藍(lán)黑腐病黃單胞菌突變體庫(kù)的構(gòu)建以大腸桿菌和Xcc之間的穿梭質(zhì)粒pLAFR1為載體將Tn5gusA5(Sharma，1991)引入Xcc野生型菌株8004，然后通過(guò)引入不相容質(zhì)粒pPH1JI(Tang et al，2005)驅(qū)趕pLAFR1，通過(guò)抗生素(卡那霉素)抗性標(biāo)記篩選Xcc::Tn5gusA5插入突變體，結(jié)合Xcc全基因組序列(基因組序列號(hào)NC 007086)和TAIL-PCR(Thermal Asymetric Interlaced-PCR)技術(shù)(Yao-Guang Liu，1995)，確定Tn5gusA5在基因組上的插入位置，并對(duì)插入位置進(jìn)行PCR驗(yàn)證。通過(guò)考察突變體的致病性、胞外酶活性、胞外多糖合成等表型的變化，篩選致病相關(guān)基因(Tang et al，2005)，本發(fā)明涉及其中一個(gè)新的致病相關(guān)基因-XC4241基因(類光敏色素蛋白基因)，其插入突變體編號(hào)為064H01，篩選過(guò)程見(jiàn)參考文獻(xiàn)(Tang et al，2005)。
實(shí)施例2 XC4241基因(類光敏色素蛋白基因)的克隆及序列測(cè)定根據(jù)XC4241的基因序列(見(jiàn)序列表，第1位到第2305位堿基)，設(shè)計(jì)引物(上游引物GGGAATTC CGATGCCGCCGTGCCGCCGCCG和下游引物GGTCTAGA GTCATGCCGATCCCGAGCACCG；PCR條件95℃3min；95℃30sec，60℃30sec，72℃2.5min，30個(gè)循環(huán)；72℃5min)，以甘藍(lán)黑腐病黃單胞菌8004菌株總DNA為模板，用PCR法擴(kuò)增該基因全長(zhǎng)序列，并將其克隆至克隆載體pGEM3Zf(+)中，用雙脫氧核苷酸法在ABI377 DNA自動(dòng)測(cè)序儀上測(cè)定DNA核苷酸序列(SEQ ID No.1)。將測(cè)序驗(yàn)證正確的XC4241基因序列克隆至穿梭載體pLAFRJ中，獲得了含該基因的重組質(zhì)粒pCXC4241。該質(zhì)粒用EcoRI、XbaI酶切，除了一個(gè)22kb的載體條帶外，還有一個(gè)2.3kb的外源片段(見(jiàn)圖1)。
實(shí)施例 3XC4241基因插入突變體064H01的驗(yàn)證對(duì)插入突變體064H01進(jìn)行TAIL-PCR測(cè)序定位，發(fā)現(xiàn)其插在XC4241基因內(nèi)。用轉(zhuǎn)座子Tn5上IS50R側(cè)的一條引物(CCGCCGAAGAGAACACAGATTTA)和上游基因XC4242(GenBank登錄號(hào)YP_245300)的一條引物(5’-CCACATCGACGCCGATACCTACG-3’)配對(duì)進(jìn)行PCR驗(yàn)證(95℃3min；95℃30sec，60℃30sec，72℃45sec，30個(gè)循環(huán)；72℃5min)，產(chǎn)物預(yù)期大小676bp(見(jiàn)圖2)。
實(shí)施例 4XC4241基因插入突變體064H01的致病性檢測(cè)實(shí)驗(yàn)所用寄主植物為蘿卜苗(種名為Raphanus sativus L.var.radiculusPers.)，所用的接種方法為剪葉法。XC4241基因插入突變體和野生型菌株在28℃下進(jìn)行液體培養(yǎng)，培養(yǎng)基NYG(每升溶液含5g蛋白胨，3g酵母膏和20g甘油，根據(jù)三組分縮寫(xiě)為NYG，pH7.0)，15-18個(gè)小時(shí)。用NYG稀釋到OD600＝0.001，用滅過(guò)菌的剪刀在菌液浸泡5秒鐘后，在健康葉片距葉尖1-2cm垂直葉脈的方向剪到中軸處，停留5秒鐘，被接種的植物在25-30℃培養(yǎng)一周后觀察結(jié)果，正對(duì)照選用甘藍(lán)黑腐病黃單胞菌野生型8004菌株，負(fù)對(duì)照用清水。致病試驗(yàn)表明，XC4241基因的插入突變體的致病性顯著降低(見(jiàn)圖3)。
