專利名稱：茶尺蠖神經(jīng)突觸小泡蛋白基因svp及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于昆蟲基因工程領(lǐng)域。具體的說，本發(fā)明涉及一種茶尺蠖神經(jīng)突觸小泡蛋白(synaptic vesicle protein, svp)基因分離和分析；還涉及利用該基因進行評價鱗翅目害蟲(茶尺蠖)對農(nóng)藥的抗藥性。
背景技術(shù)：
茶尺蠖的頻繁發(fā)生是造成茶葉減產(chǎn)和品質(zhì)下降的原因之一，因此，茶尺 蠖是重要的茶園病蟲害防治對象。擬除蟲菊酯類農(nóng)藥是目前用于防治茶尺蠖 等茶園鱗翅目害蟲的重要農(nóng)藥種類之一。擬除蟲菊酯類殺蟲的作用方式是觸 殺、胃毒和熏蒸，但以觸殺為主；其殺蟲機制是擾亂昆蟲神經(jīng)的正常生理。 由于擬除蟲菊酯類農(nóng)藥具有高效、低毒的特點，因此茶園中應(yīng)用較普遍。由 于多次、多年連續(xù)使用，近來的調(diào)查顯示，擬除蟲菊酯類農(nóng)藥對茶尺蠖等鱗 翅目害蟲的防效正在逐漸下降，顯見茶尺蠖對擬除蟲菊酯類農(nóng)藥產(chǎn)生了某些 抗藥性。如何利用現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)分析害蟲對農(nóng)藥抗藥性機制，加快防 止害蟲產(chǎn)生抗藥性的新技術(shù)的開發(fā)成了人們迫切希望解決的問題。已有的研究表明，突觸是神經(jīng)系統(tǒng)中最活躍的部位，神經(jīng)信號的傳遞、 加工都是經(jīng)突觸完成的。昆蟲突觸遞質(zhì)釋放的過程可以描述為突觸小泡沿 細(xì)胞骨架的微絲和微管轉(zhuǎn)運或大量附著于細(xì)胞骨架上，離開細(xì)胞骨架后的小 泡，攝入神經(jīng)遞質(zhì)，并與突觸前膜結(jié)合錨定；在動作電位到達時引起(^2+通道 開放，從而促進小泡與前膜融合，并釋放神經(jīng)遞質(zhì)。突觸小泡外側(cè)表面富含蛋白，這些蛋白是多種蛋白激酶的底物，通過其分子磷酸化及脫磷酸化的可 逆過程對突觸小泡釋放神經(jīng)遞質(zhì)起調(diào)節(jié)作用?？梢娡挥|小泡膜表面蛋白對昆 蟲神經(jīng)傳遞有重要作用。但是利用分子生物學(xué)技術(shù)對茶尺蠖等鱗翅目茶樹重要害蟲進行抗藥性研 究目前尚未有報道。 發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種茶尺蠖神經(jīng)突觸小泡蛋白基因svp及其編碼的蛋白質(zhì)，該基因可用于評價和測定鱗翅目害蟲對農(nóng)藥的抗藥性。為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供了一種茶尺蠖神經(jīng)突觸小泡蛋白基因svp，其具有SEQIDNo: l所示的核苷酸序列。本發(fā)明還提供了上述基因svp編碼的蛋白質(zhì)，其具有SEQIDNO: 2所示的氨基酸序列。本發(fā)明還提供了上述基因SVp用途用于評價和測定鱗翅目害蟲對農(nóng)藥的抗藥性。作為本發(fā)明的基因SXT的用途的改進該農(nóng)藥為擬除蟲菊酯類農(nóng)藥。 作為本發(fā)明的基因SVp的用途的改進鱗翅目害蟲為茶尺蠖。 本發(fā)明主要針對茶尺蠖等害蟲對擬除蟲菊酯類農(nóng)藥抗藥性機制不明確這 一問題，通過對茶尺蠖抗藥性相關(guān)基因篩選和克隆，以及重要抗藥性相關(guān)基 因表達的研究，明確與擬除蟲菊酯類農(nóng)藥抗藥性相關(guān)的基因及其特點。為利 用該基因進行茶尺蠖等害蟲的農(nóng)藥抗性機理研究提供條件，同時也為以這些 基因為作用位點的新農(nóng)藥開發(fā)奠定基礎(chǔ)。本發(fā)明是采用了以下技術(shù)方案來實現(xiàn):采用cDNA-AFLP技術(shù)分離與茶尺 蠖對擬除蟲菊酯類抗藥性有關(guān)的基因SVp;提供一種茶尺蠖SVp核心區(qū)的蛋白質(zhì)序列，其具有如SEQIDNo: 2所示序列。編碼上述svp蛋白的基因，其具 有SEQIDNo: l所示的核苷酸序列。