專利名稱：一種雜交瘤細胞擴增培養(yǎng)基及其用途的制作方法
技術領域：
發(fā)明涉及一種培養(yǎng)基及其用途，更具體地說涉及一種雜交瘤細胞擴增培養(yǎng)基 及其用途。屬于生物制品領域。
背景技術：
細胞培養(yǎng)基是生物制品領域中常用的物質，在細菌和細胞培養(yǎng)中十分必要。 目前培養(yǎng)雜交瘤細胞的培養(yǎng)基的缺點是目前，動物血清作為哺乳動物細胞培養(yǎng) 基的關鍵成分被廣泛應用，以牛血清為主。但是動物血清缺點是價格昂貴，成 分不明確，產(chǎn)品批間差異大，含有細胞生長抑制成分，且更為嚴重的是可能含有 細菌、病毒等，導致潛在生物性污染
發(fā)明內(nèi)容
要解決的問題
本發(fā)明的目的，是提供一種雜交瘤細胞(HYBRIDOMA細胞)擴增培養(yǎng)基及其 用途。
技術方案
一種雜交瘤細胞擴增無血清培養(yǎng)基及其用途，其中，包括基本培養(yǎng)基，還 包括核苷酸和激素。
上述的基本培養(yǎng)基包括氨基酸、維生素、無機鹽、其他營養(yǎng)物質。 上述的基本培養(yǎng)基包括的組份及含量為 氨基酸的組成及重量份如下
成份 Mg/L L-丙氨酸 5-35 L-精氨酸鹽酸鹽 50- 450一水L-門冬酰胺
L-天冬氨酸
L-胱氨酸鹽酸鹽
一水L-半胱氨酸鹽酸鹽
L-谷氨酸
L-谷氨酰胺
谷氨酸
一水L-組氨酸鹽酸鹽
L-羥脯氨酸
L-異亮氨酸
L-亮氨酸
L-賴氨酸鹽酸鹽
L-甲硫氨酸
L-苯丙氨酸
L-脯氨酸
L-絲氨酸
L-蘇氨酸
L-色氨酸
L-酪氨酸
L-纈氨酸
維生素的組成及重量份如下
成份
抗壞血酸鈉 D-生物素 維生素D2 氯化膽堿
3. 5-25 13-45 5. 3-45 3. 2-25 25-120 68-500 12-65 8-65
2. 5-8. 0 12-50 15-85 30-150 5-35 5-45 25-89 10-45 10-45
3. 5-15 12-65 5—36
Mg/L
0. 01-0. 65 0. 001—0. 08 0. 01-0. 5 3. 6—16
葉酸0. 1-3. 5
肌醇12-35
煙酰胺0. 01-0. 5
煙酸0. 001-0. 25
p-對氨基苯曱酸0. 007-0. 6
D-泛酸4丐0. 06-0. 98
鹽酸吡。多醛0. 01-0. 65
鹽酸吡p多辛0. 01-0. 75
維生素A0. 01-0. 65
核黃素0. 005—0. 5
維生素E0. 001-0. 03
維生素B,鹽酸鹽0. 05_1. 2
維生素B120. 2-2. 6
無才幾鹽的組成及重量份如下
成份Mg/L
偏釩酸銨0. 0000001-0. 002
氯化鈣50-200
五水》克酸銅0. 00001-0. 02
竭酸鐵0. 002-3
七水》克酸纟失0. 05-4
氯化鎂10-80
硫酸鎂20-150
石危酸錳0. 00001-0. 05
氯化鉀150-600
碳酸氬鈉2000- 8000
氯化鈉4000-10000 磷酸氫二鈉50-150
七水》克酸鋅0. 02-5
其他營養(yǎng)物質的組成及重量份如下成份Mg/L
腺噪呤硫酸鹽3. 5-12. 3
三磷酸腺苷0. 12-1. 6
膽固醇0. 05-0. 4
2-脫氧-D-核糖0. 06-0. 78
D-核糖0. 06-0. 78
D-葡萄糖1500-5600
谷胱甘肽(還原型)0. 01-0. 065
