專利名稱：：涉及g蛋白偶聯(lián)受體gpr40的單核苷酸多態(tài)性的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及與GPR40基因單核苷酸多態(tài)性有關(guān)的基因分型方法、治療方法、診斷測(cè)試和試劑盒和表征試劑的方法。
背景技術(shù)：
：糖尿病為嚴(yán)重的和有時(shí)致死的疾病，其影響超過(guò)一千七百萬(wàn)的美國(guó)人和一億五千一百萬(wàn)的世界人口。Gadsby(2002)。糖尿病因身體不能產(chǎn)生或適當(dāng)應(yīng)答胰島素而引起。葡萄糖為調(diào)節(jié)胰島素分泌的主要底物但其他的營(yíng)養(yǎng)物如游離脂肪酸(FFA)和氨基酸可改變胰島素的分泌。Haber等(2002)。存在兩種主要的糖尿病類型。I型糖尿病中，產(chǎn)生胰島素的胰腺β-細(xì)胞被身體自身的免疫系統(tǒng)破壞，導(dǎo)致胰島素缺乏。II型糖尿病由體細(xì)胞對(duì)胰島素作用的敏感性的喪失和胰腺不能適當(dāng)?shù)蒯尫乓葝u素引起。II型糖尿病的發(fā)病率正在上升，并且在美國(guó)，在某些處于風(fēng)險(xiǎn)的人群中尤其普遍。Gadsby(2002)。代謝綜合征為增加發(fā)生糖尿病和心血管疾病風(fēng)險(xiǎn)的一組代謝病況Park等(2003)。已報(bào)道包括肥胖、胰島素抵抗、血脂異常和高血壓的病況為代謝綜合征的關(guān)鍵組成成分。Reilly和Rader(2003)；Park等(2003)；ExpertPanelonDetection，Evaluation，andTreatmentofHighBloodCholesterolinAdults(2001)。已確定肥胖為促成代謝綜合征的核心因素。提出過(guò)量體重的降低將最小化與代謝綜合征有關(guān)的風(fēng)險(xiǎn)。Shirai(2004)。G蛋白偶聯(lián)受體(GPCR)為以連接交替的胞內(nèi)和胞外環(huán)的七個(gè)跨膜α-螺旋片段(稱為T(mén)M1至TM7)存在為特征的膜蛋白超家族。Gether(2000)。GPCR介導(dǎo)信號(hào)分子如激素、神經(jīng)遞質(zhì)和局部介質(zhì)與胞內(nèi)酶、離子通道和轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白之間的信號(hào)作用。參見(jiàn)Johnson和Dhanasekaran(1989)。Sawzdargo等(1997)公開(kāi)了定位于染色體19q13.1上，編碼300個(gè)氨基酸的蛋白質(zhì)并且由GenBank登錄號(hào)AF024687確定的GPCR基因-GPR40的鑒定。Haga等(2002)公開(kāi)了人基因組的190，562個(gè)遺傳變異，包括GPR40基因的單核苷酸多態(tài)性，其中編碼序列的核苷酸632(對(duì)應(yīng)GenBank登錄號(hào)AF024687序列的核苷酸642)可以是鳥(niǎo)嘌呤(G)或腺嘌呤(A)，使得氨基酸211為精氨酸或組氨酸。該單核苷酸多態(tài)性在國(guó)家生物技術(shù)信息中心(NCBI)dbSNP數(shù)據(jù)庫(kù)中以登錄號(hào)rs2301151確定。國(guó)際專利申請(qǐng)公開(kāi)No.WO02/057783和Briscoe等(2003)公開(kāi)了GPR40在人、小鼠和大鼠的胰腺β-細(xì)胞以及腦中特異性地表達(dá)。此外，WO02/057783和Briscoe等根據(jù)測(cè)量鈣離子濃度的實(shí)驗(yàn)鑒定了GPR40的中鏈和長(zhǎng)鏈飽和及不飽和脂肪酸配體。如通過(guò)連接GPR40受體的報(bào)道系統(tǒng)測(cè)量的，Kotarsky等(2003)公開(kāi)了GPR40不僅由一系列脂肪酸而且由抗糖尿病的噻唑烷二酮藥物活化。Itoh等(2003)公開(kāi)了GPR40通過(guò)游離脂肪酸的結(jié)合和活化增加胰島素的分泌。國(guó)際專利申請(qǐng)公開(kāi)No.WO04/072650公開(kāi)了人GPR40的核酸序列和氨基酸序列以及其用于哺乳動(dòng)物中血液疾病、外周和中樞神經(jīng)系統(tǒng)病癥、胃腸疾病、呼吸疾病、代謝疾病、癌癥、心血管疾病和泌尿疾病治療的調(diào)節(jié)。發(fā)明概要本發(fā)明部分涉及基因分型的方法，包括確定在氨基酸編號(hào)211位由人對(duì)象的GPR40基因編碼的氨基酸。在一優(yōu)選的實(shí)施方案中，確定GPR40基因兩個(gè)等位基因在氨基酸編號(hào)211位編碼的氨基酸。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述基因分型方法包括確定所述氨基酸編號(hào)211是否不是組氨酸。在進(jìn)一步優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述基因分型方法包括確定所述氨基酸編號(hào)211是否為精氨酸。在另外優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述基因分型方法包括確定所述氨基酸編號(hào)211是否為組氨酸。在更進(jìn)一步優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述基因分型方法包括，從人對(duì)象分離核酸，擴(kuò)增所述核酸的連續(xù)序列，其中所述連續(xù)序列包括編碼氨基酸編號(hào)211的GPR40的核苷酸或其互補(bǔ)序列，用核苷酸探針處理所述連續(xù)序列，其能確定所述對(duì)象的GPR40基因在氨基酸編號(hào)211位編碼的氨基酸；以及確定所述探針是否在高嚴(yán)謹(jǐn)度條件下與所述連續(xù)序列雜交。