專利名稱：一種微生物固定化包埋顆粒的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及微生物固定化技術(shù)，具體的說是一種用于多環(huán)芳烴(PAHs) 污染土壤修復(fù)的固定化顆粒制備方法，其是以海藻酸鈉(Na Alg)為主要 載體材料，以泥炭土、紅磚粉、粉煤灰等為輔助載體的包埋固定化微生物 工藝，可使固定化顆粒的機(jī)械強(qiáng)度、彈性和緩釋性能大大提高。
背景技術(shù)：
采用傳統(tǒng)的游離微生物技術(shù)修復(fù)受PAHs污染的土壤時(shí)存在一些缺陷， 如單位體積內(nèi)有效降解菌濃度低、反應(yīng)啟動(dòng)慢、與土著菌竟?fàn)幪幱诹觿荨?抗毒性侵害能力差、對(duì)環(huán)境條件敏感，加入到修復(fù)現(xiàn)場環(huán)境中的微生物可 能由于竟?fàn)幓螂y以適應(yīng)環(huán)境而導(dǎo)致作用結(jié)果與實(shí)驗(yàn)結(jié)果有較大出入，使得 不能很好的應(yīng)用于原位污染土壤修復(fù)。而固定化微生物技術(shù)有望克服這些 缺點(diǎn)和弊端。
固定化微生物技術(shù)UM)是利用化學(xué)或物理的手段，將游離的微生物 定位于限定的空間區(qū)域使其保持活性并能反復(fù)使用的一種技術(shù)。固定化方 法很多，由于包埋法有較好的綜合性能，催化活性保留和存活力都較高， 且應(yīng)用靈活，是最為實(shí)用方便的固定化方法。
包埋固定化是使微生物包埋在半透明的聚合物或膜內(nèi)，或使微生物細(xì) 胞擴(kuò)散進(jìn)入多孔性的載體內(nèi)部，小分子底物及代謝物可自由出入這些多孔 或凝膠膜，而微生物細(xì)胞卻不能移動(dòng)。盡管包埋固定化法已經(jīng)廣泛應(yīng)用于 修復(fù)污染的流體介質(zhì)，但在修復(fù)污染的非流體介質(zhì)中應(yīng)用該技術(shù)還未見成 功的實(shí)例。主要原因 一方面是因?yàn)榉橇黧w介質(zhì)本身所具有的復(fù)雜性和特 殊性給該技術(shù)提出了許多不同于在流體介質(zhì)中應(yīng)用該技術(shù)時(shí)所面臨的科學(xué) 問題，如固定化微生物顆粒的載體如何選擇，如何克服在非流體介質(zhì)中固 定化顆粒的不可回收性，如何克服污染物濃度的非均質(zhì)性對(duì)固定化顆粒造 成的沖擊；如果提高固定化顆粒的機(jī)械強(qiáng)度以抵抗環(huán)境脅迫造成的物理損 傷；另一方面是包埋法本身存在的缺陷，如顆粒的擴(kuò)散傳質(zhì)性能差、空 隙不均勻、抗溫度變化和酸堿度變化能力弱等。此外，傳統(tǒng)的采用Na.Alg 固定化方法常常對(duì)應(yīng)單一菌種，缺乏廣譜適應(yīng)性，對(duì)其他屬菌株的固定不 利。
耐用廉價(jià)的微生物固定化載體或包埋材料的研究和開發(fā)已成為進(jìn)一歩 降低處理成本、促進(jìn)技術(shù)推廣應(yīng)用的關(guān)鍵。

發(fā)明內(nèi)容
為了解決上述問題，本發(fā)明提出一種用于修復(fù)多環(huán)芳烴污染土壤的包 埋固定化載體配方及其工藝。本發(fā)明以海藻酸鈉(Na .Alg)為主體載體材
料，以活性炭、泥炭土、紅磚粉、粉煤灰等材料為輔助載體，改進(jìn)了傳統(tǒng)
的Na Alg包埋固定化工藝，使固定化條件更加簡化和溫和，提高了固定
化顆粒的多種技術(shù)指標(biāo)(性能更加優(yōu)良)，并可對(duì)多種不同屬微生物進(jìn)行 固定化。將制得的固定化微生物應(yīng)用于多環(huán)芳烴污染土壤的修復(fù)，結(jié)果表 明按照該配方制得的固定化生物產(chǎn)品機(jī)械強(qiáng)度高，對(duì)高分子量多環(huán)芳烴 污染土壤具有良好的修復(fù)效果，是一種可信賴的新型環(huán)保生物產(chǎn)品。
