專利名稱：高效防治香蕉枯萎病的地衣芽孢桿菌202及應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及植物保護領(lǐng)域，尤其涉及一種防治香蕉枯萎病的內(nèi) 生生防菌株，具體地說涉及一種高效防治香蕉枯萎病的地衣芽孢桿 菌202及應(yīng)用。
背景技術(shù)：
香蕉枯萎病是由尖孢鐮刀菌古巴專化型(Fusarium oxysporum f. sp. cubense)侵染引起的一種毀滅性病害，是香蕉生產(chǎn)的毀滅性土 傳病害。病原菌從受傷的根莖侵入，通過維管束向假莖及葉部蔓延， 堵塞木質(zhì)部導(dǎo)管，直至植株枯萎死亡。香蕉枯萎病菌是土壤習居菌， 其厚垣孢子能夠在土壤中存活8 10年。得以恢復(fù)生產(chǎn)。香蕉枯萎 病在在珠江三角洲香蕉產(chǎn)區(qū)的多個縣市均有分布，近年有迅速發(fā)展 的趨勢。該病病園病株率一般約為10% 40% ，嚴重的達90%以上， 以致蕉園丟荒。
目前對該病的防治尚無理想藥劑和抗病品種， 一些栽培管理措 施只能起到局部的控制作用，尋找一種經(jīng)濟、安全、有效的防治方 法是當務(wù)之急，近年來，根際有益細菌的研究為香蕉枯萎病的生物 防治提供了新途徑，許多根際有益細菌也能夠誘導(dǎo)植物產(chǎn)生系統(tǒng)抗 性，使植物獲得廣譜抗病能力。根際有益細菌誘導(dǎo)植物產(chǎn)生的防護 作用安全而有效，在植物病害生物防治中具有重要的應(yīng)用價值。
從香蕉植株內(nèi)分離篩選獲得對香蕉枯萎病菌具有拮抗作用的生 防細菌菌株，對香蕉枯萎病的防治具有重要意義，但目前相關(guān)技術(shù)
仍舊很薄弱甚至空白。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是針對現(xiàn)有技術(shù)的空白，提供一種高效防治香蕉枯
萎病的地衣芽孢桿菌202，是一種從香蕉植株內(nèi)分離篩選獲得對香蕉 枯萎病菌具有拮抗作用的生防細菌菌株，低濃度下能夠有效抑制香 蕉枯萎病菌的生長，對香蕉枯萎病的防治具有重要意義。
本發(fā)明的另一個目的是提供了所述高效防治香蕉枯萎病的地衣 芽孢桿菌202的制備方法。
本發(fā)明還有一個目的是提供了所述高效防治香蕉枯萎病的地衣 芽孢桿菌202在防止香蕉病災(zāi)害方面的多種應(yīng)用。
本發(fā)明的技術(shù)方案是提供一種高效防治香蕉枯萎病的地衣芽孢 桿菌202，所述地衣芽孢桿菌202， Aac^ZJw h'c力em'/br孤's 202， 保藏號為CCTCCM207093。
所述高效防治香蕉枯萎病的地衣芽孢桿菌202經(jīng)平板對峙篩選 獲得。
本發(fā)明還提供了所述的高效防治香蕉枯萎病的地衣芽孢桿菌202 的應(yīng)用，其一是對香蕉枯萎病菌4號小種的平板拮抗作用。
其二是防止香蕉植株主根部及維管束褐化或腐爛方面的應(yīng)用。 其三是對番茄枯萎病菌、玉米彎孢葉斑病菌、膠孢炭疽病菌、棉 花枯萎病菌、棉花黃萎病菌、小麥赤霉病菌或西瓜枯萎病菌的拮抗作 用。
本發(fā)明的有益效果是
(1) 地衣芽孢桿菌202為植物內(nèi)生菌，對香蕉枯萎病菌抑制作 用強，對多種病原真菌具有拮抗作用，具有拮抗細菌在植物病害生物 防治中所起到的非常重要的作用，例如種類和數(shù)量眾多，在植物根 際根內(nèi)、根際大量存在；對病原菌的作用方式多種多樣；繁殖速度 快等優(yōu)點，本發(fā)明通過大量實驗證明地衣芽孢桿菌202菌株能夠有 效抑制香蕉枯萎病菌的生長，抑菌譜廣，對棉花枯萎病菌、棉花黃萎 病菌、西瓜枯萎病菌、番茄枯萎病菌、彎孢葉斑病菌、香蕉炭疽病菌 等多種病原真菌都有拮抗作用；環(huán)境安全性好，具有良好的開發(fā)應(yīng)用 前景，尤其是對香蕉枯萎病的防治具有重要意義。
(2) 種菌株培養(yǎng)條件簡單、容易保存，易于工業(yè)化生產(chǎn)，具有 良好的開發(fā)應(yīng)用前景。


圖1地衣芽孢桿菌202對F0C4菌絲的抑制作用 圖2接種30天后香蕉苗維管束癥狀 圖3地衣芽孢桿菌202對多種病原菌菌絲的抑制作用
具體實施例方式
下面結(jié)合具體實施例及附圖對本發(fā)明作進一步詳細的描述。 實施例1地衣芽孢桿菌202對香蕉枯萎病菌4號小種FOC4的平板 拮抗作用實驗
在馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基PDA平板中央接入直徑為5mm的FOC4菌 絲塊，隨后在等距離FOC4菌絲塊的三角上放入直徑為5mm的滅菌 濾紙片，每片濾紙片上接入地衣芽孢桿菌202培養(yǎng)液10PL，以不接地衣芽孢菌202培養(yǎng)液的平板為對照，25 28r培養(yǎng)箱中培養(yǎng)5 7 天，測定抑菌圈直徑，有附圖1可見地衣芽孢桿菌202對香蕉枯萎病 菌抑制作用強。