本發(fā)明還提供了抗性茶尺蠖與非抗性茶尺蠖svp基因表達差異特性，證明 本發(fā)明基因svp表達對茶尺蠖正常生長有非常重要的影響，該基因是茶尺蠖等害蟲的新型殺蟲劑研制中潛在的重要的作用位點。實現(xiàn)本發(fā)明的具體技術(shù)步驟如下 一、茶尺蠖SVp基因分離和分析取對擬除蟲菊酯有不同抗性的茶尺蠖幼蟲各10頭，將擬除蟲菊酯稀釋 5000- 10000倍后對茶尺蠖幼蟲進行噴霧處理。0.2-6小時之內(nèi)，在不抗和抗藥性群體中各選取若干頭幼蟲。將上述不抗和抗性幼蟲分別置于不同研缽中液 氮研磨，以TRIZOL (Invitrogen公司)試劑提取總RNA，并以UNIQ-IO柱式 mRNA抽提純化試劑盒(上海生工生物工程有限公司)獲得茶尺蠖mRNA。取 1-5嗎mRNA為模板，采用M-MLV RTase cDNA synthesis kit(寶生物工程[大連] 有限公司)合成雙鏈cDNA。雙鏈cDNA經(jīng)過異丙醇沉淀純化后，以Bspffl (上 海前塵生物科技有限公司)與BssHII (寶生物工程[大連]有限公司)組合酶切 消化。消化后的片段與事先設(shè)計的2個接頭以TaKaRaT4DNALigase (寶生物 工程[大連]有限公司)連接。以連接完成的cDNA片段為模板，以SEQIDNo: 5和SEQIDNo: 6預(yù)擴增引物進行PCR預(yù)擴增，將擴增產(chǎn)物適當(dāng)稀釋后，以兩 組選擇性擴增引物組合SEQIDNo: 7和SEQIDNo: 8，以及SEQIDNo: 9和 SEQIDNo: 10，分別進行PClUi擇性擴增。擴增產(chǎn)物以6%變性聚丙烯酰胺凝 膠進行電泳分析，以核酸銀染試劑盒(上海生工生物工程有限公司)進行銀
染方法顯帶。從凝膠上割取顯著差異的條帶，以純水浸提過夜后，取適量浸提液作為模板，以選擇性引物組合進行PCR，產(chǎn)物在1.5。/。瓊脂糖凝膠上電泳。以UNIQ-IO 柱式DNA膠回收試劑盒(上海生工生物工程有限公司)進行目標(biāo)片段回收， 并委托Invitrogen公司進行序列分析。經(jīng)與美國生物信息數(shù)據(jù)庫 htt。:〃www.ncbi.nlm.nih.gov比對，確定了其中一個290bp的顯著差異序列是茶 尺蠖突觸小泡蛋白。再次設(shè)計并委托上海生工生物工程有公司合成引物，其 序列見SEQIDNo: ll和SEQIDNo: 12。并以MMLC—步法RT-PCR擴增試劑 盒(上海生工生物工程有限公司)進行擴增。產(chǎn)物直接委托Invitrogen公司進 行序列分析。獲得了1260bp的svp基因序列，見SEQIDNo: 1，經(jīng)Edits叫軟件 (DNAStar公司)推演，獲得了該基因的包含420個氨基酸的蛋白序列，見SEQ ID No: 2。二、擬除蟲菊酯對不同抗性茶尺蠖內(nèi)源svp基因表達影響 取對擬除蟲菊酯有不同抗性的茶尺蠖幼蟲各10頭，將農(nóng)藥稀釋5000-10000 倍后進行噴霧。0.2-6小時后，在非抗群體幼蟲中選取出現(xiàn)明顯中毒癥狀的l-2 頭，同時在抗性群體中選取l-2頭表現(xiàn)正常的幼蟲。并取l-2頭未噴藥幼蟲為對 照。以TRIZOL (Invitrogen公司)法提取RNA，以MMLV第一鏈cDNA合成試 劑盒(上海生工生物工程有限公司)合成cDNA。采用引物組合SEQIDNo: ll和SEQIDNo: 12進行PCR。結(jié)果顯示，對除蟲菊酯敏感的茶尺蠖經(jīng)過殺蟲 劑處理后中毒癥狀明顯，同時svp表達顯著下降；而噴施殺蟲劑后的抗藥性茶尺蠖幼蟲并不表現(xiàn)出中毒癥狀，SVp基因表達比較強烈；未噴藥的對照SVp表達強烈。說明svp基因的正常表達與茶尺蠖的抗藥性有很強的相關(guān)性，是一個研
究害蟲抗藥性機理的重要途徑。


下面結(jié)合附圖對本發(fā)明的具體實施方式
作進一步詳細(xì)說明。 圖l是實施例l的擴增產(chǎn)物進行電泳分析后，以核酸銀染試劑盒進行銀染 方法的顯帶圖；注選擇性擴增引物組合為SEQIDNo: 7和SEQIDNo: 8; M為分子量 標(biāo)記，l為無抗藥性茶尺蠖樣品，2為抗藥性茶尺蠖樣品；箭頭所指分別為差異目標(biāo)條帶和300bp分子量標(biāo)記。圖2是實施例2中，恒壓電泳結(jié)束后進行照相所得的圖；注l為噴藥處理后無抗性茶尺蠖個體，2為噴藥處理后的抗藥性茶尺蠖個體，3為未噴藥對照，M為分子量標(biāo)記。
