專利名稱：人工無性繁殖被毛孢專用多元培養(yǎng)基及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種生物真菌培養(yǎng)基及其制備方法，特別涉及一種 人工無性繁殖被毛孢專用多元培養(yǎng)基及其制備方法。
背景技術(shù)：
天然冬蟲夏草生長所需的營養(yǎng)主要來源于蝙蝠蛾幼蟲，被毛孢 主要依靠分解、吸收蝙蝠蛾幼蟲的蛋白質(zhì)分裂生長，它不需要光合作用。人工 繁殖蝙蝠蛾幼蟲作被毛孢培養(yǎng)基是一種成熟的技術(shù)，但由于蝙蝠蛾幼蟲生長期太長， 一般需3 4年才有使用價值，因此這種做法并不足取。另一方面，大齡 蟲由于存在互相殘咬致死的問題，不能實現(xiàn)高密度飼養(yǎng)?；谝陨蟽蓚€原因， 用人工繁殖蝙蝠蛾幼蟲作被毛孢培養(yǎng)基成本太高，產(chǎn)業(yè)上難于實現(xiàn)。有人提出用其他昆蟲蛋白代替蝙蝠蛾幼蟲作被毛孢培養(yǎng)基，比如用蠶蛹作 被毛孢培養(yǎng)基，雖然具有快速、經(jīng)濟(jì)的優(yōu)勢，但由于每一物種蛋白質(zhì)構(gòu)成各不 相同，盡管原因尚不明晰，實踐證明這種方法并不能滿足被毛孢快速生長的需 求。發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于克服上述已有培養(yǎng)基的不足，而提供一種人 工無性繁殖被毛孢專用多元培養(yǎng)基，并提供其制備方法，所要解決的技術(shù)問題 是通過將昆蟲蛋白、動物蛋白、海洋生物蛋白和植物蛋白按照特定比例組合 在一起，形成多元培養(yǎng)基，并通過獨特的加工方法，制備出適合被毛孢快速生 長的優(yōu)質(zhì)低成本培養(yǎng)基。為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用了以下技術(shù)方案一種人工無性繁殖被毛孢專用多元培養(yǎng)基，其特征在于每100kg培養(yǎng)基中 含有蠶蛹7 9kg，去殼去皮扇貝肉3 5kg，新鮮牛肉1.5 2.5kg，新鮮牛骨4 6kg，花生米0.4 0.6kg，鮮牛奶4 6kg，大豆蛋白胨0.8 1.2kg，瓊脂1.0 1.4kg，磷酸二氫鉀40 60g，硫酸鎂15 25g，余量為水。優(yōu)選的配方是每100kg培養(yǎng)基中含有蠶蛹8kg，去殼去皮扇貝肉4kg，新 鮮牛肉2kg，新鮮牛骨5kg，花生米0.5kg，鮮牛奶5kg，大豆蛋白胨lkg，瓊脂 L2kg，磷酸二氫鉀50g，硫酸鎂20g，余量為水。一種人工無性繁殖被毛孢專用多元培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于按照制備100kg培養(yǎng)基，(1) 、將去殼去皮扇貝肉用清水浸泡36 60小時，再換水6次以上脫鹽， 最后磨制成漿，作A組分；(2) 、將花生米用水浸泡8 12小時，然后磨漿制成B組分；(3) 、新鮮牛肉磨漿制成C組分；(4) 、蠶蛹磨漿、去皮制成D組分；(5) 、將A、 B、 C、 D組分混合，加水補充到75 85kg，煮開，文火熬制 20 40分鐘，沉淀、濾除渣子，制成E組分；(6) 、將新鮮牛骨用高壓鍋煮開后熬制20 40分鐘，沉淀、濾除渣子，制 成F組分；(7) 、將E組分和F組分混勻，加入鮮牛奶，大豆蛋白胨，瓊脂，磷酸二 氫鉀，硫酸鎂，并加入剩余的水， 一并熬開，裝瓶，滅菌，冷卻備接種用，其 中滅菌溫度110 12rC，滅菌時間25 30分鐘。其中，作為海洋生物蛋白的扇貝肉作用尤其突出，如果采用其他蛋白代替， 將無法實現(xiàn)本發(fā)明的目的。另外，各種組分的配比也是本發(fā)明的關(guān)鍵，是經(jīng)過 多年實驗得到的數(shù)據(jù)。制備方法中的工藝步驟，工藝條件也是本發(fā)明的關(guān)鍵技
