專利名稱：：含有γ-氨基丁酸的食品的生產(chǎn)方法和具有γ-氨基丁酸高產(chǎn)能力的酵母的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及含有Y-氨基丁酸的食品的生產(chǎn)方法，以及其中使用的具有Y-氨基丁酸的高產(chǎn)能力的酵母。
背景技術(shù)：
：Y畫(huà)氨基丁酸(Y-aminobutyricacid，本i兌明書(shū)中有時(shí)簡(jiǎn)稱為GABA)，是自然界中分布很廣的一種非蛋白質(zhì)組成氨基酸.Y-氨基丁酸作為食品成分，在各種谷物、蔬菜、水果和蘑菇中有微量的含量。此外，Y-氨基丁酸還存在于動(dòng)物的腦、脊髄，已知它是哺乳動(dòng)物中樞神經(jīng)系統(tǒng)中代表性的抑制性神經(jīng)遞質(zhì)。Y-氨基丁酸的生理功能廣泛，例如上述的作為神經(jīng)遞質(zhì)的作用、降壓作用、安神作用、腎功能活化作用、肝功能改善作用、抑制肥胖的作用和促進(jìn)醇代謝的作用等。此外，因?yàn)閥-氨基丁酸還具有改善腦血流，增加氧供給量，促進(jìn)腦代謝的作用，實(shí)際上y-氨基丁酸已作為藥品用于腦中風(fēng)后遺癥的改善、腦動(dòng)脈硬化引起的頭痛、耳鳴、抑郁等的治療。因此人們認(rèn)為如果能在日常飲食中攝取足夠的Y-氨基丁酸，對(duì)于維護(hù)健康和預(yù)防各類疾病是有益的。因此，已開(kāi)發(fā)和報(bào)道了通過(guò)進(jìn)行各種物理、化學(xué)處理，增加食品中y-氨基丁酸的含量的多種方法。已知的這種食品包括，通過(guò)在氮?dú)庵袑?duì)茶葉進(jìn)行無(wú)氧處理得到的"Gabaron茶"(特開(kāi)昭63-103285A號(hào)公報(bào))；可通過(guò)將含有米胚芽和胚芽的米糠用水進(jìn)行浸泡處理得到的、富含，氨基丁酸的"oryzagaba，，(特許第2810993號(hào))；通過(guò)使糙米發(fā)芽得到的、含有GABA的"發(fā)芽糙米"(特開(kāi)平11-24694A號(hào)公報(bào))；和通過(guò)蘑菇(^g"r/ow)酶降解得到的、富含GABA的"經(jīng)發(fā)酵的姬松茸(Jgfl/7'cws6/az")提取物，，。此外已有大量的研究報(bào)道涉及通過(guò)利用乳酸菌、酵母和曲霉菌等天然微生物的發(fā)酵反應(yīng)功能、酶降解功能生產(chǎn)富含，氨基丁酸的食品材料的方法。例如，已知使用乳酸菌(專利文獻(xiàn)1~8)的方法、使用酵母的方法(專利文獻(xiàn)9)和使用曲霉菌的方法(專利文獻(xiàn)10和11)等。然而，很難說(shuō)通過(guò)上述物理或化學(xué)處理得到的食品中的Y-氨基丁酸的含量已經(jīng)達(dá)到滿足市場(chǎng)需求的足夠水平。并且，由于這些處理后的產(chǎn)品本身是最終消費(fèi)的食品形態(tài)，故可將這些產(chǎn)品作為功能性原料添加到其他食品的范圍有限，故而缺乏普遍適用性。再有，就通過(guò)乳酸菌介導(dǎo)的發(fā)酵反應(yīng)大量生產(chǎn)Y-氨基丁酸的方法而言，由于y-氨基丁酸是作為乳酸菌所具有的谷氨酸脫羧酶引起的簡(jiǎn)單的酶反應(yīng)產(chǎn)物獲得的，因而，除y-氨基丁酸外，幾乎不會(huì)獲得其他功能性成分。不能期待其發(fā)揮更為綜合的功能性作用。此外，就通過(guò)酵母、曲霉菌等進(jìn)行微生物處理，生產(chǎn)Y-氨基丁酸的方法而言，例如，若所使用的酵母事先沒(méi)有用丙鯛處理使其干燥，則無(wú)法獲得所需的Y-氨基丁酸生成效果.由此導(dǎo)致處理步驟繁雜、不適合工廠大規(guī)模生產(chǎn)且使成本增加。即使所使用的酵母事先經(jīng)過(guò)丙酮處理，但添加到反應(yīng)液中的酵母(以干燥物為基準(zhǔn))相對(duì)于反應(yīng)液總量沒(méi)有達(dá)到30%~40%左右的高濃度，仍不能大量生產(chǎn)Y-氨基丁酸，因而，這些方法仍缺乏實(shí)用性。專利文獻(xiàn)1:特開(kāi)平6-45141號(hào)公報(bào)專利文獻(xiàn)2:特開(kāi)平10-295394號(hào)公報(bào)專利文獻(xiàn)3:特開(kāi)2000-308457號(hào)公報(bào)專利文獻(xiàn)4:特開(kāi)2000-210075號(hào)公報(bào)專利文獻(xiàn)5:特開(kāi)2001-120179號(hào)公報(bào)專利文獻(xiàn)6:特開(kāi)2003-180389號(hào)公報(bào)專利文獻(xiàn)7:特開(kāi)2003-7T賴2號(hào)公報(bào)專利文獻(xiàn)8:特許2704493號(hào)公報(bào)專利文獻(xiàn)9:特開(kāi)平9-238650號(hào)公報(bào)專利文獻(xiàn)10:特開(kāi)平10-165191號(hào)公報(bào)專利文獻(xiàn)11:特開(kāi)平11-103825號(hào)公報(bào)
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于提供使用微生物簡(jiǎn)便且大量生產(chǎn)y-氨基丁酸的方法。本發(fā)明涉及下述(1)到(10):(1)含有y-氨基丁酸的食品的生產(chǎn)方法，其特征在于使酵母或其處理物作用于糖或糖代謝中間體，或者是作用于糖或糖代謝中間體和谷氨酸或其鹽，其中，上述酵母或其處理物具有在糖或糖代謝中間體存在下通過(guò)發(fā)酵反應(yīng)生產(chǎn)y-氨基丁酸的能力。(2)(l)所述的方法，其特征在于所述酵母是屬于畢赤酵母屬(/Vc似fl)或假絲酵母屬(Om必rffl)的酵母。(3)(1)或(2)所述方法，其特征在于所述酵母是保藏號(hào)為FERMBP-10134的異常畢赤酵母(尸/c似flfl"o附fl/")MR-1，或其具有生產(chǎn)Y-氨基丁酸的能力的突變林。(4)(1)~(3)任一項(xiàng)所述方法，其特征在于使酵母或其處理物作用于含有糖或糖代謝中間體，或含有糖或糖代謝中間體和谷氨酸或其鹽的動(dòng)物、植物或微生物的可用部分，動(dòng)物、植物或微生物的提取物，或者是作用于以上述可用部分或提取物為原料的食品材料。