從本實(shí)施例可以看出，本發(fā)明要求保護(hù)的基因的失活直接導(dǎo)致甘藍(lán)黑腐病黃單胞菌致病力的下降。因此，本發(fā)明要求保護(hù)的基因可以用于植物病害防治，特別是由甘藍(lán)黑腐病黃單胞菌(Xanthomonas campestris pv.campestris)所導(dǎo)致的甘藍(lán)黑腐病。另外，本發(fā)明要求保護(hù)的基因可以作為開(kāi)發(fā)用于植物病害防治的藥物的靶標(biāo)。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以根據(jù)本說(shuō)明書(shū)的教導(dǎo)和啟示，開(kāi)發(fā)用于防治植物病害、特別是甘藍(lán)黑腐病的藥物。
參考文獻(xiàn)1.Qian W，Jia Y，Ren SX，He YQ，F(xiàn)eng JX，Lu LF，Sun Q，Ying G，TangDJ，Tang H，Wu W，Hao P，Wang L，Jiang BL，Zeng S，Gu WY，Lu G，Rong L，Tian Y，Yao Z，F(xiàn)u G，Chen B，F(xiàn)ang R，Qiang B，Chen Z，Zhao GP，Tang JL，HeC.Comparative and functional genomic analyses of the pathogenicity ofphytopathogen Xanthomonas campestris pv.campestris.Genome Res.2005，15(6)757-767.
2.Alvarez AM，Cho JJ，and Hori TM.1987.Hawaii Agric.Exp.Stn.Res.Ser.051-08.87.
3.Sineshchekov VA.Phytochrome Afunctional diversity andpolymorphism. Photochem Photobiol Sci.2004， 3596-607. Epub 2004 Mar31.
4.Nagy F，Schafer E.Phytochromes control photomorphogenesis bydifferentially regulated，interacting signaling pathways in higher plants. AnnuRev Plant Biol.2002，53329-355.
5.Staskawicz B，Dahlbeck D，Keen N，Napoli C. Molecularcharacterization of cloned avirulence genes from race 0 and race 1 ofPseudomonas syringae pv.glycinea.J.Bacteriol.1987，1695789-5794.
6.Beringer JE，Beynon JL，Buchanan-Wollaston AV，Hirsch PR andJohnston AWB.Introduction of drug resistance transposon Tn5 into Rhizobium.Nature.1978，276633-634.
7.Yao-Guang Liu，Norihiro Mitsukawa，Teruko Oosum，and RokertF.Whittier.Efficient isolation and mapping of Arabidopsis thaliana T-DNAsinsertion junctionsby thermal asmmertric interlaed PCR.the Plant Jannal.1995，8(3)457-461.
8. Tang D J，Li XJ，He YQ，et al. The zinc uptake regulator Zur isessential for the full virulence of Xanthomonas campestris pv.campestris. MolPlant-Microbe Interact.2005，18652-658.
9. Sharma SB，Signer ER.Temporal and spatial regulation of thesymbiotic genes of Rhizobium meliloti in planta revealed by transposonTn5-gusA.Genes Dev.1990，4344-356.
