專利名稱：一種調(diào)節(jié)機(jī)體免疫力的牛奶及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種牛奶及其制備工藝，特別涉及一種調(diào)節(jié)機(jī)體免疫力的牛奶及其制備工藝。
背景技術(shù)：
精氨酸在人體具有重要的生理功能。生物化學(xué)的研究早就證明了精氨酸在尿素循環(huán)代謝中的重要作用。因此，精氨酸長(zhǎng)期以來(lái)被作為一種解除氨中毒的藥物在臨床廣泛應(yīng)用。營(yíng)養(yǎng)學(xué)的研究也已經(jīng)證明精氨酸是一種條件必需氨基酸。當(dāng)人體處于饑餓狀態(tài)、蛋白質(zhì)攝入過(guò)量、創(chuàng)傷、青春生長(zhǎng)期等體內(nèi)蛋白質(zhì)分解代謝增強(qiáng)時(shí)，精氨酸的需要量就會(huì)大大增加。在營(yíng)養(yǎng)學(xué)的意義上，精氨酸具有良好的生殖營(yíng)養(yǎng)功能，在生殖細(xì)胞的發(fā)育和精子形成過(guò)程中具有重要的營(yíng)養(yǎng)作用。新近的研究證明，精氨酸是合成一氧化氮的底物，由此人們逐步發(fā)現(xiàn)了精氨酸的許多免疫調(diào)節(jié)和心血管的生物活性。實(shí)驗(yàn)研究表明，長(zhǎng)期食用精氨酸可以預(yù)防動(dòng)脈硬化的形成。人體在創(chuàng)傷(手術(shù)、意外傷、燒傷)、高溫等生理性應(yīng)激以及許多心因性應(yīng)激情況下精氨酸對(duì)于因應(yīng)激而造成的免疫功能低下有顯著的預(yù)防和恢復(fù)作用。研究還證明，精氨酸能夠提高機(jī)體的免疫監(jiān)視功能，調(diào)節(jié)抑制性T細(xì)胞、殺傷性T細(xì)胞和輔助性T細(xì)胞的功能關(guān)系，因而對(duì)于腫瘤的免疫預(yù)防和治療具有獨(dú)特作用。
藥物制劑技術(shù)的研究證明，有很多藥物或生物活性物質(zhì)經(jīng)過(guò)乳化劑和乳化工藝制成乳劑，其生物利用度會(huì)大大提高。在傳統(tǒng)的知識(shí)里，這樣的乳化工藝常常是靠添加各種天然或合成的乳化劑實(shí)現(xiàn)的。
牛奶既是最富于營(yíng)養(yǎng)和人們最常用的食品之一，同時(shí)又是天然最優(yōu)良的乳劑，可以作為許多營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、藥物和其它生物活性物質(zhì)理想的乳劑或營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化載體。雖然人類已經(jīng)發(fā)展了許多強(qiáng)化營(yíng)養(yǎng)素的牛奶，例如強(qiáng)化鈣、維生素A、D、牛黃酸等，但有關(guān)在牛奶中強(qiáng)化精氨酸的研究卻還未見(jiàn)有研究報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的在于提供一種L-精氨酸配方組合牛奶及其制備方法，本發(fā)明另一目的在于提供該配方組合牛奶的新用途。
本發(fā)明目的是通過(guò)如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)本發(fā)明L-精氨酸牛奶，是按100ml牛奶中L-精氨酸含量為0.5-20g配制而成；100ml牛奶中L-精氨酸含量?jī)?yōu)選1g、5g、10g、20g。
本發(fā)明的配方組合牛奶優(yōu)選制備方法如下取普通牛奶，按L-精氨酸在牛奶中含量為20％(g/ml)，在牛奶中添加L-精氨酸，并經(jīng)高壓均質(zhì)工藝加工制成。
L-精氨酸牛奶具有增強(qiáng)免疫功能和較好的補(bǔ)血作用。高溫應(yīng)激可引起小鼠胸腺、脾臟萎縮、體重減輕，但補(bǔ)充精氨酸后可以緩解和減輕胸腺、脾臟的急性萎縮，提高吞噬細(xì)胞功能，保護(hù)胸腺細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整性的作用，而且在一定濃度才能起到對(duì)免疫器官的保護(hù)作用。
精氨酸牛奶無(wú)論是在常溫，還是在熱應(yīng)激后，都能提高淋巴細(xì)胞ConA刺激指數(shù)、IL-2含量、IL-2R的表達(dá)率和活化胸腺細(xì)胞[Ca2+]，且濃度達(dá)到1.5mg/g時(shí)效果最佳。在高溫應(yīng)激條件下，補(bǔ)充L-精氨酸牛奶能夠保護(hù)胸腺細(xì)胞結(jié)構(gòu)的完整性。
在牛奶中按照一定比例強(qiáng)化配伍，并經(jīng)特定工藝加工制成的牛奶是一種具有顯著調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能的組合配方奶，這種配方奶較單用精氨酸有更好的調(diào)節(jié)機(jī)體免疫力的作用。因?yàn)榕Ｄ淌侨藗內(nèi)粘ｏ嬘玫氖称?，所以，本發(fā)明L-精氨酸牛奶可以更方便，更有順從性地用于免疫功能低下人群、在各種自然、生理和病理?xiàng)l件下(例如瘟疫流行、物理和心理應(yīng)激、疾病以及外科術(shù)后等)需要增強(qiáng)免疫功能的人群以及腫瘤患者的免疫治療和放化療后的免疫功能搶救。本發(fā)明牛奶還可以制成各種奶制品。
下述實(shí)驗(yàn)例用于進(jìn)一步說(shuō)明但不限于本發(fā)明。
實(shí)驗(yàn)例1 本發(fā)明L-精氨酸牛奶對(duì)免疫功能低下小鼠免疫器官重量的影響取昆明種小鼠40只，雌雄各半，體重20±2g，隨機(jī)分為空白組(A)、模型組(B)、L-精氨酸水溶液組(C)和L-精氨酸牛奶組(D)四組，每組10只。D組小鼠以1.5g/kg劑量灌服L-精氨酸牛奶；C組小鼠以1.5g/kg劑量灌服等體積L-精氨酸水溶液；模型組和空白組小鼠均灌服等體積生理鹽水，每日一次，連續(xù)給藥10天。于給藥第7天開(kāi)始，D組、C組和B組小鼠均按60mg/kg的量腹腔注射環(huán)磷酰胺，連續(xù)4天；空白組小鼠同途徑注射等量生理鹽水作為空白對(duì)照，于最后一天灌胃和注射環(huán)磷酰胺2小時(shí)后，處死動(dòng)物，稱體重，迅速剖取胸腺、脾臟組織，用濾紙吸去其表面附著的血液，立即在精密扭力天平上稱其濕重。結(jié)果見(jiàn)表1。
表1 L-精氨酸牛奶對(duì)免疫功能低下小鼠免疫器官重量的影響(x±SD)