為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案為
一種微生物固定化包埋顆粒的制備方法，
按照重量5-20%的比例將培養(yǎng)12~14 h的種子液與凝膠液混句，在 25-40。C和pH自然條件下，通過直徑為1-4.00 mm的制粒器，按照20~30 滴/min的流滴速度制得固定化顆粒，顆粒經(jīng)10-18h化學(xué)交聯(lián)，然后在固 定劑中靜置加固23~58h，最后以無菌水浸泡24-72h，沖洗凈殘留藥液后， 增殖培養(yǎng)，備用；
凝膠液質(zhì)量百分配比為海藻酸鈉(Na Alg) 2~3%， (150目)活 性炭、紅磚粉、泥炭土和/或粉煤灰0. 3~0.6%,余量為水。
凝膠液配制過程為以所需自來水重量的20%浸潤Na 'Alg凝膠劑12 ~ 20h, 100-ll(TC高溫加熱，完全溶解后冷卻到35~45°C,再向凝膠液中添 加定量輔助載體，定容，使用前于IIO 。C下濕熱滅菌30min，冷卻到35~ 45°C，備用。
所述交聯(lián)劑質(zhì)量百分配比為質(zhì)量百分比為4%的CaCV溶液，pH值自 然或4。/。CaCl2-飽和硼酸溶液，pH值自然；
加固劑質(zhì)量百分配比為a.殼聚糖1.0y。水溶液，先用微量濃HC1溶解 后再加水定容，pH自然；b. 0. 6mol/L乙二胺水溶液，pH自然；或c. 4 。/。PVA水溶液，pH自然。
增殖培養(yǎng)過程為，將制備的固定化顆粒再無菌條件下按照20~25%的 質(zhì)量濃度加入增殖培養(yǎng)基中，控制溫度在28-3(TC,搖床轉(zhuǎn)速130rpm 150rpm,培養(yǎng)時(shí)間24h,之后更換培養(yǎng)基，共3次培養(yǎng)，備用。 細(xì)菌的菌體培養(yǎng)基為
基礎(chǔ)培養(yǎng)基牛肉膏O. 3%，蛋白胨1.0%, NaClO. 5%, 1.5~2. 0%瓊脂， pH 7.0-7.2;
種子培養(yǎng)基葡萄糖1.25%，牛肉膏O. 25%， NH萬O. 1%, MgS04 7H20 0. 02%， KC1 0. 02%, pH 7. 0~ 7, 2;
增殖培養(yǎng)基葡萄糖4.0°/。，酵母膏0.3°/。， KH2PO4 0. 05%, MgS04 7H20 0.025%,(冊4)2線0,2%， pH 7.0-7.2。
本發(fā)明具有如下優(yōu)點(diǎn)
1、通過優(yōu)化Na 'Alg凝膠液配方各組分的含量，并利用交聯(lián)和2次加 固等技術(shù)措施，制備的固定化顆粒微觀結(jié)構(gòu)均勻，制備的固定化顆粒為微 生物提供了更適合的微環(huán)境，與土著菌的竟?fàn)幜υ鰪?qiáng)，對(duì)環(huán)境中毒物的抗
性增加，可以在不良環(huán)境中仍然發(fā)揮高效降解菌對(duì)多環(huán)芳烴的降解作用；
孔隙率超過90%,提高了固定化效率擴(kuò)散傳質(zhì)性能優(yōu)異，為微生物提供了
良好的生活環(huán)境。
2、 通過向凝膠液中添加泥炭土、粉煤灰、紅磚粉等輔助材料，使得固
定化顆粒機(jī)械強(qiáng)度大為提高，最高可達(dá)44.23 kg/cm2,顆粒彈性優(yōu)良，傳 質(zhì)性提高，材料的保溫性能使得微生物在低溫仍能保持很好的活性。此外， 泥炭土主要組分是木質(zhì)素和纖維素，具有多孔結(jié)構(gòu)，為微生物提供優(yōu)良的 微環(huán)境，有利的屏蔽了外界土著菌的干擾，使固定化微生物很好的發(fā)揮對(duì) 多環(huán)芳烴降解作用，高分子量多環(huán)芳烴一般以共代謝的方式被降解，泥炭 土組分中的木質(zhì)素和纖維素還可為微生物提供初級(jí)共代謝底物，誘導(dǎo)微生 物產(chǎn)生降解多環(huán)芳烴所必需的酶類，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)高分子量多環(huán)芳烴的共代 謝降解。
