專利名稱：一種高密度細胞培養(yǎng)方法及其生物反應(yīng)裝置的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種細胞培養(yǎng)方法及其生物反應(yīng)裝置，尤其涉及一種細胞高密度循環(huán)式或連續(xù)式培養(yǎng)方法及其生物反應(yīng)裝置。
背景技術(shù)：
膜生物反應(yīng)器是將膜分離技術(shù)引入生物反應(yīng)器后所形成的一類新型設(shè)備，現(xiàn)有的膜生物反應(yīng)器(MBA)主要用于污水處理，其作用原理是利用膜截留活性污泥中的微生物以提高其污水生物處理的效率，其核心問題是解決污水生物處理過程中膜過濾污染即過濾通量下降的問題。由于生物污水處理系開放式的發(fā)酵過程，并不涉及到雜菌的污染，即是此類生物反應(yīng)器中所采用的膜設(shè)備無需考慮滅菌及分離過程中的雜菌污染問題。
在高密度培養(yǎng)方面，目前所采用的方法，主要是通過優(yōu)化培養(yǎng)基、培養(yǎng)條件等方法，從而提高培養(yǎng)或發(fā)酵過程中活細胞濃度。如劉馨磊等(補料分批法高密度培養(yǎng)凝結(jié)芽孢桿菌，生物技術(shù)，2001，11〔6〕)報道利用間歇式的補料培養(yǎng)使培養(yǎng)液中菌體達到了4.5×109cfu/ml；呂兵等(乳酸菌發(fā)酵劑濃縮培養(yǎng)的研究，中國乳品工業(yè)，2001，29〔3〕)報道，通過在培養(yǎng)基中添加緩沖鹽法使培養(yǎng)液中的菌體濃度達到了5.89×109cfu/ml的結(jié)果。也有少數(shù)人采用管狀有機膜過濾濃縮，如戚薇等(中空纖維膜過濾法高密度培養(yǎng)凝結(jié)芽孢桿菌TQ33，食品與發(fā)酵工業(yè)，2003，29〔3〕)報道，利用中空纖維超濾裝置進行TQ33高密度培養(yǎng)，確定了采用過濾法進行高密度培養(yǎng)的工藝流程和參數(shù)。在對數(shù)后期，當(dāng)乳酸質(zhì)量濃度達到15g/L時，開始過濾培養(yǎng)。過濾培養(yǎng)階段持續(xù)6h，培養(yǎng)過程中平均過濾速率和培養(yǎng)基的流入速率為1L/h，平均稀釋率為0.4/h。對通過試驗所確定的工藝進行高密度培養(yǎng)，最終菌體和芽孢濃度分別達到1.6×1010cfu/mL和1.2×1010cfu/mL，是分批培養(yǎng)的21倍和37倍。在以上的這些報導(dǎo)中，采用化學(xué)方法來解除代謝產(chǎn)物對微生物的生長抑制是極為有限的，這點在以上的結(jié)果中也能清楚地反映出來。而利用外置式中空纖維膜管進行純種高密度培養(yǎng)方法中所采用的有機膜無法進行熱滅菌，因而在實際應(yīng)用中很難消除雜菌的污染，更難于完成循環(huán)式或連續(xù)式的高密度培養(yǎng)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是為了解決現(xiàn)有用于細胞高密度培養(yǎng)方法中存在的上述問題，而提供一種適用于細胞高密度培養(yǎng)的方法，即將細胞培養(yǎng)和膜過濾濃縮結(jié)合在一起，在截留活細胞的同時去除有害或分離所需的代謝產(chǎn)物，進而達到細胞的高密度培養(yǎng)或利用高密度培養(yǎng)生產(chǎn)所需代謝產(chǎn)物，以及使用補料罐、生物反應(yīng)器和膜組件實現(xiàn)高密度連續(xù)化培養(yǎng)。在實現(xiàn)細胞高密度培養(yǎng)的同時，縮短反應(yīng)時間、大幅度提高生產(chǎn)效率、降低操作費用。本發(fā)明的另一個目的是提供該方法所需的一種膜生物反應(yīng)裝置。
