專利名稱：：用于輔助平板點樣、影印與計數(shù)的裝置的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明屬于微生物領(lǐng)域，涉及平板點樣、平板影印與平板計數(shù)的裝置。
背景技術(shù)：
：在微生物實驗中，經(jīng)常會遇到平板點樣、影印和菌落計數(shù)的問題。借助經(jīng)典的模格裝置，如圖1所示，在一個平板上最多可以點52個菌落。對于保存菌種或少量細菌檢測而言，該方法具有良好的效果，操作也非常簡單。但是，當需要檢測大量菌落或需要保存較多菌株時，這種點樣方法就不能滿足要求。另外，進行細菌檢測(如原位雜交、營養(yǎng)缺陷型菌株篩選等)和保存菌株所要求的平板點樣量是不同的，目前還沒有一種裝置可以同時滿足上述要恭另一方面，在平板菌落計數(shù)時，對于較低的稀釋倍數(shù)，8.5厘米的平板上可能會產(chǎn)生800-1000個菌落，有時甚至超過1000個。因為菌落間距小，非常密集，需要劃線分區(qū)計數(shù)。但是，當有多個平板需要計數(shù)時劃線分區(qū)方法就顯得操作繁瑣。目前尚未發(fā)現(xiàn)具有該種功能的可用模格裝置。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明提供了一種用于輔助平板點樣、影印與計數(shù)的裝置，是與現(xiàn)有技術(shù)有著本質(zhì)區(qū)別的綜合性裝置，能同時滿足微生物實驗中關(guān)于平板點樣、影印與計數(shù)的要求，可分別用于平板點樣、平板影印和菌落計數(shù)，并且點樣菌落數(shù)可以根據(jù)需要調(diào)整。本發(fā)明所述的一種用于輔助平板點樣、影印與計數(shù)的裝置，包括透明的薄片，該薄片內(nèi)凸出一個圓形模格部分，其直徑比培養(yǎng)皿的直徑略??；所述薄片通過圓形模格部分粘附或者吸附在培養(yǎng)皿的底部；通過兩條相互垂直的穿過圓心的粗線將所述圓形模格部分限定為四個大扇形區(qū)域，通過縱橫交錯的單線將所述圓形模格部分限定為大小為1.5mmxl.5mm至3.5mmx3.5mm的小格，每四個鄰近的小格通過縱橫交錯的雙線限定為一個中格。進一步地，所述圓形模格部分的兩個不相鄰的扇形區(qū)域，通過一條與粗線成45度角且穿過圓心的細斜線限定為四個小扇形區(qū)域。本發(fā)明還提供了另一種基于同樣原理設計的用于輔助平板點樣、影印與計數(shù)的裝置。本發(fā)明所述的一種用于輔助平板點樣、影印與計數(shù)的裝置，包括透明的第一薄片，其內(nèi)凸出第一圓形模格部分，通過兩條相互垂直的穿過圓心的粗線將所述第一圓形模格部分限定為四個大扇形區(qū)域；透明的第二薄片，其內(nèi)凸出第二圓形模格部分，通過縱橫交錯的單線將所述第二圓形模格部分限定為大小為1.5mmxl.5mm至3.5mmx3.5mm的小格；透明的第三薄片，其內(nèi)凸出第三圓形模格部分，通過縱橫交錯的雙線將所述第三圓形模格部分限定為一個中格，該中格的大小相當于四個相鄰的所述小格的大??；所述第一、第二與第三圓形模格部分的圓心重疊；所述第一、第二與第三圓形模格部分的直徑比培養(yǎng)皿的直徑略??；所述第一、第二和/或第三薄片分別通過第一、第二和/或第三圓形模格部分單獨或者按任意順序疊加粘附或者吸附在培養(yǎng)皿的底部。進--步地，本發(fā)明所述的用于輔助平板點樣、影印與計數(shù)的裝置，還包括透明的第四薄片，其內(nèi)凸出第四圓形模格部分，通過一條穿過圓心的細斜線限定為兩個半圓區(qū)域；所述圓形模格部分的圓心與所述第一、第二、第三圓形模格部分的圓心重疊；所述第四圓形模格部分的直徑比培養(yǎng)皿的直徑略??；所述第四薄片單獨或者與第一、第二、第三薄片按任意順序疊加粘附在平板培養(yǎng)皿的底部。本發(fā)明所述的用于輔助平板點樣、影印與計數(shù)的裝置，當用于輔助平板點樣、影印時，具有以下優(yōu)點1)點樣量可以根據(jù)需要進行調(diào)整；2)不需要在平板上做任何標記，即可進行平板影??