具體實施方式
實施例l取對功夫菊酯有不同抗性的3齡茶尺蠖幼蟲各10頭，將市售濃度2.5%功夫 菊酯乳劑以水稀釋10000倍后進行噴霧處理。0.5小時后，在無抗藥性幼蟲群體 中選取出現(xiàn)明顯中毒癥狀的3頭，同時在抗性群體中選取3頭表現(xiàn)正常的幼蟲。 上述2類幼蟲分別置于不同研缽中液氮研磨，以TRIZOL (Invitrogen公司)提 取總RNA，并以UNIQ-10柱式mRNA抽提純化試劑盒(上海生工生物工程有限 公司)處理，獲得茶尺蠖mRNA。以l嗎mRNA為模板，采用M-MLVRTase cDNA synthesis kit(寶生物工程[大連]有限公司)合成雙鏈cDNA。在合成的雙鏈 cDNA加入等體積的預(yù)冷異丙醇，冰浴0.5-12小時后，13000轉(zhuǎn)/分鐘離心10-30 分鐘。將雙鏈cDNA沉淀溶于純水中。先以BspHI (上海前塵生物科技有限公
司)酶切消化2小時(具體操作如產(chǎn)品說明)；酶切完成后在產(chǎn)物中加等體積的異丙醇，并在冰浴下沉淀30分鐘后，13000轉(zhuǎn)/分鐘離心20分鐘，收集沉淀。 在酶切產(chǎn)物中加入BssfflI(寶生物工程[大連]有限公司)進行消化(具體操作參 照產(chǎn)品使用說明)。消化后的產(chǎn)物于7(TC加熱15分鐘鈍化酶后，加等體積異 丙醇冰浴下沉淀過夜，13000轉(zhuǎn)/分鐘離心30分鐘收集沉淀。將消化產(chǎn)物與接頭 SEQIDNo: 3和SEQIDNo: 4混合，以T4-DNALigase(寶生物工程[大連]有限 公司)于25。C連接過夜。以連接完成的cDNA片段為模板，以SEQIDNo: 5和 SEQIDNo: 6預(yù)擴增引物對進行PCR預(yù)擴增，具體如表l第l列所示，得預(yù)擴 增產(chǎn)物。取稀釋20倍后的預(yù)擴增產(chǎn)物2 u L，以選擇性擴增引物組合SEQ ID No: 7和SEQIDNo: 8，以及SEQIDNo: 9和SEQIDNo: 10，分別進行PCR選擇 性擴增，具體如表1第2列所示。擴增產(chǎn)物以6%變性聚丙烯酰胺凝膠進行電泳 分析，以核酸銀染試劑盒(上海生工生物工程有限公司)進行銀染方法顯帶， 如圖l。表lPCR預(yù)擴增PCR選擇性擴增PCR常規(guī)擴增9fC變性30 秒；56。C退火 60秒;72° C延 伸60秒；共30 個循環(huán)。94。C變性30秒；65。C退火30秒；72° C延 伸60秒；l個循環(huán)。 94。C變性30秒；65。C退火30秒，并以每 循環(huán)下降0.7。C; 72。C延伸60秒；12個循環(huán)。 94。C變性30秒;56。C退火30秒;72° C延 伸60秒；23個循環(huán)。94。C變性4分鐘； 一個循 環(huán)。 94。C變性30秒；55。C退火 30秒；72。C延伸60秒；35個 循環(huán)。 72。C延伸5分鐘。注本發(fā)明中未做特別說明的PCR或PCR擴增均指PCR常規(guī)擴增。從凝膠上割取顯著差異的條帶，以純水浸提過夜后，取2PL浸泡液作為模 板，以引物組合SEQIDNo: 7和SEQIDNo: 8進行PCR擴增(如表1第3列所 示)，產(chǎn)物電泳后以UNIQ-10柱式DNA膠回收試劑盒(上海生工生物工程有限
公司)進行片段回收，委托Invitrogen公司進行序列分析。經(jīng)與美國生物信息 數(shù)據(jù)庫http:〃www.ncbi.nlm.nih.gov比對，確定了其中一個差異顯著的目標(biāo)序列 為突觸小泡蛋白svp。重新設(shè)計引物SEQIDNo: ll和SEQIDNo: 12，以抗性 群體幼蟲的mRNA為模板，采用MMLV—步法RT-PCR擴增試劑盒(上海生工 生物工程有限公司)進行PCR擴增，具體操作參照試劑盒使用說明。產(chǎn)物經(jīng)割 膠純化后，委托Invitrogen公司進行序列分析。獲得了 1260bp的茶尺蠖svp基因 核心序列，見SEQIDNo: 1。