鳥噤呤鹽酸鹽0. 052-0. 65
羥脯氨酸鈉0. 65-4. 5
亞油酸0. 009-0. 3
消旋硫辛酸0. 05-0. 65
酚紅4. 5-25
腐胺0. 65-3. 6
丙酮酸鈉50-350
乙醇胺0. 008-0. 25
半乳糖0. 002-0. 6
2巰基乙醇0. 008-0. 35
胸腺嗜啶0. 06—0. 8
上述的基本培養(yǎng)基包括的組份及含量為 氨基酸的組成及重量份如下
成份 Mg/L L-丙氨酸19. 662
L-精氨酸鹽酸鹽162.98
一水L-門冬酰胺8. 7
L-天冬氨酸24. 94
L-胱氨酸鹽酸鹽20. 358
一水L-半胱氨酸鹽酸鹽15. 08
L-谷氨酸52. 026
L-谷氨酰胺232
谷氨酸33. 35
一水L-組氨酸鹽酸鹽24. 94
L-羥脯氨酸5. 8
L-異亮氨酸25. 52
L-亮氨酸42. 34
L-賴氨酸鹽酸鹽61. 77
L-曱硫氨酸11. 31
L-苯丙氨酸17. 4
L-脯氨酸43. 21
L-絲氨酸20. 59
L-蘇氨酸24. 36
L-色氨酸6. 96
L-酪氨酸38.164
L-纈氨酸21. 286
維生素的組成及重量份如下
成份Mg/L
抗壞血酸鈉 0. 061828
D-生物素 0. 00986
維生素D20. 058
氯化膽堿8. 41
葉酸0. 7598
肌醇20. 909
煙酰胺0. 0377
煙酸0. 0145
P-對氨基苯曱酸0. 029
D-泛酸4丐0. 2958
鹽酸吡口多醛0. 0435
鹽酸吡噴辛0. 0493
維生素A0. 0812
核黃素0. 029
維生素E0. 0058
維生素B1鹽酸鹽0. 1798
維生素B120. 812
無4幾鹽的組成及重量份如下
成份Mg/L
偏釩酸銨0. 0013572
氯化4丐135.256
五水-琉酸銅0. 00145
竭酸鐵0. 4176
七水硫酸鐵0. 4814
氯化鎂33. 1876
硫酸鎂56. 84
硫酸錳0. 00017516
氯化郜361. 688
石友酸氫鈉 4278. 08
氯化鈉6200
磷酸氬二鈉82. 36
七水好u酸4爭0. 4988
其他營養(yǎng)物質的組成及重量份如下成份Mg/L
腺噪呤硫酸鹽5. 8
三磷酸腺苦0. 58
膽固醇0. 116
2-脫氧-D-核糖0. 29
D-核糖0. 29
D-葡萄糖3480
谷胱甘肽(還原型)0. 029
鳥。票呤鹽酸鹽0. 174
羥脯氨酸鈉2. 9986
亞油酸0. 0464
消旋硫辛酸0. 1218
酚紅12. 296
腐胺1.96098
丙酮酸鈉191. 4
乙醇胺0. 0232
半乳糖0. 06
2巰基乙醇0. 0232
胸腺嗜啶0. 174
上述的核苷和激素包括的組份及含量為:
成份Mg/L
腺苷2. 5-8. 5
尿嘧啶2. 5-8. 5
胞苷2. 5-8. 5
鳥。票呤2. 5-8. 6
胰島素3. 5-8. 9
地塞米松0. 07-0. 75
氫化可的松0. 006-0. 5
前列腺素El0. 007-0. 21
三碘曱狀腺原氨酸0. 000006—0. 0001
上述的核苷和激素包括的組份及含量為:
成份Mg/L
腺苷4. 06
尿嘧啶4. 06
胞苷4. 06
鳥嘌呤4. 06
胰島素5. 8
地塞米松0. 232
氬化可的松0. 01856
前列腺素El0. 029
三碘曱狀腺原氨酸0. 00003828
上述的培養(yǎng)基在培養(yǎng)雜交瘤細胞培養(yǎng)過程中的用途。