序列表<110>廣西大學(xué)<120>一個(gè)用于防治作物病害的編碼類光敏色素蛋白的基因<130>IB055878<160>2<170>PatentIn version 3.1<210>1<211>2305<212>DNA<213>Xanthomonas campestris pv.campestris<400>1cgatgccgcc gtgccgccgc cggccagcag cgaggcggcg cgctggggca tgctgtatgt60catcgaaggc tctcagctgg gtggccgggt gattgcacgc atgctgcgca aacgtcagcc120gggcctggcg catgcattgc actatttcga gctggccgac gaagacccgg ccggctggcg180gcgctttcag gcggtgctcg agcaacgcct gcagagcgca gcggcgcgtg ccgacgccat240cgccggcgcg caggccatgt ttgcccattt ccacacctgc ctggcagcgg aggcacgtcc300ttgagcactg caaccaaccc gttggacctg gacgtctgcg cgcgcgaacc catccatatt360cccgggctga tccagcccta cggcgtgttg ctggtgatcg accccgccga cggccgcatc420gtgcaggcca gcaccaccgc cgccgatctg ctcggcgtgc caatggccgc actgcttggc480atgccctaca cccaggtgct gacgctgccc gaagcacagc cgttcgccgt cgatgaccag540ccacagcacc tgatgcatgc cgaggtgcgg ttcccgcaac gcgccacgcc gccagccagc600gcctgggtgg cggcctggca tctgtatccg cagcagtggc tggtggaaat ggagccgcgc660gatgcgcgcc tgctcgatgt caccctgcgc gaggcgatgc cgctgctgcg cagtgtcgaa720cgcgatccgg gcatcgccga ggcagcggtg cgcgtggcca agggcctgcg tagcctgatc780ggcttcgacc gcgtgatgat ctaccgcttc gatgaggagt ggaacggcga catcatcgcc840gaggcgcgca agccggagct ggaggcctat ctcggcctgc attaccccgc cagcgacatc900ccggcgcagg cgcgcgcgct gtacctgcgc aaccgggtcc gccagattgc cgatgtcggc960taccagccgt cgccgatcca gcccaccgtg catccgcagt tgggcacgcc ggtggatttg1020
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Pro Ile His Ile Pro Gly Leu Ile Gln Pro Tyr Gly Val Leu Leu Val20 25 30Ile Asp Pro Ala Asp Gly Arg Ile Val Gln Ala Ser Thr Thr Ala Ala35 40 45Asp Leu Leu Gly Val Pro Met Ala Ala Leu Leu Gly Met Pro Tyr Thr50 55 60Gln Val Leu Thr Leu Pro Glu Ala Gln Pro Phe Ala Val Asp Asp Gln65 70 75 80Pro Gln His Leu Met His Ala Glu Val Arg Phe Pro Gln Arg Ala Thr85 90 95Pro Pro Ala Ser Ala Trp Val Ala Ala Trp His Leu Tyr Pro Gln Gln100 105 110Trp Leu Val Glu Met Glu Pro Arg Asp Ala Arg Leu Leu Asp Val Thr115 120 125Leu Arg Glu Ala Met Pro Leu Leu Arg Ser Val Glu Arg Asp Pro Gly130 135 140Ile Ala Glu Ala Ala Val Arg Val Ala Lys Gly Leu Arg Ser Leu Ile145 150 155 160Gly Phe Asp Arg Val Met Ile Tyr Arg Phe Asp Glu Glu Trp Asn Gly165 170 175Asp Ile Ile Ala Glu Ala Arg Lys Pro Glu Leu Glu Ala Tyr Leu Gly180 185 190Leu His Tyr Pro Ala Ser Asp Ile Pro Ala Gln Ala Arg Ala Leu Tyr195 200 205Leu Arg Asn Arg Val Arg Gln Ile Ala Asp Val Gly Tyr Gln Pro Ser210 215 220Pro Ile Gln Pro Thr Val His Pro Gln Leu Gly Thr Pro Val Asp Leu225 230 235 240Ser Asp Val Ser Leu Arg Ser Val Ser Pro Val His Leu Glu Tyr Leu245 250 255