3、 固定化顆粒對(duì)環(huán)境的耐性得到顯著增強(qiáng)，固定化細(xì)菌適應(yīng)更低的環(huán) 境溫度，在5 35'C范圍內(nèi)均能保持較好的活性，固定化細(xì)菌對(duì)pH變化呈 惰性，在pH二5 8范圍內(nèi)，固定化細(xì)菌的活性沒有發(fā)生明顯的改變。
4、 固定化顆粒中的Na -Alg不發(fā)生自溶解現(xiàn)象，連續(xù)使用365天增殖 再生后，細(xì)菌活性恢復(fù)原始狀態(tài)。
5、 該載體及其固定化工藝可用于芽孢桿菌屬(&ciJius sp.)、動(dòng)膠 桿菌屬(Zoog/oea sp.)、微球菌(Micrococcus sp.)等多菌種微生物的
固定化，具有一定的廣譜適用性。
6、 固定化細(xì)菌對(duì)受芘(PYR)或苯并[a]芘(BaP)等高分子量多環(huán)芳 烴污染土壤的修復(fù)中具有明顯的修復(fù)效果，在投粒比為8% ~20%、修復(fù)時(shí) 間為42d的條件下，土壤中PYR去除率最高可達(dá)50. 6%，而對(duì)BaP的去除率 為41. 3%,較游離菌提高20%。
7、 本發(fā)明所用載體材料價(jià)格便宜，成本低，來源廣泛，通氣性良好， 無毒，不會(huì)造成土壤的二次污染。
具體實(shí)施方案
下面通過實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn) 一 步詳細(xì)說明。 實(shí)施例1(比較例)
(1) 細(xì)菌斜面培養(yǎng)
在牛肉膏蛋白棟基礎(chǔ)培養(yǎng)基(O. 3°/。牛肉膏,1. 0%蛋白棟,0. 5%NaCl， 1. 5 ~ 2. 0%瓊脂，pH 7.0-7. 2)的試管中分別接入芽孢桿菌(5aciHus sp.)置 于28 ~ 3(TC培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48h。
(2) 細(xì)菌種子液制備
分別用接種環(huán)在斜面培養(yǎng)基上接取2環(huán)菌苔，接入到液體種子培養(yǎng)基 (葡萄糖1.25°/。，牛肉膏0. 25%, N跳O. 1%， MgS04 7H20 0. 02%， KC1 0. 02%， pH7.0 7.2)中，在搖床轉(zhuǎn)速130 rpm~150 rpm、 28 30。C條件下，培養(yǎng) 16~20小時(shí)，制得細(xì)菌種子液。
5 (3) 凝膠液制備
按照總質(zhì)量200g，稱取2%海藻酸鈉(Na Alg) , 1%明膠，以40g自 來水浸潤12 20h,定容后于IIO 。C下濕熱滅菌30min,冷卻到35 45'C， 備用。
(4) 交聯(lián)劑配制
按照總600g，稱取24gCaCh,溶于蒸餾水中，pH值自然，制得交聯(lián) 劑。
(5) 加固劑制備
按照總質(zhì)量600g,配置O. 6mol/L乙二胺水溶液，pH自然，制得加固劑。
(6) 固定化顆粒制備
按照20%的質(zhì)量百分比，量取40ml種子液，與200g凝膠液混合， 迅速攪拌5min，裝入出口直徑3. 00 mm的玻璃制粒器，通過真空抽吸控制 出f流滴速度為24滴/min，凝膠粒子滴入交聯(lián)劑，制粒結(jié)東后，繼續(xù)交聯(lián) 10—18 h,然后將粒子轉(zhuǎn)移至加固劑中，加固反應(yīng)23~25h，將粒子轉(zhuǎn)移到 加固劑中，再次加固24 h,最后用無菌水沖洗，浸泡24 h,制得固定化顆 粒。
經(jīng)上述步驟制得的固定化顆粒機(jī)械強(qiáng)度達(dá)到3.89 kg/cm2。
(7) 增殖培養(yǎng)
