專利名稱：菌根性食用菌菌種激化液及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域中菌根性食用菌技術(shù)領(lǐng)域，具體地，涉及菌根性食用菌菌種激化液的配方及其制備方法。
背景技術(shù)：
在世界范圍內(nèi)目前最為廣泛食用的真菌中，菌根性食用菌(ectomycorrhizal wild edible fungi)最為人類所青睞。隨著人們生活水平的提高，人類對(duì)來自于純自然的資源，依賴性越來越強(qiáng)。野生菌根性食用菌作為一類小分子高蛋白、低脂肪、食療兼顧的綠色生態(tài)食品越來越受到人們普遍歡迎，人類對(duì)其需求日益旺盛。目前所采食的菌根性食用菌均完全依賴于自然資源。因此，僅依靠自然產(chǎn)量已供不應(yīng)求，價(jià)格高昂。由于價(jià)格及利益的驅(qū)使，誘發(fā)人們過度采集，導(dǎo)致不顧子實(shí)體是否成熟、不管自然分布和產(chǎn)菌的實(shí)際情況，“一窩端”及頻繁的采集方式屢見不鮮，累傷及地下菌絲情況比比皆是，破壞了有序的地下菌絲，自然的生存狀況受到極大的干擾，這樣的情況已持續(xù)了數(shù)年之久，致使自然生物量已出現(xiàn)逐年下降的趨勢(shì)。如何實(shí)現(xiàn)菌根性野生食用菌持續(xù)利用已成為世界性的一個(gè)難題和創(chuàng)新性研究的熱點(diǎn)。因此，進(jìn)行菌根性野生真菌人工保育，實(shí)施規(guī)范化生物技術(shù)栽培已成為野生食用菌持續(xù)發(fā)展的必然要求和必由之路。其中誘導(dǎo)菌種及其菌絲繁殖生長(zhǎng)成為制約的因素，因而能夠促進(jìn)菌絲生長(zhǎng)繁殖的菌種菌劑的配方與制作則是技術(shù)的關(guān)鍵。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供菌種制備所需菌劑的配方與制作方法，這樣的菌劑要具備利于孢子萌發(fā)、菌絲分裂與分化發(fā)育，在本發(fā)明中稱之為菌種“激化液”。
為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的上述目的，本發(fā)明提供了下述技術(shù)方案菌根性食用菌菌種激化液(Active solution for ecto-mycorrhizal fungal spores and mycelia)的四種配方菌根性食用菌菌種激化液(稱為A激化(有機(jī))液)，主要由玉米200g、胡蘿卜200g、松根200g、洋蔥200g、平菇500g、土豆1000g、尿素20g、食鹽5g組成，PH值調(diào)為5.8。
菌根性食用菌菌種激化液(稱為B激化(無機(jī))液)，主要由葡萄糖200g、(NH4)2H2PO410g，、K2HPO450g、MgSO4·7H2O7g，、CaCl210g，、Fe EDTA 4g，、NaCl 5g、MnCl2·2H2O 2g，、ZnCl210g，、CuCl2·2H2O 2g、IAA 0.02g組成。PH？？菌根性食用菌菌種激化液(稱為C激化(發(fā)酵)液)，主要由葡萄糖20g、馬鈴薯200g，、牛肉浸膏5g、玉米煮液15g、煙酸15mg、核黃素3mg、MgSO40.1g、KH2PO42g組成，PH值調(diào)為6.0。
菌根性食用菌菌種激化液(稱為D激化(發(fā)酵)液)，主要由土豆200g、玉米粉15g、麥芽糖10g、葡萄糖10g、蛋白胨2g、酵母浸膏1g、MgSO40.1g、K2HPO40.2g組成，PH值調(diào)為6.0。
本發(fā)明同時(shí)提供了制備上述菌根性食用菌菌種激化液的方法，在各個(gè)配方中加無菌水稀釋至1000毫升，充分?jǐn)嚢杈鶆颍?25℃下滅菌20分鐘，冷卻分裝，各加入0.1g頭孢抗生素(Ceftriaxone sodium for injection)，在≤4℃條件下冷藏保存。