在一優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述探針由具有約13至約35個(gè)核苷酸長(zhǎng)度的SEQ.ID.NO9或SEQ.ID.NO10核苷酸序列的連續(xù)部分組成，其連接可檢測(cè)的標(biāo)記物并且包括編碼氨基酸211的核苷酸或其互補(bǔ)的核苷酸序列。本發(fā)明另外的方面提供治療方法，包括確定人對(duì)象的GPR40基因在氨基酸編號(hào)211位編碼的氨基酸以及用治療有效量的試劑(Agent)治療所述對(duì)象，該試劑用于治療或預(yù)防通過(guò)具有其中編碼的氨基酸編號(hào)211不是組氨酸，優(yōu)選為精氨酸的GPR40基因的至少一個(gè)等位基因，并且優(yōu)選兩個(gè)等位基因而介導(dǎo)的疾病或病理狀況。在一優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述試劑選自胰島素、刺激胰島素分泌的磺酰脲化合物、糖原磷酸化酶抑制劑、雙胍肝葡萄糖排出抑制劑、α-糖苷酶抑制劑、蛋白質(zhì)酪氨酸磷酸酶-1B抑制劑、二肽基肽酶IV抑制劑、糖原合酶激酶-3β抑制劑、過(guò)氧化物酶體增殖因子-活化的受體γ激動(dòng)劑、胰高血糖素受體拮抗劑、選擇性5-羥色胺再攝取抑制劑、3-羥基-3-甲基戊二酰輔酶A還原酶抑制劑、γ-氨基丁酸激動(dòng)劑、血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑、血管緊張素-II受體拮抗劑、磷酸二酯酶5型抑制劑、山梨醇脫氫酶抑制劑和醛糖還原酶抑制劑、其藥學(xué)可接受前藥或其藥學(xué)可接受鹽。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述試劑為抗-肥胖劑，優(yōu)選選自載脂蛋白-B分泌/微粒體甘油三酯轉(zhuǎn)移蛋白抑制劑、11β-羥基類固醇脫氫酶-1抑制劑、肽YY3-36、肽YY3-36的類似物、大麻素拮抗劑、MCR-4激動(dòng)劑、縮膽囊肽-A激動(dòng)劑、單胺再攝取抑制劑、擬交感神經(jīng)劑、β3腎上腺素能受體激動(dòng)劑、多巴胺激動(dòng)劑、促黑激素受體類似物、5HT2c激動(dòng)劑、黑色素濃縮激素拮抗劑、苗條蛋白、苗條蛋白類似物、苗條蛋白受體激動(dòng)劑、促生長(zhǎng)激素神經(jīng)肽拮抗劑、脂酶抑制劑、減食欲劑、神經(jīng)肽-Y受體拮抗劑、擬甲狀腺劑、脫氫表雄甾酮、脫氫表雄甾酮類似物、糖皮質(zhì)激素受體激動(dòng)劑、糖皮質(zhì)激素受體拮抗劑、木蝴蝶苷(orexin)受體拮抗劑、胰高血糖素-樣肽-1受體激動(dòng)劑、睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子、人刺鼠-相關(guān)蛋白質(zhì)、ghrelin受體拮抗劑、組胺3受體拮抗劑、組胺3受體反向激動(dòng)劑和神經(jīng)介肽U受體激動(dòng)劑。本發(fā)明的另一方面涉及試劑盒，包括能確定人對(duì)象GPR40基因在氨基酸編號(hào)211位編碼的氨基酸的核苷酸探針。在一優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述探針能確定所述GPR40基因的氨基酸編號(hào)211是否為組氨酸。在另一實(shí)施方案中，所述探針能確定所述GPR40基因的氨基酸編號(hào)211是否不是組氨酸，優(yōu)選為精氨酸。在進(jìn)一步優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述探針由具有約13至約35個(gè)核苷酸長(zhǎng)度的SEQ.ID.NO9或SEQ.ID.NO10核苷酸序列的連續(xù)部分組成，其連接可檢測(cè)的標(biāo)記物并且包括編碼氨基酸211的核苷酸或其互補(bǔ)的核苷酸序列。在另外優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述試劑盒進(jìn)一步包括以下任一第一條聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)核苷酸引物，其與編碼所述GPR40基因氨基酸211的核苷酸下游的核苷酸序列互補(bǔ)，以及第二條聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)引物，其與編碼所述氨基酸211的核苷酸上游的核苷酸序列互補(bǔ)；或第一條引物，其與編碼所述氨基酸211的核苷酸上游的核苷酸序列互補(bǔ)，以及第二條聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)引物，其與編碼所述氨基酸211的核苷酸下游的核苷酸序列互補(bǔ)。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中所述試劑盒進(jìn)一步包括容器。本發(fā)明另外的方面涉及表征試劑的方法，包括測(cè)量待測(cè)試劑對(duì)GPR40配體結(jié)合第一種人GPR40受體的競(jìng)爭(zhēng)性抑制，在所述第一種GPR40受體中氨基酸編號(hào)211為組氨酸，以及測(cè)量所述化合物對(duì)GPR40配體結(jié)合第二種人GPR40受體的競(jìng)爭(zhēng)性抑制，在所述第二種人GPR40受體中氨基酸編號(hào)211不是組氨酸。在一優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述第二種受體的氨基酸編號(hào)211為精氨酸。在進(jìn)一步優(yōu)選的實(shí)施方案中，該方法進(jìn)一步包括比較所述化合物對(duì)所述第一種受體和所述第二種受體的結(jié)合的競(jìng)爭(zhēng)性抑制。