專利名稱：：利用烏飯樹葉制備天然防腐劑中間體的方法及其用途的制作方法
技術領域：
：本發(fā)明涉及一種利用烏飯樹葉制備天然防腐劑中間體的方法及其用途。技術背景食品的腐敗變質是指在微生物為主的各種因素作用下，食品的成分與感官性質發(fā)生變化而導致食品質量下降或失去食用價值，甚至造成食物中毒。近年來，全世界農副產品、水產品、果蔬等食品腐爛變質而引起的經濟損失十分巨大，因而食品的防腐保鮮始終是食品工業(yè)中一個亟待解決的重要問題。長期的研究發(fā)現(xiàn)現(xiàn)在普遍使用的化學防腐劑對人體有誘癌性、致畸性等或多或少的毒害作用，并且對自然界的生態(tài)環(huán)境也會造成不利的影響，例如亞硝酸鹽和硝酸鹽可能會生成致癌的亞硝胺等，因而必須嚴格限制其在食品中的用量。比較而言，天然防腐劑具有抗菌性強、安全無毒、水溶性好、熱穩(wěn)定性好、作用范圍廣等化學防腐劑所無法比擬的優(yōu)點。但是，天然防腐劑往往由于生產成本較高，品種較少而限制了其廣泛應用。烏飯樹(Kzcc/w'wm6racto3/wwThunb.)為杜昌粵花禾斗(Ericaceae)越桔屬(VacciniumLinn.)的常綠灌木或小喬木，主產于我國華東、華中、華南至西南地區(qū)，常分布在丘陵地帶或海拔4001400米的山地，常見于山坡林內或灌叢中。在我國江浙一帶民間每年農歷四月初八素有以烏飯樹的嫩莖葉浸汁后染米加工烏飯食用的習慣，做成的烏飯不僅具有很高的營養(yǎng)價值，并且暴露在空氣中數(shù)日不變色、不變味、不變質，顯示出極好的抑菌防腐作用。本發(fā)明正是利用烏飯樹葉優(yōu)良的防腐作用，針對目前天然防腐劑成本高、品種少的缺點，
發(fā)明內容本發(fā)明的目的是提供一種利用烏飯樹葉制備天然防腐劑中間體的方法及其用途。它是烏飯樹葉加612倍體積百分比濃度為20%95%乙醇，冷浸或加熱回流提取14次，每次0.512小時，提取液過濾，合并，濃縮至0.25-1.0g生藥/mL，過濾或離心分離后通過AB-8或Du),大孔樹脂柱，烏飯樹葉與大孔樹脂的重量比為1:15，上柱流速14BV/h，樹脂柱徑高比為1:31:9;用水洗滌樹脂38BV，洗脫流速為24BV/h，水洗脫液棄去；用體積百分比濃度為20%95%乙醇洗脫，流速為24BV/h，收集乙醇洗脫液；乙醇液減壓濃縮，減壓或噴霧干燥，烏飯樹葉提取物粉碎后，即得天然防腐劑中間體。所述的提取所用乙醇的體積百分比濃度優(yōu)選30%95%。所述的洗脫樹脂所用乙醇的體積百分比濃度優(yōu)選30%95%。利用烏飯樹葉制備天然防腐劑的中間體用于制備牛奶制品、罐頭食品的防腐劑。本發(fā)明采用的原材料屬于可再生資源，取材容易，成本低；生產工藝簡單、可行。由該方法制備的防腐劑中間體對細菌[金黃色葡萄球菌(Sto;/^/ococc^做rem0、大腸桿菌(^c/zm-c/n'"co/f)、枯草芽抱桿菌(5a"7/wssw6"7/51)、蘇z金芽包桿菌(5ac/〃MJ2Mn'wg/e"s&)]、霉菌[黑曲霉(^s/erg/〃a黃曲霉(y^/erg/腸y7av"s)、根霉(監(jiān)zo/ms"jfgn'ctms)]、真菌[白色念珠菌(Ca"d/<iaa/Z/c<ms)、酵母菌(Sacc/2araw;/cescereWw'aei/a""")、]的生長均有良好的抑帝!j作用。通過該方法制備的中間體可與多種輔料配伍，制成天然防腐劑，用于面包、牛奶制品、罐頭食品等的防腐。具體實施方式烏飯樹葉加612倍體積百分比濃度為20%95%乙醇，冷浸或加熱回流提取14次，每次0.512小時，提取液過濾，合并，濃縮至0.251.0g生藥/mL，過濾或離心分離后通過AB-8或Dun大孔樹脂柱，烏飯樹葉與大孔樹脂的重量比為1:15，上柱流速14BV/h，樹脂柱徑高比為1:31:9;用水洗滌樹脂38BV，洗脫流速為2-4BV/h，水洗脫液棄去；用濃度為20%95%水乙醇洗脫，流速為24BV/h，收集乙醇洗脫液；乙醇液減壓濃縮，減壓或噴霧干燥，得烏飯樹葉提取物。