；3)尋找目標菌落極為簡單，杜絕了找錯的可能；4)在邊緣不完整的小格點樣不會影響細菌生長。本發(fā)明所述的用于輔助平板點樣、影印與計數(shù)的裝置，當用于輔助平板計數(shù)時，具有以下優(yōu)點1)操作簡單；2)還可以進行抽樣計數(shù)。此外，本發(fā)明所述的裝置在設計時已經(jīng)綜合考慮并平衡解決了樣品最大容納量和樣品間距的問題。在實際操作中，由于平板點樣、平板影印和菌落計數(shù)是微生物實驗中經(jīng)常用到的方法，本發(fā)明所述裝置的應用前景非常廣闊。圖1為經(jīng)典的點樣模格圖，圖中顯示只能容納菌落52個，對于大量點樣要求顯得容量太小。圖2為本發(fā)明所述的用于輔助平板點樣、影印與計數(shù)的裝置的結(jié)構(gòu)示意圖。圖3為圖2的A向側(cè)視圖。圖4為本發(fā)明所述裝置的圓形模格部分。圖5為本發(fā)明所述裝置的第二個實施例的結(jié)構(gòu)示意圖。圖6為圖5的B向側(cè)視圖。圖7為用本發(fā)明所述的模格裝置獲得的點樣效果圖，圖中顯示菌落排列整齊，細菌相互間無接觸。圖8為用本發(fā)明所述的模格裝置獲得的平板影印結(jié)果圖，圖中顯示盡管菌落由于受壓變得有些扁平，菌落間仍然未有明顯接觸。具體實施例方式實施例一用于輔助平板點樣、影印與計數(shù)的裝置的制作本發(fā)明所述的一種用于輔助平板點樣、影印與計數(shù)的裝置，如圖2和圖3所示，包括透明的薄片1，該薄片1內(nèi)凸出一個圓形模格部分3，其直徑比培養(yǎng)皿2的直徑略小(例如，小0.5-1.5mm);所述薄片1通過圓形模格部分3粘附或者吸附在培養(yǎng)皿2的底部。如圖4所示，通過兩條相互垂直的穿過圓心的粗線將所述圓形模格部分限定為四個大扇形區(qū)域，通過縱橫交錯的單線將所述圓形模格部分限定為大小為1.5mmxl.5mm至3.5mmx3.5mm的小格，每四個鄰近的小格通過縱橫交錯的雙線限定為一個中格。所述圓形模格部分的兩個不相鄰的扇形區(qū)域，通過一條與粗線成45度角且穿過圓心的細斜線限定為四個小扇形區(qū)域。本實施例中，可按表1所列方式限定所述圓形模格部分。<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>該模格由直徑8.23厘米的圓周界定范圍，背景部分由行和列交叉組成，包含大小為3.2mmx3.2mm的小格，共計約448個，可以用于密集點樣；4個鄰近的小格組成一個中格，共計約112個中格，彼此之間由雙線分開，可以用作保種點樣。由2條相垂直的直徑將該區(qū)域限定為A、B、C和D4個區(qū)，字母分別標記在各區(qū)的扇角位置。直徑以小格為標準標記刻度，通過該刻度可以確定4個區(qū)中的任何一個點。需要說明的是本實施例中設定的小格的大小為3.2mmx3.2mm，實際應用中根據(jù)培養(yǎng)皿的規(guī)格以及菌落的密度，可以在1.5mmxl.5mm至3.5mmx3.5mm之間進行調(diào)整，并已經(jīng)過實驗驗證。本實施例所述的裝置用作點樣模格工具時，既可以用于密集點樣(448菌落/平板)也可以用作保種點樣(112菌落/平板)；用作平板計數(shù)工具時，可以用于菌落抽樣計數(shù)和分區(qū)計數(shù)。如圖4所示，A區(qū)和C區(qū)內(nèi)各分布有5個計數(shù)位置(圖中打點的區(qū)域)，用于菌落數(shù)量較高時的抽樣計數(shù)。A區(qū)計數(shù)，C區(qū)用作重復。B區(qū)和D區(qū)各由一條細線分為B1、B2和D1、D2兩部分(各為1/8平板面積)，用于菌落數(shù)量較高的分區(qū)計數(shù)。B1或B2作為計數(shù)區(qū)，對應的D1或D2作為重復。如果菌落數(shù)較低，則可以同時計數(shù)B1和B2區(qū)(即整個B區(qū))，合計為1/4平板面積，同時計數(shù)D區(qū)作重復。實施例二用于輔助平板點樣、影印與計數(shù)的裝置的制作本實施例是對實施例一的同一構(gòu)思下的另一產(chǎn)品。