(5)(1)~(4)中任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于Y-氨基丁酸生成反應(yīng)是在初始pH為3.0~6.0、反應(yīng)溫度為3255TC的條件下進(jìn)行的。(6)(1)~(5)中任一項(xiàng)所述方法，其包括通過(guò)對(duì)含有Y-氨基丁酸的反應(yīng)液進(jìn)一步進(jìn)行分離、純化、濃縮或干燥，提高y-氨基丁酸的濃度的步驟。(7)根據(jù)(1)~(6)中任一項(xiàng)所述的方法生產(chǎn)的含有Y-氨基丁酸的食品。(8)屬于異常畢赤酵母的酵母，其具有生產(chǎn)濃度在150mg/100ml或以上的Y-氨基丁酸的能力，上迷的，氨基丁酸濃度是在以如下方式獲得的溶液中測(cè)得的將水份含量為78.8重量％的l.Og活菌體加入到200ml容量的三角燒瓶中的、含有5重量％葡萄糖和1重量％的谷氨酸的50ml水溶液中，于451C振蕩24小時(shí)后，85TC加熱15分鐘使其失活，再經(jīng)離心分離，將上清濃縮、定容為25ml的溶液。(9)保藏號(hào)為FERMBP-10134的異常畢赤酵母MR-1，或其具有生產(chǎn)Y-氨基丁酸的能力的突變林。(10)含有畢赤酵母屬的酵母的食品。根據(jù)本發(fā)明，可且簡(jiǎn)便且大量地生產(chǎn)Y-氨基丁酸。由于本發(fā)明的酵母是通過(guò)發(fā)酵反應(yīng)生產(chǎn)Y-氨基丁酸，因此，使用本發(fā)明的酵母生產(chǎn)的含有Y-氨基丁酸的食品不僅含有Y-氨基丁酸，還含有其他有用的發(fā)酵產(chǎn)物。本說(shuō)明書(shū)包括作為本發(fā)明的優(yōu)先權(quán)基礎(chǔ)的日本專利申請(qǐng)?zhí)?004-333671說(shuō)明書(shū)和/或附圖中公開(kāi)的部分或全部?jī)?nèi)容。圖1是本發(fā)明的MR-1菌抹和已知的異常畢赤酵母(AY231611.1)的ITS-5.8SrDNA基因6^堿基序列比較結(jié)果圖，其同源性為97.6%。圖2是氯化鈉濃度對(duì)本發(fā)明的MR-1酵母和已知的NBRC-100267酵母增殖的影響的差異圖。圖3是顯示培養(yǎng)溫度對(duì)MR-1酵母增殖的影響的圖。具體實(shí)施方案以下，將對(duì)本發(fā)明進(jìn)行更詳細(xì)的說(shuō)明。此外，在本說(shuō)明書(shū)中，除有特殊說(shuō)明外，符號(hào)"％"均表示"重量％"。為了使Y-氨基丁酸作為功能性成份在更多的食品中得以應(yīng)用，本發(fā)明的發(fā)明人針對(duì)利用微生物簡(jiǎn)便且大量地生產(chǎn)Y-氨基丁酸的方法進(jìn)行了深入探討。為了找到在不用施加特殊處理的情況下使用活菌體就能生產(chǎn)Y-氨基丁酸的微生物，本發(fā)明人經(jīng)過(guò)銳意研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)了海洋酵母，其是一種生活在海洋中的微生物，具有在糖或糖代謝中間體存在下，通過(guò)活菌體內(nèi)的反應(yīng)大量生產(chǎn)Y-氨基丁酸的能力。已證實(shí)，使用該酵母，能夠以簡(jiǎn)便方法在短時(shí)間內(nèi)大量生產(chǎn)？氨基丁酸之類的天然代謝產(chǎn)物。而且已通過(guò)遺傳學(xué)、生理、生化鑒定試驗(yàn)證實(shí)該酵母是屬于異常畢赤酵母的新菌林。本發(fā)明人將該菌林命名為異常畢赤酵母MR-1。該菌林已于2004年9月28日保藏于獨(dú)立行政法人產(chǎn)業(yè)技術(shù)綜合研究所特許生物寄托中心(日本國(guó)茨城縣筑波市東1丁目l番地l中央笫6)，保藏號(hào)FERMBP-10134。該保藏是由林式會(huì)社日冷加工食品公司(日本國(guó)千葉縣千葉市美濱區(qū)新港9番地(郵編261-8S45)于2004年9月28日提交的。在200S年10月18日、即本發(fā)明申請(qǐng)的受理日(2005年10月21日)之前，該保藏的名義變更為作為本申請(qǐng)的申請(qǐng)人的林式會(huì)社日冷食品公司(日本國(guó)東京都中央?yún)^(qū)筑地6-19-20，郵編104-8402)。根據(jù)本發(fā)明的Y-氨基丁酸或含有Y-氨基丁酸的食品的生產(chǎn)方法，所用的菌林并不限于異常畢赤酵母MR-1菌林，凡是具有在糖或糖代謝中間體存在下，通過(guò)發(fā)酵反應(yīng)生產(chǎn)y-氨基丁酸的能力的酵母都適用。作為具有這樣的能力的酵母，例如可以舉出屬于畢赤酵母屬或假絲酵母屬的酵母。更為具體的例子包括，但并不限于，異常畢赤酵母(例如，異常畢赤酵母NBRC-10213和異常畢赤酵母NBRC-100267)，尸/cA,Vi(無(wú)性世代產(chǎn)朊假絲酵母(nrt7&))、(例如戶/c似fl/flrf/w//NBRC-0987)，產(chǎn)朊假絲酵母(例如，產(chǎn)朊假絲酵母NBRC-10707)。上述任意酵母都能夠以酵母菌體懸濁液的形式用于本發(fā)明方法。可將上述酵母附于適當(dāng)?shù)妮d體，以所謂的固定化酵母的形式使用。這樣的固定化酵母可作為"酵母處理物"的例子。迄今為止，具有等同或超過(guò)異常畢赤酵母MR-1菌林的，氨基丁酸生產(chǎn)能力的酵母還是未知的。作為這樣的酵母的例子包括具有如下的Y-氨基丁酸生產(chǎn)能力的酵母，即將l.Og活菌體(水份含量為78.8重量％)加入到內(nèi)含50ml水溶液的200ml容量的三角燒瓶中，上述水溶液含有葡萄糖(5重量％)和谷氨酸(1重量％)，451C振蕩24小時(shí)后，851C加熱15分鐘使其失活后，離心分離，并將上清濃縮，定容為25ml的溶液，測(cè)定所得溶液中Y-氨基丁酸的濃度時(shí)，所得濃度為150mg/100ml或以上，優(yōu)選200mg/100ml或以上，更優(yōu)選300mg/100ml或以上。此外，只要具有Y-氨基丁酸的生產(chǎn)能力，也可以使用異常畢赤酵母MR-1的突變抹。