將固定化顆粒接入增殖培養(yǎng)基(葡萄糖4. 0%，酵母膏0. 3%，KH2PO4 0. 05%, MgS04 7H20 0.025%, (NH4) 2HP04 0.2%, pH 7.0—7.2)中，在搖床轉(zhuǎn)速130 rpm、 2rC條件下，培養(yǎng)24h,然后更換增殖培養(yǎng)基2次，每次重復(fù)增殖培 養(yǎng)步驟。
(8) 土壤修復(fù)效果
固定化顆粒投粒比10%,當(dāng)土壤中初始PYR/BaP濃度為50 mg/kg時(shí)， 修復(fù)42 d， PYR的去除率為40. 2%, BaP去除率為31. 8%。 實(shí)施例2 (比較例)
與實(shí)施例l不同之處之一在于交聯(lián)劑配制時(shí)，按照總600g，配4% CaCl「飽和硼酸水溶液，pH值自然。
不同處之二在于加固劑制備時(shí)，按照總質(zhì)量600g,配1.0%的殼聚 糖水溶液，先用微量濃HC1溶解后再加水定容，pH自然。
制得的固定化顆粒機(jī)械強(qiáng)度僅為1.00 kg/cm2，在制粒時(shí)，顆粒薄， 成粒不均勻，而且顆粒中含泡沬多。將制得的固定化顆粒在搖床上增殖培 養(yǎng)后，用于土壤中PAHs污染的修復(fù)，當(dāng)土壤中初始PYR/BaP濃度為50mg/kg 時(shí)，投粒比12%，修復(fù)42d, PYR的去除率為21. 1%, BaP去除率為12. 8%。
實(shí)施例3
與實(shí)施例1不同之處之一在于凝膠液配制時(shí)，按照總質(zhì)量200g,稱 取3%海藻酸鈉(Na . Alg),活性炭(150目)0. 3%,以40g自來水浸潤
12h,定容后于110 X:下濕熱滅菌30min，冷卻到35°C。
與實(shí)施例1不同處之二在于加固劑配制時(shí)，按照總質(zhì)量600g,配4 。/。PVA水溶液，pH自然。
與實(shí)施例1不同處之三在于固定化顆粒制備時(shí)，種子液與凝膠液混 合，迅速攪拌5min，裝入出口直徑l.OO mm的坡璃制粒器，通過真空抽吸 控制出口流滴速度為20滴/min
按照以上步驟制得的固定化顆粒機(jī)械強(qiáng)度達(dá)到22.12 kg/cnA。在搖 床上增殖培養(yǎng)后，用于土壤中PAHs污染的修復(fù)，當(dāng)土壤中初始PYR/BaP濃 度為50mg/kg時(shí)，投粒比10%,修復(fù)42d， PYR的去除率為42. 1 % ， BaP去 除率為36. 7%。
實(shí)施例4
與實(shí)施例1不同處之一在于凝膠液配制時(shí)，按照總質(zhì)量200g,稱取 2。/。海藻酸鈉(Na -Alg)，紅磚粉(150目)0. 6 % ,以40g自來水浸潤12h， 定容后于IIO 。C下濕熱滅菌30min,冷卻到45°C。
與實(shí)施例l不同處之二在于加固劑配制時(shí)，按照總質(zhì)量600g,配4 。/。PVA水溶液，pH自然，加固24h。
與實(shí)施例1不同處之三在于固定化顆粒制備時(shí)，用無菌水中沖洗后 在無菌水中浸泡24h,制得固定化顆粒，不需要2次加固。
按照以上步驟制得的固定化顆粒機(jī)械強(qiáng)度達(dá)到30.96 kg/cm2。在搖床 上增殖培養(yǎng)后，用于土壤中PAHs污染的修復(fù)，當(dāng)土壤中初始PYR/BaP濃度 為50mg/kg時(shí)，投粒比10%,修復(fù)42d， PYR的去除率為45. 3%， BaP去除 率為38. 1%。
實(shí)施例5
與實(shí)施例1不同處之一在于凝膠液配制時(shí)，按照總質(zhì)量200g,稱取 2%海藻酸鈉(Na .Alg)，泥炭土 ( 150目)0.4%，以40g自來水浸潤12h， 定容后于IIO 。C下濕熱滅菌30min,冷卻到35°C。
與實(shí)施例l不同處之二在于固定化顆粒制備時(shí)，種子液與凝膠液混 合，迅速攪拌5min,裝入出口直徑4.00 mm的玻璃制粒器，通過真空抽吸 控制出口流滴速度為30滴/min