本發(fā)明配方的組成原理在于針對(duì)多汁乳菇及其類似菌根性食用菌保育促繁增產(chǎn)方法之現(xiàn)狀，本發(fā)明優(yōu)化菌種菌劑配方及其制作，以實(shí)現(xiàn)菌根性食用菌的保育促繁，增加自然產(chǎn)量之目的，實(shí)現(xiàn)自然資源持續(xù)利用，造福山地林區(qū)人民，實(shí)現(xiàn)人與自然和諧共存之目的。因此本發(fā)明采用菌根性食用菌子實(shí)體或培養(yǎng)菌種制作的栽培用菌種，需加入激化液中；激化液配制的目的是促使鈍化的菌種菌絲及擔(dān)孢子激化萌發(fā)，提高和加強(qiáng)菌絲得分裂和生長(zhǎng)能力，促進(jìn)地下菌絲發(fā)育分化，增加地下菌絲的儲(chǔ)備量以確保自然的子實(shí)體產(chǎn)量。本發(fā)明的技術(shù)方案適用于同類菌根性食用菌在成熟宜林地使用。
四種激化液配方及配制方法如下配制各個(gè)配方加無菌水稀釋至1000毫升，充分?jǐn)嚢杈鶆颍?25℃下滅菌20min，冷卻分裝，各加入0.1g頭孢抗生素(Ceftriaxone sodium for injection)，在≤4℃條件下冷藏保存。
具體實(shí)施例方式為了更好地了解本發(fā)明，下面用本發(fā)明的實(shí)施例來進(jìn)一步說明本發(fā)明的內(nèi)容，但本發(fā)明的內(nèi)容并不局限于此。
以多汁乳菇為例說明具體步驟與方法，但本發(fā)明的技術(shù)方案適用于同類菌根性食用菌在成熟宜林地使用。
實(shí)施例11、取多汁乳菇(奶漿菌)子實(shí)體5千克，篩選優(yōu)良無病害、無蟲蛀幾近成熟的子實(shí)體，剔除子實(shí)體異物，表面自然風(fēng)干去除潮濕水汽后；置于粉碎機(jī)中粉碎，加適量水?dāng)嚢璩珊隣睿?、取配方1(A激化(有機(jī))液)玉米200g，胡蘿卜200g，松根200g，洋蔥200g，平菇500g，土豆1000g；食醋調(diào)PH值為5.8，尿素20g，食鹽5g，加無菌水稀釋至1000毫升，充分?jǐn)嚢杈鶆颍?25℃下滅菌20min，冷卻分裝；在≤4℃條件下冷藏保存；用前加入0.1g頭孢抗生素(Ceftriaxonesodium for injection)。
3、使用上述配制好的激化液，攪拌均勻加入稀釋10倍的菌絲激化液中，浸泡10小時(shí)以上，期間不斷攪拌以利充分接觸與通氣，使孢子和菌絲充分激化發(fā)酵。
4、選擇宜林地(15年以上樹齡的松、櫟混交，緩坡≤30°林地，地被植物不宜過密，并清除紫莖澤蘭)的地段，開約2米長(zhǎng)、10厘米寬、8-10厘米深的槽，將上述處理好的菌絲及其激化液均勻噴施到溝槽內(nèi)，復(fù)土塌實(shí)掩埋；槽間隙2-3米為宜。
5、科學(xué)管理，有條件的山區(qū)可以適時(shí)噴灌澆水；避免人、畜危害踐踏，若有紫莖澤蘭等有害雜草，必須清除，一般3-4年后開始產(chǎn)菌，5年進(jìn)入豐產(chǎn)期，之后連年出菇。
上述試驗(yàn)在云南省思茅市讕倉縣謙邁鄉(xiāng)試驗(yàn)田里進(jìn)行，并連續(xù)2年獲得成功，成為“退耕還林”和“天保工程”后的主要經(jīng)濟(jì)來源。
實(shí)施例2試驗(yàn)步驟同實(shí)施例1，區(qū)別僅在于多汁乳菇菌種激化液的配方2(B激化(無機(jī))液)葡萄糖200g，(NH4)2H2PO410g，K2HPO450g，MgSO4·7H2O 7g，CaCl210g，F(xiàn)e EDTA 4g，NaCl5g，MnCl2·2H2O 2g，ZnCl210g，CuCl2·2H2O 2g，IAA 0.02g。
實(shí)施例3試驗(yàn)步驟同實(shí)施例1，區(qū)別僅在于多汁乳菇菌種激化液的配方3(C激化液)葡萄糖2％，馬鈴薯200g，牛肉浸膏5g，玉米煮液15g，煙酸+核黃素(1.5mg+0.3mg)％，MgSO40.1g，KH2PO42g，PH值調(diào)制6.0。