經(jīng)Editseq軟件(DNAStar公司)推演，獲得了 該基因序列的氨基酸順序，該序列包含420個氨基酸殘基，見SEQIDNo: 2。 經(jīng)過序列比對顯示，茶尺蠖svp核苷酸序列與寄生黃蜂、瘧蚊等svp的一致性為 70%左右，而氨基酸順序與埃及伊蛟和寄生黃蜂等相似性超過80%。 實施例2將市售2.5%功夫菊酯乳劑以水稀釋5000倍后，對具有不同菊酯農(nóng)藥抗性 的茶尺蠖4齡幼蟲進行噴霧處理，2小時后，取對功夫菊酯敏感以及有抗藥性 的幼蟲各l-2頭(約0.2g)，同時取未經(jīng)施藥處理4齡幼蟲l-2頭，上述樣品分 別置于研缽中液氮快速研磨，力nimlTRIZOL (Invitrogen公司)充分混勻，并 按照TRIZOL試劑說明書步驟提取總RNA。經(jīng)分光光度法分析，該RNA樣品 OD260/OD280比值為1.8、濃度約750/ig/mL。以1.5nL上述RNA溶液為模板， 以MMLV第一鏈cDNA合成試劑盒(上海生工生物工程有限公司)合成cDNA。 以4L cDNA為模板，以SEQ ID No: ll和SEQ ID No: 12為引物組合，進行PCR。 PCR結(jié)束后以1.5n/。的瓊脂糖凝膠進行恒壓電泳，電泳結(jié)束后進行照相，如圖2。 結(jié)果顯示，對功夫菊酯敏感的茶尺蠖經(jīng)過殺蟲劑處理后中毒癥狀明顯，同時svp 條帶的吸光度為0.14，而抗藥性茶尺蠖幼蟲噴施殺蟲劑后并不表現(xiàn)出中毒癥
狀，svp條帶強度為0.96，而未經(jīng)噴藥處理的幼蟲svp條帶強度為0.89。說明施 藥后敏感茶尺蠖中該基因表達受到抑制，蟲體就表現(xiàn)出明顯不適癥狀?？梢妔vp 與抗藥茶尺蠖幼蟲的抗藥性表現(xiàn)密切相關(guān)。因此，我們可以得知將擬除蟲菊酯類農(nóng)藥經(jīng)稀釋2500-20000倍后，按照等同于實施例2的方 法處理后；svp條帶強度為>=0.5的為抗藥性茶尺蠖，且該值越大，表明抗性 越厲害；svp條帶強度0.5的為對擬除蟲菊酯類農(nóng)藥敏感的茶尺蠖。最后，還需要注意的是，以上列舉的僅是本發(fā)明的若干個具體實施例。 顯然，本發(fā)明不限于以上實施例，還可以有許多變形。本領(lǐng)域的普通技術(shù)人 員能從本發(fā)明公開的內(nèi)容直接導(dǎo)出或聯(lián)想到的所有變形，均應(yīng)認(rèn)為是本發(fā)明 的保護范圍。
序列表SEQ ID No: 1ttggtgggtg cgtacgcgtg gggctcggtg gcggactcgc tgggccgcaa gcgcgtgctc 60 atcgccatct ccatcatcaa cgggctegcc ategtcgcct cttccttcac gcaaaactac 120 gagctcttca tgctcttccg attcatcaac ggcgctgcgt taggagggtc gggtccggta 180 atctggtcgt atttcgccga gttccagccg aaaaagaagc gaggcgctat gttgagcttc 240 atggcggctt tctggacgct cgggaacctg ttcgtggccg gcctcgcctg ggtcatcatt 300 ccagctgaaa toggcatcaa cacggcagga ttcgtctaca actcatggcg tatattcctg 360 ctggtgatgt cactgccgtc cttcgtggta gcggctottc tgttcctgct tcccgagtct 420 cccaagttcc tcatgtottg cggtagacac gaggatgcgt tagaagtctt caagggaatc 480 tatctcatga acacaggaaa gagcaaggag gagtatcccg tgaagcagat acttgtcgat 540 gatgtgcata tccacaacag caagcccgaa aaggtgaaga gcatcgatga ggcgcccaag 600 tcgaagacgc gtaagatgtt gagcgacatc gtggaacaca gcaagcagct gttcgtgccg 660 cccatcctca agttcactgc catctccate accatcaact