該提取物粉碎后，即得天然防腐劑中間體。所制備的天然防腐劑中間體總黃酮含量不低于20%(UV法，以葒草素或異葒草素計，重量百分比)；葒草素不低于1%(HPLC法、重量百分比)；異葒草素不低于1%(HPLC法、重量百分比)。實施例1烏飯樹葉加6倍30%乙醇，加熱回流提取l次，每次0.5小時，提取液過濾，合并，濃縮至0.25g生藥/mL，過濾后通過AB-8大孔樹脂柱，烏飯樹葉與AB-8大孔樹脂的重量比為1:1，上柱流速lBV/h，樹脂柱徑高比為1:3;用水洗滌樹脂3BV，洗脫流速為2BV/h，水洗脫液棄去；用30%乙醇洗脫，流速為2BV/h，收集乙醇洗脫液；乙醇液減壓濃縮，減壓干燥，得烏飯樹葉提取物，該提取物粉碎，得天然防腐劑中間體。該中間體總黃酮含量為20%(UV法，以葒草素或異葒草素計，重量百分比)；葒草素含量為1%(HPLC法、重量百分比)；異葒草素含量為1%(HPLC法、重量百分比)。實施例2烏飯樹葉加12倍95%乙醇，冷浸4次，每次12小時，提取液過濾，合并，濃縮至l.Og生藥/mL，離心分離后通過Dw大孔樹脂柱，烏飯樹葉與Dnn大孔樹脂的重量比為1:5，上柱流速4BV/h,樹脂柱徑高比為1:9;用水洗滌樹脂8BV，洗脫流速為4BV/h，水洗脫液棄去；用95%乙醇洗脫，流速為4BV/h，收集乙醇洗脫液；乙醇液減壓濃縮，減壓或噴霧干燥，得烏飯樹葉提取物，該提取物粉碎，得天然防腐劑中間體。該中間體總黃酮含量為90%(UV法，以葒草素或異葒草素計，重量百分比)；葒草素含量為12%(HPLC法、重量百分比)；異葒草素含量為11%(HPLC法、重量百分比)。實施例3烏飯樹葉加8倍70%乙醇，冷浸3次，每次8小時，提取液過濾，合并，濃縮至0.5g生藥/mL，離心分離后通過D^大孔樹脂柱，烏飯樹葉與D朋大孔樹脂的重量比為1:3，上柱流速2BV/h，樹脂柱徑高比為1:5;用水洗滌樹脂5BV，洗脫流速為3BV/h，水洗脫液棄去；用70%乙醇洗脫，流速為3BV/h，收集乙醇洗脫液；乙醇液減壓濃縮，減壓或噴霧干燥，得烏飯樹葉提取物該提取物粉碎，得天然防腐劑中間體。該中間體總黃酮含量為50%(UV法，以葒草素或異葒草素計，重量百分比)；葒草素含量為8%(HPLC法、重量百分比)；異葒草素含量7%(HPLC法、重量百分比)。所制備的天然防腐劑中間體的抑菌試驗結果1、烏飯樹葉乙醇提取物抑菌試驗烏飯樹葉用10倍量70%乙醇冷浸3次，每次12小時，冷浸提取液合并，過濾，濃縮，干燥，得烏飯樹葉乙醇提取物。表l烏飯樹葉乙醇提取物抑菌試驗結果<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>("+"表示該樣品濃度下指示菌生長呈陽性，"一"表示指示菌生長呈陰性)"提取物"在1.25%的濃度下，對金黃色葡萄球菌有抑制作用"提取物"在0.625%的濃度下，對金黃色葡萄球菌失去抑制作用"提取物"在1.25%的濃度下，對枯草芽孢桿菌有抑制作用"提取物"在0.625%的濃度下，對枯草芽孢桿菌失去抑制作用"提取物"在1.25%的濃度下，對大腸桿菌有抑制作用"提取物"在0.625%的濃度下，對大腸桿菌失去抑制作用"提取物"在1.25。％的濃度下，對蘇云金芽孢桿菌有抑制作用"提取物"在0.625%的濃度下，對蘇云金芽孢桿菌失去抑制作用"提取物"在1.25%的濃度下，對黑曲霉有抑制作用"提取物"在0.625%的濃度下，對黑曲霉失去抑制作用"提取物"在1.25%的濃度下，對黃曲霉有抑制作用"提取物"在0.625%的濃度下，對黃曲霉失去抑制作用"提取物"在1.25°%的濃度下，對根霉有抑制作用"提取物"在0.625Q/^的濃度下，對根霉失去抑制作用"提取物"在1.25%的濃度下，對白色念珠菌有抑制作用"提取物"在0.625%的濃度下，對白色念珠菌失去抑制作用"提取斷'在1.25%的濃度下，對酵母菌有抑制作用"提取物"在0.625%的濃度下，對酵母菌失去抑制作用2、由烏飯樹葉制備的天然防腐劑中間體的抑菌試驗表2試驗結果<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>枯草芽孢桿菌+++大腸桿菌一——+++++_蘇云金芽孢桿菌—一——++++一黑曲霉菌+++_黃曲霉菌+++一根霉一—_+++++.