專(zhuān)利名稱(chēng)：細(xì)菌總數(shù)測(cè)試液及其測(cè)試瓶的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種細(xì)菌的測(cè)試方法及其測(cè)試器具，特別是涉及一種水質(zhì)、食品、藥品、化妝品等物質(zhì)中細(xì)菌總數(shù)的測(cè)試液及其測(cè)試瓶。
背景技術(shù)：
細(xì)菌總數(shù)是指水質(zhì)、食品和藥品等經(jīng)過(guò)處理，在一定條件下培養(yǎng)后，所得1g或1ml檢樣中所含細(xì)菌菌落的總數(shù)。細(xì)菌總數(shù)主要作為判別水質(zhì)、食品等被污染程度的標(biāo)志，也可以應(yīng)用這一方法觀察細(xì)菌在食品中繁殖的動(dòng)態(tài)，以便對(duì)被檢樣品進(jìn)行衛(wèi)生學(xué)評(píng)價(jià)時(shí)提供依據(jù)。
細(xì)菌總數(shù)并不表示樣品中實(shí)際存在的所有細(xì)菌的總數(shù)，細(xì)菌總數(shù)并不能區(qū)分其中細(xì)菌的種類(lèi)，所以有時(shí)被稱(chēng)為雜菌數(shù)，需氧菌數(shù)等。
目前，水質(zhì)、食品等樣品中細(xì)菌總數(shù)的測(cè)試方法大多數(shù)采用傳統(tǒng)的平皿計(jì)數(shù)法，平皿計(jì)數(shù)法中涉及到的主要儀器設(shè)備為高壓蒸汽滅菌器、干熱滅菌箱、生化培養(yǎng)箱、天平、顯微放大鏡或菌落計(jì)數(shù)器、pH計(jì)或精密pH試紙、滅菌試管、平皿、刻度吸管和采樣瓶等。
平皿計(jì)數(shù)法的主要操作步驟為第一步采集水樣即以無(wú)菌操作方法用滅菌吸管吸取一定量的水樣；第二步純水的制備；第三步器皿洗滌滅菌即將平皿、錐形瓶、燒杯、移液管等放入高壓蒸汽滅菌器內(nèi)，滅菌一定時(shí)間；第四步培養(yǎng)基的配制；第五步接種水樣；第六步培養(yǎng)；第七步菌落計(jì)數(shù)(根據(jù)形態(tài)或顏色以?xún)x器方式進(jìn)行)；第八步計(jì)算。
傳統(tǒng)的平皿計(jì)數(shù)法對(duì)實(shí)驗(yàn)室環(huán)境以及操作人員的技術(shù)要求都極為嚴(yán)格，包括從采樣技術(shù)、實(shí)驗(yàn)室條件、儀器設(shè)備、器皿試劑質(zhì)量、操作人員的專(zhuān)業(yè)知識(shí)、操作技能、實(shí)際經(jīng)驗(yàn)直至質(zhì)量控制等全部監(jiān)測(cè)過(guò)程及控制程序。并且操作程序繁瑣、復(fù)雜、冗長(zhǎng)，任何一個(gè)環(huán)節(jié)的不慎都有可能造成測(cè)試結(jié)果的誤差。例如，細(xì)菌通常為團(tuán)塊聚集體，如果操作過(guò)程中沒(méi)有將細(xì)菌團(tuán)塊聚集體充分分散，則計(jì)數(shù)為負(fù)誤差；細(xì)菌生長(zhǎng)時(shí)出現(xiàn)的沉淀物、顆粒、氣泡等有時(shí)很難與細(xì)菌菌落區(qū)別，則計(jì)數(shù)為正誤差。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的克服現(xiàn)有技術(shù)中細(xì)菌總數(shù)測(cè)試方法中的不足，提供一種快速、簡(jiǎn)便、具有較長(zhǎng)儲(chǔ)存期的簡(jiǎn)易細(xì)菌總數(shù)測(cè)試液及其測(cè)試瓶。