本發(fā)明的技術(shù)方案是一種循環(huán)式或連續(xù)式高密度細胞培養(yǎng)的方法，其步驟包括A、將新鮮培養(yǎng)基通過物料進口(I)加入生物反應(yīng)器(2)中進行細胞培養(yǎng)，待生物反應(yīng)器(2)中活細胞數(shù)達到105cfu/ml-108cfu/ml時，發(fā)酵液經(jīng)閥門K2、K1和泵4通過無機膜過濾組件(3)過濾濃縮，棄去清液，濃縮菌液通過閥門K5返回到生物反應(yīng)器(2)中，并通過補料罐(1)重新補加新鮮培養(yǎng)基后再次進行培養(yǎng)。
B、從過濾到補料再到重新培養(yǎng)稱為一個循環(huán)，當(dāng)培養(yǎng)液中菌體濃度達到109cfu/ml-1013cfu/ml，培養(yǎng)液經(jīng)過閥門K2、K4由出料口(G)直接排出，為循環(huán)式高密度細胞培養(yǎng)或當(dāng)培養(yǎng)液達到109cfu/ml-1013cfu/ml后，進入連續(xù)培養(yǎng)，新鮮培養(yǎng)液從補料罐1由蠕動泵進入生物反應(yīng)器2中，高密度培養(yǎng)液經(jīng)閥門K3、K4由出料口(G)以排出，整個過程由自動系統(tǒng)控制，為連續(xù)式高密度細胞培養(yǎng)。
其中每次循環(huán)中過濾要求的發(fā)酵液濃縮倍數(shù)為1-10倍。循環(huán)次數(shù)為1-4次。
在連續(xù)培養(yǎng)過程中，可通過控制pH、培養(yǎng)液的光密度值或葡萄糖濃度來進行補料，其中pH可控制在1-7的范圍內(nèi)、光密度可控制在0.1-2.0、以培養(yǎng)基為基準(zhǔn)葡萄糖質(zhì)量百分濃度控制在1％-10％范圍。
本發(fā)明還提出了一種循環(huán)式或連續(xù)式高密度細胞培養(yǎng)的方法的生物反應(yīng)裝置，其特征在于該裝置由生物反應(yīng)器(2)、無機膜過濾組件(3)和補料罐(1)通過控制回路將三者連接而成。
其中生物反應(yīng)器(2)由反應(yīng)罐、攪拌器(I)、蒸汽滅菌裝置、通氣加壓裝置和探測控制裝置組成；無機膜分離過濾組件(3)由無機膜管、膜管支撐架組成，其中無機膜管為陶瓷膜管、金屬材料膜管或它們的復(fù)合材料膜管；補料罐(1)通過管道同生物反應(yīng)器(2)相連，它的補料方式是通過控制pH、培養(yǎng)液的光密度值或葡萄糖濃度，并通過液位控制來實現(xiàn)培養(yǎng)液的自動排放。
本發(fā)明適用于單細胞微生物，如細菌、酵母、植物細胞等。
有益效果1.本發(fā)明方法將無機膜分離組件與生物反應(yīng)器及補料罐連接在一起，通過適當(dāng)?shù)目刂品绞?，使得生物反?yīng)過程與細胞過濾濃縮合為一體，利用該系統(tǒng)，既可實現(xiàn)細胞的培養(yǎng)與菌體產(chǎn)物回收的耦合，也能完成微生物連續(xù)式的高密度培養(yǎng)。
2.采用本發(fā)明的方法對乳酸菌等進行高密度培養(yǎng)，其菌體的最終濃度可達到1012cfu/ml-1013cfu/ml，而常規(guī)方法菌體的最終濃度4.5×109cfu/ml-1.6×1010cfu/mL。
3.與現(xiàn)有的用于細胞高密度培養(yǎng)的生物反應(yīng)器相比，本發(fā)明反應(yīng)裝置中所采用的無機膜過濾組件具有耐高溫、耐腐蝕，在高溫高壓條件下密封性良好，長時間操作無機膜過濾組件及其連結(jié)件不損壞，且易于拆卸和更換，從而使該膜組件的滅菌成為可能。細胞培養(yǎng)與產(chǎn)物分離耦合既可實現(xiàn)細胞的重復(fù)利用，也可通過產(chǎn)物分離解除產(chǎn)物合成的代謝抑制及對細胞生長的抑制。同樣在變換控制方式的前提下，也可利用該系統(tǒng)完成高密度條件下的細胞連續(xù)培養(yǎng)。
4.與傳統(tǒng)的生物反應(yīng)器相比，本系統(tǒng)極大地提高了生物反應(yīng)器單位體積的設(shè)備利用率，可縮短生產(chǎn)周期、降低操作費用。