Ala Asn Met Gly Val Thr Ala Thr Leu Val Ala Ser Ile Val Val Asn260 265 270Asp Ala Leu Trp Gly Leu Ile Ser Cys His His Tyr Ser Pro His Phe275 280 285Thr Asn His Ala Met Arg Asp Val Thr Asp Ala Val Ala Arg Thr Leu290 295 300Ala Gly Arg Ile Gly Ala Leu Gln Ala Val Ala Arg Ala Arg Leu Glu305 310 315 320Ser Val Leu Leu Thr Val Arg Glu Lys Leu Ile Thr Asp Phe Asn Asp325 330 335Ala Glu His Met Thr Val Glu Leu Leu Asp Asp Met Ala Pro Asp Leu340 345 350Met Asp Val Val Asp Ala Asp Gly Val Ala Ile Phe His Gly Asn Asp355 360 365Ile Ser Arg His Gly Thr Thr Pro Asp Val Ala Ala Leu Arg Arg Ile370 375 380Arg Asp His Ile Glu Ser Glu His His Glu Ala Leu Arg Glu Asp Ala385 390 395 400Val Gly Ala Leu His Val Asp Ala Ile Gly Glu Val Phe Pro Glu Leu405 410 415Ala Asp Leu Ala Pro Leu Ala Ala Gly Phe Ile Phe Val Pro Leu Met420 425 430Pro Gln Ser Arg Ser Ala Leu Leu Trp Thr Arg Arg Glu Gln Ile Gln435 440 445Gln Ile Lys Trp Ala Gly Asn Pro Gln Leu Ala Lys Leu Glu Asp Ile450 455 460Pro Asn Ser Arg Leu Ser Pro Arg Lys Ser Phe Asp Leu Trp Gln Gln465 470 475 480Thr Val Arg Gly Arg Ala Arg Arg Trp Ser Pro Leu His Leu Glu Ser485 490 495
Ala Arg Ser Leu Arg Val Leu Ile Glu Leu Met Glu Arg Lys Arg Phe500 505 510Gln Gln Asp Phe Thr Leu Leu Glu Ala Ser Leu Ser Arg Leu Arg Asp515 520 525Gly Val Ala Ile Ile Glu Arg Gly Thr Ala Asn Ala Ala His Arg Leu530 535 540Leu Phe Val Asn Thr Ala Phe Ala Asp Val Cys Gly Ser Asp Val Ala545 550 555 560Glu Leu Ile Gly Arg Glu Leu Gln Thr Leu Tyr Ala Ser Asp Ala Pro565 570 575Arg Ala Asn Val Glu Leu Leu Gln Asp Ala Leu Arg Asn Gly Arg Ala580 585 590Ala Tyr Val Thr Leu Pro Leu Gln Val Ser Asp Gly Ala Pro Val Tyr595 600 605Arg Gln Phe His Leu Glu Pro Leu Pro Ser Pro Ser Gly Val Thr Ala610 615 620His Trp Leu Leu Gln Leu Arg Asp Pro Glu625 630
權(quán)利要求
1.一種編碼類光敏色素蛋白的基因，其是下列核苷酸序列之一1)SEQ ID No.1所示的DNA序列；2)與SEQ ID No.1所示DNA序列具有80％以上同源性的DNA序列。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基因，其特征在于它具有SEQ ID No.1所示的DNA序列。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的基因，其特征在于自5’端的第301-2202位核苷酸為開(kāi)放閱讀框。
4.含有根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的基因的表達(dá)載體。
5.根據(jù)權(quán)利要求4的表達(dá)載體，其為pCXC4241。
6.權(quán)利要求1或2所述的基因在植物病害防治中的應(yīng)用。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其中所述植物病害是由甘藍(lán)黑腐病黃單胞菌(Xanthomonas campestris pv.campestris)所導(dǎo)致的甘藍(lán)黑腐病。
8.權(quán)利要求1或2所述的基因作為用于植物病害防治的藥物的靶標(biāo)的應(yīng)用。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的應(yīng)用，其中所述植物病害是由甘藍(lán)黑腐病黃單胞菌所導(dǎo)致的甘藍(lán)黑腐病。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了來(lái)自甘藍(lán)黑腐病黃單胞菌中的一個(gè)與致病相關(guān)的基因(類光敏色素蛋白基因)。本發(fā)明所提供的類光敏色素蛋白基因，其是下列核苷酸序列之一1)SEQ ID No.1所示的DNA序列；2)與SEQ ID No.1所示DNA序列具有80％以上同源性的DNA序列。本發(fā)明還涉及該基因在植物病害防治中的應(yīng)用以及作為用于植物病害防治的藥物的靶標(biāo)的應(yīng)用。
文檔編號(hào)C12N15/63GK1952147SQ20051008665
公開(kāi)日2007年4月25日 申請(qǐng)日期2005年10月20日 優(yōu)先權(quán)日2005年10月20日
發(fā)明者姜伯樂(lè), 唐紀(jì)良, 何勇強(qiáng), 唐東階, 姜偉, 韋紅玉, 臧寧, 韋珂, 張穗生 申請(qǐng)人:廣西大學(xué)