可使用任意適當(dāng)?shù)恼T變劑來(lái)進(jìn)行誘變處理。這里，術(shù)語(yǔ)"誘變婀"廣義來(lái)說(shuō)，應(yīng)該理解為不僅包括具有誘變效應(yīng)的藥物，還包括UV照射等具有誘變效應(yīng)的處理。適當(dāng)?shù)恼T變劑的例子包括曱磺酸乙酯、UV照射、N-曱基-N，-硝基-N-亞硝基胍、溴尿嘧啶等核苷酸堿基類似物以及吖啶類物質(zhì)。也可以使用其它的有效誘變劑。異常畢赤酵母MR-1在糖或糖代謝中間體存在下生成GABA。同時(shí)，異常畢赤酵母MR-1，在僅有谷氨酸而沒(méi)有糖或糖代謝中間體存在時(shí)，只生成少量GABA。異常畢赤酵母MR-1和以往公知的GABA生產(chǎn)酵母明顯不同，后者只要沒(méi)有谷氨酸或其鹽存在，就不能生成GABA。并且，令人驚奇的是，異常畢赤酵母MR-1在糖或糖代謝中間體和谷氨酸或其鹽共存的條件下，能夠以協(xié)同的方式大量生成GABA。利用異常畢赤酵母MR-1的GABA生成反應(yīng)具有如下特征(1)只要添加糖或糖代謝中間體，即使在幾乎不存在谷氨酸的條件下也能較多的生產(chǎn)GABA;(2)在糖或糖代謝中間體存在下，不僅生成較多的GABA，還可生成游離丙氨酸(本說(shuō)明書(shū)中有時(shí)稱作"Ala")等其它成分；(3)在沒(méi)有糖或糖代謝中間體存在時(shí)，即使是追加谷氨酸，也基本上不產(chǎn)生GABA;(4)在糖或糖代謝中間體存在下，在GABA生成反應(yīng)液中檢測(cè)出較多的乙醇成分；(5)將菌體冷凍保存2天或以上后，用于GABA的生成反應(yīng)的情況，與將菌體冷藏保存相同天數(shù)的情況相比，GABA的生成量以約50%或以上的程度大量減少。假設(shè)異常畢赤酵母MR-1引發(fā)的GABA的生成是像乳酸菌引發(fā)的GABA的生成那樣的、基于特定的酶介導(dǎo)的筒單的酶反應(yīng)，則無(wú)論細(xì)胞是死細(xì)胞還是活細(xì)胞，只要相關(guān)的酶沒(méi)有失活，GABA的生成量就沒(méi)有明顯差別。然而，上述假設(shè)并不能解釋上述(5)中描述的現(xiàn)象。因此推測(cè)，異常畢赤酵母MR-1引發(fā)的GABA的生成是由菌體內(nèi)代謝功能的組合所誘導(dǎo)的某種發(fā)酵反應(yīng)引起的。上述(2)和(4)中所述的，還同時(shí)產(chǎn)生了Ala和乙醇的情況也支持這種推測(cè)。因此，通過(guò)本發(fā)明方法生產(chǎn)GABA時(shí)，還有望一同生成其它有用的成分。此外，異常畢赤酵母MR-1引發(fā)的GABA的生成，不需要像使用通常的酵母那樣，預(yù)先用丙酮處理之類的預(yù)處理。此外，還有個(gè)優(yōu)點(diǎn)就是，可直接使用活菌體。如試驗(yàn)例9所示，畢赤酵母屬或假絲酵母屬的活菌體的GABA生成能力非常高，是其它酵母的5~15倍或更高。因此推測(cè)，本發(fā)明中使用的其它酵母菌林，例如，異常畢赤酵母NBRC-10213、異常畢赤酵母NBRC-100267、P/c似"NBRC-0987或產(chǎn)朊假絲酵母NBRC-10707所引發(fā)的GABA生成也是基于發(fā)酵反應(yīng)。本發(fā)明中可用于生產(chǎn)GABA的糖，例如可舉出單糖、二糖、糖醇類和寡糖等。單糖例如果糖、葡萄糖、木糖、山梨糖、半乳糖等。二糖例如麥芽糖、乳糖、海藻糖、蔗糖、異構(gòu)化的乳糖和異帕拉金糖(Paratinose)等。糖醇例如麥芽糖醇、木糖醇、山梨糖醇、甘露醇、palatinit等。其中，優(yōu)選葡萄糖、果糖、麥芽糖和蔗糖。本發(fā)明中，術(shù)語(yǔ)"糖代謝中間體"指的是作為糖代謝途徑的糖酵解途徑或TCA循環(huán)中的各成分。這些成分的具體例子有糖酵解體系中的糖原、各種磷酸化葡萄糖及其分解產(chǎn)物，丙酮酸等，或TCA循環(huán)中的檸檬酸、異檸檬酸、酮戊二酸、琥珀酸、延胡索酸、蘋(píng)果酸和草酰乙酸等。若考慮穩(wěn)定性和作為原料的實(shí)用性等，優(yōu)選糖原、檸檬酸、丙酮酸、酮戊二酸、琥珀酸和蘋(píng)果酸。此外，由于代謝中間體可以是GABA生成反應(yīng)的底物，因此，本發(fā)明的GABA生成反應(yīng)基于發(fā)酵反應(yīng)這一點(diǎn)就清楚了。此外，谷氨酸還可以是鹽的形式，例如谷氨酸鈉。糖或糖代謝中間體以及谷氨酸的添加量并沒(méi)有特別限制。例如，當(dāng)本發(fā)明的酵母(水份含量78%)在反應(yīng)體系中的濃度為2重量％時(shí)，作為糖類使用的葡萄糖的濃度優(yōu)選為1.0重量％到10.0重量％。例如，試驗(yàn)例l(不存在谷氨酸)中，當(dāng)異常畢赤酵母MR-1在反應(yīng)體系中的濃度為2重量％時(shí)，葡萄糖的添加量不應(yīng)少于1重量％。此外，試驗(yàn)例2(存在谷氨酸)中，葡萄糖的最適添加量?jī)?yōu)選為7.5重量％。和不添加葡萄糖的情況相比，上述情況下GABA的生成量分別增加了約8或約100倍以上。進(jìn)而，例如，在本發(fā)明的酵母(水份含量78%)在反應(yīng)體系中的濃度為2重量％時(shí)，谷氨酸或其鹽的添加濃度優(yōu)選約為0.25重量％~2.0重量％，更優(yōu)選約為0.5重量％~1.5重量％。在GABA的生成反應(yīng)中，反應(yīng)開(kāi)始時(shí)的初始pH優(yōu)選為3.0~6.0，更優(yōu)選為4.0~S.6。檢測(cè)使用各底物時(shí)反應(yīng)溫度和GABA生成量的關(guān)系即可很容易地確定最佳反應(yīng)溫度范圍。典型地，選擇溫度范圍在32TC~551C,優(yōu)選在401C501C，更優(yōu)選在431C~48*C。如試驗(yàn)例4所示，在上述溫度范圍內(nèi)有大量GABA生成。此外，本發(fā)明人還證實(shí)，在上述GABA大量生成的溫度條件下，MR-1菌林的細(xì)胞幾乎沒(méi)有增殖(參見(jiàn)試驗(yàn)例4)。因此可以說(shuō)，MR-1菌林引發(fā)的GABA生成反應(yīng)的特征在于，反應(yīng)是在細(xì)胞不易增殖的條件下展開(kāi)進(jìn)行的。菌體添加量通?？