專利名稱：：一種苧麻脫膠復合酶的發(fā)酵誘導制備方法
技術領域：
：本發(fā)明屬酶的發(fā)酵領域，特別是涉及一種苧麻脫膠復合酶的發(fā)酵誘導制備方法。
背景技術：
：苧麻，昔時稱"中國草"，苧麻織物具有吸濕散熱快，通風透氣，易洗快干，穿著涼爽，強力高，能抑菌防腐、膨脹率大、導電小等特點，因此苧麻紡織品歷來為名貴紡織品之一。苧麻與其同類纖維的相似之處，都是莖纖維。但在其它方面，既有不同之處，又有許多缺點，在苧麻利用過程中造成很多困難譬如別的麻只要用水漚莖，就可以使韌皮纖維與中央木質部分離，而苧麻則不能，苧麻莖的單寧物質有很強的防腐性，可抑制漚麻細菌的繁殖。因此苧麻纖維的剝制必須依靠機械或很強的化學藥劑才能完成。脫膠是苧麻紡織的重點，提高苧麻纖維可紡性和染色效果的關鍵在于脫膠質量。為了將苧麻資源優(yōu)勢變?yōu)楫a(chǎn)品優(yōu)勢，必須提高麻的加工精度，開創(chuàng)好的脫膠加工工藝。目前苧麻脫膠常用的方法是堿液煮練的化學方法。使用強酸和強堿的高溫高壓或常溫常壓煮練,會使精干麻剛性大，抱合力差,織物手感粗硬,服用刺癢；還造成大量化工原料和能源的消耗，生產(chǎn)成本高，環(huán)境污染嚴重等自身不可避免的問題，所以亟待建立一種經(jīng)濟、安全、高效的生物脫膠方法。國內外生物脫膠方面的研究主要是利用微生物或酶處理苧麻纖維，如中國農(nóng)科院采用果膠酶產(chǎn)生菌進行脫膠；山東大學用果膠酶進行脫膠；武漢大學用嗜堿芽孢桿菌產(chǎn)生的果膠酶進行脫膠，日本用果膠酶和纖維素酶混合進行脫膠，美國有研究者用含真菌果膠酶的弱酸性溶液脫膠。但是這些技術方法都存在酶類單一，酶活性不高，生產(chǎn)成本高，效率低；工藝條件未被優(yōu)化，生產(chǎn)周期長等不足，使得生物脫膠的探索僅局限在實驗室或停留在中試階段，未能產(chǎn)業(yè)化。由于苧麻膠質復合體結構復雜，因此需要纖維素酶、木聚糖酶和果膠酶等脫膠酶系協(xié)同作用才可達到效果，而且這幾種酶均具有一定的可誘導性。但目前的研究僅以果膠質和半纖維素(木聚糖)為主攻對象，沒有充分考慮到纖維素在膠質中的作用。
發(fā)明內容本發(fā)明的目的是提供一種苧麻脫膠復合酶的發(fā)酵誘導制備方法，該方法針對苧麻膠質中各種成分，以苧麻為原料對菌種進行誘導產(chǎn)酶，獲得可降解苧麻中多組分的復合酶并以多酶協(xié)同作用以達到最優(yōu)的脫膠效果。本發(fā)明中里氏木霉木聚糖酶等半纖維素酶的產(chǎn)量較高，且能產(chǎn)生纖維素酶和果膠酶，可以通過調節(jié)產(chǎn)酶培養(yǎng)基中的碳氮比進而調控纖維素酶和木聚糖酶的活力比例，達到苧麻脫膠酶的最適配比，同時通過嚴格控制脫膠時間以減小纖維素酶對苧麻纖維的過度影響。本方法成本低廉，操作簡便，易于工業(yè)化生產(chǎn)。本發(fā)明的一種苧麻脫膠復合酶的發(fā)酵誘導制備方法，包括如下步驟(1)里氏木霉苧麻脫膠酶系的誘導制備將里氏木霉種子培養(yǎng)基在25~30°C，120-250r/min條件下培養(yǎng)40~48小時，以4~10%接種量轉接至含1~5%苧麻粉的發(fā)酵培養(yǎng)基產(chǎn)酶，培養(yǎng)過程中可以通過添加苧麻粉進一步誘導產(chǎn)酶，在2530'C，120250r/min條件下培養(yǎng)67天，過濾，離心得粗酶液；所述的里氏木霉種子是里氏木霉RutC30(7Wcto&mare"e/RutC30)，購自美國ATCC，編號ATCC56765，其種子培養(yǎng)基為1%葡萄糖，0.1~1%蛋白胨，0.05%擰檬酸，0.015%Tween80，2%Vogel，smediumN;所述的里氏木霉產(chǎn)酶培養(yǎng)基為0.1~1%葡萄糖，0.1~1%蛋白胨，0.05%檸檬酸，0.015%Tween80，2%Vogel，smediumN，添加1~5%苧麻粉，pH5.0;所述的培養(yǎng)產(chǎn)酶過程是間歇分批式的、分批補料式的或連續(xù)培養(yǎng)式。