圖1是用于細胞高密度培養(yǎng)膜生物反應(yīng)器結(jié)構(gòu)示意圖。其中1-補料罐；2-生物反應(yīng)器；3-無機膜組件；4-泵；5-蠕動泵；6-pH、光密度或葡萄糖控制系統(tǒng)，7-液位控制系統(tǒng)；A蒸汽；B無菌空氣；C冷卻水；D取樣口；E清液出口；F濃液料出口；G料液出口；H冷凝水；I物料進口；J攪拌器；K1、K2、K3、K4、K5、K6、K7、K8為閥門。
下面結(jié)合附圖1對該方法及裝置作詳細介紹1.循環(huán)式高密度培養(yǎng)，首先在清洗好的生物反應(yīng)器內(nèi)加入合適培養(yǎng)基，按常規(guī)方法對生物反應(yīng)器2及與罐體相通的管路進行熱滅菌的，通過夾套冷卻水冷卻后即可接入種子液的在一定溫度下進行培養(yǎng)。培養(yǎng)結(jié)束前，在K2K3K4關(guān)閉的情況下，打開K1K6K8用蒸汽對無機膜組件及泵4和與之相連接的管道進行滅菌后，關(guān)閉K6K7K8并適當(dāng)冷卻到室溫，當(dāng)生物反應(yīng)器內(nèi)細菌濃度達到105cfu/ml-108cfu/ml時，打開K2K1K5，開啟泵4，經(jīng)膜管循環(huán)過濾，通過清液出口棄去清液，濃縮菌液重新回到生物反應(yīng)器內(nèi)，經(jīng)循環(huán)過濾后，使生物反應(yīng)器內(nèi)菌體濃度提高1-10倍后，將補料罐內(nèi)已滅菌冷卻的新鮮培養(yǎng)基(與初始開入生物反應(yīng)器內(nèi)的培養(yǎng)基相同)通過蠕動泵5加入到發(fā)酵罐內(nèi)到起始培養(yǎng)時液位，并在相同條件下開始新一輪培養(yǎng)。依據(jù)所要求的培養(yǎng)液中菌體濃度達到1011cfu/ml-1013cfu/ml，決定上述從過濾到補料再到重新培養(yǎng)的循環(huán)次數(shù)，從而實現(xiàn)乳酸菌的高密培養(yǎng)。所要求的培養(yǎng)液中菌體濃度指109cfu/ml-1013cfu/ml。當(dāng)循環(huán)培養(yǎng)結(jié)束后，發(fā)酵液可通過料液出口直接排出，亦可通過膜組件過濾后由濃縮液出口排出。本實例中，關(guān)于補料控制也可通過控制培養(yǎng)液的光密度、葡萄糖濃度得以實現(xiàn)；pH可控制在1-7的范圍內(nèi)，液位控制則可設(shè)定在罐內(nèi)的任何液位。
2.連續(xù)式高密度培養(yǎng)，首先在清洗好的生物反應(yīng)器內(nèi)加入合適培養(yǎng)基，按常規(guī)方法對生物反應(yīng)器2及與罐體相通的管路進行熱滅菌的，通過夾套冷卻水冷卻后即可接入種子液一定條件(常規(guī)方法)下進行培養(yǎng)。培養(yǎng)結(jié)束前，在K2K3K4關(guān)閉的情況下，打開K1K6K8用蒸汽對無機膜組件及泵4和與之相連接的管道進行滅菌后，關(guān)閉K6K7K8并適當(dāng)冷卻，當(dāng)生物反應(yīng)器內(nèi)細菌濃度達到105cfu/ml-108cfu/ml時，打開K2K1K5，開啟泵4，經(jīng)膜管循環(huán)過濾，通過清液出口E棄去清液，濃縮菌液通過閥門K5，重新回到生物反應(yīng)器內(nèi)，經(jīng)循環(huán)過濾后，使生物反應(yīng)器內(nèi)菌體濃度提高1-10倍后，將補料罐內(nèi)已滅菌冷卻的新鮮培養(yǎng)基(與初始開入生物反應(yīng)器內(nèi)的培養(yǎng)基相同)通過蠕動泵5加入到發(fā)酵罐內(nèi)到起始培養(yǎng)時液位，并在相同條件下開始新一輪培養(yǎng)。當(dāng)完成從過濾到補料再到重新培養(yǎng)的循環(huán)1-4次后進入連續(xù)培養(yǎng)，即利用生物反應(yīng)器內(nèi)的pH控制系統(tǒng)，當(dāng)pH低于設(shè)定值時(設(shè)定值范圍為1-7)，與補料罐相連接的蠕動泵自動開啟，新鮮培養(yǎng)基加入到生物反應(yīng)器內(nèi)，當(dāng)pH回升到設(shè)定值后，蠕動泵將自動關(guān)閉。