上述的雜交瘤細胞擴增無血清培養(yǎng)基，可以直接替換含血清常規(guī)培養(yǎng)基，雜
交瘤細胞不需要適應過程；上述的培養(yǎng)基使用條件為溫度37。C, 0)2濃度5°/。， 相對濕度>95%;優(yōu)選的培養(yǎng)基使用條件為溫度37'C, (^02濃度5%，相對濕度〉98%。
本發(fā)明產(chǎn)品的優(yōu)點是本發(fā)明的雜交瘤細胞無血清培養(yǎng)基，不含任何動物血
清，以氨基酸，維生素，無機鹽，糖類，脂肪酸和核苷酸和激素組成。
本發(fā)明組分均可人工合成，均為結構明確的化學物質，使本培養(yǎng)基產(chǎn)品具有 極高的一致性和穩(wěn)定性。轉鐵蛋白和胰島素，無論動物源性提取純化來源或經(jīng)重 組蛋白技術人工合成獲得，都價格昂貴，用以上組分替代后，培養(yǎng)基成本顯著降 低。另外，因本培養(yǎng)基不含蛋白質組分，使得應用本培養(yǎng)基培養(yǎng)的CHO細胞進行 重組蛋白生產(chǎn)時，其下游純化工作極大簡化，節(jié)約成本，利于提高重組蛋白的純 度。
此雜交瘤細胞無血清培養(yǎng)基，可以直接替換含血清常規(guī)培養(yǎng)基，雜交瘤細胞 不需要適應過程。


圖1為無血清培養(yǎng)基雜交瘤細胞擴增培養(yǎng)基實施例1的培養(yǎng)曲線；
圖2為無血清培養(yǎng)基雜交瘤細胞擴增培養(yǎng)基實施例2的培養(yǎng)曲線。
具體實施例方式
實施例1
培養(yǎng)基由基本培養(yǎng)基、核苷和激素組成，其中，基本培養(yǎng)基包括的組份及 含量為
氨基酸的組成及重量份如下
成份 Mg/L
L-丙氨酸 35
L-精氨酸鹽酸鹽 450
一水L-門冬酰胺 25
L-天冬氨酸 45
L-胱氨酸鹽酸鹽 45
一水L-半胱氨酸鹽酸鹽 25
L-谷氨酸 120
L-谷氨酰胺 500
谷氨酸65 一水L-組氨酸鹽酸鹽65
L-輕脯氨酸8. 0
L-異亮氨酸50
L-亮氨酸85
L-賴氨酸鹽酸鹽150
L-曱硫氨酸35
L-苯丙氨酸45
L-脯氨酸89
L-絲氨酸45
L-蘇氨酸45
L-色氨酸15
L-酪氨酸65
L-纈氨酸36
維生素的組成及重量份如下
成份Mg/L
抗壞血酸鈉0. 65
D-生物素0. 08
維生素D20. 5
氯化膽堿16
葉酸3. 5
肌醇35
煙酰胺0. 5
煙酸0. 25
P-對氨基苯曱酸0. 6
D-泛酸釣0. 98
鹽酸吡"多醛0. 65 鹽酸吡噴辛0. 75
維生素A0. 65
核黃素0. 5
維生素E0. 03
維生素B1鹽酸鹽1. 2
維生素B122. 6
無機鹽的組成及重量份如下
成份Mg/L
偏釩酸銨0. 002
氯化4丐200
五水硫酸銅0. 02
硝酸鐵3
七水硫酸鐵4
氯化鎂80
硫酸鎂150
硫酸錳0. 05
氯化鉀600
碳酸氫鈉8000
氯化鈉10000
磷酸氫二鈉150
七水;克酸鋅5
其他營養(yǎng)物質的組成及重量份如下成份Mg/L
腺噪呤硫酸鹽12. 3
三磷酸腺苦1. 6 膽固醇0. 4
2-脫氧-D-核糖0. 78
D-核糖0. 78
D-葡萄糖5600
谷胱甘肽(還原型)0. 065
鳥嘌呤鹽酸鹽0. 65
鞋脯氨酸鈉4. 5
亞油酸0. 3
消旋硫辛酸0. 65
酚紅25
腐胺3. 6
丙酮酸鈉350
乙醇胺0. 25
半乳糖0. 6