梢允欠磻?yīng)溶液重量的2重量％~10重量％(在使用水份含量為78%的菌體的情況下)。綜合考慮GABA生成量和原料成本，菌體添加量?jī)?yōu)選為2重量％~5重量％(在使用相同菌體的情況下)。最佳反應(yīng)時(shí)間范圍，也可以像反應(yīng)溫度那樣，通過(guò)檢測(cè)使用各底物時(shí)反應(yīng)時(shí)間和GABA生成量的關(guān)系容易地確定。典型上講，該反應(yīng)時(shí)間為12~72小時(shí)。尤其是，當(dāng)反應(yīng)溫度為35TC401C時(shí)，反應(yīng)時(shí)間若為約48~72小時(shí)就足夠了。當(dāng)反應(yīng)溫度為401C~5010時(shí)，反應(yīng)時(shí)間若為約12~48小時(shí)就足夠了。例如，當(dāng)反應(yīng)體系由異常畢赤酵母MR-1菌林、糖或糖代謝中間體和谷氨酸組成時(shí)，在451C時(shí)反應(yīng)時(shí)間在24小時(shí)以內(nèi)，37"C時(shí)反應(yīng)時(shí)間在72小時(shí)以內(nèi)是最適當(dāng)?shù)?。?dāng)反應(yīng)體系中含有例如溫度敏感性成分、易高溫變色的成分時(shí)，有時(shí)反應(yīng)優(yōu)選在低溫長(zhǎng)時(shí)間進(jìn)行。上述GABA生成反應(yīng)可以任何方式進(jìn)行，例如，分批、半連續(xù)式、連續(xù)式等。本發(fā)明中作為反應(yīng)底物的各成分，例如，糖、糖代謝中間體，或者是糖或糖代謝中間體和谷氨酸或其鹽，可將這些成分單獨(dú)使用或?qū)⑵湟栽谶m當(dāng)溶劑，例如水中形成的溶液(例如，反應(yīng)液)的形式使用。這些反應(yīng)底物可以作為含有糖或糖代謝中間體，或者是含有糖或糖代謝中間體以及谷氨酸或其鹽的食品材料提供。這樣的食品材料，例如動(dòng)物、植物或微生物的可用部分；動(dòng)物、植物或微生物的提取物；或以上述可用部分或提取物為原料的食品材料等。本發(fā)明中，術(shù)語(yǔ)"可用部分，，指的是動(dòng)物、植物或微生物的能夠用作食品的部分，或者是該部分經(jīng)過(guò)適當(dāng)處理(例如粉碎、加熱、烘烤、煎、干燥、蒸煮)后的產(chǎn)品。若食品材料原本就含有糖、糖代謝中間體、谷氨酸或其鹽，則無(wú)需添加這些成分，即可直接用作本發(fā)明的反應(yīng)底物。例如，以市售酵母提取物、大豆、小麥等作為原料制得的各種發(fā)酵調(diào)味料中常常含有足量的糖類或糖代謝中間體和谷氨酸。此外，海帶提取物、魚(yú)醬等天然調(diào)味料富含源自原料的谷氨酸。然而，有時(shí)這些天然調(diào)味料中糖或糖代謝中間體的含量卻很低。這種情況下，考慮到這些食品材料中的固態(tài)成分含量和谷氨酸含量，可以在其中添加適量葡萄糖等糖或糖代謝中間體[例如，對(duì)于添加有5%的MR-1酵母菌體(水份含量78重量%)的體系，添加1%~5%的糖類)后，將其作為本發(fā)明的反應(yīng)底物。此外，通過(guò)在食品材料中添加淀粉酶或蛋白酶等食品用酶，降解食品材料中的成分(主要是淀粉、蛋白質(zhì)等)，可提高食品材料中分子量相對(duì)較小的糖、糖代謝中間體或谷氨酸的含量，由此得到的食品材料也可作為本發(fā)明的反應(yīng)底物。含有通過(guò)使上述酵母和上述底物反應(yīng)得到的Y-氨基丁酸的反應(yīng)液可直接加入到各種飲料或食品中使用。此外，也可以采用通常的食品加工處理步驟(過(guò)濾、濃縮、干燥、粉碎等)提高，氨基丁酸含量后使用。進(jìn)而，也可以將它們的粉末壓片后制成片劑使用。需要說(shuō)明的是，根據(jù)本發(fā)明生產(chǎn)的"含有Y-氨基丁酸的食品"還包括，Y-氨基丁酸的含量提高(例如，采用離子交換或色譜等通常的分離手段分離的Y-氨基丁酸)的產(chǎn)品。根據(jù)本發(fā)明生產(chǎn)的食品可以含有酵母活細(xì)胞、死細(xì)胞或細(xì)胞破碎物。此外，也可以將酵母細(xì)胞及其細(xì)胞破碎物從食品中除去。本發(fā)明還涉及含有屬于畢赤酵母(尤其是異常畢赤酵母)屬的酵母的食品。該情況下，酵母的存在形式可以是活細(xì)胞、死細(xì)胞或細(xì)胞破碎物。此時(shí)，優(yōu)選畢赤酵母屬的酵母的細(xì)胞中含有Y-氨基丁酸。本發(fā)明的該實(shí)施方式，提供的是畢赤酵母屬酵母的新用途。實(shí)施例以下將參考下述實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明進(jìn)行更為詳細(xì)的說(shuō)明，但本發(fā)明并不局限于此。(參考例1)異常畢赤酵母是從曰本八戸沖海水中來(lái)用如下程序分離出來(lái)的一種海洋酵母。從海水分離]首先，自離青森海岸約15公里的八戸沖海上的船上，用無(wú)菌采水器采集約50升水下5米深處的海水。于冷藏溫度下運(yùn)輸海水。第二天，將海水用無(wú)菌濾膜(孔徑0.45jim)過(guò)濾。將濾膜上留存的微生物菌體混懸于15ml無(wú)菌水，用作隨后實(shí)驗(yàn)中從海水采集的菌體試樣。從上述采集的菌體試樣(15ml)中每次取200ji1，涂布于專用于耐鹽酵母分離培養(yǎng)的YPD瓊脂培養(yǎng)基(葡萄糖"/n，蛋白胨2%,酵母提取物粉末1%，氯化鈉3%,瓊脂2%和氯霉素0.01%)，于25TC培養(yǎng)5天。自YPD培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的酵母樣菌落收集菌體。然后，用1000倍光學(xué)顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)，分別挑選認(rèn)為是由酵母樣微生物的單個(gè)菌落。接下來(lái)，用鉑金環(huán)從各單個(gè)菌落收集菌體，將其分別分散于lml無(wú)菌水后，再畫(huà)線涂布于新的YPD瓊脂培養(yǎng)基，于251C再培養(yǎng)3-5天。需要說(shuō)明的是，為從菌落將菌林完全分離，上述一系列操作(菌體收集、分散和培養(yǎng)操作)至少重復(fù)5次經(jīng)上述分離培養(yǎng)后，最終從50升海水中分離出58種酵母樣微生物菌林。