與此同時，當(dāng)罐內(nèi)的培養(yǎng)液超過設(shè)定的液位值時，由液位控制計控制的回路開始工作，即K3閥自動開啟，109cfu/ml-1013cfu/ml培養(yǎng)液由料液出口G直接排出，當(dāng)液位低于設(shè)計值時，K3將自動關(guān)閉。通過pH及液位控制的聯(lián)動，可實現(xiàn)乳酸菌的高密度連續(xù)式培養(yǎng)。本實例中，關(guān)于補料控制也可通過控制培養(yǎng)液的光密度、葡萄糖濃度得以實現(xiàn)；pH可控制在1-7的范圍內(nèi)，液位控制則可設(shè)定在罐內(nèi)的任何液位。
具體實施例方式
以下通過具體實施例對本發(fā)明的技術(shù)方案進行進一步詳細描述。
實施例1乳酸菌循環(huán)式的高密度培養(yǎng)首先在清洗好的生物反應(yīng)器內(nèi)加入牛肉膏1％，蛋白胨1％，酵母膏1％，葡萄糖15％，吐溫80 0.05％pH6.5培養(yǎng)基，按常規(guī)方法對生物反應(yīng)器2及與罐體相通的管路進行熱滅菌的，通過夾套冷卻水冷卻后即可接入種子液的在30℃下進行培養(yǎng)。培養(yǎng)結(jié)束前，在K2K3K4關(guān)閉的情況下，打開K1K6K8用蒸汽對無機膜組件及泵4和與之相連接的管道進行滅菌后，關(guān)閉K6K7K8并適當(dāng)冷卻到室溫，當(dāng)生物反應(yīng)器內(nèi)乳酸菌濃度達到105cfu/ml-108cfu/ml時，打開K2K1K5，開啟泵4，經(jīng)膜管循環(huán)過濾，通過清液出口棄去清液，濃縮菌液重新回到生物反應(yīng)器內(nèi)，經(jīng)循環(huán)過濾后，使生物反應(yīng)器內(nèi)菌體濃度提高5-10倍后，將補料罐內(nèi)已滅菌冷卻的新鮮培養(yǎng)基(與初始開入生物反應(yīng)器內(nèi)的培養(yǎng)基相同)通過蠕動泵5加入到發(fā)酵罐內(nèi)到起始培養(yǎng)時液位，并在相同條件下開始新一輪培養(yǎng)。依據(jù)所要求的培養(yǎng)液中菌體濃度1011cfu/ml，決定上述從過濾到補料再到重新培養(yǎng)的循環(huán)次數(shù)，本實驗使用2-3次，從而實現(xiàn)乳酸菌的高密培養(yǎng)。所要求的培養(yǎng)液中菌體濃度指1011cfu/ml-1013cfu/ml。當(dāng)循環(huán)培養(yǎng)結(jié)束后，發(fā)酵液可通過料液出口直接排出，亦可通過膜組件過濾后由濃縮液出口排出。
實施例2大腸桿菌連續(xù)式的高密度培養(yǎng)首先在清洗好的生物反應(yīng)器內(nèi)加入乳糖0.5％，胰蛋白胨2％，磷酸二氫鉀0.275％，磷酸氫二鉀0.275％，NaCl0.5％，十二烷基硫酸鈉0.05％ pH6.6-7.0培養(yǎng)基，按常規(guī)方法對生物反應(yīng)器2及與罐體相通的管路進行熱滅菌的，通過夾套冷卻水冷卻后即可接入種子液一定條件下進行培養(yǎng)。培養(yǎng)結(jié)束前，在K2K3K4關(guān)閉的情況下，打開K1K6K8用蒸汽對無機膜組件及泵4和與之相連接的管道進行滅菌后，關(guān)閉K6K7K8并適當(dāng)冷卻，當(dāng)生物反應(yīng)器內(nèi)大腸桿菌濃度達到105cfu/ml-108cfu/ml時，打開K2K1K5，開啟泵4，經(jīng)膜管循環(huán)過濾，通過清液出口棄去清液，濃縮菌液重新回到生物反應(yīng)器內(nèi)，經(jīng)循環(huán)過濾后，使生物反應(yīng)器內(nèi)菌體濃度提高5-10倍后，將補料罐內(nèi)已滅菌冷卻的新鮮培養(yǎng)基(與初始開入生物反應(yīng)器內(nèi)的培養(yǎng)基相同)通過蠕動泵5加入到發(fā)酵罐內(nèi)到起始培養(yǎng)時液位，并在相同條件下開始新一輪培養(yǎng)。