本發(fā)明另外的方面涉及表征試劑的方法，包括測(cè)量待測(cè)試劑對(duì)第一種人GPR40受體的活化，所述第一種人GPR40受體中氨基酸編號(hào)211為組氨酸，以及測(cè)量待測(cè)試劑對(duì)第二種人GPR40受體的活化，所述第二種人GPR40受體中氨基酸編號(hào)211不是組氨酸。在一優(yōu)選的實(shí)施方案中，該第二種受體的氨基酸編號(hào)211為精氨酸。在進(jìn)一步優(yōu)選的實(shí)施方案中，該方法進(jìn)一步包括比較所述化合物對(duì)所述第一種受體和所述第二種受體的活化。本發(fā)明另一個(gè)方面提供表征試劑的方法，包括測(cè)量待測(cè)試劑對(duì)第一種人GPR40受體經(jīng)GPR40活化劑活化的抑制，其中所述第一種受體的氨基酸編號(hào)211為組氨酸，以及測(cè)量待測(cè)試劑對(duì)第二種人GPR40受體經(jīng)GPR40活化劑活化的抑制，其中所述第二種受體的氨基酸編號(hào)211不是組氨酸，優(yōu)選為精氨酸。在進(jìn)一步優(yōu)選的實(shí)施方案中，該方法進(jìn)一步包括比較所述化合物對(duì)所述第一種受體和所述第二種受體活化的抑制。附圖簡(jiǎn)述圖1舉例說(shuō)明了如通過(guò)表達(dá)GPR40的HEK293細(xì)胞較之不表達(dá)GPR40的HEK293細(xì)胞中胞內(nèi)鈣離子釋放所測(cè)量的，GPR40被噻唑烷二酮化合物活化。圖2顯示如通過(guò)在表達(dá)GPR40的HEK293細(xì)胞中胞內(nèi)鈣離子釋放所測(cè)量的，在氨基酸211位具有組氨酸對(duì)比精氨酸的GPR40由噻唑烷二酮化合物活化之間的比較。圖3顯示比較體重指數(shù)與患糖尿病的可能性，2465名對(duì)象(1332名男性和857名女性)群體中每種GPR40基因型的對(duì)數(shù)回歸曲線(實(shí)線)以及95％置信限(虛線)和個(gè)體數(shù)據(jù)點(diǎn)。圖頂端的數(shù)據(jù)點(diǎn)指示患有糖尿病個(gè)體的體重指數(shù)。圖底部的數(shù)據(jù)點(diǎn)指示無(wú)糖尿病個(gè)體的體重指數(shù)。圖4顯示用于制備表達(dá)GPR40的HEK293細(xì)胞的表達(dá)載體的限制性圖譜。圖5顯示編碼人GPR40的核苷酸和氨基酸序列(分別為SEQ.ID.NO1和2)，其中突出編碼氨基酸編號(hào)211的核苷酸和為精氨酸的氨基酸編號(hào)211。圖6顯示編碼人GPR40的核苷酸和氨基酸序列(分別為SEQ.ID.NO3和4)，其中突出編碼氨基酸編號(hào)211的核苷酸和為組氨酸的氨基酸編號(hào)211。圖7顯示可用于擴(kuò)增和檢測(cè)包含GPR40等位基因的序列的PCR引物和PCR探針的序列。圖7還顯示編碼氨基酸編號(hào)211為組氨酸(SEQ.ID.NO9)或精氨酸(SEQ.ID.NO10)的核苷酸序列。圖8顯示包含在氨基酸編號(hào)211位編碼組氨酸的GPR40等位基因的表達(dá)載體構(gòu)建體的序列。發(fā)明詳述此處所用的術(shù)語(yǔ)具有其在本領(lǐng)域中通常的意義。然而，為了更進(jìn)一步闡明本發(fā)明以及為了方便起見(jiàn)，底下提供說(shuō)明書(shū)，包括實(shí)施例和附加的權(quán)利要求中采用的某些術(shù)語(yǔ)和短語(yǔ)的意義。如本文進(jìn)一步所述的，術(shù)語(yǔ)“試劑(Agent)”指物質(zhì)，包括肽和化合物，其用于治療或預(yù)防疾病或病理狀況，后者通過(guò)具有其中編碼的氨基酸編號(hào)211不是組氨酸，優(yōu)選為精氨酸的GPR40基因的至少一個(gè)等位基因，優(yōu)選兩個(gè)等位基因而介導(dǎo)相對(duì)于GPR40基因的術(shù)語(yǔ)“氨基酸編號(hào)211”指GenBank登錄號(hào)AF024687的序列中氨基酸殘基編號(hào)211，所述序列也在SEQ.ID.No.2和4中顯示。術(shù)語(yǔ)“高嚴(yán)謹(jǐn)度條件”指約0.2xSSC和約0.1％SDS存在下68℃，1小時(shí)的洗滌條件。對(duì)這些洗滌條件有用的改變對(duì)于本領(lǐng)域普通技術(shù)人員將是顯而易見(jiàn)的。通常，雜交的嚴(yán)謹(jǐn)度在部分程度上根據(jù)進(jìn)行洗滌步驟的溫度表示。通常，選擇所述洗滌溫度為在確定的離子強(qiáng)度和pH時(shí)比特異性序列的熱熔點(diǎn)(Tm)低約5℃-20℃。Tm為50％的靶序列雜交完全匹配的探針時(shí)的溫度(在確定的離子強(qiáng)度和pH下)。用于計(jì)算Tm的方程式和核酸雜交條件為大家所熟知并且可在Sambrook(1989)中找到，參見(jiàn)第2卷第9章。術(shù)語(yǔ)“糖尿病”指如本領(lǐng)域技術(shù)人員所理解的糖尿病。該術(shù)語(yǔ)包括I型糖尿病，亦稱胰島素依賴型糖尿病(IDDM)，和II型糖尿病，亦稱非胰島素依賴型糖尿病(NIDDM)。世界衛(wèi)生組織(W.H.O)已建議用于診斷糖尿病的標(biāo)準(zhǔn)(W.H.O.1980/85TechnicalReportSeriesNo.646/727)。糖尿病也已由國(guó)家糖尿病數(shù)據(jù)組表征(參見(jiàn)NationalDiabetesDataGroupClassificationanddiagnosisofdiabetesmellitusandothercategoriesofglucoseintolerance，Diabetes，281039-1044，1979)。然而近年來(lái)，例如美國(guó)糖尿病聯(lián)合會(huì)已闡明指導(dǎo)原則，以使得能夠診斷I型和II型糖尿病(參見(jiàn)例如，ADA(2004))。術(shù)語(yǔ)“治療有效量”指試劑的量，其(i)治療或預(yù)防特定的疾病、病況或病癥；(ii)減弱、改善或消除特定疾病、病況或病癥的一種或多種癥狀；或(iii)預(yù)防或延緩特定疾病、病況或病癥的一種或多種癥狀的發(fā)作。