分離的菌體的增殖培養(yǎng)自最后分離得到的各菌落收集菌體，分別接種于200ml的YPD液體培養(yǎng)基(葡萄糖2%，蛋白胨2%，酵母提取物粉末1%，氯化鈉3%，KH2PO40.05%，MgSO40.05%、(NH4)2S040.1%)，于25"C振蕩培養(yǎng)2~3天。接著，將各培養(yǎng)液在無(wú)菌狀態(tài)下離心分離后，用無(wú)菌水清洗菌體，再次離心分離。為了充分清洗菌體，將上述離心和清洗操作重復(fù)2到3次。Y-氨基丁酸生產(chǎn)能力的比較將如上分離并清洗后的酵母樣微生物菌體(各0.5g)分別添加到含有葡萄糖5%和谷氨酸1%的反應(yīng)液(各25ml)中，充填氮?dú)夂?，?7TC反應(yīng)3天。將獲得的反應(yīng)液于85TC加熱15分鐘使其失活后，離心分離。將各上清液定容為50ml，用于游離氨基酸含量分析?；谏鲜龇治鼋Y(jié)果，發(fā)現(xiàn)58林中有3林是具有一定的生產(chǎn)？氨基丁酸的能力的酵母樣微生物，其中一林具有較高的Y-氨基丁酸生成能力。具有較高y-氨基丁酸生成能力的酵母樣微生物被暫時(shí)命名為MR-l.此外，用日本電子(棘)制造的全自動(dòng)氨基酸分析儀JLC-500/V分析包括GABA在內(nèi)的游離氨基酸含量(以下使用相同的分析儀)。分子系統(tǒng)解析采用常規(guī)方法，自上述具有？氨基丁酸高產(chǎn)能力的酵母樣微生物MR-1的活菌體提取分離基因組DNA成分。接著，對(duì)核糖體ITS-5.8S區(qū)域的rDNA序列進(jìn)行分析(參見(jiàn)序列1)。利用BLAST程序在GenBank數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)ITS-5.8SrDNA的基因的堿基序列(序列l(wèi))進(jìn)行同源性檢索。結(jié)果證實(shí)，其與異常畢赤酵母(AY231611.1)有97.6%的同源性(參見(jiàn)圖1)。此外，基于對(duì)18SrDNA堿基序列的分子系統(tǒng)分析，發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的菌林與異常畢赤酵母有很高的同源性(實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)未顯示)。進(jìn)而，將從DNA數(shù)據(jù)庫(kù)獲得的畢赤酵母屬酵母和代表性酵母種的堿基序列進(jìn)行序列多重對(duì)比后，進(jìn)行同源檢索，發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的菌林在分子系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)的位置和異常畢赤酵母所處位置相同。[菌學(xué)、生理生化性質(zhì)表1顯示的是上述MR-1菌林的菌學(xué)、生理生化性質(zhì)。表ltable>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>2.生理生化性質(zhì)碳源發(fā)酵性<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>碳源同化性<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>氮源同化性<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>符號(hào)所代表的含義:+:陽(yáng)性D:推遲了7天多-陰性基于表1所示的菌學(xué)、生理生化性質(zhì)，并參照YEASTS:Characteristicsandidentification,(2000)，進(jìn)4亍分類和鑒定。發(fā)現(xiàn)MR國(guó)1菌林屬于異常畢赤酵母。此外，MR-1菌林并不和公知的異常畢赤酵母菌林完全相同。例如，如表2所示，MR-1菌抹和已知的異常畢赤酵母菌林(NBRC-100267)在一些生理生化性質(zhì)上不同。表2MR-1菌林和公知的異常畢赤酵母菌林(NBRC-100267)在生理生化性質(zhì)上的差異<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>*符號(hào)和表1中的含義相同此外，MR-1菌林和公知的異常畢赤酵母菌林的不同點(diǎn)，還表現(xiàn)在二者在不同鹽濃度下的增殖速度不同(圖2)。因而，可以說(shuō)MR-1菌林是一種新的菌林。本發(fā)明的酵母異常畢赤酵母MR-1已保藏于獨(dú)立行政法人產(chǎn)業(yè)技術(shù)綜合研究所特許生物寄托中心，保藏號(hào)為FERMBP-10134.(參考例2)保存的菌林的復(fù)原于室溫解凍在冷凍或凍干狀態(tài)下保存的MR-1菌抹。用鉑金環(huán)收集菌體后，將菌體分散于約lml無(wú)菌水中，然后畫(huà)線接種于YPD瓊脂培養(yǎng)基，于25"C培養(yǎng)5天。MR-1菌體是以培養(yǎng)基上的乳白色圓形菌落的形式獲得。該菌體可直接用于如下預(yù)培養(yǎng)。此外，如果該瓊脂培養(yǎng)基上的菌林于51C10TC的冷藏保存只要不超過(guò)2個(gè)月，就可用于預(yù)培養(yǎng)等。將7升液體培養(yǎng)基(葡萄糖2%,尿素2°/，酵母提取物粉末1.0%，氯化鈉0.5%，KH2PO40.05%，MgSO40.05%，硫酸銨0.1%)置于10升的培養(yǎng)罐，于121TC加熱滅菌60分鐘。將液體培養(yǎng)基溫度冷卻至30X:后，用稀鹽酸和稀堿將培養(yǎng)液pH調(diào)到5.0。接著，將上述200ml預(yù)培養(yǎng)液在無(wú)菌條件下加入到培養(yǎng)罐，于251C邊攪拌邊通氣培養(yǎng)2天。將培養(yǎng)液離心分離后，用無(wú)菌水充分清洗菌體，再次離心分離。將上述離心分離一清洗操作重復(fù)2次，獲得MR-1菌體150g(水份含量78.8%)。該菌體在以后的試驗(yàn)例和實(shí)施例中用作MR-1酵母菌體。