ttaccttcca tatcgggtac 720 tacggcctga tgatgtggtt ccccgagatg ttcaaccgtt tcgacgagtg gtcgcgcgcc 780 aacgacaacg ctgaagctga catttgtcag gtgacgagat ac魄acgca gcaggggacg 840 cactcggcgg acgcgctgtg cgactogcac atccactccg atgtgtttca tttcatggag 900 tctctcatoa cggtcgccgc ggccatacct tccaacatct togccgtgct cggcatggac 960 cgcctoggga ggaagttctt cttggtgttc gcgacgttct ccgcgggcct gtgctcggcg 1020 gcgatgtact tcgtgtacaa caagaccaac aacctgatag tgagcgccat cttctcctcc 1080 gtcatatcct gcggaaacgc ctcgctcgac tgcctcatca cagaggtctt ccccaccaac 1140 ctacgagcga cgggtgtggc agtgtccatg gtagcagccc ggctgggagg cateatoggc 1200 aac跑魄a tagccgcact cctggatacc tactgtccag ctcccaccat catcaggaaa 1260SEQIDNo: 2Leu Val Gly Ala Tyr Ala Tip Gly Ser Val Ala Asp Ser Leu Gly 1 5 10 15Arg Lys Arg Val Leu lie Ala lie Ser lie lie Asn Gly Leu Ala 2025 30lie Val Ala Ser Ser Phe Thr Gin Asn Tyr Glu Leu Phe Met Leu 3540 45Phe Aig Phe lie Asn Gly Ala Ala Leu GlyGly Ser Gly Pro Val 5055 60lie Trp Ser Tyr Phe Ala Glu Phe Gin Pro Lys Lys Lys Arg Gly 6570 75Ala Met Leu Ser Phe Met Ala Ala Phe Trp Thr Leu Gly Asn Leu 8085 90Phe Val Ala Gly Leu Ala Trp Val lie lie Pro Ala Glu lie Gly 95100 105lie Asn Thr Ala Gly Phe Val Tyr Asn Ser Trp Arg He Phe Leu 110115 120Leu Val Met Ser Leu Pro Ser Phe Val Val Ala Ala Leu Leu Phe 125130 135Leu Leu Pro Glu Ser Pro Lys Phe Leu Met Ser Cys Gly Arg His 140145 150Glu Asp Ala Leu Glu Val Phe Lys Gly lie Tyr Leu Met Asn Thr 155160 165Gly Lys Ser Lys Glu Glu Tyr Pro Val Lys Gin lie Leu Val Asp 170175 180Asp Val His lie His Asn Ser Lys Pro Glu Lys Val Lys Ser lie 185190 195Asp Glu Ala Pro Lys Ser Lys Thr Arg Lys Met Leu Ser Asp lie 200205 210Val Glu His Ser Lys Gin Leu Phe Val Pro Pro lie Leu Lys Phe 215220 225Thr Ala lie Ser lie Thr lie Asn Phe Thr Phe His lie Gly Tyr 230235 240Tyr Gly Leu Met Met Trp Phe Pro Glu Met Phe Asn Arg Phe Asp 245250 255Glu Trp Ser Arg Ala