實(shí)施例4試驗(yàn)步驟同實(shí)施例1，區(qū)別僅在于多汁乳菇菌種激化液的配方4(D激化液)土豆200g，玉米粉15g，麥芽糖10g，葡萄糖10g，蛋白胨2g，酵母浸膏1g，MgSO40.1g，K2HPO40.2g，PH值6.0。
與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具備的優(yōu)益性在于1、實(shí)現(xiàn)了菌根性食用菌的在成熟自然林地的人工栽培。
2、利用本發(fā)明的方法達(dá)到了通過人工干預(yù)補(bǔ)充和誘導(dǎo)增加地下菌絲量來實(shí)現(xiàn)地上部分增加的目的。
3、本配方及其制作方法可與荒山植樹造林及植被的恢復(fù)與重建相結(jié)合，對(duì)于開發(fā)利用山地林區(qū)非木材林產(chǎn)品具有巨大的林地經(jīng)濟(jì)潛力和廣闊的應(yīng)用前景。
4、本發(fā)明的配方原料多為常見、價(jià)廉的成分，配制方法操作簡(jiǎn)易，容易廣泛推廣應(yīng)用。
5、本發(fā)明為生物學(xué)(微生物學(xué)、菌物學(xué))與農(nóng)學(xué)與林學(xué)(栽培學(xué)和林業(yè))技術(shù)的交叉，汲取了多學(xué)科知識(shí)，具有實(shí)用簡(jiǎn)便的優(yōu)勢(shì)。
權(quán)利要求
1.菌根性食用菌菌種激化液，其特征在于主要由玉米200g、胡蘿卜200g、松根200g、洋蔥200g、平菇500g、土豆1000g、尿素20g、食鹽5g組成，PH值調(diào)為5.8。
2.菌根性食用菌菌種激化液，其特征在于主要由葡萄糖200g、(NH4)2H2PO410g、K2HPO450g、MgSO4·7H2O7g，、CaCl210g，、FeEDTA4g，、NaCl5g、MnCl2·2H2O2g，、ZnCl210g，、CuCl2·2H2O2g、IAA0.02g組成PH值調(diào)為6.0。
3.菌根性食用菌菌種激化液，其特征在于主要由葡萄糖20g、馬鈴薯200g，、牛肉浸膏5g、玉米煮液15g、煙酸15mg、核黃素3.0mg、MgSO40.1g、KH2PO42g組成，PH值調(diào)為6.0。
4.菌根性食用菌菌種激化液，其特征在于主要由土豆200g、玉米粉15g、麥芽糖10g、葡萄糖10g、蛋白胨2g、酵母浸膏1g、MgSO40.1g、K2HPO40.2g組成，PH值調(diào)為6.0。
5.制備權(quán)利要求1或2或3或4菌根性食用菌菌種激化液的方法，其特征在于各個(gè)配方需加無菌水稀釋至1000毫升，充分?jǐn)嚢杈鶆颍?25℃下滅菌20分鐘，冷卻分裝，用前各加入0.1g頭孢抗生素，在≤4℃條件下冷藏保存，。
全文摘要
提供菌種制備所需菌劑(在本發(fā)明中稱之為菌種“激化液”)的配方與制作方法。配方中原料多為常見、價(jià)廉的成分，配制方法操作簡(jiǎn)易，容易推廣應(yīng)用。利于孢子萌發(fā)、菌絲分裂與分化發(fā)育，實(shí)現(xiàn)了菌根性食用菌的在成熟自然林地的人工栽培。通過人工干預(yù)補(bǔ)充和誘導(dǎo)增加地下菌絲量來實(shí)現(xiàn)地上部分增產(chǎn)。可與荒山植樹造林及植被的恢復(fù)與重建相結(jié)合，對(duì)于開發(fā)利用山地林區(qū)非木材林產(chǎn)品具有巨大的林地經(jīng)濟(jì)潛力和廣闊的應(yīng)用前景。同時(shí)為生物學(xué)(微生物學(xué)、菌物學(xué))與農(nóng)學(xué)與林學(xué)(栽培學(xué)和林業(yè))技術(shù)的交叉，汲取了多學(xué)科知識(shí)，具有實(shí)用簡(jiǎn)便的優(yōu)勢(shì)。
文檔編號(hào)C12N1/14GK1958784SQ20061004885
公開日2007年5月9日 申請(qǐng)日期2006年11月28日 優(yōu)先權(quán)日2006年11月28日
發(fā)明者劉培貴, 于富強(qiáng), 王向華, 陳娟, 鄭煥娣, 田霄飛 申請(qǐng)人:中國科學(xué)院昆明植物研究所