與空白組比較，*P＜0.01；與模型組比較，*P＜0.05，**P＜0.01；與水溶液組比較，ΔP＜0.05結(jié)果表明，模型組與空白組比較，其胸腺指數(shù)和脾指數(shù)明顯降低(P＜0.01)，說(shuō)明造模成功。
與模型組比較，L-精氨酸水溶液組和L-精氨酸牛奶組的胸腺指數(shù)和脾指數(shù)明顯升高(P＜0.05，P＜0.01)，說(shuō)明兩種溶液對(duì)于環(huán)磷酰胺造成的免疫器官重量及其免疫功能下降具有明顯的改善作用。
與L-精氨酸水溶液組比較，L-精氨酸牛奶組胸腺指數(shù)和脾指數(shù)升高更明顯(P＜0.05)，說(shuō)明L-精氨酸牛奶對(duì)于環(huán)磷酰胺造成的免疫器官重量及其免疫功能下降的改善作用優(yōu)于單純使用L-精氨酸。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明環(huán)磷酰胺可造成小鼠免疫功能低下，并可使免疫器官重量指數(shù)下降。L-精氨酸牛奶可以拮抗環(huán)磷酰胺的免疫抑制作用，保護(hù)小鼠胸腺和脾臟免受其損害，說(shuō)明本發(fā)明精氨酸牛奶具有增強(qiáng)免疫功能的作用。
實(shí)驗(yàn)例2 本發(fā)明L-精氨酸牛奶對(duì)血虛模型小鼠紅細(xì)胞及血紅蛋白的影響取昆明種小鼠，雌雄各半，體重20±2g，隨機(jī)分為模型組、L-精氨酸水溶液組和L-精氨酸牛奶組，每組10只。先測(cè)出各鼠給藥前紅細(xì)胞(RBC)和血紅蛋白(Hb)值，然后尾部放血法造成失血性血虛模型(RBC、Hb均明顯低于正常值)后，L-精氨酸水溶液組以1.5g/kg劑量灌服L-精氨酸水溶液，L-精氨酸牛奶組則每日灌服等體積的L-精氨酸牛奶，模型組灌服等體積生理鹽水，均為每日一次。連續(xù)給灌服12天。末次給藥2小時(shí)后，尾部采血測(cè)RBC和Hb值。結(jié)果見(jiàn)表2。
表2 L-精氨酸牛奶對(duì)血虛模型小鼠紅細(xì)胞和血紅蛋白的影響(x±SD)