(2)測定纖維素酶、木聚糖酶和果膠酶活力①纖維素酶活力測定(a)粗酶液中還原糖的測定0.2mL粗酶液+0.8mL蒸餾水+1.5mL3，5-二硝基水楊酸(DNS)，沸水浴5min，冷卻后加4mL蒸餾水，550nm處測得ODj;(b)粗酶液與羧甲基纖維素鈉(CMC-Na)反應后總還原糖的測定0.2mL粗酶液+0.8mL1%CMC-Na溶液(用50mM，pH4.8的醋酸緩沖液配制)，50'C水浴10min后加入1.5mLDNS，沸水浴5min;冷卻后加4mL蒸餾水，550nm處測得0D2;(c)A0D二0D2—0D^l個酶活力單位(1U)定義為每分鐘水解羧甲基纖維素鈉產(chǎn)生lpmol還原糖(以葡萄糖計)的酶量，酶活(U/mL)=扁遷0><""，式中，K為標180x10準曲線斜率，N為稀釋倍數(shù)，1000為mg轉化為ng的系數(shù)，180為葡萄糖的分子量，10為反應時間(min)。②木聚糖酶活力測定(a)粗酶液中殘?zhí)呛繙y定0.5mL適當稀釋粗酶液+1mL水+3mLDNS，沸水浴5min，冷卻后加水定容至25mL，550nm處測得ODi;(b)粗酶液與木聚糖反應后總還原糖測定0.5mL經(jīng)適當稀釋的粗酶液(對所有樣品稀釋度恒定)+1mLl。/。木聚糖溶液(100mM，pH4.8的檸檬酸緩沖溶液配置)，5(TC水浴30min，力n3mLDNS，沸水浴5min，冷卻后加水定容至25mL，550nm處測得OD2;(c)AOD二OD2—ODi，一個木聚糖酶活力單位(1U)定義為每分鐘生成1pmol,木糖所需的酶量，酶活(U/mL)=雄x難由W，式中，K為標準曲線斜率，N為稀釋倍150x30數(shù)，1000為mg轉化為網(wǎng)的系數(shù)，150為木糖的分子量，30為反應時間(min)。③果膠酶活力測定(a)底物空白1mL0.1M檸檬酸緩沖液(pH5.0)+6mL0.5%聚半乳糖醛酸(由100mM，pH5.0的檸檬酸緩沖液配制)；(b)酶液空白1mL酶液+6mL0.1M檸檬酸緩沖液；(c)反應液lmL酶液+6mL0.5。/。聚半乳糖醛酸；(d)37。C水浴60min，冰水中冷卻中止反應，分別吸取100pL到新試管中(置于冰上)；加入2mLColorReagentA(40g無水Na2C03溶于600mL去離子水，加入16g甘氨酸，攪拌至溶解后再加入0.45gCuSCV5H20溶解后定溶于1L)禾a2mLColorReagentB(1.2g新銅試劑-HCl溶解于lL去離子水中，貯存于棕色試劑瓶中4""C保存)，倒置混勻；沸水浴13min，冷卻后加2mL水，倒置混勻；450nm處測定吸光值(水做空白)。底物空白、酶液空白和反應液的吸光值分別為ODi，OD2和OD3。(e)AOD-OD3—OD2—OD!，一個果膠酶活力單位(1U)定義為每分鐘生成1pmolD-半乳糖醛酸所需的酶量，酶活(U/mL)=廳x畫x"W，式中，K為標準曲線斜率，212x60N為稀釋倍數(shù)，1000為mg轉化為嗎的系數(shù)，212為D-半乳糖醛酸的分子量，60為反應時間(min)。(3)用發(fā)酵獲得的粗酶液處理苧麻用200mL自來水將3g原麻煮沸30min，再用粗酶液處理(浴比1:20~28，溫度30~50。C，轉速40~80rpm，時間20~24h)，處理后用100mL水洗3~5次后在6080'C條件下烘約2h，得到處理后的精干麻。