術(shù)，也是經(jīng)過多年探索積累尋找到的，如果有所變動，將直接影響培養(yǎng)基的使 用性能。牛骨的用量比例較常規(guī)高，這是多年研究、試驗發(fā)現(xiàn)的，采用本比例 明顯促進(jìn)被毛孢組織細(xì)胞的分裂生長，這也是本發(fā)明的關(guān)鍵點。本發(fā)明的積極效果在于(1)、多年實踐證明，本發(fā)明的培養(yǎng)基能夠滿足被 毛孢細(xì)胞快速分裂生長所需的必要氨基酸和其他營養(yǎng)元素。每100ml培養(yǎng)基可可生產(chǎn)5g被毛孢菌體。(2)、采用本發(fā)明的制備方法，保證了制得培養(yǎng)基為可 被直接吸收的小分子溶液，縮短了酶分解時間，提高了被毛孢生長速度。(3)、 培養(yǎng)基的生產(chǎn)周期短，制造成本低，經(jīng)濟(jì)性好，適合產(chǎn)業(yè)化大面積推廣利用。
具體實施方式
下面結(jié)合實施例進(jìn)一步說明本發(fā)明。實施例一按照制備100kg培養(yǎng)基，(1) 、將去殼去皮扇貝肉4kg用清水浸泡48小時，再換水6次以上脫鹽， 最后磨制成漿，作A組分；(2) 、將花生米0.5kg用水浸泡IO小時，然后磨槳制成B組分；(3) 、新鮮牛肉2kg磨漿制成C組分；(4) 、蠶蛹8kg磨漿、去皮制成D組分；(5) 、將A、 B、 C、 D組分混合，加水補充到80kg，煮開，文火熬制30分 鐘，沉淀、濾除渣子，制成E組分；(6) 、將新鮮牛骨5kg用高壓鍋煮開后熬制30分鐘，沉淀、濾除渣子，制 成F組分；(7) 、將E組分和F組分混勻，加入鮮牛奶5kg，大豆蛋白胨lkg，瓊脂1.2kg， 磷酸二氫鉀50g，硫酸鎂20g，并加水補充到100kg， 一并熬開，裝瓶，滅菌， 冷卻備接種用，其中滅菌溫度115'C，滅菌時間30分鐘。
實施例二按照制備100kg培養(yǎng)基，(1) 、將去殼去皮扇貝肉3kg用清水浸泡36小時，再換水6次以上脫鹽，最后磨制成漿，作A組分；(2) 、將花生米0.6kg用水浸泡8小時，然后磨漿制成B組分；(3) 、新鮮牛肉1.5kg磨漿制成C組分；(4) 、蠶蛹9kg磨漿、去皮制成D組分；(5) 、將A、 B、 C、 D組分混合，加水補充到85kg，煮開，文火熬制20分 鐘，沉淀、濾除渣子，制成E組分；(6) 、將新鮮牛骨4kg用高壓鍋煮開后熬制20分鐘，沉淀、濾除渣子，制 成F組分；(7) 、將E組分和F組分混勻，加入鮮牛奶6kg，大豆蛋白胨0.8kg，瓊脂 1.4kg，磷酸二氫鉀40g,硫酸鎂15g，并加水補充到100kg， 一并熬開，裝瓶， 滅菌，冷卻備接種用，其中滅菌溫度11(TC，滅菌時間30分鐘。