當(dāng)完成從過濾到補料再到重新培養(yǎng)的循環(huán)1-4次后進入連續(xù)培養(yǎng)，即利用生物反應(yīng)器內(nèi)的pH控制系統(tǒng)，當(dāng)pH下降到5-6，與補料罐相連接的蠕動泵自動開啟，新鮮培養(yǎng)基加入到生物反應(yīng)器內(nèi)，當(dāng)pH回升到設(shè)定值后，蠕動泵將自動關(guān)閉。以此同時，當(dāng)罐內(nèi)的培養(yǎng)液超過設(shè)定的液位值時，由液位控制計控制的回路開始工作，即K3閥自動開啟，1011cfu/ml-1013cfu/ml培養(yǎng)液由料液出口G直接排出，當(dāng)液位低于設(shè)計值時，K3將自動關(guān)閉。通過pH及液位控制的聯(lián)動，可實現(xiàn)大腸桿菌的高密度連續(xù)式培養(yǎng)。本實例中，關(guān)于補料控制也可通過控制培養(yǎng)液的光密度得以實現(xiàn)；pH可控制在0-7的范圍內(nèi)，液位控制則可設(shè)定在罐內(nèi)的任何液位。
實施例3酵母菌連續(xù)式的高密度培養(yǎng)首先在清洗好的生物反應(yīng)器內(nèi)加入麥芽汁(2％-12％)，按常規(guī)方法對生物反應(yīng)器2及與罐體相通的管路進行熱滅菌的，通過夾套冷卻水冷卻后即可接入種子液一定條件下進行培養(yǎng)。培養(yǎng)結(jié)束前，在K2K3K4關(guān)閉的情況下，打開K1K6K8用蒸汽對無機膜組件及泵4和與之相連接的管道進行滅菌后，關(guān)閉K6K7K8并適當(dāng)冷卻，當(dāng)生物反應(yīng)器內(nèi)酵母菌濃度達到105cfu/ml-108cfu/ml時，打開K2K1K5，開啟泵4，經(jīng)膜管循環(huán)過濾，通過清液出口棄去清液，濃縮菌液重新回到生物反應(yīng)器內(nèi)，經(jīng)循環(huán)過濾后，使生物反應(yīng)器內(nèi)菌體濃度提高5-10倍后，將補料罐內(nèi)已滅菌冷卻的新鮮培養(yǎng)基(與初始開入生物反應(yīng)器內(nèi)的培養(yǎng)基相同)通過蠕動泵5加入到發(fā)酵罐內(nèi)到起始培養(yǎng)時液位，并在相同條件下開始新一輪培養(yǎng)。當(dāng)完成從過濾到補料再到重新培養(yǎng)的循環(huán)1-4次后進入連續(xù)培養(yǎng)，即利用生物反應(yīng)器內(nèi)的葡萄糖控制系統(tǒng)，當(dāng)葡萄糖濃度下降到1-10，與補料罐相連接的蠕動泵自動開啟，新鮮培養(yǎng)基加入到生物反應(yīng)器內(nèi)，當(dāng)葡萄糖回升到設(shè)定值后，蠕動泵將自動關(guān)閉。以此同時，當(dāng)罐內(nèi)的培養(yǎng)液超過設(shè)定的液位值時，由液位控制計控制的回路開始工作，即K3閥自動開啟，1011cfu/ml-1013cfu/ml培養(yǎng)液由料液出口G直接排出，當(dāng)液位低于設(shè)計值時，K3將自動關(guān)閉。通過葡萄糖及液位控制的聯(lián)動，可實現(xiàn)大腸桿菌的高密度連續(xù)式培養(yǎng)。本實例中，關(guān)于補料控制也可通過控制培養(yǎng)液的光密度得以實現(xiàn)；葡萄糖可控制在1-10的范圍內(nèi)，液位控制則可設(shè)定在罐內(nèi)的任何液位。
權(quán)利要求