與模型組比較，*P＜0.05，**P＜0.01；與水溶液組比較，ΔP＜0.05實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明服用L-精氨酸牛奶12天后的血虛小鼠RBC和Hb值顯著高于模型組(P＜0.01)和L-精氨酸水溶液組，說(shuō)明L-精氨酸配方組合牛奶具有較好的補(bǔ)血作用，實(shí)驗(yàn)例3 高溫應(yīng)激下補(bǔ)充L-精氨酸牛奶對(duì)小鼠免疫功能的影響(一)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與分組選用6～8周齡雄性BALB/C小鼠105只，動(dòng)物購(gòu)回后在室溫(25±1℃，相對(duì)濕度50％)下適應(yīng)三天，自由攝食和飲自來(lái)水。將105只小鼠隨機(jī)分為3組，A組為對(duì)照組給蒸溜水；B組按L-精氨酸1.5g/kg，用L-精氨酸水溶液灌胃；C組按精氨酸1.5g/kg，用20％L-精氨酸牛奶灌胃；(二)高溫應(yīng)激方法將每組35只小鼠再分為7個(gè)小組，每小組5只(即常溫對(duì)照、熱應(yīng)激處理后0、2、4、8、12、24h)。常溫對(duì)照不入高溫倉(cāng)，其余6個(gè)小組都入高溫倉(cāng)接受熱應(yīng)激。對(duì)照組及各處理組灌胃14天后放入動(dòng)物高溫實(shí)驗(yàn)倉(cāng)進(jìn)行熱應(yīng)激處理，參數(shù)為干球溫度為(41±0.5)℃，相對(duì)濕度為65％，熱應(yīng)激時(shí)間為120min。
(三)實(shí)驗(yàn)結(jié)果1、L-精氨酸牛奶對(duì)熱應(yīng)激小鼠胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)的影響胸腺或脾臟指數(shù)＝胸腺或脾臟質(zhì)量(g)/小鼠熱應(yīng)激后體重(g)
表3各組小鼠胸腺指數(shù)的變化(x±SD)

表4實(shí)驗(yàn)小鼠脾臟指數(shù)的變化(x±SD)

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明未補(bǔ)充L-精氨酸的熱應(yīng)激組小鼠的胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)都顯著低于相應(yīng)的常溫對(duì)照組，而補(bǔ)充L-精氨酸牛奶組小鼠兩指數(shù)在熱應(yīng)激條件下都顯著高于其水溶液組，提示與L-精氨酸的水溶液相比，L-精氨酸牛奶具有更好的保護(hù)脾臟和胸腺等免疫器官在高溫應(yīng)激時(shí)的急性萎縮的作用。
2、L-精氨酸牛奶對(duì)熱應(yīng)激小鼠淋巴細(xì)胞增殖活性的影響小鼠淋巴細(xì)胞增殖活性以ConA刺激指數(shù)來(lái)表示，ConA刺激指數(shù)＝實(shí)驗(yàn)孔吸光度(OD值)/對(duì)照孔吸光度(OD值)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表5。
表5實(shí)驗(yàn)小鼠淋巴細(xì)胞增殖活性(ConA刺激指數(shù))的變化(x±SD)

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明與L-精氨酸水溶液組相比，L-精氨酸組配方牛奶組在更強(qiáng)的刺激高溫應(yīng)激條件下實(shí)驗(yàn)小鼠淋巴細(xì)胞有增值活性。
3、L-精氨酸牛奶對(duì)熱應(yīng)激小鼠胸腺細(xì)胞IL-2含量的影響L-精氨酸牛奶對(duì)熱應(yīng)激小鼠活化的胸腺細(xì)胞IL-2的含量影響的實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表6。
表6各實(shí)驗(yàn)組小鼠IL-2質(zhì)量濃度的變化(x±SD)(ng/l)