2琉基乙醇0. 35
胸腺嘧咬0. 8。
核苷和激素包括的組份及含量為:
成份 Mg/L
腺苷 8. 5
尿嗜啶 8. 5
胞苷 8. 5
鳥噤呤 8. 6
胰島素 8. 9
地塞米爭〉 0. 75
氫化可的松 0. 5
前列腺素El 0.21
三碘曱狀腺原氨酸 0.0001。
實施例2
培養(yǎng)基由基本培養(yǎng)基、核苷和激素組成，其中，基本培養(yǎng)基包括的組份及 含量為
氨基酸的組成及重量份如下
成份Mg/L
L-丙氨酸5
L-精氨酸鹽酸鹽50
一水L-門冬酰胺3. 5
L-天冬氨酸13
L-胱氨酸鹽酸鹽5. 3
一水L-半胱氨酸鹽酸鹽3. 2
L-谷氨酸25
L-谷氨酰胺68
谷氨酸12
一水L-組氨酸鹽酸鹽8
L-羥脯氨酸2. 5
L-異亮氨酸12
L-亮氨酸15
L-賴氨酸鹽酸鹽30
L-曱硫氨酸5
L-苯丙氨酸5
L-脯氨酸25
L-絲氨酸10
L-蘇氨酸10
L-色氨酸3. 5
L-酪氨酸12 L-纈氨酸 5
維生素的組成及重量份如下
成份 Mg/L
抗壞血酸鈉 0. 01
D-生物素 0. 001
維生素D2 0.01
氯化膽堿 3. 6
葉酸 0. 1
肌醇 12
煙酰胺 0. 01
煙酸 0. 001
P-對氨基苯甲酸 0.007
D-泛酸4丐 0. 06
鹽酸吡噴醛 0. 01
鹽酸吡。多辛 0. 01
維生素A 0. 01
核黃素 0. 005
維生素E 0. 001
維生素Bl鹽酸鹽 0. 05
維生素B12 0.2
無機鹽的組成及重量份如下
成份 Mg/L
偏釩酸銨 0. 0000001
氯化鉤 50
五水碌L酸銅 G. 00001
硝酸鐵0. 002
七水硫酸鐵0. 05
氯化鎂10
硫酸鎂20
硫酸錳0. 00001
氯化鉀150
碳酸氫鈉2000
氯化鈉4000
磷酸氫二鈉50
七水辟u酸4爭0. 02
其他營養(yǎng)物質的組成及重量份如下成份Mg/L
腺。票呤碌u酸鹽3. 5
三磷酸腺苷0. 12
膽固醇0. 05
2-脫氧-D-核糖0. 06
D-核糖0. 06
D-葡萄糖1500
谷胱甘肽(還原型)0. 01
鳥噤呤鹽酸鹽0. 052
輕脯氨酸鈉0. 65
亞油酸0. 009
消旋硫辛酸0. 05
酚紅4. 5
腐胺0. 65
丙酮酸鈉50
乙醇胺 0.008
半乳糖 G. 002
2巰基乙醇 0.008
胸腺嘧啶 Q. 06。
核苷和激素包括的組份及含量為
成份 Mg/L
腺芬 2. 5
尿嗜咬 2. 5
胞苦 2. 5
鳥噤呤 2. 5
胰島素 3. 5
地塞米+〉 0. 07
氫化可的松 0. 006
前列腺素E1 0.007
三硤曱狀腺原氨酸 0.000006。
實施例3
培養(yǎng)基由基本培養(yǎng)基、核苷和激素組成，其中，基本培養(yǎng)基包括的組份及 含量為
氨基酸的組成及重量份如下
成份
L-丙氨酸 L-精氨酸鹽酸鹽 一水L-門冬酰胺 L-天冬氨酸 L-胱氨酸鹽酸鹽
25
Mg/L
19. 662 162.98 8. 7 24. 94
20. 358
一水L-半胱氨酸鹽酸鹽15. 08
L-谷氨酸52.026
L-谷氨酰胺232
谷氨酸33. 35
一水L-組氨酸鹽酸鹽24. 94
L-羥脯氨酸5. 8
L-異亮氨酸25. 52
L-亮氨酸42. 34
L-賴氨酸鹽酸鹽61. 77
L-曱硫氨酸11. 31
L-苯丙氨酸17. 4
L-脯氨酸43. 21
L-絲氨酸20. 59