如圖5和圖6所示，包括透明的第一薄片10，其內(nèi)凸出第一圓形模格部分11，通過兩條相互垂直的穿過圓心的粗線將所述第一圓形模格部分限定為四個大扇形區(qū)域；透明的第二薄片20，其內(nèi)凸出第二圓形模格部分21，通過縱橫交錯的單線將所述第二圓形模格部分限定為大小為1.5mmx1.5mm至3.5mmx3.5mm的小格；透明的第三薄片30，其內(nèi)凸出第三圓形模格部分31，通過縱橫交錯的雙線將所述第三圓形模格部分限定為一個中格，該中格的大小相當于四個相鄰的所述小格的大小。圖4中還包括透明的第四薄片40，其內(nèi)凸出第四圓形模格部分41，通過一條穿過圓心的細斜線限定為兩個半圓區(qū)域。所述第一圓形模格部分11、第二圓形模格部分21、第三圓形模格部分31、第四圓形模格部分41的圓心重疊；所述第一圓形模格部分11、第二圓形模格部分21、第三圓形模格部分31、第四圓形模格部分41的直徑比培養(yǎng)皿50的直徑略小(例如，小0.5-1.5mm);所述第一薄片10、第二薄片20、第三薄片30、第四薄片40分別通過第一圓形模格部分11、第二圓形模格部分21、第三圓形模格部分31、第四圓形模格部分41疊加粘附或者吸附在平板培養(yǎng)皿50的底部。如圖6所示的圓形模格部分的疊加效果如圖4所示。需要說明的是，圖5和圖6所示的本實施例的薄片疊放順序只是一種方案，各層薄片通過各自的圓形模格部分可以按任意順序進行疊加粘附或者吸附在平板培養(yǎng)皿50的底部，組合出不同的使用效果，也可以將各薄片通過各自的圓形模格部分單獨粘附或者吸附在平板培養(yǎng)皿50的底部，以獨立使用。上述實施例中所述的裝置可以用于輔助平板點樣、影印與計數(shù)。當用于輔助平板點樣、影印時，所述的裝置具有以下優(yōu)點1)點樣量可以根據(jù)需要進行調(diào)整。如果要求點樣量較大，可以在每個小格內(nèi)點樣，一個直徑8.5厘米的平板可以容納448個菌落而不顯密集，并且相互間無接觸；如果點樣量不大，則可以考慮小格間隔點樣，即相當于中格內(nèi)對角的2個小格點樣，直徑8.5厘米的平板可以容納224個菌落；如果點樣量還低一些，則考慮用中格點樣，可以容納120個菌落。在做菌落篩選的過程中，按照最大點樣量進行點樣以用于后續(xù)檢測。結(jié)果如圖7所示，用該模格獲得的點樣效果很好，菌落排列整齊，細菌相互間無接觸。如此的菌落排布，既可以使有限的平板空間容納更大量的樣品，方便后續(xù)工作的開展；同時由于有設定的坐標，因此尋找目的菌落變得極為簡單和準確。并且如圖8所示，平板影印時盡管菌落由于受壓變得有些扁平，菌落間仍然未有明顯接觸，表明按照該模格點樣后的菌落間有足夠的空隙。2)不需要在平板上做任何標記，即可進行平板影印。在進行平板影印時，需要在平板底部進行標記，以便區(qū)分方向。如果遺忘了標記，有可能尋找到錯誤的目標菌落。在該方法中，通過A、B、C和D四個分區(qū)已經(jīng)很好的為平板影印方向進行了定位。不需要再進行任何其他標記。3)尋找目標菌落極為簡單，杜絕了找錯的可能。由于每個分區(qū)都有以小格為單位的刻度，定位任何一個點只需要確定其縱坐標和橫坐標即可。例如，在影印平板上有我們感興趣的一個菌落，其坐標為A區(qū)6X6位置，則在母板上6X6位置的菌落就是目標菌落。4)在邊緣不完整的小格點樣不會影響細菌生長。培養(yǎng)皿底蓋的直徑通常在8.5厘米左右，該模格的直徑為8.23厘米，距離平板邊緣尚有0.27厘米間隙。因此即使點樣到達該模格圓周邊界，仍然不會影響菌落生長。在平板計數(shù)過程中，如果菌落數(shù)稍高一些(例如800~1000個/平板)，就無法簡單計數(shù)。此時現(xiàn)有技術(shù)需要在平板背面劃線分區(qū)，然后計數(shù)某個小區(qū)的菌落數(shù)，求得總菌數(shù)。在劃線過程中，通常需要尋找平板圓心，穿過圓心畫2條垂直線將平板分成4個區(qū)，然后再將某個區(qū)分成2部分計數(shù)。傳統(tǒng)方法存在如下問題1)某個區(qū)的限定線理論上是45度夾角延伸，實際上不容易操作，可能導致一邊偏大或偏?。?)