本發(fā)明的技術(shù)方案本發(fā)明提供一種細(xì)菌總數(shù)測(cè)試液，該測(cè)試液稱(chēng)為液體顯色培養(yǎng)基，以重量含量為單位，由蛋白胨5～15‰，氯化物3～10‰，牛肉浸膏1～5‰，葡萄糖2～5‰，蒸餾水970～988‰和微量顯色指示劑組成。
所述的細(xì)菌總數(shù)測(cè)試液中氯化物為氯化鈉或氯化鉀，顯色指示劑為酚紅或中性紅。
一種細(xì)菌總數(shù)測(cè)試瓶，該測(cè)試瓶為帶膠塞和鋁皮蓋的無(wú)菌、無(wú)色透明玻璃瓶，測(cè)試瓶中裝有細(xì)菌總數(shù)測(cè)試液，測(cè)試液在瓶中的高度H1和留空高度H2之比為H1∶H2＝1∶0.3～0.8。
所述的細(xì)菌總數(shù)測(cè)試瓶中的測(cè)試液，以重量含量為單位，由蛋白胨5～15‰，氯化物3～10‰，牛肉浸膏1～5‰，葡萄糖2～5‰，蒸餾水970～988‰和微量顯色指示劑組成。
本發(fā)明的測(cè)試瓶可以選用5～15毫升西林瓶或口服液瓶。
使用本發(fā)明細(xì)菌總數(shù)測(cè)試液及其測(cè)試瓶測(cè)定水質(zhì)中細(xì)菌的操作方法為用無(wú)菌注射器將水質(zhì)樣品吸取1.0(或0.5)毫升，注入到測(cè)試瓶中，搖勻后放置于37℃干燥箱或水浴鍋中24小時(shí)，根據(jù)瓶中液體顏色的變化來(lái)判斷陰性或陽(yáng)性反應(yīng)(瓶中液體顏色本身為紅色，不變色為陰性，變?yōu)辄S色為陽(yáng)性)，此為定性分析；按此方法做2組或3組平行樣，按逐級(jí)稀釋法查MPN表，即可進(jìn)行定量測(cè)試。食品等其它固體樣品則須用水溶解或浸提，處理成液體后再按上述方法進(jìn)行測(cè)定。
本發(fā)明的積極有益效果1.本發(fā)明的測(cè)試液即液體顯色培養(yǎng)基密封貯存于玻璃瓶中，有較長(zhǎng)貯存期，省去平皿計(jì)數(shù)法中第二、三、四的操作步驟，可以縮短1/2以上的檢測(cè)時(shí)間，大大減輕了勞動(dòng)強(qiáng)度。
2.本發(fā)明的測(cè)試方法免除了平皿計(jì)數(shù)法中必須的無(wú)菌條件，使得生化檢驗(yàn)可以在一般環(huán)境下進(jìn)行，從而可以節(jié)省大量的基礎(chǔ)建設(shè)投資。
3.細(xì)菌代謝產(chǎn)物與測(cè)試液即液體顯色培養(yǎng)基發(fā)生變色反應(yīng)，以此作為陽(yáng)性反應(yīng)的判斷依據(jù)，更加直觀，從而免去平皿計(jì)數(shù)法第七步的操作步驟；同時(shí)無(wú)需使用顯微鏡、測(cè)試儀等儀器，使得非專(zhuān)業(yè)人員也可以掌握此生化檢驗(yàn)技術(shù)。
4.細(xì)菌與測(cè)試液即液體顯色培養(yǎng)基中試劑的特征顯色反應(yīng)是在無(wú)菌的細(xì)菌測(cè)試瓶中自動(dòng)進(jìn)行，可避免傳統(tǒng)方法多步驟操作過(guò)程中的污染和干擾，大大減少了操作步驟；減少了操作過(guò)程中容易引起的誤差，從而在很大程度上提高了檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確可靠性。
5.本發(fā)明對(duì)活性細(xì)菌總數(shù)既能進(jìn)行定性測(cè)試也能進(jìn)行定量測(cè)試，最低檢出限符合國(guó)家水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)要求。
6.本發(fā)明可應(yīng)用于各種水質(zhì)中細(xì)菌總數(shù)的簡(jiǎn)易快速測(cè)試，非專(zhuān)業(yè)人員數(shù)分鐘即可學(xué)會(huì)操作。
