專利名稱：假單胞菌色素測(cè)定診斷劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種假單胞菌色素測(cè)定診斷劑，其主要成分是蛋白際、硫酸鉀、MgC12，6H20、甘油、瓊脂、蒸餾水經(jīng)一定的工藝制成。可供假單胞菌培養(yǎng)生長(zhǎng)，準(zhǔn)確測(cè)定銅綠假單胞菌產(chǎn)生水溶性色素生成能力。鑒別細(xì)菌的種類，其關(guān)鍵在于準(zhǔn)確、快速、簡(jiǎn)便。而細(xì)菌接種分離培養(yǎng)好壞，會(huì)直接影響檢測(cè)結(jié)果。往往需要將樣本通過(guò)不同方法進(jìn)行分離培養(yǎng)，來(lái)進(jìn)行細(xì)菌種類的鑒別，這是目前微生物實(shí)驗(yàn)室最常用的手段。由于目前培養(yǎng)條件的應(yīng)用范圍所限，供一般標(biāo)本的分離培養(yǎng)用假單胞菌色素測(cè)定培養(yǎng)基沒(méi)有特效的，存在所分離培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)不足、培養(yǎng)時(shí)間長(zhǎng)、易出現(xiàn)形態(tài)變異和假陽(yáng)性或假陰性等問(wèn)題。隨著生物研究的進(jìn)展，國(guó)內(nèi)外對(duì)細(xì)菌鑒別的培養(yǎng)基研究也在不斷的發(fā)展中。生物、藥物工作者一直希望能有一種能克服上述不足的特異性的假單胞菌色素測(cè)定診斷劑。
背景技術(shù)：
本發(fā)明的目的在于提供一種能克服己有培養(yǎng)基不足的特異性的假單胞菌色素測(cè)定診斷劑。與其它同類培養(yǎng)基相比具備下列特點(diǎn)所需接種量小，少量細(xì)菌即可迅速繁殖，在通常室溫下或37'C培養(yǎng)24小時(shí)即可觀察結(jié)果；不易出現(xiàn)假陽(yáng)性和假陰性。35'C培養(yǎng)過(guò)夜后觀察綠膿菌色素結(jié)果，陰性者室溫(2(TC 22'C)放置觀察6d
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的要點(diǎn)在于選擇合適的組分，并進(jìn)行合理混配，經(jīng)加溫、溶解、混合、冷卻、分裝、高溫滅菌等工藝而成一種假單胞菌色素測(cè)定診斷劑。
本發(fā)明選擇的配方如下(組分及其重量百分比％):蛋白目示20. 0-25. 0;硫酸鉀10. 0-15. 0;MgC12 6H201. 4-1. 6;甘油10. 0-12. 0;瓊脂10. 0-12. 0;蒸餾水加至100(使用液稀釋至1000)。本培養(yǎng)基含有豐富的營(yíng)養(yǎng)成分，如蛋白胨、瓊脂粉是培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)和支持成分，可供假單胞菌細(xì)菌生長(zhǎng)，有利于銅綠假單胞菌產(chǎn)生水溶性色素生成，用于測(cè)定診斷觀察銅綠假單胞菌形態(tài)和純種分離培養(yǎng)。在通常室溫下或35。C培養(yǎng)過(guò)夜后觀察結(jié)果，陰性者室溫(2(TC 22°C)放置觀察6d。或移種到選擇性培養(yǎng)基上以分離致病菌。本發(fā)明產(chǎn)品的制備方法是
1) 、將上述蛋白際、硫酸鉀、MgC12*6H20、甘油、瓊脂、蒸餾水各成分混勻，加熱溶
解；
2) 、取出后冷至50。C左右，調(diào)pH7. 2 7.4，分裝于試管中，121°C 15min高壓滅菌；
3) 、以無(wú)菌手制成斜面，凝固后，抽樣于37。C培養(yǎng)18-24小時(shí)，如無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)，冷藏備用。
本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)(1)所需接種量小，培養(yǎng)時(shí)間短，少量細(xì)菌即可迅速繁殖，在通常室溫下或37"C培養(yǎng)12-24小時(shí)即可觀察結(jié)果；(2)不易出現(xiàn)假陽(yáng)性或假陰性；具體實(shí)施方式