L-蘇氨酸24. 36
L-色氨酸6. 96
L-酪氨酸38. 164
L-纈氨酸21.286
維生素的組成及重量份如下
成份Mg/L
抗壞血酸鈉0. 061828
D-生物素0. 00986
維生素D20. 058
氯化膽堿8. 41
葉酸0. 7598
肌醇20. 909
煙酰胺0. 0377
煙酸0. 0145
p-對氨基苯曱酸0. 029
D-泛酸鉤0. 2958
鹽酸吡噴醛0. 0435
鹽酸吡。多辛0. 0493
維生素A0. 0812
核黃素0. 029
維生素E0. 0058
維生素B1鹽酸鹽0. 1798
維生素B120. 812
無機鹽的組成及重量份如下
成份Mg/L
偏釩酸銨0. 0013572
氯化鈣135. 256
五水碌u酸銅0. 00145
硝酸鐵0. 4176
七水硫酸鐵0. 4814
氯化鎂33. 1876
硫酸鎂56. 84
硫酸錳0. 00017516
氯化鉀361. 688
碳酸氫鈉4278.08
氯化鈉6200
磷酸氫二鈉82. 36
七水硫酸鋅0. 4988
其他營養(yǎng)物質的組成及重量份如下:
成份Mg/L
腺噤呤硫酸鹽5. 8
三磷酸腺芬0. 58
膽固醇0. 116
2-脫氧-D-核糖0. 29
D-核糖0. 29
D-葡萄糖3480
谷胱甘肽(還原型)0. 029
鳥。票呤鹽酸鹽0. 174
羥脯氨酸鈉2. 9986
亞油酸0. 0464
消旋硫辛酸0. 1218
酚紅12. 296
腐胺1.96098
丙酮酸鈉191. 4
乙醇胺0. 0232
半乳糖0. 06
2巰基乙醇0. 0232
胸腺嘧咬0. 174。
核苷和激素包括的組份及含量為
成份 Mg/L
腺苷 4. 06
尿。密咬 4. 06
胞苷 4. 06鳥噤呤 4. 06
胰島素 5. 8
地塞米松 0.232
氳化可的爭> 0. 01856
前列腺素El 0. 029
三石典曱狀腺原氨酸 0. 00003828。
實施例4
培養(yǎng)基由基本培養(yǎng)基、核苷和激素組成，其中，基本培養(yǎng)基包括的組份及 含量為
氨基酸的組成及重量份如下
成份Mg/L
L-丙氨酸5
L-精氨酸鹽酸鹽450
一水L-門冬酰胺3. 5
L-天冬氨酸45
L-胱氨酸鹽酸鹽5. 3
一水L-半胱氨酸鹽酸鹽25
L-谷氨酸25
L-谷氨酰胺500
谷氨酸12
一水L-組氨酸鹽酸鹽8
L-羥脯氨酸8. 0
L-異亮氨酸12
L-亮氨酸15
L-賴氨酸鹽酸鹽150
L-甲硫氨酸35
L-苯丙氨酸5
L-脯氨酸89
L-絲氨酸10
L-蘇氨酸10
L-色氨酸15
L-酪氨酸12
L-纈氨酸36
維生素的組成及重量份如下
成份Mg/L
抗壞血酸鈉0. 01
D-生物素0. 08
維生素D20. 01
氯化膽堿3. 6
葉酸0. 1
肌醇35
煙酰胺0. 01
煙酸0. 001
P-對氨基苯曱酸0. 6
D-泛酸4丐0. 98
鹽酸吡。多醛0. 01
鹽酸吡噴辛0. 75
維生素A0. 01
核黃素0. 5
維生素E0. 001
維生素B1鹽酸鹽1. 2
維生素B122. 6
無機鹽的組成及重量份如下:
成份Mg/L
偏釩酸銨0. 00000
氯化釣200
五水辟L酸銅0. 00001
硝酸鐵0. 002
七水硫酸鐵4
氯化鎂10
硫酸鎂20
硫酸錳0. 05
氯化鉀600
碳酸氬鈉2000
氯化鈉10000
磷酸氬二鈉50
七水硫酸鋅0. 02
其他營養(yǎng)物質的組成及重量份如下成份Mg/L