7.本發(fā)明將細(xì)菌檢測(cè)技術(shù)產(chǎn)品化、商品化，將預(yù)先配置好的測(cè)定液封裝于透明玻璃瓶中，可直接用于細(xì)菌的測(cè)定，攜帶、使用方便，測(cè)定簡(jiǎn)單快速、準(zhǔn)確，保存時(shí)間長(zhǎng)。可用于水質(zhì)、食品、藥品、化妝品等多種物質(zhì)的細(xì)菌定性、定量檢測(cè)。
四

圖1細(xì)菌總數(shù)測(cè)試瓶的結(jié)構(gòu)示意圖五具體實(shí)施例方式下面的實(shí)施例僅為了進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明，而不是限制本發(fā)明的范圍。
實(shí)施例一細(xì)菌總數(shù)測(cè)試液配方為蛋白胨5‰，氯化鈉10‰，牛肉浸膏5‰，葡萄糖5‰，蒸餾水975‰，加入微量酚紅顯色指示劑。
將上述測(cè)試液配好后調(diào)節(jié)PH值為6.8-7.0，按每瓶4.5毫升封裝于無(wú)菌、無(wú)色透明小玻璃瓶中，經(jīng)高壓滅菌即可。
細(xì)菌總數(shù)測(cè)試瓶實(shí)施方法參見(jiàn)圖1，1為鋁皮蓋，2為膠塞，3為等截面玻璃瓶，4為細(xì)菌總數(shù)測(cè)試液；H1為測(cè)試液的高度，H2為留空高度，本實(shí)施例中測(cè)試瓶為4.5毫升，測(cè)試液的高度H1為3厘米，留空高度H2為1.5厘米。
實(shí)施例二細(xì)菌總數(shù)測(cè)試液配方為蛋白胨15‰，氯化鈉3‰，牛肉浸膏1‰，葡萄糖3‰，蒸餾水978‰，加入微量中性紅顯色指示劑。
將上述測(cè)試液配好后調(diào)節(jié)PH值為6.8-7.0，按每瓶4.5毫升封裝于無(wú)菌、無(wú)色透明小玻璃瓶中，高壓滅菌15分鐘即可。
細(xì)菌總數(shù)測(cè)試瓶實(shí)施方法參見(jiàn)圖1，1為鋁皮蓋，2為膠塞，3為等截面玻璃瓶，4為細(xì)菌總數(shù)測(cè)試液；H1為測(cè)試液的高度，H2為留空高度，本實(shí)施例中測(cè)試瓶為4.5毫升，測(cè)試液的高度H1為2厘米，留空高度H2為1.0厘米。
實(shí)施例三細(xì)菌總數(shù)測(cè)試液配方為蛋白胨10‰，氯化鉀7‰，牛肉浸膏3‰，葡萄糖2‰，蒸餾水978‰，加入微量酚紅顯色指示劑。
將上述測(cè)試液配好后調(diào)節(jié)PH值為6.8-7.0，按每瓶9.0毫升封裝于無(wú)菌、無(wú)色透明小玻璃瓶中，高壓滅菌15分鐘即可。
細(xì)菌總數(shù)測(cè)試瓶實(shí)施方法參見(jiàn)圖1，1為鋁皮蓋，2為膠塞，3為等截面玻璃瓶，4為細(xì)菌總數(shù)測(cè)試液；H1為測(cè)試液的高度，H2為留空高度，本實(shí)施例中測(cè)試瓶為9.0毫升，測(cè)試液的高度H1為3.5厘米，留空高度H2為2.8厘米。
實(shí)施例四細(xì)菌總數(shù)測(cè)試液配方為蛋白胨5‰，氯化鈉3‰，牛肉浸膏2‰，葡萄糖2‰，蒸餾水988‰，加入微量中性紅顯色指示劑。
將上述測(cè)試液配好后調(diào)節(jié)PH值為6.8-7.0，按每瓶9.0毫升封裝于無(wú)菌、無(wú)色透明小玻璃瓶中，經(jīng)高壓滅菌即可。
細(xì)菌總數(shù)測(cè)試瓶實(shí)施方法參見(jiàn)圖1，1為鋁皮蓋，2為膠塞，3為等截面玻璃瓶，4為細(xì)菌總數(shù)測(cè)試液；H1為測(cè)試液的高度，H2為留空高度，本實(shí)施例中測(cè)試瓶為9.0毫升，測(cè)試液的高度H1為4.5厘米，留空高度H2為2.7厘米。