下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的詳細(xì)說(shuō)明
按照下表所列數(shù)據(jù)(重量百分比％)及其所述步驟進(jìn)行配置
配方一
細(xì)菌胨 20-25硫酸鉀 10-15.0MgC12 6H20 1. 4-1. 6
甘油 10-12.0
瓊脂 10-12.0
蒸餾水 加至100 (使用液稀釋至1000)。
配方二細(xì)菌胨硫酸鉀MgC12 6H20
甘油瓊脂蒸餾水
20-25
10-15. 0
1.4-1.6
10-12.0
10-12.0
加至100 (使用液稀釋至1000)。
配方三
細(xì)菌胨硫酸鉀
MgC12 6H20
甘油
瓊脂
蒸餾水
20-25
10-15. 0
1. 4-1. 6
10-12.0
10-12.0
加至100 (使用液稀釋至1000)。
配方四
細(xì)菌胨硫酸鉀
MgC12 6H20
甘油
瓊脂
蒸餾水
20-25
10-15.0
1. 4-1. 6
10-12.0
10-12.0
加至IOO (使用液稀釋至1000)。
權(quán)利要求
1、一種假單胞菌色素測(cè)定診斷劑，其主要成分是蛋白眎、硫酸鉀、MgCl2·6H2O、甘油、瓊脂、蒸餾水經(jīng)一定的工藝制成；其特征在于具有如下配方(組分及其重量百分比％)蛋白眎20.0-25.0；硫酸鉀10.0-15.0；MgCl2·6H2O1.4-1.6；甘油10.0-12.0；瓊脂10.0-12.0；蒸餾水加至100(使用液稀釋至1000)。
2、 一種權(quán)利要求1所述假單胞菌色素測(cè)定診斷劑的制備方法，其特征在于具有如下的步驟1) 、將上述蛋白呩、硫酸鉀、MgC12，6H20、甘油、瓊脂、蒸餾水各成分混勻，加熱溶解；2) 、取出后冷至5(TC左右，調(diào)pH7.2 7.4，分裝于試管中，121°C 15min高壓滅菌；3) 、以無(wú)菌手制成斜面，凝固后，抽樣于37。C培養(yǎng)18-24小時(shí)，如無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)，冷藏備用。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種假單胞菌色素測(cè)定診斷劑，其主要成分是蛋白眎、硫酸鉀、MgCl₂·6H₂O、甘油、瓊脂、蒸餾水經(jīng)一定的工藝制成。可供假單胞菌培養(yǎng)生長(zhǎng)，準(zhǔn)確測(cè)定銅綠假單胞菌產(chǎn)生水溶性色素生成能力。鑒別細(xì)菌的種類，其關(guān)鍵在于準(zhǔn)確、快速、簡(jiǎn)便。而細(xì)菌接種分離培養(yǎng)好壞，會(huì)直接影響檢測(cè)結(jié)果。往往需要將樣本通過(guò)不同方法進(jìn)行分離培養(yǎng)，來(lái)進(jìn)行細(xì)菌種類的鑒別，這是目前微生物實(shí)驗(yàn)室最常用的手段。由于目前培養(yǎng)條件的應(yīng)用范圍所限，供一般標(biāo)本的分離培養(yǎng)用假單胞菌色素測(cè)定診斷劑沒(méi)有特效的，存在所分離培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)不足、培養(yǎng)時(shí)間長(zhǎng)、易出現(xiàn)形態(tài)變異和假陽(yáng)性或假陰性等問(wèn)題。克服已有培養(yǎng)基不足的特異性的假單胞菌色素測(cè)定診斷劑。與其它同類培養(yǎng)基相比具備下列特點(diǎn)所需接種量小，少量細(xì)菌即可迅速繁殖，在通常室溫下或37℃培養(yǎng)24小時(shí)即可觀察結(jié)果；不易出現(xiàn)假陽(yáng)性和假陰性。35℃培養(yǎng)過(guò)夜后觀察綠膿菌色素結(jié)果，陰性者室溫(20℃~22℃)放置觀察6d。
文檔編號(hào)C12Q1/04GK101463380SQ200710115769
公開日2009年6月24日 申請(qǐng)日期2007年12月19日 優(yōu)先權(quán)日2007年12月19日
發(fā)明者志 王 申請(qǐng)人:志 王