腺噤呤硫酸鹽12. 3
三磷酸腺香0. 12
膽固醇0. 4
2-脫氧-D-核糖0. 06
D-核糖0. 78
D-葡萄糖5600
谷胱甘肽(還原型)0. 01
鳥噤呤鹽酸鹽0. 65
輕脯氨酸鈉0. 65
亞油酸0. 3
消旋硫辛酸0. 05
酚紅25
腐胺0. 65
丙酮酸4內(nèi)350
乙醇胺0. 008
半乳糖0. 6
2巰基乙醇0. 008
胸腺嘧啶0. 8。
核普和激素包括的組份及含量為:
成份Mg/L
腺苷2. 5
尿嘧啶8. 5
胞苷2. 5
鳥嘌呤8. 6
胰島素3. 5
地塞米松0. 75
氫化可的松0. 5
前列腺素El0. 007
三碘曱狀腺原氨酸0. 000006。
實施例5
培養(yǎng)基由基本培養(yǎng)基、核脊和激素組成，其中，基本培養(yǎng)基包括的組份及 含量為
氨基酸的組成及重量份如下
成份Mg/L
L-丙氨酸5
L-精氨酸鹽酸鹽50
一水L-門冬酰胺25
L-天冬氨酸45
L-胱氨酸鹽酸鹽5. 3
一水L-半胱氨酸鹽酸鹽25
L-谷氨酸25
L-谷氨酰胺68
谷氨酸65
一水L-組氨酸鹽酸鹽65
L-羥脯氨酸8. 0
L-異亮氨酸12
L-亮氨酸15
L-賴氨酸鹽酸鹽30
L-曱硫氨酸35
L-苯丙氨酸5
L-脯氨酸89
L-絲氨酸45
L-蘇氨酸10
L-色氨酸3. 5
L-酪氨酸65
L-纈氨酸5
維生素的組成及重量份如下
成份 Mg/L 抗壞血酸鈉 0. 01
D-生物素0. 001
維生素D20. 5
氯化膽堿16
葉酸0. 1
肌醇12
煙酰胺0. 01
煙酸0. 001
P-對氨基苯甲酸0. 6
D-泛酸鈣0. 06
鹽酸吡噴醛0. 65
鹽酸吡噴辛0. 01
維生素A0. 65
核黃素0. 005
維生素E0. 03
維生素B1鹽酸鹽0. 05
維生素B120. 2
無才幾鹽的組成及重量份如下
成份Mg/L
偏釩酸銨0. 0000001
氯化鉤50
五水碌u酸銅0. 02
硝酸鐵3
七水硫酸鐵4
氯化鎂10
硫酸鎂20
硫酸錳0. 04 氯化鉀 150
碳酸氫鈉 6000
氯化鈉 10000
磷酸氫二鈉 50
七水碌b酸鋅 0. 02
其他營養(yǎng)物質的組成及重量份如下:
成份Mg/L
腺喋呤硫酸鹽3. 5
三磷酸腺芬1. 6
膽固醇0. 4
2-脫氧-D-核糖0. 78
D-核糖0. 06
D-葡萄糖5600
谷胱甘肽(還原型)0. 01
鳥嘌呤鹽酸鹽0. 65
羥脯氨酸鈉4. 5
亞油酸0. 3
消旋硫辛酸0. 09
酚紅25
腐胺0. 65
丙酮酸鈉350
乙醇胺0. 008
半乳糖0. 002
2巰基乙醇0. 35
胸腺嘧咬0. 06。
核苷和激素包括的組份及含量為:
成份Mg/L
腺苷8. 5
尿嗜啶2. 5
胞苷8. 5
鳥噤呤2. 5
胰島素8. 9
地塞米松0. 07
氫化可的松0. 006
前列腺素El0. 21
三碘曱狀腺原氨酸0.0001。
權利要求
1.一種雜交瘤細胞擴增無血清培養(yǎng)基及其用途，其特征在于包括基本培養(yǎng)基，還包括核苷酸和激素。
2. 如權利要求1所述的培養(yǎng)基，其特征在于其中所述的基本培養(yǎng)基包括氨 基酸、維生素、無機鹽、其他營養(yǎng)物質。