(試驗(yàn)例1)向6個(gè)200ml容量的三角燒瓶中分別添加50ml的特定濃度的葡萄糖水溶液和上述參考例2中獲得的MR-1菌體l.Og(濃度2%)，于451C邊振蕩邊反應(yīng)24小時(shí)。隨后，于85TC加熱15分鐘使其失活，離心分離.將各上清濃縮定容至25ml后，用于分析包括GABA在內(nèi)的游離氨基酸。游離氨基酸的分析結(jié)果顯示，GABA和丙氨酸的濃度高于其它游離氨基酸。表3顯示的是這兩種氨基酸的濃度，此外，谷氨酸的濃度非常低。然而，鑒于谷氨酸的濃度和GABA生成量的關(guān)系極為密切，因而也將其濃度列于表3。表3葡萄糖的添加量對(duì)GABA生成量的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>上述結(jié)果顯示，在沒(méi)有添加葡萄糖的情況下，GABA和丙氨酸的生成幾乎觀測(cè)不到；而在添加有葡萄糖的情況下，GABA和丙氨酸的生成量都顯著增加。(試驗(yàn)例2)在各反應(yīng)液中添加了谷氨酸(濃度1%)，除此之外，其它都和試驗(yàn)例1相同的條件下，進(jìn)行GABA的生成反應(yīng)，制備25ml的濃縮液。濃縮液中GABA和丙氨酸的濃度示于表4。此外，還測(cè)量了乙醇濃度，作為發(fā)酵反應(yīng)指標(biāo)。表4葡萄糖的添加量對(duì)GABA生成量的影響(添加有1%的谷氨酸)<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>上述結(jié)果顯示，在沒(méi)有添加葡萄糖的情況下，即使是添加了谷氨酸，也幾乎沒(méi)有觀測(cè)到GABA和丙氨酸生成；而在添加有葡萄糖和谷氨酸的體系中，GABA和丙氨酸的生成量比試驗(yàn)例l顯著提高。在沒(méi)有添加葡萄糖的情況下，即使是添加了谷氨酸，也很難觀測(cè)到GABA生成，其原因被認(rèn)為是，由于沒(méi)有糖存在，因而酵母引發(fā)的發(fā)酵反應(yīng)沒(méi)有進(jìn)行。(試驗(yàn)例3)分別在pH為3.0~7.0的各檸檬酸-磷酸鈉緩沖液(0.1M檸檬酸-0.2M磷酸氫二鈉)中，添加上述參考例2中獲得的MR-1菌體、葡萄糖和谷氨酸，使得終體積為50ml，上述MR-1菌體、葡萄耱和谷氨酸濃度分別為2%、5%、1%。GABA的生成反應(yīng)在和試驗(yàn)例1相同的條件下進(jìn)行。相應(yīng)地，獲得濃縮液各25ml。這些濃縮液中的GABA濃度示于表5。表5反應(yīng)液pH對(duì)GABA生成量的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>由上述結(jié)果可知，在pH3.0-6.0的范圍生成較多量的GABA。此外，最適pH在pH5.0左右。(試驗(yàn)例4)分別在12支20ml容積的L字型試管中，加入含有參考例2獲得的MR-1菌體2%、葡萄糖5%、谷氨酸1%的反應(yīng)液10ml。在以20rpm的速度振蕩的同時(shí)，于151C到601C的溫度梯度內(nèi)反應(yīng)3天。此后，以與試驗(yàn)例1相同的方式進(jìn)行分離、純化，制備各5ml的濃縮液。這些濃縮液的GABA濃度示于表6。表6<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>由上述結(jié)果可知，在32TC到551C的范圍內(nèi)生成較多量的GABA，最適反應(yīng)溫度在441C左右。此外，由于441C時(shí)GABA濃度大約是361C時(shí)的3倍，因而認(rèn)為，反應(yīng)溫度對(duì)GABA生成量影響非常大。上述結(jié)果也支持了MR-1介導(dǎo)的GABA的生成是通過(guò)發(fā)酵反應(yīng)實(shí)現(xiàn)的這一結(jié)論。該結(jié)論基于如下推理GABA在52.9TC的生成量約是44匸時(shí)的30%;此外，在相同條件下進(jìn)行的另一個(gè)實(shí)驗(yàn)(數(shù)據(jù)未列出)中，50TC時(shí)GABA的生成量約是451C時(shí)的18%.通常酶活性在50"C和45TC不會(huì)有很大差異，因而認(rèn)為，GABA生成壹上6^差異是由于溫度升高引起活細(xì)胞數(shù)量減少，使得發(fā)酵反應(yīng)很難進(jìn)行。此外，本發(fā)明人還在和上述相同的條件下，于15.0TC、19.81C、23.5TC、26.9"C、30.3"C、33.5TC、36.51C、40.71C、44.31C、48.21C、53.1"C、60.01C的各種溫度下培養(yǎng)MR-1菌體，并經(jīng)時(shí)測(cè)量了各培養(yǎng)液的濁度(OD660)，以觀察反應(yīng)溫度和菌體增殖之間的關(guān)系。結(jié)果顯示，在36.51C或更高溫度條件下，幾乎觀測(cè)不到菌體增殖(圖3)。(試驗(yàn)例5)18將規(guī)定濃度的谷氨酸添加到含有上述參考例2獲得的MR-1菌體2%、葡萄糖5%的50ml反應(yīng)液中，在和試驗(yàn)例1相同的條件下進(jìn)行GABA生成反應(yīng)。制備濃縮液各25ml。這些濃縮液中的GABA濃度示于表7。表7<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>由上述結(jié)果可知，谷氨酸添加的適當(dāng)濃度約為0.25%~2.0%的范圍，更優(yōu)選為0.5%~1.5%的范圍。另一方面，若谷氨酸濃度超過(guò)上述范圍，則GABA生成量有下降的趨勢(shì)。(試驗(yàn)例6)將規(guī)定濃度的上述參考例2獲得的MR-1菌體分別添加到含有葡萄糖5%、谷氨酸1%的50ml反應(yīng)液中，在與試驗(yàn)例l相同的條件下進(jìn)行GABA生成反應(yīng)。相應(yīng)地，制備濃縮液各25ml。這些濃縮液中GABA濃度示于表8。表8<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>由上述結(jié)果可知MR-1菌體的最適添加濃度約為2%~5%。若菌體量超過(guò)上述范圍，GABA生成量有不增加的趨勢(shì)。