可通過(guò)本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員基于本文公開(kāi)的內(nèi)容在個(gè)體基礎(chǔ)上確定治療有效量，并且其將至少在部分程度上基于對(duì)受試者物種、受試者大小、所用的投遞系統(tǒng)類型和給藥類型的考慮并相對(duì)于疾病的進(jìn)展。視具體情況而定，詞語(yǔ)“藥學(xué)可接受的鹽”包括藥學(xué)可接受酸加成鹽和藥學(xué)可接受的陽(yáng)離子鹽。藥學(xué)可接受的陽(yáng)離子鹽包括但不限于，鹽如堿金屬鹽(例如，鈉和鉀)、堿土金屬鹽(例如，鈣和鎂)、鋁鹽、銨鹽和與有機(jī)胺的鹽，所述有機(jī)胺如芐星青霉素(N，N’-二芐基乙二胺)、膽堿、二乙醇胺、乙二胺、葡甲胺(N-甲基葡糖胺)、苯乙芐胺(N-芐基苯乙胺)、二乙胺、哌嗪、氨基丁三醇(2-氨基-2-羥甲基-1，3-丙二醇)和普魯卡因。詞語(yǔ)“藥學(xué)可接受的酸加成鹽”旨在包括但不限于，這樣的鹽如鹽酸鹽、氫溴化物、硫酸鹽、硫酸氫鹽、磷酸鹽、磷酸氫鹽、磷酸二氫鹽、乙酸鹽、琥珀酸鹽、檸檬酸鹽、甲烷磺酸鹽(甲磺酸鹽)和對(duì)甲苯磺酸鹽(甲苯磺酸鹽)。尤其優(yōu)選的鹽為鈉鹽。此處出現(xiàn)的化合物的描述，其包括短語(yǔ)“其前藥或其藥學(xué)可接受的鹽”或大體類似的短語(yǔ)意在包括適用化合物的藥學(xué)可接受鹽以及這類前藥的藥學(xué)可接受鹽。術(shù)語(yǔ)“前藥”指在體內(nèi)轉(zhuǎn)化而產(chǎn)生本發(fā)明化合物的化合物。轉(zhuǎn)化可通過(guò)各種的機(jī)理發(fā)生，如通過(guò)在血液中水解。前藥使用的討論由Higuchi和Stella(1987)提供。例如，當(dāng)本發(fā)明的化合物包含羧酸官能團(tuán)時(shí)，前藥可包括通過(guò)酸基的氫原子由諸如以下基團(tuán)置換而形成的酯，如(C1-C8)烷基、(C2-C12)烷酰氧基甲基、具有4至9個(gè)碳原子的1-(烷酰氧基)乙基、具有5至10個(gè)碳原子的1-甲基-1-(烷酰氧基)-乙基、具有3至6個(gè)碳原子的烷氧基羰基氧基甲基、具有4至7個(gè)碳原子的1-(烷氧基羰基氧基)乙基、具有5至8個(gè)碳原子的1-甲基-1-(烷氧基羰基氧基)乙基、具有3至9個(gè)碳原子的N-(烷氧羰基)氨甲基、具有4至10個(gè)碳原子的1-(N-(烷氧羰基)氨基)乙基、3-酞基、4-巴豆酸內(nèi)酯基、γ-丁內(nèi)酯-4-基、二-N，N-(C1-C2)烷氨基(C2-C3)烷基(如b-二甲基氨基乙基)、氨基甲?；?(C1-C2)烷基、N，N-二(C1-C2)烷基氨基甲酰基-(C1-C2)烷基和哌啶子基-、吡咯烷基-或4-嗎啉基(C2-C3)烷基。類似地，當(dāng)本發(fā)明的化合物包括醇官能團(tuán)時(shí)，前藥可通過(guò)醇基的氫原子由如下基團(tuán)置換而形成，如(C1-C6)烷酰氧基甲基、1-((C1-C6)烷酰氧基)乙基、1-甲基-1-((C1-C6)烷酰氧基)乙基、(C1-C6)烷氧基羰基氧基甲基、N-(C1-C6)烷氧基羰基氨甲基、琥珀酰基、(C1-C6)烷酰基、a-氨基(C1-C4)烷?；?、芳?；蚢-氨?；?，或a-氨酰基-a-氨?；?，其中每種a-氨?；鶊F(tuán)獨(dú)立選自天然存在的L-氨基酸；P(O)(OH)2、-P(O)(O(C1-C6)烷基)2或糖基(該基團(tuán)由除去糖類半縮醛形式的羥基而產(chǎn)生)。當(dāng)本發(fā)明的化合物包括胺官能團(tuán)時(shí)，前藥可通過(guò)胺基團(tuán)中的氫原子由如下基團(tuán)置換而形成，如RX-羰基、RXO-羰基、NRXRX′-羰基，其中RX和RX′各自獨(dú)立地為(C1-C10)烷基、(C3-C7)環(huán)烷基、苯甲基，或RX-羰基為天然的a-氨酰基或天然的a-氨?；?天然的a-氨?；?C(OH)C(O)OYX，其中YX為H、(C1-C6)烷基或苯甲基)；-C(OYX0)YX1，其中YX0為(C1-C4)烷基以及YX1為(C1-C6)烷基、羧基(C1-C6)烷基、氨基(C1-C4)烷基或單-N-或二-N，N-(C1-C6)烷基氨基烷基；-C(YX2)YX3，其中YX2為H或甲基以及YX3為單-N-或二-N，N-(C1-C6)烷氨基、嗎啉代、哌啶-1-基或吡咯烷-1-基?！昂塑账嵝蛄小焙汀岸嗪塑账帷敝窪NA或RNA，無(wú)論是單鏈或雙鏈形式的。術(shù)語(yǔ)“互補(bǔ)的核苷酸序列”指根據(jù)鳥(niǎo)苷核苷酸(G)與胞苷核苷酸(C)以及腺苷核苷酸(A)與胸苷核苷酸(T)的配對(duì)而退火(結(jié)合)至另一核苷酸序列的核苷酸序列，除了在RNA中T用尿苷核苷酸(U)代替從而U與A結(jié)合。此處所用的縮寫(xiě)具有在本領(lǐng)域中其通常的含義。然而，為了更進(jìn)一步闡明本發(fā)明，為了方便起見(jiàn)，如下提供某些縮寫(xiě)的意義“℃”指攝氏度；“CO2”指二氧化碳；“DMEM”指Dulbecco′s改進(jìn)的Eagle′s培養(yǎng)基；“DNA”指脫氧核糖核酸；“FBS”指胎牛血清；“g”指克；“HEPES”指4-(2-羥乙基)-1-哌嗪乙磺酸；“kg”指公斤；“mg”指毫克；“mL”指毫升；“mM”指毫摩爾；“μl”指微升；“μM”指微摩爾；“ng”指納克；“nm”指納米；“nM”指納摩爾；“PCR”指聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)；“Pen/Strep”指包含青霉素和鏈霉素的混合物；“RNA”指核糖核酸；“RPM”指每分鐘轉(zhuǎn)數(shù)；以及“xg”指倍數(shù)重力。