按照以上步驟制得的固定化顆粒機(jī)械強(qiáng)度達(dá)到22.99 kg/cm2。在搖床 上增殖培養(yǎng)后，用于土壤中PAHs污染的修復(fù)，當(dāng)土壤中初始PYR/BaP濃度 為50mg/kg時(shí)，投粒比10%，修復(fù)42d, PYR的去除率為49. 6%， BaP去除 率為41.3%。而且在4匸冰箱中經(jīng)過365d的保存后，增殖培養(yǎng)后的固定化 粒子活性保持為85%以上。
實(shí)施例6
與實(shí)施例l不同處之一在于凝膠液配制時(shí)，按照總質(zhì)量200g，稱取 2%海藻酸鈉(Na -Alg),粉煤灰(150目)0. 3%,以40g自來水浸潤12h, 定容后于IIO 。C下濕熱滅菌30min,冷卻到38。C。與實(shí)施例1不同處之二在于加固劑配制時(shí)，按照總質(zhì)量600g,配4 y。PVA水溶液，pH自然，加固40min后。
與實(shí)施例1不同處之三在于固定化顆粒制備時(shí)，用無菌水中沖洗后 在無菌水中浸泡24h，制得固定化顆粒，不需要二次加固。
按照以上步驟制得的固定化顆粒機(jī)械強(qiáng)度達(dá)到4《23kg/cm2,制粒時(shí)， 顆粒下滴有力，分散好，顆粒均勻。將制得的固定化顆粒在搖床上增殖培 養(yǎng)后，用于土壤中PAHs污染的修復(fù)，當(dāng)土壤中初始PYR/BaP濃度為50mg/kg 時(shí)，投粒比10%，修復(fù)42d， PYR的去除率為54. 1%, BaP去除率為45. 8 /。。
實(shí)施例7
與實(shí)施例l不同處之一在于凝膠液配制時(shí)，按照總質(zhì)量200g,稱取 2%海藻酸鈉(Na -Alg)，粉煤灰(150目)0. 6 % ，以40g自來水浸潤20h, 定容后于IIO r下濕熱滅菌30min,冷卻到4(TC。
與實(shí)施例1不同處之二在于加固劑配制時(shí)，按照總質(zhì)量600g，配4 "/oPVA水溶液，pH自然，加固24h后。
與實(shí)施例l不同處之三在于固定化顆粒制備時(shí)，種子液與凝膠液混 合，迅速攪拌5min，裝入出口直徑2. 00 mm的玻璃制粒器，通過真空抽吸 控制出口流滴速度為24滴/min
按照以上步驟制得的固定化顆粒機(jī)械強(qiáng)度達(dá)到43. 34 kg/cm2,制粒時(shí)， 顆粒下滴有力，分散好，顆粒均勻。將制得的固定化顆粒在搖床上增殖培 養(yǎng)后，用于土壤中PAHs污染的修復(fù)，當(dāng)土壤中初始PYR/BaP濃度為50mg/kg 時(shí)，投粒比1.0°/。，修復(fù)42d, PYR的去除率為50. 6%， BaP去除率為41. 3%。
實(shí)施例8
與實(shí)施例7不同處在于細(xì)菌斜面培養(yǎng)制備時(shí)，在牛肉膏蛋白棟基礎(chǔ)培 養(yǎng)基(O. 3%牛肉膏,1.0%蛋白棟，0. 5%NaCl, 1.5-2. 0%瓊脂，pH 7. 0 ~ 7. 2 ) 的試管中分別接入動(dòng)膠桿菌(Zoog7oea sp.)、微球菌(M/crWacterf咖sp.) 置于28 ~ 30"C培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48h。
按照以上步驟制得的固定化顆粒機(jī)械強(qiáng)度達(dá)到42.13kg/cm2,將制得 的固定化顆粒在搖床上增殖培養(yǎng)后，用于土壤中PAHs污染的修復(fù)，當(dāng)土壤 中初始PYR/BaP濃度為50mg/kg時(shí)，投粒比10%,修復(fù)42d,動(dòng)膠桿菌 (Zoogioea sp.)對(duì)PYR的去除率為31.4%,對(duì)BaP去除率為21.9%;微 球菌(邊'crobacteri咖sp.)對(duì)PYR的去除率為30.7%,對(duì)BaP去除率為 25.7%。而且在4'C冰箱中經(jīng)過365d的保存后，增殖培養(yǎng)后的固定化粒子活 性保持均在85%以上。