—白色念珠菌一__—++++—酵母菌++—("+"表示該樣品濃度下指示菌生長呈陽性，"_"表示指示菌生長呈陰性)"提取物"在0.3125。％的濃度下，對金黃色葡萄球菌有抑制作用"提取物"在0.15625%的濃度下，對金黃色葡萄球菌失去抑制作用"提取物"在0.3125%的濃度下，對枯草芽孢桿菌有抑制作用"提取物"在0.15625%的濃度下，對枯草芽孢桿菌失去抑制作用"提取物"在1.25%的濃度下，對大腸桿菌有抑制作用"提取物"在0.625%的濃度下，對大腸桿菌失去抑制作用"提取物"在0.625%的濃度下，對蘇云金芽孢桿菌有抑制作用"提取物"在0.3125%的濃度下，對蘇云金芽孢桿菌失去抑制作用"提取物"在0.3125%的濃度下，對黑曲霉有抑制作用"提取物"在0.15625%的濃度下，對黑曲霉失去抑制作用"提取物"在0.325%的濃度下，對黃曲霉有抑制作用"提取物"在0.15625%的濃度下，對黃曲霉失去抑制作用"提取物"在1.25%的濃度下，對根霉有抑制作用"提取物"在0.625%的濃度下，對根霉失去抑制作用"提取物"在0.625%的濃度下，對白色念珠菌有抑制作用"提取物"在0.3125%的濃度下，對白色念珠菌失去抑制作用"提取物"在0.15625%的濃度下，對酵母菌有抑制作用"提取物"在0.078125%的濃度下，對酵母菌失去抑制作用權利要求1、一種利用烏飯樹葉制備天然防腐劑中間體的方法，其特征在于烏飯樹葉加6～12倍體積百分比濃度為20％～95％乙醇，冷浸或加熱回流提取1～4次，每次0.5～12小時，提取液過濾，合并，濃縮至0.25～1.0g生藥/mL，過濾或離心分離后通過AB-8或D101大孔樹脂柱，烏飯樹葉與大孔樹脂的重量比為1∶1～5，上柱流速1～4BV/h，樹脂柱徑高比為1∶3～1∶9；用水洗滌樹脂柱3～8BV，洗脫流速為2～4BV/h，水洗脫液棄去；用體積百分比濃度為20％～95％乙醇洗脫，流速為2～4BV/h，收集乙醇洗脫液；乙醇液減壓濃縮，減壓或噴霧干燥，烏飯樹葉提取物粉碎后，即得天然防腐劑中間體。2、根據(jù)權利要求1所述的一種利用烏飯樹葉制備天然防腐劑中間體的方法，其特征在于提取所用乙醇的體積百分比濃度30%95%。3、根據(jù)權利要求1所述的一種利用烏飯樹葉制備天然防腐劑中間體的方法，其特征在于洗脫樹脂所用乙醇的體積百分比濃度30%95%。4、一種如權利要求1所述的利用烏飯樹葉制備天然防腐劑中間體的用途，其特征在于用于制備牛奶制品、罐頭食品的防腐劑。全文摘要本發(fā)明公開了一種利用烏飯樹葉制備天然防腐劑中間體的方法及其用途。它是將烏飯樹葉加乙醇，冷浸或加熱回流提取，提取液過濾，合并，濃縮，過濾或離心后通過大孔樹脂，先用水洗滌樹脂，水洗脫液棄去；再用乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液；乙醇液減壓濃縮，干燥，得烏飯樹葉提取物。該提取物粉碎后，即得天然防腐劑中間體。本發(fā)明所用資源具有再生性，生產成本低，制備的防腐劑中間體防腐作用強，安全無毒，可與多種輔料配伍制成天然防腐劑，用于面包、牛奶制品、罐頭食品等的防腐。文檔編號A23L3/3463GK101152018SQ20071007062公開日2008年4月2日申請日期2007年8月31日優(yōu)先權日2007年8月31日發(fā)明者劉洪梅,劉洪輝,亮增,琳張,張紅偉,田富饒,田景奎,鐳羅,谷希達,波陳申請人:浙江大學