下列氨基酸縮寫(xiě)用于本說(shuō)明書(shū)中A-丙氨酸T-蘇氨酸V-纈氨酸C-半胱氨酸L-亮氨酸Y-酪氨酸I-異亮氨酸N-天冬酰胺P-脯氨酸Q-谷氨酰胺F-苯丙氨酸D-天冬氨酸W-色氨酸E-谷氨酸M-甲硫氨酸K-賴氨酸G-甘氨酸R-精氨酸S-絲氨酸H-組氨酸通過(guò)GenBank登錄號(hào)AF024687確定的GPCR基因GPR40編碼300個(gè)氨基酸的蛋白質(zhì)。Sawzdargo等(1997)。在胰島細(xì)胞中高表達(dá)的GPR40已與胰島素分泌的調(diào)節(jié)相關(guān)聯(lián)，并且因此已建議其作為用于糖尿病治療的靶標(biāo)。Briscoe等(2003)；Itoh等(2003)。Kotarsky等(2003)認(rèn)為GPR40介導(dǎo)對(duì)噻唑烷二酮型糖尿病藥物的應(yīng)答。如同其他GPCR，GPR40參與將胞外信號(hào)傳送進(jìn)入細(xì)胞中。GPR40的活化通過(guò)涉及Gq蛋白的途徑引起胞內(nèi)鈣的釋放。Briscoe等(2003)。基于本公開(kāi)，產(chǎn)生的鈣流可通過(guò)本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法用于檢測(cè)GPR40活化(參見(jiàn)例如Kotarsky等(2003)；Briscoe等(2003))。已知噻唑烷二酮和某些脂肪酸活化GPR40。Kotarsky等(2003)和Briscoe等(2003)。如在此通過(guò)圖1舉例說(shuō)明的，相比不表達(dá)GPR40的細(xì)胞，噻唑烷二酮化合物在表達(dá)GPR40的細(xì)胞中刺激胞內(nèi)鈣離子的釋放。本發(fā)明在部分程度上基于單核苷酸多態(tài)性影響例如噻唑烷二酮型藥物對(duì)GPR40的活化這一發(fā)現(xiàn)。這一在GPR40編碼序列的核苷酸632位存在的多態(tài)性(對(duì)應(yīng)于GenBank登錄號(hào)AF024687序列的核苷酸642)，包括A替換為非A核苷酸，優(yōu)選G，導(dǎo)致殘基211位從組氨酸至非組氨酸的氨基酸優(yōu)選精氨酸的氨基酸置換。其中氨基酸211為精氨酸的GPR40的核苷酸和氨基酸序列分別以SEQ.ID.No.1和2呈現(xiàn)。其中氨基酸211為組氨酸的GPR40的核苷酸和氨基酸序列分別以SEQ.ID.No.3和4呈現(xiàn)。如通過(guò)圖2舉例說(shuō)明的，相比在位點(diǎn)632具有A核苷酸的細(xì)胞，其中GPR40的核苷酸632為G的細(xì)胞對(duì)例如噻唑烷二酮活化具有更高的應(yīng)答。圖2顯示在位點(diǎn)632位具有G對(duì)比A核苷酸的細(xì)胞中測(cè)量胞內(nèi)鈣離子的基于細(xì)胞分析的結(jié)果。此外，本發(fā)明在部分程度上基于在核苷酸642位具有G的個(gè)體，尤其在兩個(gè)等位基因上均具有G的個(gè)體相比其中該核苷酸為A的個(gè)體具有更高糖尿病風(fēng)險(xiǎn)這一發(fā)現(xiàn)。如通過(guò)圖3舉例說(shuō)明的，對(duì)于給定的體重指數(shù)，在核苷酸642位為雜合或純合A的對(duì)象比為純合G的對(duì)象具有顯著更低的患II型糖尿病的幾率。本發(fā)明包括表征方法和疾病或病理狀況的治療或預(yù)防方法，所述疾病與病理狀況與具有GPR40的至少一個(gè)等位基因，優(yōu)選兩個(gè)等位基因有關(guān)，其中編碼的氨基酸編號(hào)211不是組氨酸，優(yōu)選為精氨酸。基于本公開(kāi)，用于本發(fā)明方法的對(duì)象的基因分型可通過(guò)本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法進(jìn)行。例如在Dracopoli等(2004)的第2章中描述了例示性的方法?；诒竟_(kāi)，可如本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的那樣利用合適的對(duì)象組織進(jìn)行基因分型。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，基于本公開(kāi)，通過(guò)本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的方法從整個(gè)血樣分離用于基因分型的DNA。這些方法可利用各種市場(chǎng)上可買到的試劑盒進(jìn)行，如PuregeneDNA分離試劑盒(GentraSystems，Inc.，Minneapolis，MN)、用于血液的DNA分離試劑盒(目錄號(hào)2-032-805，RocheDiagnosticsCorporation)、GenomicPrepTM血液DNA分離試劑盒(目錄號(hào)27-5236-01，AmershamBiosciencesCorp.，Piscataway，NJ)、PAXgene血液DNA試劑盒(目錄號(hào)761133，QIAGENInc.，Valencia，CA)、GNOME全血DNA分離試劑盒(目錄號(hào)2011-600，Qbiogene，Inc.，Carlsbad，CA)和Wizard基因組DNA純化試劑盒(目錄號(hào)A1120，PromegaU.S.，Madison，WI)?？衫缤ㄟ^(guò)利用有義和反義引物和檢測(cè)探針的PCR技術(shù)擴(kuò)增包含單核苷酸多態(tài)性的核酸區(qū)域。然而，也可利用其他的核酸擴(kuò)增方法，包括連接酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(參見(jiàn)例如，Abravaya，K.等(1995)，分支DNA信號(hào)擴(kuò)增(參見(jiàn)例如，Jrdea，M.S.等(1993))、等溫基于核酸序列的擴(kuò)增(NASBA)(參見(jiàn)例如，Kievits，T.等(1991))，和其他的自動(dòng)維持序列復(fù)制分析。