專利名稱：：胰酪胨肉毒梭菌增菌肉湯的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種胰酪胨肉毒梭菌增菌肉湯，其主要成分是胰酪蛋白胨、蛋白胨、酵母浸粉、葡萄糖、硫乙醇酸鈉、蒸餾水、1.5%胰蛋白酶(1:250)溶液按比例混合經(jīng)加溫、溶解、混合、冷卻、分裝、高溫滅菌等工藝而成。主要用于肉毒梭菌的增菌培養(yǎng)。常與皰肉培養(yǎng)基同時(shí)使用。已有培養(yǎng)基劑品種很多，不具有切實(shí)可靠的方法；對(duì)培養(yǎng)成分有破壞作用，亦影響其物理性狀。隨著消毒研究的進(jìn)展，國(guó)內(nèi)外對(duì)培養(yǎng)基的研究也在不斷的發(fā)展中。生物實(shí)驗(yàn)工作者一直希望能有一種能克服上述培養(yǎng)基不足的胰酪胨肉毒梭菌增菌肉湯。技術(shù)背景本發(fā)明的目的在于提供一種能克服上述培養(yǎng)基不足的新型產(chǎn)品，用于肉毒梭菌的增菌培養(yǎng)。常與皰肉培養(yǎng)基同時(shí)使用，本發(fā)明的胰酪胨肉毒梭菌增菌肉湯克服了上述的不足，快速檢測(cè)肉毒梭菌的毒素，經(jīng)酶激化后顯示毒力，便于進(jìn)行測(cè)毒動(dòng)物試驗(yàn)，可彌補(bǔ)皰肉培養(yǎng)基的不足。方法簡(jiǎn)單，使用方便，結(jié)果可靠。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的要點(diǎn)在于選擇合適的組分，并進(jìn)行合理混配，經(jīng)加溫、溶解、混合、冷卻、高溫滅菌、分裝、等工藝而成一種胰酪胨肉毒梭菌增菌肉湯。本發(fā)明選擇的配方如下(重量百分比％):胰酪蛋白胨50-60g;蛋白胨O.5-1.Og;酵母浸粉20-30g;葡萄糖4.0-5.Og;硫乙醇酸鈉1.0-1.5g;蒸餾水1000mL;1.5%胰蛋白酶(1:250)溶液67mL。釀成的培養(yǎng)基呈黃色透明液體。將肉毒梭菌48h培養(yǎng)物，稀釋成l:1000菌懸液，接種O.OlmL，應(yīng)能生長(zhǎng)。肉毒梭菌的毒素，經(jīng)酶激化后顯示毒力，便于進(jìn)行測(cè)毒動(dòng)物試驗(yàn)，可彌補(bǔ)皰肉培養(yǎng)基的不足。本發(fā)明產(chǎn)品的制備方法是(1).將胰酶消化液加溫到80°C，用200g/L氫氧化鈉溶液調(diào)至pH7.0_7.2。加入內(nèi)浸液、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鉀，煮沸10min后，再調(diào)pH，韋氏梭菌pH為8.2_8.4，膿毒梭菌pH為8.0-8.2，煮沸20min，過(guò)濾透明，分裝于無(wú)菌瓶?jī)?nèi)；培養(yǎng)韋氏梭菌瓶中按12%加新鮮洗凈牛肉渣，培養(yǎng)膿毒梭菌瓶中按O.1%加活性炭，1131:30min高壓滅菌備用；(2).配制250g/L葡萄糖，113°C30min高壓滅菌，種菌前按1%(V/V)無(wú)菌操作加入。本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)胰酪胨肉毒梭菌增菌肉湯克服了以往培養(yǎng)基的不足，能快速準(zhǔn)確檢測(cè)肉毒梭菌，常與皰肉培養(yǎng)基同時(shí)使用。肉毒梭菌的毒素，經(jīng)酶激化后顯示毒力，便于進(jìn)行測(cè)毒動(dòng)物試驗(yàn)，可彌補(bǔ)皰肉培養(yǎng)基的不足。培養(yǎng)基清澈，方法簡(jiǎn)單，使用方便，結(jié)果可靠。具體實(shí)施方式下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的詳細(xì)說(shuō)明按照下表所列數(shù)據(jù)(重量百分比％)及其所述步驟進(jìn)行配置配方一胰酪蛋白胨50-60蛋白胨0.5-1.0酵母浸粉20-30<table>tableseeoriginaldocumentpage4</column></row><table>權(quán)利要求一種胰酪胨肉毒梭菌增菌肉湯，其主要成分是胰酪蛋白胨、蛋白胨、酵母浸粉、葡萄糖；硫乙醇酸鈉、蒸餾水、1.5％胰蛋白酶(1∶250)溶液按比例混合，經(jīng)加溫、溶解、混合、冷卻、分裝、高溫滅菌等工藝而成；其特征在于具有如下配方胰酪蛋白胨50-60g；蛋白胨0.51.0g；酵母浸粉20-30g；葡萄糖4.0-5.0g；硫乙醇酸鈉1.0-1.5g；蒸餾水1000mL；1.5％胰蛋白酶(1∶250)溶液67mL。2.—種權(quán)利要求1所述胰酪胨肉毒梭菌增菌肉湯的制備方法，其特征在于具有如下的步驟(1).將胰酶消化液加溫到8(TC，用200g/L氫氧化鈉溶液調(diào)至pH7.0_7.2，加入內(nèi)浸液、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鉀，煮沸10min后，再調(diào)pH，韋氏梭菌pH為8.2_8.4，膿毒梭菌pH為8.0-8.2，煮沸20min，過(guò)濾透明，分裝于無(wú)菌瓶?jī)?nèi)；培養(yǎng)韋氏梭菌瓶中按12%加新鮮洗凈牛肉渣，培養(yǎng)膿毒梭菌瓶中按O.1%加活性炭，1131:30min高壓滅菌備用；(2).配制250g/L葡萄糖，113t:30min高壓滅菌，種菌前按1%(V/V)無(wú)菌操作加入。全文摘要本發(fā)明涉及一種胰酪胨肉毒梭菌增菌肉湯，其主要成分是胰酪蛋白胨、蛋白胨、酵母浸粉、葡萄糖、硫乙醇酸鈉、蒸餾水、1.5％胰蛋白酶(1∶250)溶液按比例混合經(jīng)加溫、溶解、混合、冷卻、分裝、高溫滅菌等工藝而成。主要用于肉毒梭菌的增菌培養(yǎng)。本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)胰酪胨肉毒梭菌增菌肉湯克服了以往培養(yǎng)基的不足，能快速準(zhǔn)確檢測(cè)肉毒梭菌，常與皰肉培養(yǎng)基同時(shí)使用。肉毒梭菌的毒素，經(jīng)酶激化后顯示毒力，便于進(jìn)行測(cè)毒動(dòng)物試驗(yàn)，可彌補(bǔ)皰肉培養(yǎng)基的不足。培養(yǎng)基清澈，方法簡(jiǎn)單，使用方便，結(jié)果可靠。文檔編號(hào)C12R1/01GK101698826SQ20071011578公開日2010年4月28日申請(qǐng)日期2007年12月19日優(yōu)先權(quán)日2007年12月19日發(fā)明者楊宇申請(qǐng)人:楊宇