實施例2地衣芽孢桿菌202防止香蕉植株主根部及維管束褐化或腐 爛實驗，溫室盆栽防效。
選擇株高15cm左右的巴西香蕉幼苗，進行3種不同處理(1) 清水健株對照香蕉苗根部浸泡在無菌水中后直接移栽在營養(yǎng)缽中生 長；(2)將香蕉苗根部浸泡在地衣芽孢桿菌202培養(yǎng)液中30min后， 移栽至營養(yǎng)缽中，再將20mL的FOC4孢子懸浮液灌根接入營養(yǎng)缽?fù)?壤中；(3)發(fā)病對照香蕉苗根部灌根接種20mLFOC4的孢子懸浮 液，不接種地衣芽孢桿菌202培養(yǎng)液。以上處理，每處理組20株。 之后26。C培養(yǎng)，分別于接種后10d、 20d、 30d調(diào)查發(fā)病率和病情指 數(shù)，三次重復(fù)。與對照相比，地衣芽孢桿菌202能有效地降低香蕉枯 萎病的發(fā)生程度，接種30d后效果最明顯，根部及維管束褐化、腐爛 程度明顯減輕，見附圖2，其中A:清水接種對照，無褐變、無腐爛 現(xiàn)象；D、 E:同時接種地衣芽孢桿菌202接種液和F0C4孢子懸浮液， 輕微褐變、無腐爛；F、 G、 H、 I:只接種F0C4孢子懸浮液，嚴重褐 變、腐爛。
實施例3地衣芽孢桿菌202對多種病原菌的拮抗作用
采用平板對峙法，測試地衣芽孢桿菌202對番茄枯萎病菌、玉米 彎孢葉斑病菌、膠孢炭疽病菌、棉花枯萎病菌、棉花黃萎病菌、小麥 赤霉病菌、西瓜枯萎病菌等7種病原菌的拮抗效果，在PDA平板中央
接入直徑為5mm的靶標菌絲塊，隨后在等距離F0C4菌絲塊的三角上 放入直徑為5mm的滅菌濾紙片，每片濾紙片上接入地衣芽孢桿菌202 培養(yǎng)液10叱，以不接地衣芽孢菌202培養(yǎng)液的平板為對照，28。C培 養(yǎng)箱中培養(yǎng)5 7d，測定抑菌圈直徑。地衣芽孢桿菌202抑菌譜較廣， 對棉花枯萎病菌等多種病原真菌具有拮抗作用，見表1以及附圖3。 從附圖3圖A中可看到地衣芽孢桿菌202對番茄枯萎病菌的抑制作 用；B中可觀察到地衣芽孢桿菌202對膠胞炭疽菌的抑制作用；C中 可觀察到地衣芽孢桿菌202對香蕉炭疽病菌的抑制作用；D中可觀察 到地衣芽孢桿菌202對棉花枯萎病的抑制作用。
表1:地衣芽孢桿菌202對多種病原菌的抑制作用
病原菌抑制半徑
棉花枯萎病+++
棉花黃萎病+++
西瓜枯萎病++
番茄枯萎病++
小麥赤霉病+
彎孢葉斑病++
香蕉炭疽病+++
一無抑制作用+:抑菌圈直徑l 4mm
++:抑菌圈直徑4 8mm +++:抑菌圈直徑〉8mm
權(quán)利要求
1、一種高效防治香蕉枯萎病的地衣芽孢桿菌202，其特征在于所述地衣芽孢桿菌202，Bacillus licheniformis 202，保藏號為CCTCCM207093。
2、 權(quán)利要求1所述的高效防治香蕉枯萎病的地衣芽孢桿菌202 的制備方法，其特征在于所述地衣芽孢桿菌202通過平板對峙篩選獲 得。
3、 權(quán)利要求1所述的高效防治香蕉枯萎病的地衣芽孢桿菌202 的應(yīng)用，其特征在于對香蕉枯萎病菌4號小種的平板拮抗作用。
4、 權(quán)利要求1所述的高效防治香蕉枯萎病的地衣芽孢桿菌202 的應(yīng)用，其特征在于防止香蕉植株主根部及維管束褐化或腐爛方面的 應(yīng)用。
5、 權(quán)利要求1所述的高效防治香蕉枯萎病的地衣芽孢桿菌202 的應(yīng)用，其特征在于對番茄枯萎病菌、玉米彎孢葉斑病菌、膠孢炭疽 病菌、棉花枯萎病菌、棉花黃萎病菌、小麥赤霉病菌或西瓜枯萎病菌 的拮抗作用。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種高效防治香蕉枯萎病的地衣芽孢桿菌202，Bacillus licheniformis 202，保藏號為CCTCCM207093。同時公開了其制備方法以及應(yīng)用，所述地衣芽孢桿菌202菌株經(jīng)平板對峙、盆栽試驗篩選獲得，能夠有效抑制香蕉枯萎病菌的生長，抑菌譜廣，對棉花枯萎病菌、棉花黃萎病菌、西瓜枯萎病菌、番茄枯萎病菌、彎孢葉斑病菌或香蕉炭疽病菌等多種病原真菌都有拮抗作用，環(huán)境安全性好，具有良好的開發(fā)應(yīng)用前景。
文檔編號C12N1/20GK101186886SQ200710032050
公開日2008年5月28日 申請日期2007年12月4日 優(yōu)先權(quán)日2007年12月4日
發(fā)明者孫正祥, 王振中, 紀春艷 申請人:華南農(nóng)業(yè)大學