專(zhuān)利名稱(chēng)：微生物發(fā)酵生產(chǎn)混合長(zhǎng)鏈二元酸的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種混合長(zhǎng)鏈二元酸的生產(chǎn)方法。
背景技術(shù)：
我國(guó)在世界上率先發(fā)明了利用微生物石油發(fā)酵生產(chǎn)十二碳二元酸的工藝，并產(chǎn)業(yè)化，并開(kāi)發(fā)了利用微生物石油發(fā)酵生產(chǎn)十三碳二元酸、十四碳二元酸的工藝。但這些工藝均生產(chǎn)單組分長(zhǎng)鏈二元酸，且所用的主要原料輕蠟油需經(jīng)精餾。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種利用一種菌種生產(chǎn)混合長(zhǎng)鏈二元酸，且工藝簡(jiǎn)單，易操作的微生物發(fā)酵生產(chǎn)混合長(zhǎng)鏈二元酸的方法。
本發(fā)明的技術(shù)解決方案是一種微生物發(fā)酵生產(chǎn)混合長(zhǎng)鏈二元酸的方法，其特征是包括下列步驟(1)菌種混合選擇熱帶假絲酵母菌株，并進(jìn)行1～3代的培養(yǎng)；(2)搖瓶種子將麥芽汁培養(yǎng)基在26～32℃條件下，于旋轉(zhuǎn)搖床上培養(yǎng)40～48小時(shí)，培養(yǎng)成種液；(3)一級(jí)種子罐培養(yǎng)將種液放入一級(jí)種子罐中，接種，在26～29℃、300～360rpm攪拌速度下，培養(yǎng)35～42小時(shí)；(4)二級(jí)種子罐培養(yǎng)將經(jīng)一級(jí)種子罐培養(yǎng)的菌液放入二級(jí)種子罐中，接種，在25～30℃、200～280rpm攪拌速度下，培養(yǎng)40～50小時(shí)；(5)發(fā)酵在發(fā)酵罐中加入輕蠟油和經(jīng)二級(jí)種子罐培養(yǎng)的菌液，在25～30℃條件下，以150～210轉(zhuǎn)/分鐘的轉(zhuǎn)速攪拌發(fā)酵150～200小時(shí)；(6)破乳分層發(fā)酵完成后，進(jìn)行破乳粉層，并壓至分層罐，放置分層1～3天，上層為殘烴，下層為菌層，中層清液為混合長(zhǎng)鏈二元酸，放出上層，收集中層。
(7)將收集得到的混合長(zhǎng)鏈二元酸進(jìn)行脫色、結(jié)晶、壓濾、烘干得產(chǎn)品。
步驟(2)搖瓶種子時(shí)，搖床旋轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)速為200～250轉(zhuǎn)/分鐘。步驟(3)、(4)中通風(fēng)量均為1∶0.6～0.8。步驟(5)中通氣量為1∶0.6～0.8，壓力為0.7～0.8個(gè)大氣壓。脫色處理時(shí)采用活性炭進(jìn)行脫色處理。步驟(5)中輕蠟油采用200#輕蠟油。
本發(fā)明用一種工藝、一種菌種生產(chǎn)混合長(zhǎng)鏈二元酸，突破了只能利用單一菌種生產(chǎn)單品種二元酸的現(xiàn)狀；生產(chǎn)工藝簡(jiǎn)單，易操作，所用的主要原料輕蠟油(如200#)可直接使用，而不必先精餾處理，減少了投資，節(jié)約了成本。
下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說(shuō)明。
具體實(shí)施例方式一種微生物發(fā)酵生產(chǎn)混合長(zhǎng)鏈二元酸的方法，包括下列步驟(1)菌種混合選擇熱帶假絲酵母菌株，并進(jìn)行1～3代的培養(yǎng)；
(2)搖瓶種子用3000ml三角瓶配制10Be’麥芽汁培養(yǎng)基，并將其在26～32℃(例26℃、29℃、32℃)條件下，于旋轉(zhuǎn)搖床上以200～250轉(zhuǎn)/分鐘(例200轉(zhuǎn)/分鐘、220轉(zhuǎn)/分鐘、250轉(zhuǎn)/分鐘)轉(zhuǎn)速培養(yǎng)40～48小時(shí)(例40、45、48小時(shí))，培養(yǎng)成種液；(3)一級(jí)種子罐培養(yǎng)將種液放入一級(jí)種子罐中，接種，在400L裝液量、2.4L接種量、1∶0.6～0.8(例1∶0.6、1∶0.7、1∶0.8)通風(fēng)量、罐壓1kg/m3、26～29℃(例26℃、27℃、29℃)、300～360rpm(例300rpm、330rpm、360rpm)攪拌速度下，培養(yǎng)35～42小時(shí)(例35、39、42小時(shí))；(4)二級(jí)種子罐培養(yǎng)將經(jīng)一級(jí)種子罐培養(yǎng)的菌液放入二級(jí)種子罐中，接種，在裝液量3.5噸、接種量400L、1∶0.6～0.8(例1∶0.6、1∶0.7、1∶0.8)通風(fēng)量、罐壓1kg/m3、25～30℃(例25℃、27℃、30℃)、200～280rpm攪拌速度下，培養(yǎng)40～50小時(shí)(例40小時(shí)、45