(試驗(yàn)例7)將規(guī)定的糖質(zhì)5%分別加入到含有參考例2獲得的MR-1菌體2%、谷氨酸1%的50ml反應(yīng)液中，在與試驗(yàn)例1相同的條件下進(jìn)行GABA生成反應(yīng)。相應(yīng)地，制備濃縮液各25ml。這些濃縮液中GABA濃度示于表9。表9<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>GABA濃度(mg/100ml)78.7106.59.09.122.5添加的糖的種類里扭葡萄糖木糖山梨糖甘露糖GABA濃度(mg/100ml)200.4276.328.516.011.6由上述結(jié)果可知GABA生成量具有因添加的糖的種類而有所不同的趨勢(shì)。其中，發(fā)現(xiàn)葡萄糖、果糖等單糖和麥芽糖、蔗糖等二糖對(duì)GABA生成量的提高有促進(jìn)作用。尤其是，發(fā)現(xiàn)葡萄糖和果糖的效果最大。(試驗(yàn)例8)將規(guī)定濃度的下述兩種MR-1菌體分別加入到含有葡萄糖5%、谷氨酸l。/n的各50ml反應(yīng)液中，于5TC非冷凍保存2天的MR-1菌體，和于-251C冷凍保存2天的MR-1菌體。在與試驗(yàn)例1相同的條件下進(jìn)行GABA生成反應(yīng)。相應(yīng)地，制備濃縮液各25ml。此外，使用的菌體是上述參考例2中獲得的菌體。上述濃縮液中GABA濃度示于表10。表IOMR-1菌體保存對(duì)R態(tài)對(duì)GABA生成量的影響非冷凍保《「的菌體冷凍保存的菌體MR-1菌體濃度(％)2.06.02.06.0GABA濃度(mg/100ml)196.8260.692.8136.6由上述結(jié)果可知冷凍保存使得菌體生產(chǎn)GABA的能力顯著下降，因此知道，本發(fā)明優(yōu)選使用活酵母菌體。(試驗(yàn)例9)將本發(fā)明的MR-1菌體(參考例2)、畢赤酵母屬或假絲酵母屬(獲自保藏機(jī)構(gòu))的其它酵母、市售海洋酵母(酵母M，三共林式會(huì)社生產(chǎn))、面包酵母(東方酵母工業(yè)有限公司)和清酒協(xié)會(huì)7號(hào)酵母各lg，分別加入到含有葡萄糖5%、谷氨酸1°/。的50ml反應(yīng)液中，在與試驗(yàn)例1相同的條件下進(jìn)行GABA生成反應(yīng)。相應(yīng)地，制備濃縮液各25ml。這些濃縮液中GABA濃度示于表11。表ll各酵母的GABA生產(chǎn)能力比較酵母名稱___GABA濃度(mg/100ml)<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table>由上述結(jié)果可知與其它酵母相比，畢赤酵母屬和假絲酵母屬的酵母具有非常高的GABA生產(chǎn)能力。尤其是發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明的MR-1酵母具有非常高的GABA生產(chǎn)能力，比通常酵母約高出10~15倍。(試驗(yàn)例10)分別制備50ml不含谷氨酸的反應(yīng)液和添加有1%谷氨酸的反應(yīng)液。兩種反應(yīng)液均含有MR-1菌體2%(參考例2)和下表中所列的規(guī)定的糖或糖代謝中間體50mM。在與試驗(yàn)例1相同的條件下進(jìn)行GABA生成反應(yīng)。相應(yīng)地，制備濃縮液各25ml。這些濃縮液中GABA濃度示于表12。表12<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table>由上述結(jié)果可知GABA在不含谷氨酸的體系中，是由各種糖代謝中間體生成的，并且，若體系中事先添加有1%的谷氨酸，會(huì)進(jìn)一步促進(jìn)GABA的生成。(實(shí)施例1)根據(jù)上述參考例2中的主培養(yǎng)方法，將7升液體培養(yǎng)基加入到10升發(fā)酵罐后，滅菌。以參考例2中獲得的MR-1菌林0.7g無(wú)菌接種于上述液體培養(yǎng)基，并于301C、pH5.0的狀態(tài)下通氣培養(yǎng)2天。將得到的培養(yǎng)液離心，用無(wú)菌水清洗菌體，從而得到MR-1菌體160g(水份含量79.2%)。將菌體分散于8升含有葡萄糖3.0%、谷氨酸0.5%的反應(yīng)液后，于451C邊振蕩邊反應(yīng)24小時(shí)，生成GABA。此后，將反應(yīng)液于85TC加熱15分鐘使其失活后，離心。過(guò)濾上清，減壓濃縮，得到含固態(tài)成分40。/。的濃縮液800ml。該濃縮液中GABA含量和其它成分的分析值示于表13。表13MR-1菌林誘導(dǎo)的GABA生成反應(yīng)液中各有用成分的含量_(單位mg/100ml)_<table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table>(實(shí)施例2)將20g市售"粉末狀發(fā)酵增味調(diào)料S"(Kikkoman林式會(huì)社生產(chǎn))用蒸餾水稀釋5倍。接著，向其中添加參考例2獲得的本發(fā)明的MR-1菌體(終濃度為5%)5g，使之分散后，用稀鹽酸將反應(yīng)液初始pH調(diào)整到5.0。隨后，于451C反應(yīng)24小時(shí)，生成GABA。接下來(lái)，將反應(yīng)溶液于85TC加熱15分鐘使其失活后，離心分離。將上清液濃縮直至得到60g濃縮液。濃縮液中GABA濃度為171.2mg/100ml。因此，與將處理前的原料稀釋3倍得到的溶液中GABA濃度為4.1mg/100ml相比，GABA含量增加約40倍。(實(shí)施例3)將l冊(cè)g市售魚(yú)肉提取物"TaimiJF*(仙味土年X林式會(huì)社生產(chǎn))用蒸餾水稀釋3倍。接著，向其中添加參考例2獲得的本發(fā)明的MR-1菌體(濃度為5%)15g，并使之分散。隨后，在與實(shí)施例2相同條件下進(jìn)行GABA的生成反應(yīng)，最后得到100g濃縮液。濃縮液中GABA濃度為246.8mg/100ml。因此，與處理前的原料中GABA濃度5.3mg/100ml相比，GABA含量增加約46倍。