本發(fā)明中纖維素酶、木聚糖酶和果膠酶的活力測定的反應原理纖維素酶和木聚糖酶分別能夠將各自的底物羧甲基纖維素鈉和木聚糖降解成寡糖和單糖，具有還原性末端的寡糖和有還原基團的單糖在沸水浴條件下可以與DNS試劑發(fā)生顯色反應。由于反應液顏色的強度與酶解產(chǎn)生的還原糖量成正比，而還原糖的生成量又與反應液中酶活力成正比，因此，可以通過分光比色測定反應液顏色的強度，從而計算反應液中相應酶的活力。果膠酶活力的測定原理與上同，只是果膠酶的底物為聚半乳糖醛酸，顯色劑為ColorReagentA和ColorReag6ntBo本發(fā)明中通過在培養(yǎng)過程中添加麻粉來誘導里氏木霉合成纖維素酶、木聚糖酶和果膠酶，通過調整改變培養(yǎng)基的碳氮比來優(yōu)化誘導合成的粗酶液中纖維素酶和木聚糖酶等半纖維素酶的活力比例。本發(fā)明的有益效果本發(fā)明利用方便易得且價格低廉的麻為原料誘導里氏木霉生產(chǎn)苧麻脫膠復合酶系。通過對發(fā)酵原料及其各成分配比的控制，生產(chǎn)出適合于苧麻脫膠的混合酶，并用生產(chǎn)的酶處理苧麻，為紡織工業(yè)中苧麻生物脫膠工藝改良提供新的思路和途徑。利用誘導的粗酶液處理苧麻，比常規(guī)的堿處理反應條件溫和；纖維離散度較高；對環(huán)境友好。本方法可得到較高的酶活，更適合麻脫膠的復合酶體系，而且安全環(huán)保，操作簡單，可控性強。圖1是實施例1-3中纖維素酶活力測定結果；圖2是實施例1-3中木聚糖酶活力測定結果圖3是實施例1-3中果膠酶活力測定結果。其中，圖l-3中，(參)代表實施例l，(▲)代表實施例2，(■)代表實施例3。具體實施例方式下面結合具體實施例，進一步闡述本發(fā)明。應理解，這些實施例僅用于說明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍；此外應理解，在閱讀了本發(fā)明講授的內容之后，本領域技術人員可以對本發(fā)明作各種改動或修改，這些等價形式同樣落于本申請所附權利要求書所限定的范圍。實施例11.苧麻化學組分測定試驗采用中華人民共和國國家標準GB5889-86中的苧麻化學成分定量分析方法，對本試驗所用苧麻原麻進行分析。所得結果如表1所示，與文獻報道的結果較為相符。表1苧麻化學成分定量分析<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>2.里氏木霉的種子培養(yǎng)(1)里氏木霉種子培養(yǎng)基1%葡萄糖，0.1%蛋白胨，0.05%檸檬酸，0.015%Tween80，2%Vogel，smediumN;(2)以里氏木霉(7>e"e/)RutC30為生產(chǎn)菌株，在pH5.0，3(TC，200r/min條件下培養(yǎng)48h。3.里氏木霉發(fā)酵產(chǎn)酶(1)里氏木霉產(chǎn)酶培養(yǎng)基0.1%葡萄糖，0.1%蛋白胨，0.05%檸檬酸，0.015%Tween80，2%Vogel，smediumN，添加2%苧麻粉，pH5.0;(2)以10%接種量，未加苧麻粉的培養(yǎng)為對照，在3(TC，160r/min條件下培養(yǎng)7d誘導產(chǎn)酶；(3)過濾或離心收集的發(fā)酵液清液就是苧麻脫膠復合酶液。4.纖維素酶活力測定(1)粗酶液中還原糖的測定0.2mL粗酶液+0.8mL蒸餾水+1.5mLDNS，沸水浴5min，冷卻后加4mL蒸餾水，550nm處測得0D1;(2)粗酶液與羧甲基纖維素鈉(CMC-Na)反應后總還原糖的測定0.2mL粗酶液+0.8mL1%CMC-Na溶液，50。