小時(shí)、50小時(shí))；(5)發(fā)酵在發(fā)酵罐中加入200#輕蠟油和經(jīng)二級(jí)種子罐培養(yǎng)的菌液，在25～30℃例25℃、27℃、30℃)、通氣量為1∶0.6～0.8(例1∶0.6、1∶0.7、1∶0.8)，壓力為0.7～0.8個(gè)大氣壓條件下，以150～210轉(zhuǎn)/分鐘(例150轉(zhuǎn)/分鐘、180轉(zhuǎn)/分鐘、210轉(zhuǎn)/分鐘)的轉(zhuǎn)速攪拌發(fā)酵150～200小時(shí)；(6)破乳分層發(fā)酵完成后，進(jìn)行破乳粉層，并壓至分層罐，放置分層1～3天，上層為殘烴，下層為菌層，中層清液為混合長(zhǎng)鏈二元酸，放出上層，收集中層。
(7)將收集得到的混合長(zhǎng)鏈二元酸采用活性炭進(jìn)行脫色處理、結(jié)晶、用壓濾機(jī)對(duì)結(jié)晶的產(chǎn)品壓濾、用烘干機(jī)烘干得產(chǎn)品。
權(quán)利要求
1.一種微生物發(fā)酵生產(chǎn)混合長(zhǎng)鏈二元酸的方法，其特征是包括下列步驟(1)菌種混合選擇熱帶假絲酵母菌株，并進(jìn)行1～3代的培養(yǎng)；(2)搖瓶種子將麥芽汁培養(yǎng)基在26～32℃條件下，于旋轉(zhuǎn)搖床上培養(yǎng)40～48小時(shí)，培養(yǎng)成種液；(3)一級(jí)種子罐培養(yǎng)將種液放入一級(jí)種子罐中，接種，在26～29℃、300～360rpm攪拌速度下，培養(yǎng)35～42小時(shí)；(4)二級(jí)種子罐培養(yǎng)將經(jīng)一級(jí)種子罐培養(yǎng)的菌液放入二級(jí)種子罐中，接種，在25～30℃、200～280rpm攪拌速度下，培養(yǎng)40～50小時(shí)；(5)發(fā)酵在發(fā)酵罐中加入輕蠟油和經(jīng)二級(jí)種子罐培養(yǎng)的菌液，在25～30℃條件下，以150～210轉(zhuǎn)/分鐘的轉(zhuǎn)速攪拌發(fā)酵150～200小時(shí)；(6)破乳分層發(fā)酵完成后，進(jìn)行破乳粉層，并壓至分層罐，放置分層1～3天，上層為殘烴，下層為菌層，中層清液為混合長(zhǎng)鏈二元酸，放出上層，收集中層。(7)將收集得到的混合長(zhǎng)鏈二元酸進(jìn)行脫色、結(jié)晶、壓濾、烘干得產(chǎn)品。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的微生物發(fā)酵生產(chǎn)混合長(zhǎng)鏈二元酸的方法，其特征是步驟(2)搖瓶種子時(shí)，搖床旋轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)速為200～250轉(zhuǎn)/分鐘。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的微生物發(fā)酵生產(chǎn)混合長(zhǎng)鏈二元酸的方法，其特征是步驟(3)、(4)中通風(fēng)量均為1∶0.6～0.8。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的微生物發(fā)酵生產(chǎn)混合長(zhǎng)鏈二元酸的方法，其特征是步驟(5)中通氣量為1∶0.6～0.8，壓力為0.7～0.8個(gè)大氣壓。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的微生物發(fā)酵生產(chǎn)混合長(zhǎng)鏈二元酸的方法，其特征是脫色處理時(shí)采用活性炭進(jìn)行脫色處理。
6.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的微生物發(fā)酵生產(chǎn)混合長(zhǎng)鏈二元酸的方法，其特征是步驟(5)中輕蠟油采用200#輕蠟油。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種微生物發(fā)酵生產(chǎn)混合長(zhǎng)鏈二元酸的方法包括菌種混合、搖瓶種子、一級(jí)種子罐培養(yǎng)、二級(jí)種子罐培養(yǎng)、發(fā)酵、破乳分層、脫色、結(jié)晶、壓濾、烘干等步驟。本發(fā)明用一種工藝、一種菌種生產(chǎn)混合長(zhǎng)鏈二元酸，突破了只能利用單一菌種生產(chǎn)單品種二元酸的現(xiàn)狀；生產(chǎn)工藝簡(jiǎn)單，易操作，所用的主要原料輕蠟油可直接使用，而不必先精餾處理，減少了投資，節(jié)約了成本。
文檔編號(hào)C12R1/74GK1844404SQ20061003833
公開(kāi)日2006年10月11日 申請(qǐng)日期2006年2月14日 優(yōu)先權(quán)日2006年2月14日
發(fā)明者張肅凈, 陳遠(yuǎn)童 申請(qǐng)人:南通圣諾鑫生物科技有限公司