(實(shí)施例4)將100g市售"干鰹魚(yú)提取物J"(仙味工年X林式會(huì)社生產(chǎn))用蒸餾水稀釋3倍，向其中添加參考例2獲得的本發(fā)明的MR-1菌體(濃度為5%)15g、葡萄糖(濃度為5%)15g和谷氨酸鈉(濃度為1%)3g，并使之分散。隨后，與實(shí)施例2同樣地進(jìn)行GABA生成反應(yīng)，得到lOOg濃縮液。濃縮液中GABA濃度為306.3mg/100ml。因此，與處理前的原料(GABA含量為0)相比，GABA生成量增加。(實(shí)施例5)將市售"昆布提取物(〕/"7￡L)KW-1"(富士食品工業(yè)林式會(huì)社生產(chǎn))各lOOg用蒸餾水稀釋3倍。向其中添加表14所列的規(guī)定濃度的參考例2獲得的MR-1菌體、葡萄糖和谷氨酸鈉，并使之分散，與實(shí)施例2同樣地進(jìn)行GABA生成反應(yīng)，得到濃縮液各100g。檢測(cè)濃縮液中GABA的濃度發(fā)現(xiàn)，與處理前的原料(GABA含量為0)相比，在只加入本發(fā)明的MR-1菌體的情況下就可以多量的生成GABA，在進(jìn)一步追加有葡萄糖和谷氨酸的情況下，GABA濃度可增加到約1.7倍。表14<table>tableseeoriginaldocumentpage23</column></row><table>(實(shí)施例6)將市售畜肉提取物"雞肉提取物C-501NAC"(富士食品工業(yè)林式會(huì)社生產(chǎn))各l冊(cè)g用蒸餾水稀釋3倍，向其中添加表15所列的規(guī)定濃度的、參考例2獲得的MR-1菌體、葡萄糖和谷氨酸鈉，并使之分散。與實(shí)施例2同樣地進(jìn)行GABA生成反應(yīng)，得到濃縮液各100g。檢測(cè)濃縮液中GABA的濃度發(fā)現(xiàn)，與處理前的原料(GABA含量為0)相比，在只加入本發(fā)明的MR-1菌體的情況下就可以生成多量的GABA，在進(jìn)一步追加有葡萄糖和谷氨酸的情況下，GABA濃度可增加到2倍以上。表15添加MR-1菌體得到的雞肉提取物中的GABA濃度比較23<table>tableseeoriginaldocumentpage24</column></row><table>(實(shí)施例7)將市售畜肉提取物"豬肉提取物FP-301"(富士食品工業(yè)林式會(huì)社生產(chǎn))各100g用蒸餾水稀釋3倍。向其中添加表16所列的規(guī)定濃度的、參考例2獲得的MR-1菌體、葡萄糖和谷氨酸鈉，并使之分散。與實(shí)施例2同樣地進(jìn)行GABA生成反應(yīng)，得到lOOg濃縮液。檢測(cè)濃縮液中GABA的濃度發(fā)現(xiàn)，與處理前的原料(GABA含量為0)相比，在只加入本發(fā)明的MR-1菌體的情況下就可以多量的生成GABA，在進(jìn)一步追加有葡萄糖和谷氨酸的情況下，GABA濃度可增加到約4倍。表16<table>tableseeoriginaldocumentpage24</column></row><table>本說(shuō)明書(shū)孝i用的所有出版物、專利和專利申請(qǐng)都作為參考包括在本發(fā)明中。權(quán)利要求1.含有γ-氨基丁酸的食品的生產(chǎn)方法，其特征在于使酵母或其處理物作用于糖或糖代謝中間體，或者是作用于糖或糖代謝中間體和谷氨酸或其鹽，其中，上述酵母或其處理物具有在糖或糖代謝中間體存在下通過(guò)發(fā)酵反應(yīng)生產(chǎn)γ-氨基丁酸的能力。2.根據(jù)權(quán)利要求l所述的方法，其特征在于，所述酵母是屬于畢赤酵母屬(尸/c/^Vi)或假絲酵母屬(Cfl"rf/rffl)的酵母。3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述方法，其中，所述酵母是保藏號(hào)為FERMBP-10134的異常畢赤酵母(flmwi"/a)MR-1，或其具有生產(chǎn)Y-氨基丁酸的能力的突變林。4.根據(jù)權(quán)利要求1~3任一項(xiàng)所述方法，其特征在于使酵母或其處理物作用于含有糖或糖代謝中間體，或者是含有糖或糖代謝中間體和谷氨酸或其鹽的動(dòng)物、植物或微生物的可用部分，或者是動(dòng)物、植物或微生物的提取物，或者是以上述可用部分或提取物制得的食品材料。5.根據(jù)權(quán)利要求1~4任一項(xiàng)所述方法，其特征在于，氨基丁酸的生成反應(yīng)是在初始pH為3.0~6.0，且反應(yīng)溫度為3255TC的條件下進(jìn)行的。6.根據(jù)權(quán)利要求1~5任一項(xiàng)所述方法，其包括如下步驟，即對(duì)y-氨基丁酸的反應(yīng)液進(jìn)一步進(jìn)行分離、純化、濃縮或干燥，提高y-氨基丁酸的濃度的步驟。7.根據(jù)權(quán)利要求1~6任一項(xiàng)所述方法生產(chǎn)的含有y-氨基丁酸的食品。8.屬于異常畢赤酵母的酵母，其具有生產(chǎn)濃度在150mg/100ml或以上的Y-氨基丁酸的能力，上述的Y-氨基丁酸濃度是在以如下方式獲得的溶液中測(cè)得的將水份含量為78.8重量％的l.Og活菌體加入到200ml容量的三角燒瓶中的、含有5重量％葡萄糖和1重量％的谷氨酸的50ml水溶液中，于45TC振蕩24小時(shí)后，85lC加熱15分鐘使其失活，再經(jīng)離心分離，將上清濃縮、定容為25ml的溶液。9.保藏號(hào)為FERMBP-10134的異常畢赤酵母MR-1，或其具有生產(chǎn)y-氨基丁酸的能力的突變林。10.含有畢赤酵母屬的酵母的食品。全文摘要本發(fā)明的目的在于提供使用微生物簡(jiǎn)便且大量生產(chǎn)γ-氨基丁酸的方法。本發(fā)明涉及含有γ-氨基丁酸的食品的生產(chǎn)方法，其包括使酵母或其處理物作用于糖和/或糖代謝中間體，或者是作用于糖或糖代謝中間體和谷氨酸或其鹽，其中，上述酵母具有在糖或糖代謝中間體存在下通過(guò)發(fā)酵反應(yīng)生產(chǎn)γ-氨基丁酸的能力。文檔編號(hào)C12N1/16GK101102683SQ20058004678公開(kāi)日2008年1月9日申請(qǐng)日期2005年11月10日優(yōu)先權(quán)日2004年11月17日發(fā)明者萩原俊彥,郭曉風(fēng)申請(qǐng)人:株式會(huì)社日冷食品