穿過圓心的2條線不一定垂直，造成4個區(qū)大小不一；3)如果同時計數(shù)大量平板，對每個平板劃線無疑是相當繁瑣的事情。本發(fā)明所述的裝置當用于輔助平板計數(shù)時，具有以下優(yōu)點1)操作簡單。該裝置只需簡單地附在平板底部即可使用，也可以重復使用，由于直接形成了1/4分區(qū)和1/8分區(qū)，就可以選擇計數(shù)1/4分區(qū)或1/8分區(qū)。2)該模格還可以進行抽樣計數(shù)。本實施例在A區(qū)和D區(qū)分布有5個抽樣計數(shù)格(中間打點的格)，如果菌落分布不均，分區(qū)計數(shù)出現(xiàn)較大變化時，可以采用抽樣計數(shù)方法。通過計數(shù)某個分區(qū)的5個計數(shù)格，求得單格的菌落數(shù)，估算出某個分區(qū)的菌落數(shù)，進而得到整個平板的菌落數(shù)。權(quán)利要求1、一種用于輔助平板點樣、影印與計數(shù)的裝置，其特征在于包括透明的薄片，該薄片內(nèi)凸出一個圓形模格部分，其直徑比培養(yǎng)皿的直徑略?。凰霰∑ㄟ^圓形模格部分粘附或者吸附在培養(yǎng)皿的底部；通過兩條相互垂直的穿過圓心的粗線將所述圓形模格部分限定為四個大扇形區(qū)域，通過縱橫交錯的單線將所述圓形模格部分限定為大小為1.5mm×1.5mm至3.5mm×3.5mm的小格，每四個相鄰的小格通過縱橫交錯的雙線限定為一個中格。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的裝置，其特征在于所述圓形模格部分的兩個不相鄰的扇形區(qū)域，通過一條與所述粗線成45度角且穿過圓心的細斜線限定為四個小扇形區(qū)域。3、一種用于輔助平板點樣、影印與計數(shù)的裝置，其特征在于包括透明的第一薄片，其內(nèi)凸出第一圓形模格部分，通過兩條相互垂直的穿過圓心的粗線將所述第一圓形模格部分限定為四個大扇形區(qū)域；透明的第二薄片，其內(nèi)凸出第二圓形模格部分，通過縱橫交錯的單線將所述第二圓形模格部分限定為大小為1.5mmxl.5mm至3.5mmx3.5mm的小格；以及透明的第三薄片，其內(nèi)凸出第三圓形模格部分，通過縱橫交錯的雙線將所述第三圓形模格部分限定為一個中格，該中格的大小相當于四個相鄰的所述小格的大小；所述第一、第二與第三圓形模格部分的圓心重疊；所述第一、第二與第三圓形模格部分的直徑比培養(yǎng)皿的直徑略??；所述第一、第二和/或第三薄片分別通過第一、第二和/或第三圓形模格部分單獨或者按任意順序疊加粘附或者吸附在培養(yǎng)皿的底部。4、根據(jù)權(quán)利要求3所述的裝置，其特征在于還包括透明的第四薄片，其內(nèi)凸出第四圓形模格部分，通過一條穿過圓心的細斜線限定為兩個半圓區(qū)域；所述第四圓形模格部分的圓心與所述第一、第二、第三圓形模格部分的圓心重疊；所述第四圓形模格部分的直徑比培養(yǎng)皿的直徑略??；所述第四薄片單獨或者與第一、第二、第三薄片按任意順序疊加粘附或者吸附在培養(yǎng)皿的底部。全文摘要本發(fā)明屬于微生物領(lǐng)域，涉及平板點樣、平板影印與平板計數(shù)的裝置。本發(fā)明所述的用于輔助平板點樣、影印與計數(shù)的裝置，包括透明的薄片，該薄片內(nèi)凸出一個圓形模格部分，其直徑比培養(yǎng)皿的直徑略??；所述薄片通過圓形模格部分粘附或者吸附在培養(yǎng)皿的底部；通過兩條相互垂直的穿過圓心的粗線將所述圓形模格部分限定為四個大扇形區(qū)域，通過縱橫交錯的單線將所述圓形模格部分限定為大小為1.5mm×1.5mm至3.5mm×3.5mm的小格，每四個鄰近的小格通過縱橫交錯的雙線限定為一個中格。本發(fā)明所述裝置能同時滿足微生物實驗中關(guān)于平板點樣、影印與計數(shù)的要求，并且點樣菌落數(shù)可以根據(jù)需要調(diào)整。文檔編號C12M1/00GK101096635SQ20071002913公開日2008年1月2日申請日期2007年7月12日優(yōu)先權(quán)日2007年7月12日發(fā)明者付京花,周世寧,徐民俊,田小群申請人:中山大學