C水浴10min后加入L5mLDNS，沸水浴5min;冷卻后加4mL蒸餾水，550nm處測得OD2;(3)厶0D-0D2—0D!，l個酶活力單位(1U)定義為每分鐘水解羧甲基纖維素鈉產(chǎn)生lnmol還原糖(以葡萄糖計)的酶量。(u/mL)=扁x難x"iV180x10式中K為標準曲線斜率，N為稀釋倍數(shù)，1000為mg轉化為嗎的系數(shù)，180為葡萄糖的分子量，IO為反應時間(分鐘)。5.木聚糖酶活力測定(1)粗酶液中殘?zhí)呛繙y定0.5mL適當稀釋粗酶液+lmL水+3mLDNS，沸水浴5min，冷卻后加水定容至25mL，550nm處測得ODi;(2)粗酶液與木聚糖反應后總還原糖測定0.5mL適當稀釋粗酶液+1mLP/。木聚糖溶液，5(TC水浴30min，力卩3mLDNS，沸水浴5min，冷卻后加水定容至25mL，550nm處測得OD2;(3)AOD=OD2—ODp—個木聚糖酶活力單位(1U)定義為每分鐘生成1nmol木糖所需的酶量。酶活(U/mL)=-150x30式中K為標準曲線斜率，N為稀釋倍數(shù)，1000為mg轉化為嗎的系數(shù)，150為木糖的分子量，30為反應時間(miti)。6.果膠酶活力測定(1)底物空白lmL0.1M檸檬酸緩沖液(pH5.0)+611^0.5%聚半乳糖醛酸；(2)酶液空白lmL酶液+6mL緩沖液；(3)反應液6mL0.5M聚半乳糖醛酸+lmL酶液；(4)37匸水浴60min，冰水中冷卻中止反應，分別吸取100到新試管中(置于冰上)；加入2mLColorReagentA(40g無水Na2C03溶于600mL去離子水，加入16g甘氨酸，攪拌至溶解后再加入0.45gCuS045H20溶解后定溶于1L)和2mLColorReagentB(1.2g新銅試劑-HCl溶解于lL去離子水中，貯存于棕色試劑瓶中4'C保存)，倒置混勻；沸水浴13min，冷卻后加2mL水，倒置混勻；450nm處測定吸光值(水做空白)。底物空白、酶液空白和反應液的吸光值分別為OD^OD2和OD3。(5)AOD=OD3—OD2—ODi，一個果膠酶活力單位(1U)定義為每分鐘生成1薩01D-半乳糖醛酸所需的酶量。駄、工/TT,T、A(9Dx層0xii:xiV酶活(U/mL)=-212x60式中K為標準曲線斜率，N為稀釋倍數(shù)，1000為mg轉化為嗎的系數(shù)，212為D-半乳糖醛酸的分子量，60為反應時間(min)。7.粗酶液處理苧麻用200mL自來水將3g原麻煮沸30min，然后在浴比1:24，溫度40'C，轉速50rpm的條件下用自制粗酶處理24h，反應結束后用100mL水洗5次，在8(TC條件下烘約2h，得到精干麻。實施例21.里氏木霉的種子培養(yǎng)(1)里氏木霉種子培養(yǎng)基1%葡萄糖，0.1%蛋白胨，0.05%檸檬酸，0.015%Tween80，2%Vogel，smediumN;(2)以里氏木霉RutC30為生產(chǎn)菌種，在pH5.0，30°C，200r/min條件下培養(yǎng)48h。2.里氏木霉發(fā)酵產(chǎn)酶(1)里氏木霉產(chǎn)酶培養(yǎng)基0.5%葡萄糖，0.1%蛋白胨，0.05%檸檬酸，0.015%Tween80，2%Vogel，smediumN，添加2%苧麻粉，pH5.0;(2)以10%接種量，未加苧麻粉的培養(yǎng)為對照，在3(TC，160r/min條件下培養(yǎng)7d誘導產(chǎn)酶；(3)過濾或離心收集的發(fā)酵液清液就是苧麻脫膠復合酶液。3.纖維素酶活力測定，詳見實施例l。4.木聚糖酶活力測定，詳見實施例l。5.果膠酶活力測定，詳見實施例l。6.粗酶液處理苧麻，詳見實施例l。實施例31.