1.一種高密度細胞培養(yǎng)方法，其步驟包括A、將新鮮培養(yǎng)基通過物料進口(I)加入生物反應(yīng)器(2)中進行細胞培養(yǎng)，待生物反應(yīng)器(2)中活細胞數(shù)達到105cfu/ml-108cfu/ml時，發(fā)酵液經(jīng)閥門K2、K1和泵(4)通過無機膜過濾組件(3)過濾濃縮，棄去清液，濃縮菌液通過閥門K5返回到生物反應(yīng)器(2)中，并通過補料罐(1)重新補加新鮮培養(yǎng)基后再次進行培養(yǎng)；B、從過濾到補料再到重新培養(yǎng)稱為一個循環(huán)，當(dāng)培養(yǎng)液中菌體濃度達到109cfu/ml-1013cfu/ml，培養(yǎng)液經(jīng)過閥門K2、K4由出料口(G)直接排出，為循環(huán)式高密度細胞培養(yǎng)；或當(dāng)培養(yǎng)液達到109cfu/ml-1013cfu/ml后，進入連續(xù)培養(yǎng)，新鮮培養(yǎng)液從補料罐(1)由蠕動泵進入生物反應(yīng)器(2)中，高密度培養(yǎng)液經(jīng)閥門K3、K4由出料口(G)以排出，整個過程由自動系統(tǒng)控制，為連續(xù)式高密度細胞培養(yǎng)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于每次循環(huán)中過濾要求的發(fā)酵液濃縮倍數(shù)為1-10倍。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于循環(huán)次數(shù)為1-4次。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于在連續(xù)培養(yǎng)過程中，可通過控制pH、培養(yǎng)液的光密度值或葡萄糖濃度來進行補料，其中pH可控制在1-7的范圍內(nèi)、光密度可控制在0.1-2.0、以培養(yǎng)基為基準(zhǔn)葡萄糖質(zhì)量百分濃度控制在1％-10％范圍。
5.一種如權(quán)利要求1所述方法的高密度細胞培養(yǎng)生物反應(yīng)裝置，其特征在于該裝置由生物反應(yīng)器(2)、無機膜過濾組件(3)和補料罐(1)通過控制回路將三者連接而成。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的反應(yīng)器裝置，其特征在于無機膜分離過濾組件(3)由無機膜管和膜管支撐架組成。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述反應(yīng)裝置，其特征在于無機膜管為陶瓷膜管、金屬材料膜管或它們的復(fù)合材料膜管。
8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的反應(yīng)裝置，其特征在于補料罐(1)通過管道同生物反應(yīng)器(2)相連，它的補料方式是通過控制pH、培養(yǎng)液的光密度值或葡萄糖濃度，并通過液位控制來實現(xiàn)培養(yǎng)液的自動排放。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種細胞培養(yǎng)方法及其生物反應(yīng)裝置，尤其涉及一種細胞高密度循環(huán)式或連續(xù)式培養(yǎng)方法及其生物反應(yīng)裝置。其特征是在生物反應(yīng)器上加裝無機膜過濾組件及補料罐，并通過一定的控制回路將三者連接為一個可用于細胞循環(huán)式高密度培養(yǎng)或高密度連續(xù)式培養(yǎng)的生物反應(yīng)器系統(tǒng)，即將細胞培養(yǎng)和膜過濾濃縮結(jié)合在一起，在截留活細胞的同時去除有害或分離所需的代謝產(chǎn)物，進而達到細胞的高密度培養(yǎng)或利用高密度培養(yǎng)生產(chǎn)所需代謝產(chǎn)物。在實現(xiàn)細胞高密度培養(yǎng)的同時，縮短反應(yīng)時間、大幅度提高生產(chǎn)效率、降低操作費用。
文檔編號C12N5/00GK1778887SQ20051009473
公開日2006年5月31日 申請日期2005年10月9日 優(yōu)先權(quán)日2005年10月9日
發(fā)明者熊曉輝, 熊強, 陸利霞, 韓亦龍 申請人:南京工業(yè)大學(xué)