3. 如權利要求2所述的培養(yǎng)基，其特征在于其中所述的基本培養(yǎng)基包括的組 份及含量為氨基酸的組成及重量份如下成份Mg/LL-丙氨酸5-35L-精氨酸鹽酸鹽50- 450一水L-門冬酰胺3. 5-25L-天冬氨酸13-45L-胱氨酸鹽酸鹽5. 3-45一水L-半胱氨酸鹽酸鹽3. 2-25L-谷氨酸25-120L-谷氨酰胺68-500谷氨酸12-65一水L-組氨酸鹽酸鹽8-65L-羥脯氨酸2. 5-8. 0L-異亮氨酸12-50L-亮氨酸15-85L-賴氨酸鹽酸鹽30-150L-甲硫氨酸5-35L-苯丙氨酸5-45L-脯氨酸25—89L-絲氨酸 L-蘇氨酸 L-色氨酸 L-酪氨酸 L-纈氨酸維生素的組成及重量份如下成份抗壞血酸鈉 D-生物素 維生素D2 氯化膽堿 葉酸 肌醇 煙酰胺 煙酸P-對氨基苯曱酸 D-泛酸釣 鹽酸吡p多醛鹽酸吡噴辛 維生素A 核黃素維生素E維生素Bt鹽酸鹽 維生素B12無機鹽的組成及重量份如下:10-45 10-45 3. 5-15 12-65 5-36Mg/L0. 01-0. 65 0. 001-0. 08 0. 01-0. 5 3. 6-16 0. 1-3. 5 12-35 0. 01-0. 5 0. 001-0. 25 0. 007-0. 6 0. 06-0. 98 0. Ol-O. 65 0. 01-0. 75 0. 01-0. 65 0. 005—0. 5 0. 001-0. 03 0. 05-1. 2 0. 2-2. 6成份Mg/L偏釩酸銨0. 0000001-0. 002氯化4丐50-200五水》克酸銅0. 00001-0. 02硝酸鐵0. 002-3七水硫酸鐵0. 05-4氯化鎂10-80硫酸鎂20-150硫酸錳0. 00001-0. 05氯化鉀150-600碳酸氫鈉2000- 8000氯化鈉4000-10000磷酸氫二鈉50-150七水》克酸鋅0. 02-5其他營養(yǎng)物質的組成及重量份如下成份Mg/L腺。票呤硫酸鹽3. 5-12. 3三磷酸腺苦0. 12-1. 6膽固醇0. 05-0. 42-脫氧-D-核糖0. 06-0. 78D-核糖0. 06-0. 78D-葡萄糖1500-5600谷胱甘肽(還原型)0. 01-0. 065鳥噪呤鹽酸鹽0. 052-0. 65羥脯氨酸鈉0. 65-4. 5亞油酸0. 009—0. 3消旋硫辛酸0. 05-0. 65酚紅4. 5-25腐胺0. 65-3. 6丙酮酸鈉50-350乙醇胺0. 008—0. 25半乳糖0. 002-0. 62巰基乙醇0. 008-0. 35胸腺嘧啶0. 06—0. 8。
4.如權利要求3所述的培養(yǎng)基，其特征在于其中所述的基本培養(yǎng)基包括的組 份及含量為氨基酸的組成及重量份如下成份Mg/LL-丙氨酸19. 662L-精氨酸鹽酸鹽162. 98一水L-門冬酰胺8. 7L-天冬氨酸24. 94L-胱氨酸鹽酸鹽20. 358一水L-半胱氨酸鹽酸鹽15. 08L-谷氨酸52. 026L-谷氨酰胺232谷氨酸33. 35一水L-組氨酸鹽酸鹽24. 94L-羥脯氨酸5. 8L-異亮氨酸25. 52L-亮氨酸42. 34L-賴氨酸鹽酸鹽61. 77L-曱硫氨酸11. 31L-苯丙氨酸17. 4L-脯氨酸43. 21L-絲氨酸20. 59L-蘇氨酸24. 36L-色氨酸6. 96L-酪氨酸38. 164L-纈氨酸21. 286維生素的組成及重量份如下成份Mg/L抗壞血酸鈉0. 061828D-生物素0. 00986維生素D20. 058氯化膽堿8. 41葉酸0. 7598肌醇20. 909煙酰胺0. 0377煙酸0. 