用于制備PCR引物和探針的方法為本領(lǐng)域所熟知，并且例如在Sambrook等(1989)，Ausubel等(1994)和Innis等(1990)中描述。PCR引物對(duì)可源于已知序列，例如通過(guò)利用設(shè)計(jì)用于該目的的計(jì)算機(jī)程序如Primer(0.5版本，1991，WhiteheadInstituteforBiomedicalResearch，CambridgeMA)?？衫帽绢I(lǐng)域已知用于所述目的的軟件選擇用作引物的寡核苷酸。例如，OLIGO6版本軟件(MolecularBiologyInsights，Inc.，Cascade，CO，www.oligo.com)用于各多至100個(gè)核苷酸的PCR引物對(duì)的選擇。類似的引物選擇程序已引入了另外的特征用于擴(kuò)展的能力。例如，PrimOU引物選擇程序(公眾可從UniversityofTexas，SouthWestMedicalCenter，DallasTX的GenomeCenter，ftp//ftp.genome.ou.edu/pub/programs/primou-src.tar得到)能從兆堿基序列選擇特異性引物并且因此可用于在廣泛的基因組范圍內(nèi)設(shè)計(jì)引物。Primer3，0.9版本引物選擇程序(公眾可從WhiteheadInstitute/MITCenterforGenomeResearch，CambridgeMA，http://www-genome.wi.mit.edu/genome_software/other/primer3.html得到)允許用戶輸入“錯(cuò)引物文庫(kù)”，其中避免作為引物結(jié)合位點(diǎn)的序列為用戶指定的。Primer3尤其可用于微陣列寡核苷酸的選擇。(后兩種引物選擇程序的源代碼也可獲自其各自的來(lái)源并且改進(jìn)以符合用戶的特定需求。)PrimeGen程序(公眾可從UKHumanGenomeMappingProjectResourceCentre，CambridgeUK，http://www.hgmp.mrc.ac.uk/Registered/Option/primegen.html得到)基于多重序列比對(duì)設(shè)計(jì)引物，因此允許選擇雜交至比對(duì)核酸序列的最為保守或最不保守區(qū)域的引物。因此，該程序可用于獨(dú)特的和保守的寡核苷酸和多核苷酸片段的鑒定?；诒竟_(kāi)，其他的寡核苷酸選擇方法對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員將是顯而易見(jiàn)的。優(yōu)選，用于探針的序列長(zhǎng)度利用與探針序列相聯(lián)的小溝結(jié)合劑(MGB)最小化以區(qū)分兩種SNP。MGB為本領(lǐng)域技術(shù)人員所知，例如在美國(guó)專利No.5,801,155；6,084,102；6,426,408；6,312,894和6,683,173中公開(kāi)的。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，PrimerExpress1.5版本軟件(AppliedBiosystems，F(xiàn)osterCity，CA)用于設(shè)計(jì)實(shí)踐本發(fā)明的PCR引物和探針。例示性的引物包括用于正向引物的CTTGGCCATCACAGCCTTCT(SEQ.ID.NO5)和用于反向引物的CCACGTTGGAGGCGTTGT(SEQ.ID.NO6)。探針可以是具有序列6FAM-CACTGGCCCACTCT和VIC-CACTGGCCCGCTC(分別為SEQ.ID.No.7和8)的FAMTM和VIC染料-標(biāo)記的TaqManMGB探針(AppliedBiosystems)。將對(duì)象分離的DNA用PCR試劑，包括引物和探針處理，并且處于重復(fù)的熱循環(huán)中以發(fā)生PCR反應(yīng)。SNP的檢測(cè)可例如利用基于熒光的序列檢測(cè)系統(tǒng)如ABIPRISM7900HTSequenceDetectionSystem(AMEBioscience，Toroed，Norway)進(jìn)行。本發(fā)明還包括用于確定對(duì)象是否在GPR40編碼序列的核苷酸632位具有非A核苷酸，優(yōu)選為G的診斷檢驗(yàn)試劑盒。例如，該試劑盒可包括諸如能檢測(cè)對(duì)象是否在GPR40編碼序列的核苷酸632位具有A或G的標(biāo)記的或可標(biāo)記的核酸探針這樣的試劑。所述探針優(yōu)選小于35個(gè)核苷酸長(zhǎng)度，更優(yōu)選小于25個(gè)核苷酸，并且甚至更優(yōu)選在13至25個(gè)核苷酸之間。該試劑盒可進(jìn)一步包括試劑，如PCR引物，用于擴(kuò)增包含核苷酸632的核酸區(qū)域。試劑可包裝于合適的容器中。該試劑盒可進(jìn)一步包括使用該試劑盒檢測(cè)對(duì)象是否在GPR40編碼序列的核苷酸632位具有A或G的說(shuō)明書(shū)。通過(guò)將其中氨基酸211不是組氨酸、優(yōu)選為精氨酸的第一種人GPR40受體經(jīng)待測(cè)試劑的活化，與其中氨基酸211為組氨酸的第二種人GPR40受體經(jīng)待測(cè)試劑的活化相比較，本發(fā)明提供用于鑒定活化GPR40的待測(cè)試劑的方法。測(cè)量GPR40活化的任何合適的方法可用于實(shí)踐本發(fā)明。所述方法是已知的或基于本公開(kāi)對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員是顯而易見(jiàn)的。例如在優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述方法包括熒光成像平板讀數(shù)系統(tǒng)(即，F(xiàn)LIPR)中鈣敏感染料的利用，其測(cè)量通過(guò)Gq蛋白介導(dǎo)的G蛋白偶聯(lián)受體活化后的鈣流(參見(jiàn)例如，Chambers等(2003)。