實施例三按照制備100kg培養(yǎng)基，(1) 、將去殼去皮扇貝肉5kg用清水浸泡60小時，再換水6次以上脫鹽， 最后磨制成漿，作A組分；(2) 、將花生米0.4kg用水浸泡12小時，然后磨漿制成B組分；(3) 、新鮮牛肉2.5kg磨漿制成C組分；(4) 、蠶蛹7kg磨漿、去皮制成D組分；(5) 、將A、 B、 C、 D組分混合，加水補充到75kg，煮開，文火熬制40分 鐘，沉淀、濾除渣子，制成E組分；(6) 、將新鮮牛骨6kg用高壓鍋煮開后熬制40分鐘，沉淀、濾除渣子，制 成F組分；(7) 、將E組分和F組分混勻，加入鮮牛奶4kg，大豆蛋白胨1.2kg，瓊脂 l.Okg，磷酸二氫鉀60g，硫酸鎂25g，并加水補充到100kg， 一并熬開，裝瓶， 滅菌，冷卻備接種用，其中滅菌溫度12rC，滅菌時間25分鐘。所用的水要求是純凈水，所用各種原料必須保證新鮮，無變質(zhì)跡象。另外， 活蛹優(yōu)于抽絲后的死蛹，死蛹優(yōu)于干蛹。所制備的培養(yǎng)基PH值在5.5 6.5之間。 夏季配制的營養(yǎng)液放置時間一般不能超過6小時。
權(quán)利要求
1、一種人工無性繁殖被毛孢專用多元培養(yǎng)基，其特征在于每100kg培養(yǎng)基中含有蠶蛹7～9kg，去殼去皮扇貝肉3～5kg，新鮮牛肉1.5～2.5kg，新鮮牛骨4～6kg，花生米0.4～0.6kg，鮮牛奶4～6kg，大豆蛋白胨0.8～1.2kg，瓊脂1.0～1.4kg，磷酸二氫鉀40～60g，硫酸鎂15～25g，余量為水。
2、 如權(quán)利要求1所述的人工無性繁殖被毛孢專用多元培養(yǎng)基，其特征在于: 每100kg培養(yǎng)基中含有蠶蛹8kg，去殼去皮扇貝肉4kg，新鮮牛肉2kg，新鮮牛 骨5kg，花生米0.5kg，鮮牛奶5kg，大豆蛋白胨lkg，瓊脂1.2kg，磷酸二氫鉀 50g，硫酸鎂20g，余量為水。
3、 如權(quán)利要求1或2所述的人工無性繁殖被毛孢專用多元培養(yǎng)基的制備方 法，其特征在于按照制備100kg培養(yǎng)基，(1) 、將去殼去皮扇貝肉用清水浸泡36 60小時，再換水6次以上脫鹽， 最后磨制成漿，作A組分；(2) 、將花生米用水浸泡8 12小時，然后磨槳制成B組分；(3) 、新鮮牛肉磨漿制成C組分；(4) 、蠶蛹磨漿、去皮制成D組分；(5) 、將A、 B、 C、 D組分混合，加水補充到75 85kg，煮開，文火熬制 20 40分鐘，沉淀、濾除渣子，制成E組分；(6) 、將新鮮牛骨用高壓鍋煮開后熬制20 40分鐘，沉淀、濾除渣子，制 成F組分；(7) 、將E組分和F組分混勻，加入鮮牛奶，大豆蛋白胨，瓊脂，磷酸二氫鉀，硫酸鎂，并加入剩余的水， 一并熬開，裝瓶，滅菌，冷卻備接種用，其 中滅菌溫度110 121°C，滅菌時間25 30分鐘。
全文摘要
本發(fā)明是一種人工無性繁殖被毛孢專用多元培養(yǎng)基及其制備方法，每100kg培養(yǎng)基中含有蠶蛹7～9kg，去殼去皮扇貝肉3～5kg，新鮮牛肉1.5～2.5kg，新鮮牛骨4～6kg，花生米0.4～0.6kg，鮮牛奶4～6kg，大豆蛋白胨0.8～1.2kg，瓊脂1.0～1.4kg，磷酸二氫鉀40～60g，硫酸鎂15～25g，余量為水。本發(fā)明的培養(yǎng)基能夠滿足被毛孢細(xì)胞快速分裂生長所需的必要氨基酸和其他營養(yǎng)元素。每100ml培養(yǎng)基可可生產(chǎn)5g被毛孢菌體。
文檔編號C12N1/14GK101126068SQ20071001681
公開日2008年2月20日 申請日期2007年7月5日 優(yōu)先權(quán)日2007年7月5日
發(fā)明者姜善清 申請人:姜善清