里氏木霉的種子培養(yǎng)(1)里氏木霉種子培養(yǎng)基1%葡萄糖，0.1%蛋白胨，0.05%檸檬酸，0.015%Tween80，2%Vogel，smediumN;(2)以里氏木霉RutC30為生產(chǎn)菌種，在pH5.0，30'C，200r/min條件下培養(yǎng)48h。2.里氏木霉發(fā)酵產(chǎn)酶(1)里氏木霉產(chǎn)酶培養(yǎng)基1%葡萄糖，0.1%蛋白胨，0.05%檸檬酸，0.015%Tween80，2%Vogel，smediumN，pH5.0;(2)以10°/。接種量，在30。C，130r/min條件下培養(yǎng)7h誘導產(chǎn)酶；(3)過濾或離心收集的發(fā)酵液清液就是苧麻脫膠復合酶液。3.纖維素酶活力測定，詳見實施例l。4.木聚糖酶活力測定，詳見實施例l。5.果膠酶活力測定，詳見實施例l。6.粗酶液處理苧麻，詳見實施例l。通過比較實施例1至實施例3的酶活測定結果可知(見圖l、圖2、圖3),里氏木霉可通過在培養(yǎng)基中添加苧麻粉誘導產(chǎn)生苧麻脫膠復合酶系，用誘導產(chǎn)生的酶液處理苧麻，可以得到離散度較好的麻纖維；而未加苧麻粉誘導的粗酶液處理效果遠不如誘導產(chǎn)生的酶液。此外，發(fā)酵培養(yǎng)基中的碳氮比也會影響到纖維素酶和木聚糖酶的產(chǎn)量，生產(chǎn)中可以根據(jù)需要調整碳氮比例以達到最佳的脫膠酶系。實施例2中的碳氮比例較實施例1提高了5倍，前者中纖維素酶活最大為3.2U/mL，木聚糖酶活最大為2.5U/mL，而后者中纖維素酶活最大為0.8U/mL，木聚糖酶活最大為35U/mL。權利要求1.一種苧麻脫膠復合酶的發(fā)酵誘導制備方法，包括下列步驟(1)里氏木霉苧麻脫膠酶的誘導制備將里氏木霉種子培養(yǎng)基在25～30℃，120～250r/min條件下培養(yǎng)40～48小時，以4～10％接種量轉接至含1～5％苧麻粉的發(fā)酵培養(yǎng)基產(chǎn)酶，在25～30℃，120～250r/min條件下培養(yǎng)6～7天，過濾，離心得粗酶液；(2)測定纖維素酶、木聚糖酶和果膠酶活力；(3)用發(fā)酵獲得的粗酶液處理苧麻用水將原麻煮沸后，用步驟(1)中的酶液處理20～24小時，其中浴比1∶20～28，溫度30～50℃，轉速40～80r/min，處理后用水洗滌，60～80℃烘干，得處理后的精干麻。2.根據(jù)權利要求1所述的苧麻脫膠復合酶的發(fā)酵誘導制備方法，其特征在于，所述的里氏木霉種子是里氏木霉RutC30，其種子培養(yǎng)基為1%葡萄糖，0.1~1%蛋白胨，0.05%檸檬酸，0.015%Tween80，2%Vogel，smediumN。3.根據(jù)權利要求1所述的苧麻脫膠復合酶的發(fā)酵誘導制備方法，其特征在于，所述步驟(1)中的發(fā)酵培養(yǎng)基為-0.1~1%葡萄糖，0.1~1%蛋白胨，0.05%檸檬酸，0.015%Tween80，2%Vogel，smediumN，添加15%苧麻粉，pH5.0。4.根據(jù)權利要求1所述的苧麻脫膠復合酶的發(fā)酵誘導制備方法，其特征在于，所述的纖維素酶活力測定步驟(a)粗酶液中還原糖的測定0.2mL粗酶液+0.8mL蒸餾水+1.5mL3,5-二硝基水楊酸DNS，沸水浴5min，冷卻后加4mL蒸餾水，550nm處測得ODu(b)粗酶液與羧甲基纖維素鈉CMC-Na反應后總還原糖的測定0.2mL粗酶液+0.8mL以50mM，pH4.8的醋酸緩沖液配制的1%CMC-Na溶液，50。