本領(lǐng)域已知的其他方法包括鈣結(jié)合蛋白(Miyawaki等(1997)，Kain(1999))和鈣敏感螢光素酶(Button和Brownstein(1997)，Stables等(1997))的利用。通過(guò)將其中氨基酸211為組氨酸的第一種人GPR40受體的活化經(jīng)待測(cè)試劑的抑制，與其中氨基酸211不是組氨酸、優(yōu)選為精氨酸的第二種人GPR40受體的抑制相比較，本發(fā)明進(jìn)一步提供用于鑒定抑制GPR40活化的待測(cè)試劑的方法。所述方法可利用上述利用已知的GPR40活化劑聯(lián)合待測(cè)試劑的活化測(cè)定法。產(chǎn)生的可檢測(cè)信號(hào)與如果單獨(dú)利用已知的活化劑本身所預(yù)期的信號(hào)相比較。GPR40的各種活化劑在本領(lǐng)域中已知并且可用于所述方法，包括Kotarsky等(2003)，Briscoe等(2003)和國(guó)際專利申請(qǐng)公開(kāi)No.WO02/057783所述的那些。通過(guò)將已知的GPR40配體與其中氨基酸211為組氨酸的第一種人GPR40受體的結(jié)合經(jīng)待測(cè)試劑的競(jìng)爭(zhēng)性抑制，與該已知的配體與其中氨基酸211不是組氨酸、優(yōu)選為精氨酸的第二種人GPR40受體的結(jié)合經(jīng)該化合物的競(jìng)爭(zhēng)性抑制相比較，本發(fā)明還包括用于鑒定結(jié)合GPR40的待測(cè)試劑的方法。配體可用本領(lǐng)域眾所周知的可檢測(cè)標(biāo)記物標(biāo)記，包括例如，放射性同位素、熒光染料和酶。GPR40的各種配體在本領(lǐng)域中已知并且可用于所述方法，包括Kotarsky等(2003)，Briscoe等(2003)和國(guó)際專利申請(qǐng)公開(kāi)No.WO02/057783所述的那些。本領(lǐng)域技術(shù)人員基于本公開(kāi)將理解，用于鑒定本發(fā)明待測(cè)試劑的方法的活化、活化的抑制和結(jié)合的抑制的比較可通過(guò)任何多種方法進(jìn)行。例如，可利用測(cè)量鈣流的熒光或比色法(例如，F(xiàn)LIPR)進(jìn)行GPR40活化和活化抑制的測(cè)量。因此，可通過(guò)所述方法，例如通過(guò)利用產(chǎn)生數(shù)值的光檢測(cè)儀器精確地定量GPR40的活化。可通過(guò)自動(dòng)的或人工的手段比較根據(jù)所述測(cè)量得到的值。例如，實(shí)際的方法，尤其當(dāng)產(chǎn)生許多值時(shí)，包括通過(guò)本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的方法利用計(jì)算機(jī)系統(tǒng)比較這些值。此外，本發(fā)明包括疾病或病理狀況的治療或預(yù)防方法，所述疾病或病理狀況與具有GPR40的至少一個(gè)等位基因，優(yōu)選兩個(gè)等位基因有關(guān)，其中編碼的氨基酸編號(hào)211不是組氨酸，優(yōu)選為精氨酸。鑒定所述疾病或病況的方法為本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知或基于本公開(kāi)為顯而易見(jiàn)的。例如，圖3舉例說(shuō)明了比較患有II型糖尿病受試者與不患有糖尿病受試者的基因型的研究結(jié)果。對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員顯而易見(jiàn)的是類似于圖3和實(shí)施例5中所述的方法可用于確定其他的疾病或病況，其與具有GPR40的至少一個(gè)等位基因，優(yōu)選兩個(gè)等位基因有關(guān)，其中編碼的氨基酸編號(hào)211不是組氨酸，優(yōu)選為精氨酸。本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，通過(guò)具有GPR40的至少一個(gè)等位基因，優(yōu)選兩個(gè)等位基因，其中編碼的氨基酸編號(hào)211不是組氨酸，優(yōu)選為精氨酸而介導(dǎo)的疾病或病理狀況為糖尿病，優(yōu)選II型糖尿病。在另一實(shí)施方案中，疾病或病況為與糖尿病有關(guān)的并發(fā)癥。所述并發(fā)癥包括動(dòng)脈硬化、糖尿病性心肌病、白內(nèi)障、足潰瘍、糖尿病性大血管病、糖尿病性微血管病、糖尿病性腎病、糖尿病性視網(wǎng)膜病和糖尿病性神經(jīng)病。另外的實(shí)施方案中，所述疾病或病況為與代謝綜合征有關(guān)的任何危險(xiǎn)因素，包括肥胖、高血壓、胰島素抵抗、II型糖尿病和血脂異常。本發(fā)明提供涉及用于疾病或病理狀況治療或預(yù)防的試劑給藥的治療方法，該疾病或病理狀況通過(guò)具有GPR40基因的至少一個(gè)等位基因，優(yōu)選兩個(gè)等位基因，其中編碼的氨基酸編號(hào)211不是組氨酸，優(yōu)選為精氨酸而介導(dǎo)(之前定義為“試劑”)?；诒竟_(kāi)該試劑對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員將是顯而易見(jiàn)的或可很容易通過(guò)本領(lǐng)域已知的方法鑒定。例如該試劑可包括胰島素、刺激胰島素分泌的磺酰脲化合物、糖原磷酸化酶抑制劑(GPI)、雙胍肝葡萄糖排出抑制劑、噻唑烷二酮抗糖尿病化合物、α-糖苷酶抑制劑、蛋白質(zhì)酪氨酸磷酸酶-1B(PTP-1B)抑制劑、二肽基肽酶IV(DPPIV)抑制劑、糖原合酶激酶-3β(GSK-3β)抑制劑、過(guò)氧代物酶體增殖因子-活化受體γ(PPARγ)激動(dòng)劑、胰高血糖素受體拮抗劑、選擇性5-羥色胺再攝取抑制劑(SSRI)、3-羥基-3-甲基戊二酰輔酶A還原酶抑制劑(他汀類)、γ-氨基丁酸(GABA)激動(dòng)劑、血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)抑制劑、血管緊張素-II(A-II)受體拮抗劑、磷酸二酯酶5型(PDE-5)抑制劑、山梨醇脫氫酶抑制劑(SDI)和醛糖還原酶抑制劑(ARI)。