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明與L-精氨酸水溶液相比，L-精氨酸牛奶具有更好的提高實(shí)驗(yàn)小鼠胸腺細(xì)胞IL-2含量的作用。
4、L-精氨酸牛奶對(duì)熱應(yīng)激小鼠活化的胸腺細(xì)胞IL-2R表達(dá)的影響對(duì)活化的胸腺細(xì)胞IL-2R表達(dá)，結(jié)果以IL-2R陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)占所測(cè)細(xì)胞數(shù)(5000個(gè)細(xì)胞)的百分比表示。結(jié)果見(jiàn)表7。
表7各實(shí)驗(yàn)組小鼠活化胸腺細(xì)胞IL-2R表達(dá)率的變化(x±SD)％

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明與L-精氨酸水溶液相比，L-精氨酸牛奶具有更好的促進(jìn)高溫應(yīng)激條件下實(shí)驗(yàn)小鼠胸腺細(xì)胞IL-2R表達(dá)的作用。
5、L-精氨酸牛奶對(duì)胸腺細(xì)胞胞漿游離鈣離子濃度的影響活化的胸腺細(xì)胞漿游離鈣離子[Ca2+]以熒光強(qiáng)度表示，測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表8。
表8各組細(xì)胞漿[Ca2+]熒光強(qiáng)度的變化(x±SD)

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明與L-精氨酸水溶液組相比，L-精氨酸牛奶組具有更好的活化胸腺細(xì)胞[Ca2+]的作用。因此，可以認(rèn)為在高溫應(yīng)激條件下，補(bǔ)充L-精氨酸牛奶能夠保護(hù)胸腺細(xì)胞結(jié)構(gòu)的完整性。
下述實(shí)施例均能實(shí)現(xiàn)上述實(shí)驗(yàn)例所述的效果。
實(shí)施例1取牛奶100ml，在牛奶中添加1g L-精氨酸，經(jīng)高壓均質(zhì)工藝加工，制成1％(g/ml)濃度的L-精氨酸配方組合牛奶。
實(shí)施例2取牛奶100ml，在牛奶中添加5g L-精氨酸，經(jīng)高壓均質(zhì)工藝加工，制成5％(g/ml)濃度的L-精氨酸配方組合牛奶。
實(shí)施例3取牛奶100ml，在牛奶中添加10g L-精氨酸，經(jīng)高壓均質(zhì)工藝加工，制成10％(g/ml)濃度的L-精氨酸配方組合牛奶。
實(shí)施例4取牛奶100ml，在牛奶中添加20g L-精氨酸，經(jīng)高壓均質(zhì)工藝加工，制成20％(g/ml)濃度的L-精氨酸配方組合牛奶。
權(quán)利要求
1.一種調(diào)節(jié)機(jī)體免疫力的牛奶，其特征在于該牛奶是按100ml牛奶中L-精氨酸含量為0.5-20g配制而成。
2.如權(quán)利要求1所述的牛奶，其特征在于該牛奶是按100ml牛奶中的L-精氨酸含量為1g配制而成。
3.如權(quán)利要求1所述的牛奶，其特征在于該牛奶是按100ml牛奶中L-精氨酸含量為5g配制而成。
4.如權(quán)利要求1所述的牛奶，其特征在于該牛奶是按100ml牛奶中L-精氨酸含量為10g配制而成。
5.如權(quán)利要求1所述的牛奶，其特征在于該牛奶是按100ml牛奶中L-精氨酸含量為20g配制而成。
6.如權(quán)利要求1、2、3、4或5所述的牛奶的制備方法，其特征在于該方法包括以下步驟取普通牛奶，按0.5-20％的濃度在牛奶中添加L-精氨酸，并經(jīng)高壓均質(zhì)工藝加工制成。
7.如權(quán)利要求6所述的牛奶的制備方法，其特征在于該方法包括以下步驟取普通牛奶，按10％的濃度在牛奶中添加L-精氨酸，并經(jīng)高壓均質(zhì)工藝加工制成。
8.如權(quán)利要求1、2、3、4或5所述的配方組合牛奶具有調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能的作用。
9.如權(quán)利要求1、2、3、4或5所述的配方組合牛奶在制備具有調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能的奶制品中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種配方組合牛奶及其制備方法。該牛奶是通過(guò)在普通牛奶中添加L－精氨酸，并經(jīng)均質(zhì)工藝加工制成。本發(fā)明的配方組合牛奶具有調(diào)節(jié)機(jī)體免疫力的作用。
文檔編號(hào)A23C9/152GK1806587SQ200610002649
公開(kāi)日2006年7月26日 申請(qǐng)日期2006年1月26日 優(yōu)先權(quán)日2006年1月26日
發(fā)明者馮前進(jìn), 翟志光 申請(qǐng)人:山西中醫(yī)學(xué)院豪派中藥制劑工程研究院