Asn Asp Asn Ala Glu Ala Asp lie Cys Gin 260265 270Val Thr Arg Tyr Val Thr Gin Gin Gly Thr His Ser Ala Asp Ala 275280 285Leu Cys Asp Ser His He His Ser Asp Val Phe His Phe Met Glu 290295 300Ser Leu lie Thr Val Ala Ala Ala lie Pro Ser Asn lie Phe Ala 305310 315Val Leu Gly Met Asp Arg Leu Gly Arg Lys Phe Phe Leu Val Phe 320325 330Ala Thr Phe Ser Ala Gly Leu Cys Ser Ala Ala Met Tyr Phe Val 335340 345 Tyr Asn Lys Thr Asn Asn Leu lie Val Ser Ala lie Phe Ser Ser 350355 360Val lie Ser Cys Gly Asn Ala Ser Leu Asp Cys Leu lie Thr Glu 365370 375Val Phe Pro Thr Asn Leu Arg Ala Thr Gly Val Ala Val Ser Met 380385 390Val Ala Ala Arg Leu Gly Gly lie lie Gly Asn Val Val lie Ala 395400 405Ala Leu Leu Asp Thr Tyr Cys Pro Ala Pro Thr lie lie Arg Lys 410415 4205'-CTCGTAGACTGCGTACC -3' SEQIDNo: 3 (BspH據(jù)頭)3'- CATCTGACGCATGGGTAC-5'SEQIDNo: 4 (BssHII接頭)S，-GACGATGAGTCCTGAG -3' 3'- TACTCAGGACTCGCGC-5'SEQIDNo: 5 (預(yù)擴增上游引物) SEQIDNo: 6 (預(yù)擴增下游引物)-GTAGACTGCGTACCCATGA-3' 5 ， -GATGAGTCCTGACGCGC-3'SEQIDNo: 7 (選擇性擴增上游引物) SEQIDNo: 8 (選擇性擴增下游引物)-GACTGCGTACCCATGAA-3' -GATGAGTCCTGACGCGCG-3'SEQIDNo: 9 (選擇性擴增上游引物) SEQIDNo: 10 (選擇性擴增下游引物)隱GACTGCGTACCCATGAC-3' ，-GATGAGTCCTGACGCGCA-3 ，SEQIDNo: 11 (SVP基因上游引物) SEQIDNo: 12 (SVP基因下游引物)-TTGGTGGGTGCGTACGCGTG-3 ， -TTTCCTGATGATGGTGGGAG-3，
權(quán)利要求
1、一種茶尺蠖神經(jīng)突觸小泡蛋白基因svp，其特征是具有SEQ ID No1所示的核苷酸序列。
2、 如權(quán)利要求l所述的基因svp編碼的蛋白質(zhì)，其特征是:具有SEQIDNO: 2所示的氨基酸序列。
3、 如權(quán)利要求l所述的基因SVp的用途，其特征是用于評價和測定鱗翅目害蟲對農(nóng)藥的抗藥性。
4、 根據(jù)權(quán)利要求3所述的基因svp的用途，其特征是所述農(nóng)藥為擬除蟲菊酯類農(nóng)藥。
5、 根據(jù)權(quán)利要求3所述的基因svp的用途，其特征是所述鱗翅目害蟲為茶
全文摘要
本發(fā)明公開了一種茶尺蠖神經(jīng)突觸小泡蛋白基因svp，其具有SEQ ID NO1所示的核苷酸序列。本發(fā)明還公開了上述基因svp編碼的蛋白質(zhì)，其具有SEQID NO2所示的氨基酸序列。本發(fā)明也公開了上述基因的用途用于評價和測定鱗翅目害蟲對農(nóng)藥的抗藥性。
文檔編號C12N15/12GK101210246SQ20071016481
公開日2008年7月2日 申請日期2007年12月24日 優(yōu)先權(quán)日2007年12月24日
發(fā)明者杜穎穎, 楊曉利, 晨 林, 梁月榮, 陸建良 申請人:浙江大學(xué)