權(quán)利要求
1.一種微生物固定化包埋顆粒的制備方法，其特征在于按照重量5-20％的比例將培養(yǎng)12～14h的種子液與凝膠液混勻，在25-40℃和pH自然條件下，通過直徑為1-4.00mm的制粒器，按照20～30滴/min的流滴速度制得固定化顆粒，顆粒經(jīng)10～18h化學(xué)交聯(lián)，然后在固定劑中靜置加固23～58h，最后以無菌水浸泡24-72h，沖洗凈殘留藥液后，增殖培養(yǎng)，備用；凝膠液質(zhì)量百分配比為海藻酸鈉(Na·Alg)2～3％，(150目)活性炭、紅磚粉、泥炭土和/或粉煤灰0.3～0.6％，余量為水。
2. 按照權(quán)利要求l所述的制備方法，其特征在于 凝膠液配制過程為以所需自來水重量的20%浸潤Na 'Alg凝膠劑12 ~20h, 100-ll(TC高溫加熱，完全溶解后冷卻到35~45°C，再向凝膠液中添 加定量輔助載體，定容，使用前于IIO t:下濕熱滅菌30min，冷卻到35-45°C，備用。
3. 按照權(quán)利要求l所述的制備方法，其特征在于所述交聯(lián)劑質(zhì)量百 分配比為2 4。/。CaCl2溶液，pH值自然或2 ~ 4 %CaCl2 ~飽和硼酸溶液， pH值自然;加固劑質(zhì)量百分配比為a.殼聚糖l. 0%水溶液，先用濃HC1溶解后再 加水定容，pH自然；b. 0. 6mol/L乙二胺水溶液，pH自然；或c. 4%PVA 水溶液，pH自然。
4. 按照權(quán)利要求l所述的制備方法，其特征在于增殖培養(yǎng)過程為， 將制備的固定化顆粒再無菌條件下按照20 ~ 25 %的質(zhì)量濃度加入增殖培養(yǎng) 基中，控制溫度在28~30°C,搖床轉(zhuǎn)速130rpm 150rpm,培養(yǎng)時(shí)間24h, 之后更換培養(yǎng)基，共3次培養(yǎng)，備用。
5. 按照權(quán)利要求l所述的制備方法，其特征在于細(xì)菌的菌體培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基牛肉膏O. 3%，蛋白胨1.0%, NaClO. 5%， 1.5~2. 0%瓊脂， pH 7. 0 ~ 7. 2;種子培養(yǎng)基葡萄糖l. 25%，牛肉膏O. 25%, NH4N03 0. 1%， MgS04 7H20 0. 02%, K(U 0. 02%, pH 7. 0~ 7. 2;增殖培養(yǎng)基葡萄糖4.0%,酵母膏0.3%, KH2PO4 0. 05%, MgS04 7H.,0 0.025%， (NH4)2HP04 0.2%， pH 7.0-7.2。
全文摘要
本發(fā)明涉及微生物固定化技術(shù)，具體的說是一種用于多環(huán)芳烴(PAHs)污染土壤修復(fù)的固定化顆粒制備方法，按照重量5-20％的比例將培養(yǎng)12～14h的種子液與凝膠液混勻，在25-40℃和pH自然條件下，通過直徑為1-4.00mm的制粒器，按照20～30滴/min的流滴速度制得固定化顆粒，顆粒經(jīng)10～18h化學(xué)交聯(lián)，然后在固定劑中靜置加固23～58h，最后以無菌水浸泡24-72h，沖洗凈殘留藥液后，增殖培養(yǎng)，備用；凝膠液質(zhì)量百分配比為海藻酸鈉(Na·Alg)2～3％，(150目)活性炭、紅磚粉、泥炭土和/或粉煤灰0.3～0.6％，余量為水。本發(fā)明可使固定化顆粒的機(jī)械強(qiáng)度、彈性和緩釋性能大大提高。
文檔編號(hào)C12N11/00GK101177677SQ20061013420
公開日2008年5月14日 申請日期2006年11月8日 優(yōu)先權(quán)日2006年11月8日
發(fā)明者李培軍, 丹 蘇, 鞠京麗 申請人:中國科學(xué)院沈陽應(yīng)用生態(tài)研究所