0145P-對氨基苯甲酸0. 029D-泛酸鈣0. 2958鹽酸吡。多醛0. 0435鹽酸吡。多辛0. 0493維生素A0. 0812核黃素0. 029維生素E0. 0058維生素B1鹽酸鹽0. 1798維生素B120. 812無機鹽的組成及重量份如下:成份Mg/L偏釩酸銨0. 0013572氯化4丐135. 256五水》危酸銅0. 00145硝酸鐵0. 4176七水硫酸鐵0. 4814氯化鎂33. 1876硫酸鎂56. 84硫酸錳0.00017516氯化鉀361.688碳酸氫鈉4278. 08氯化鈉6200磷酸氫二鈉82. 36七水硫酸鋅0. 4988其他營養(yǎng)物質的組成及重量份如下成份Mg/L腺。票呤硫酸鹽5. 8三磷酸腺苷0. 58膽固醇0. 1162-脫氧-D-核糖0. 29D-核糖0. 29D-葡萄糖3480谷胱甘肽(還原型)0. 029鳥噪呤鹽酸鹽0. 174 羥脯氨酸鈉亞油酸消旋硫辛酸酚紅腐胺丙酮酸鈉乙醇胺半乳糖2巰基乙醇胸腺嗜咬2. 9986 0. 04640. 1218 12. 2961. 96098 191. 40. 0232 0. 06 0. 0232 0. 174。
5.如權利要求1所述的培養(yǎng)基，其特征在于所述的核苦和激素包括的組份及 含量為Mg/L 2. 5-8. 5 2. 5-8. 5 2. 5-8. 52. 5-8. 63. 5-8. 9 0. 07-0. 75 0. 006-0. 5 0. 007-0. 21 0. 000006-0. 0001。成份腺苷尿嘧啶胞苷鳥噤呤胰島素地塞米松氫化可的松前列腺素El三碘曱狀腺原氨酸
6.如權利要求5所述的培養(yǎng)基，其特征在于所述的核苦和激素包括的組份及 含量為成份 Mg/L 腺脊 4. 06 尿嘧咬 4. 06胞苷 4. 06鳥噤呤 4. 06胰島素 5. 8地塞米+/> 0.232氫化可的松 0. 01856前列腺素E1 0.029三硪曱狀腺原氨酸 0. 00003828。
7. 如權利要求1-6中任意一項所述的培養(yǎng)基在培養(yǎng)雜交瘤細胞中的用途。
8. 如權利要求7所述的用途，其特征在于所述的雜交瘤細胞擴增無血清培養(yǎng) 基，可以直接替換含血清常規(guī)培養(yǎng)基，雜交瘤細胞不需要適應過程。
9. 如權利要求8所述的用途，其特征在于所述的培養(yǎng)基使用條件為溫度37 。C, 0)2濃度5°/ ,相對濕度>95%。
10. 如權利要求8所述的用途，其特征在于所述的培養(yǎng)基使用條件為溫度37 。C， 0)2濃度5°/ ，相對濕度>98%。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種培養(yǎng)基及其用途，更具體地說涉及一種雜交瘤細胞擴增培養(yǎng)基及其用途。屬于生物制品領域。本發(fā)明的一種雜交瘤細胞擴增無血清培養(yǎng)基及其用途，其中，包括基本培養(yǎng)基，還包括核苷酸和激素。此雜交瘤細胞無血清培養(yǎng)基，可以直接替換含血清常規(guī)培養(yǎng)基，雜交瘤細胞不需要適應過程。
文檔編號C12N5/12GK101195817SQ20071030706
公開日2008年6月11日 申請日期2007年12月28日 優(yōu)先權日2007年12月28日
發(fā)明者唐賀文, 黃宗堂 申請人:天津百若克醫(yī)藥生物技術有限責任公司