實(shí)施例五細(xì)菌總數(shù)測(cè)試液配方為蛋白胨7‰，氯化鉀5‰，牛肉浸膏4‰，葡萄糖4‰，蒸餾水980‰，加入微量酚紅顯色指示劑。
將上述測(cè)試液配好后調(diào)節(jié)PH值為6.8-7.0，按每瓶4.5毫升封裝于無(wú)菌、無(wú)色透明小玻璃瓶中，經(jīng)高壓滅菌即可。
細(xì)菌總數(shù)測(cè)試瓶實(shí)施方法參見(jiàn)圖1，1為鋁皮蓋，2為膠塞，3為等截面玻璃瓶，4為細(xì)菌總數(shù)測(cè)試液；H1為測(cè)試液的高度，H2為留空高度，本實(shí)施例中測(cè)試瓶為4.5毫升，測(cè)試液的高度H1為5.0厘米，留空高度H2為2.0厘米。
實(shí)施例六細(xì)菌總數(shù)測(cè)試液配方為蛋白胨12‰，氯化鈉3‰，牛肉浸膏2‰，葡萄糖3‰，蒸餾水980‰，加入微量酚紅顯色指示劑。
將上述測(cè)試液配好后調(diào)節(jié)PH值為6.8-7.0，按每瓶4.5毫升封裝于無(wú)菌、無(wú)色透明小玻璃瓶中，經(jīng)高壓滅菌即可。
細(xì)菌總數(shù)測(cè)試瓶實(shí)施方法參見(jiàn)圖1，1為鋁皮蓋，2為膠塞，3為等截面玻璃瓶，4為細(xì)菌總數(shù)測(cè)試液；H1為測(cè)試液的高度，H2為留空高度，本實(shí)施例中測(cè)試瓶為4.5毫升，測(cè)試液的高度H1為4厘米，留空高度H2為1.2厘米。
權(quán)利要求
1.一種細(xì)菌總數(shù)測(cè)試液，該測(cè)試液稱(chēng)為液體顯色培養(yǎng)基，其特征是以重量含量為單位，由蛋白胨5～15‰，氯化物3～10‰，牛肉浸膏1～5‰，葡萄糖2～5‰，蒸餾水970～988‰和微量顯色指示劑組成。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的細(xì)菌總數(shù)測(cè)試液，其特征是所述氯化物為氯化鈉或氯化鉀，顯色指示劑為酚紅或中性紅。
3.一種細(xì)菌總數(shù)測(cè)試瓶，該測(cè)試瓶為帶膠塞和鋁皮蓋的無(wú)菌、無(wú)色透明玻璃瓶，其特征是測(cè)試瓶中裝有細(xì)菌總數(shù)測(cè)試液，測(cè)試液在瓶中的高度H1和留空高度H2之比為H1∶H2＝1∶0.3～0.8。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的細(xì)菌總數(shù)測(cè)試瓶，其特征是所述的測(cè)試液，以重量含量為單位，由蛋白胨5～15‰，氯化物3～10‰，牛肉浸膏1～5‰，葡萄糖2～5‰，蒸餾水970～988‰和微量顯色指示劑組成。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種細(xì)菌總數(shù)測(cè)試液及其測(cè)試瓶。細(xì)菌總數(shù)測(cè)試液以重量含量為單位，由蛋白胨5～15‰，氯化物3～10‰，牛肉浸膏1～5‰，葡萄糖2～5‰，蒸餾水970～988‰和微量顯色指示劑組成。細(xì)菌總數(shù)測(cè)試瓶為帶膠塞和鋁皮蓋的無(wú)菌、無(wú)色透明玻璃瓶，測(cè)試瓶中裝有細(xì)菌總數(shù)測(cè)試液，測(cè)試液在瓶中的高度H
文檔編號(hào)C12Q1/06GK101029332SQ20061012831
公開(kāi)日2007年9月5日 申請(qǐng)日期2006年11月30日 優(yōu)先權(quán)日2006年11月30日
發(fā)明者李樹(shù)華, 劉五一, 王濟(jì)昌, 白莉, 崔紀(jì)周 申請(qǐng)人:白莉