C水浴10min后加入1.5mLDNS，沸水浴5min;冷卻后加4mL蒸餾水，550nm處測得0D2;(c)A0D二0D2—0Dj1個酶活力單位定義為每分鐘水解羧甲基纖維素鈉產(chǎn)生1tmiol葡萄糖還原糖的酶量，酶活U/m卜磨x，"xiV，式中，K為標準曲線斜率，N為稀釋倍數(shù)，1000為mg180x10轉化為嗎的系數(shù)，180為葡萄糖的分子量，10為反應時間min。5.根據(jù)權利要求1所述的苧麻脫膠復合酶的發(fā)酵誘導制備方法，其特征在于，所述的木聚糖酶活力測定步驟-(a)粗酶液中殘?zhí)呛繙y定0.5mL稀釋粗酶液+1mL水+3mLDNS，沸水浴5min，冷卻后加水定容至25mL,550nm處測得OD"(b)粗酶液與木聚糖反應后總還原糖測定0.5mL經(jīng)稀釋的粗酶液+以100mM，pH4.8的檸檬酸緩沖溶液配制的1mL"/。木聚糖溶液，5(TC水浴30min，力[]3mLDNS，沸水浴5min，冷卻后加水定容至25mL，550nm處測得0D2;(c)A0D-0D2—0Dj一個木聚糖酶活力單位定義為每分鐘生成1pmol木糖所需的酶量，酶活U/mL=，x畫"xiV，式中，K為標準曲線斜率，N為稀釋倍數(shù)，1000為mg轉化為ng的150x30系數(shù)，150為木糖的分子量，30為反應時間min。6.根據(jù)權利要求1所述的苧麻脫膠復合酶的發(fā)酵誘導制備方法，其特征在于，所述的果膠酶活力測定步驟(a)底物空白1mL0.1MpH5.0檸檬酸緩沖液+以100mM，pH5.0的檸檬酸緩沖液配制的6mL0.5%聚半乳糖醛酸；(b)酶液空白1mL酶液+6mLO.lM檸檬酸緩沖液；(c)反應液lmL酶液+6mL0.5y。聚半乳糖醛酸；(d)37'C水浴60min，冰水中冷卻中止反應，分別吸取100到試管中，置于冰上；加入2mLColorReagentA和2mLColorReagentB，倒置混勻，沸水浴13min，冷卻后加2mL水，倒置混勻，450nm處測定吸光值，并以水為空白，底物空白、酶液空白和反應液的吸光值分別為ODi，OD2和OD3。(e)厶OD-OD3-OD2-OD1一個果膠酶活力單位定義為每分鐘生成1^1111010-半乳糖醛酸所需的酶量，酶活<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>，式中，K為標準曲線斜率，N為稀釋倍數(shù)，1000為mg轉化為嗎的212x60。系數(shù)，212為D-半乳糖醛酸的分子量，60為反應時間min。7.根據(jù)權利要求6所述的苧麻脫膠復合酶的發(fā)酵誘導制備方法，其特征在于，所述的ColorReagentA是以40g無水Na2C03溶于600mL去離子水，加入16g甘氨酸，攪拌至溶解后再加入0.45gCuS04'5H20溶解后定溶于1L所配制的溶液，ColorReagentB是以1.2g新銅試劑-HCl溶解于1L去離子水中所配制的溶液。8.根據(jù)權利要求1所述的苧麻脫膠復合酶的發(fā)酵誘導制備方法，其特征在于，所述的培養(yǎng)產(chǎn)酶過程是間歇分批式的、分批補料式的或連續(xù)培養(yǎng)式。全文摘要本發(fā)明涉及一種苧麻脫膠復合酶的發(fā)酵誘導制備方法，步驟包括(1)里氏木霉苧麻脫膠酶系的誘導制備；(2)測定纖維素酶、木聚糖酶和果膠酶活力；(3)用發(fā)酵獲得的粗酶液處理苧麻。本發(fā)明可得到較高的酶活，更適合麻脫膠的復合酶體系，而且成本低廉，操作簡便，易于工業(yè)化生產(chǎn)。文檔編號C12N9/24GK101186907SQ20071017193公開日2008年5月28日申請日期2007年12月7日優(yōu)先權日2007年12月7日發(fā)明者楓洪,坤鐘申請人:東華大學