該試劑可包括任何蛋白質(zhì)酪氨酸磷酸酶-1B(PTP-1B)抑制劑。術(shù)語(yǔ)蛋白質(zhì)酪氨酸磷酸酶-1B抑制劑指抑制酶蛋白質(zhì)酪氨酸磷酸酶-1B的任何化合物。認(rèn)為PTP-1B抑制胰島素降低血糖水平的能力。例示性的PTP-1B抑制劑、用于鑒定所述抑制劑的測(cè)定法和優(yōu)選劑量和給藥的方法在下列美國(guó)專利、國(guó)際專利申請(qǐng)公開(kāi)和其他出版物中公開(kāi)US6,251936、US6,221,902、US6,057,316、US6,001,867、US5,753,687、WO01/46203、WO01/46204、WO01/46206、WO01/17516、WO00/53583、WO99/58518、WO99/61435、WO99/58521、WO99/58522、WO99/58514、WO99/58520、WO99/58519、WO99/58511、WO99/61410、WO99/15529、Malamas等(2000A)、Bleasdale等(2001)、Wrobel等(1999)、Malamas等(2000B)、Wang等(1998)、Andersen等(2000)、Iversen等，(2000)、Wrobel等(2000)和Kees(1996)。該試劑可包括任何胰高血糖素受體拮抗劑。術(shù)語(yǔ)胰高血糖素受體拮抗劑指拮抗胰高血糖素受體，因此抑制通過(guò)胰高血糖素結(jié)合胰高血糖素受體誘導(dǎo)的葡萄糖釋放的任何化合物。所述拮抗作用很容易由本領(lǐng)域技術(shù)人員根據(jù)本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的測(cè)定法確定。例示性的胰高血糖素受體拮抗劑、用于鑒定所述拮抗劑的測(cè)定法和優(yōu)選劑量和給藥的方法在下列美國(guó)專利、國(guó)際專利申請(qǐng)公開(kāi)和其他出版物中公開(kāi)US6,218,431、US5,138,090、WO98/04528、WO99/01423、WO00/39088、WO00/69810、WO98/21957、WO98/22109、WO98/22108、WO97/16442、Livingston等(1999)、Madsen等(1998)、deLaszlo等(1999)、Chang等(2001)、Cascieri等(1999)、Ling等(2001)和Guillon等(1998)。該試劑可包括任何糖原合酶激酶-3β(GSK-3β)拮抗劑。例示性的GSK-3β拮抗劑、用于鑒定所述拮抗劑的測(cè)定法和優(yōu)選劑量和給藥的方法在下列美國(guó)專利、國(guó)際專利申請(qǐng)公開(kāi)和其他出版物中公開(kāi)US6,057,286、WO01/56567、WO01/09106、WO01/49709、WO01/44246、WO01/44206、WO01/42224、WO00/21927、WO00/38675、WO99/65897、WO98/16528、Coghlan等(200)、Smith等(2001)、Cross等(2001)和Lochhead等(2001)。用于本發(fā)明的試劑可包括α-糖苷酶抑制劑。任何α-糖苷酶抑制劑可用作本發(fā)明中的試劑。例示性的α-糖苷酶抑制劑包括阿卡波糖(亦稱Precose)和米格列醇(亦稱Glyset)，和那些α-糖苷酶抑制劑的類似物、衍生物、前藥和藥學(xué)可接受鹽。該試劑可包括刺激胰島素分泌的磺酰脲化合物。任何刺激胰島素分泌的磺酰脲化合物可用作本發(fā)明的試劑。例示性的刺激胰島素分泌的磺酰脲化合物包括格列甲嗪，亦稱Glucotrol和GlucotrolXL；格列美脲(亦稱Amaryl)、優(yōu)降糖和氯磺丙脲(亦稱特泌胰)；和其類似物、衍生物、前藥和藥學(xué)可接受鹽。優(yōu)選的刺激胰島素分泌的磺酰脲化合物為格列甲嗪。該試劑可包括雙胍肝葡萄糖排出抑制劑。任何雙胍肝葡萄糖排出抑制劑可用作實(shí)踐本發(fā)明的試劑。例示性的雙胍為二甲雙胍，亦稱Glucophage。該試劑可包括PPARγ激動(dòng)劑，包括噻唑烷二酮和非-噻唑烷二酮化合物。PPARγ激動(dòng)劑增強(qiáng)對(duì)胰島素作用重要的組織如脂肪組織、骨骼肌和肝臟中的胰島素敏感性。任何PPARγ激動(dòng)劑可用作實(shí)踐本發(fā)明的試劑。例示性的PPARγ激動(dòng)劑包括下列美國(guó)專利中所述的那些US4,340,605；US4,342,771；US4,367,234；US4,617,312；US4,687,777和US4,703,052；和其類似物、衍生物、前藥和藥學(xué)可接受鹽。優(yōu)選的PPARγ激動(dòng)劑包括達(dá)格列酮(darglitazone)、環(huán)格列酮(ciglitazone)、恩格列酮(englitazone)、匹格列酮(pioglitazone)亦稱Actos，和羅格列酮(rosiglitazone)亦稱Avandia和BRL-49653。PPARγ激動(dòng)劑優(yōu)選以約0.1mg/天至約100mg/天的量范圍以單一或分開(kāi)劑量給藥，對(duì)普通患者而言，優(yōu)選為約0.1mg/天至約50mg/天，取決于噻唑烷二酮類抗糖尿病化合物以及給藥途徑。然而，依據(jù)所治療患者的情況，必定會(huì)有劑量上的一些變化。負(fù)責(zé)給藥的人在任何情況下決定個(gè)體患者的合適劑量。該試劑可包括任何二肽基肽酶IV(DPPIV)抑制劑。術(shù)語(yǔ)DPPIV抑制劑指抑制酶二肽基肽酶的任何化合物。所述抑制很容易由本領(lǐng)域技術(shù)人員根據(jù)諸如國(guó)際專利申請(qǐng)發(fā)明者P·巴納吉,K·L·豪斯克內(nèi)克特申請(qǐng)人:輝瑞產(chǎn)品公司