專利名稱：一種細(xì)胞復(fù)制培養(yǎng)板的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本實(shí)用新型涉及一種用于進(jìn)行細(xì)胞復(fù)制的細(xì)胞復(fù)制培養(yǎng)板。
技術(shù)背景大規(guī)?；蚝偷鞍追蛛x、分析等方法日臻成熟。這些技術(shù)已成為人們 了解復(fù)雜的生命體系有力武器。同樣，與其對應(yīng)的細(xì)胞操縱，包括細(xì)胞分 選和復(fù)制等技術(shù)也己取得的巨大的進(jìn)步。流式細(xì)胞儀為大規(guī)模分選目標(biāo)細(xì) 胞提供了基礎(chǔ)。各式各樣機(jī)械手的使用大大地方便細(xì)胞液的更換。然而，大規(guī)模復(fù)制細(xì)胞的操作仍然是一項(xiàng)高勞動(dòng)強(qiáng)度的工作。 一般來 講，為了完成細(xì)胞的復(fù)制，需要先將細(xì)胞從培養(yǎng)皿(培養(yǎng)瓶或細(xì)胞培養(yǎng)板) 表面消化下來，然后再將每一份消化下來的細(xì)胞分成兩份或多份。這其中 要涉及廢液的去除、細(xì)胞的漂洗、消化液的加入、消化液的失活、細(xì)胞分 裝等多步操作。如此操作不僅勞動(dòng)強(qiáng)度高，而且還有其它缺點(diǎn)消化時(shí)間 不好控制，容易導(dǎo)致細(xì)胞傷害，容易引起細(xì)胞污染等。細(xì)胞復(fù)制技術(shù)不僅僅用于細(xì)胞的傳代，也能用于細(xì)胞的篩選，特別是 細(xì)胞庫的建立和靶細(xì)胞的篩選。干細(xì)胞的分離、純化、鑒定同樣離不開細(xì) 胞復(fù)制技術(shù)。當(dāng)一次要涉及大量細(xì)胞復(fù)制時(shí)，這種更簡便的方法就顯得尤 為重要
實(shí)用新型內(nèi)容
本實(shí)用新型的目的在于提供一種用于進(jìn)行細(xì)胞復(fù)制培養(yǎng)板，以克服公 知技術(shù)中存在的不足之處。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本實(shí)用新型提供的細(xì)胞復(fù)制培養(yǎng)板，由內(nèi)孔復(fù)制板 置于多孔培養(yǎng)板中組成；其中-內(nèi)孔復(fù)制板為一體成型，其上端為一平板，連接多個(gè)桶狀結(jié)構(gòu)，桶底 面可為任意形狀， 一般取環(huán)形、半圓形或圓形，可以帶篩孔。所述的細(xì)胞復(fù)制培養(yǎng)板，其中內(nèi)孔復(fù)制板置于多孔培養(yǎng)板中時(shí)，內(nèi)孔 復(fù)制板的桶底表面與多孔培養(yǎng)板的底表面處于同一水平面。所述的細(xì)胞復(fù)制培養(yǎng)板，其中內(nèi)孔復(fù)制板置于多孔培養(yǎng)板中時(shí)，內(nèi)孔 復(fù)制板的桶底表面與多孔培養(yǎng)板底板的上表面完全接觸。所述的細(xì)胞復(fù)制培養(yǎng)板，其中內(nèi)孔復(fù)制板置于多孔培養(yǎng)板中時(shí)，內(nèi)孔 復(fù)制板的桶底表面懸掛在多孔培養(yǎng)板上，內(nèi)孔復(fù)制板的底表面與多孔培養(yǎng) 底板的上表面間有一間隙。所述的細(xì)胞復(fù)制培養(yǎng)板，其中間隙為2微米到5毫米。 所述的細(xì)胞復(fù)制培養(yǎng)板，其中內(nèi)孔復(fù)制板的桶底面篩孔的孔徑為0.05 毫米到IO毫米之間。所述的細(xì)胞復(fù)制培養(yǎng)板，其中內(nèi)孔復(fù)制板的桶底面為任意形狀。 所述的細(xì)胞復(fù)制培養(yǎng)板，其中內(nèi)孔復(fù)制板的桶底面的篩孔為均勻分布。所述的細(xì)胞復(fù)制培養(yǎng)板，其中內(nèi)孔復(fù)制板的桶底面的篩孔為不均勻分布?！∮杀緦?shí)用新型的實(shí)施，可以方便地用于細(xì)胞的復(fù)制培養(yǎng)，特別適用于 大規(guī)模細(xì)胞的傳代培養(yǎng)、細(xì)胞庫的篩選，干細(xì)胞的分離等研究中，能在很 大程度上簡化細(xì)胞復(fù)制過程。在一定情況下，可以替代傳統(tǒng)的細(xì)胞傳代方 法。本實(shí)用新型的細(xì)胞復(fù)制培養(yǎng)板具有使用簡單、高效，對細(xì)胞低傷害等 特點(diǎn)。


圖1為本實(shí)用新型的實(shí)施例的結(jié)構(gòu)示意圖；其中，圖la為內(nèi)孔復(fù)制 板的桶底面為環(huán)形，圖lb為內(nèi)孔復(fù)制板的桶底面為半圓形，圖lc為內(nèi)孔 復(fù)制板的桶底面為圓形，并帶有篩孔。圖2為本實(shí)用新型的實(shí)施例的六桶圓形內(nèi)孔復(fù)制板的結(jié)構(gòu)示意圖。圖3為本實(shí)用新型的內(nèi)孔復(fù)制板置于多孔培養(yǎng)板中的結(jié)構(gòu)示意圖；其 中，圖3a為同一平面型，圖3b為接觸型，圖3c為懸掛型。圖4為本實(shí)用新型的內(nèi)孔復(fù)制板上的桶底表面積與篩孔比例分布示意 圖；其中，圖4a為36:28、圖4b為36:14、圖4c為36:10、圖4d為大小 不均勻的篩孔，其比例為36:16。
具體實(shí)施方式
本實(shí)用新型是由內(nèi)孔復(fù)制板1置于多孔培養(yǎng)板2中組成。其中的內(nèi)孔 復(fù)制板細(xì)胞生長表面應(yīng)與多孔培養(yǎng)板的細(xì)胞生長表面相通，保證懸浮細(xì)胞 (或分裂細(xì)胞)能自由通過內(nèi)孔復(fù)制板細(xì)胞生長表面。該內(nèi)孔復(fù)制板1為一體成型，可以采用高聚物材料，如聚苯乙烯及其
衍生物、聚乙烯等，利用目前公知的細(xì)胞培養(yǎng)板生產(chǎn)技術(shù)制備而成。該內(nèi)孔復(fù)制板1和多孔培養(yǎng)板2也可以在聚二甲基硅氧烷(PMDS)、硅、或玻 璃材料上，利用軟蝕刻技術(shù)(soft Hthography)、微流控技術(shù)(microfluidic technology)、半導(dǎo)體加工技術(shù)(semiconductor technology)等公知的微納 米技術(shù)制備而成。其上端為一平板11，連接多個(gè)桶狀結(jié)構(gòu)12 (參閱圖2)， 作用一是置于多孔培養(yǎng)板2時(shí)起固定作用，二是便于拿取和安放該內(nèi)孔復(fù) 制板l;該內(nèi)孔復(fù)制板的桶底端可為任意形狀， 一般為環(huán)形13、半圓形14 或帶篩孔的圓形15 (參閱圖la、 lb、 lc所示)。請參閱圖3，內(nèi)孔復(fù)制板1置于多孔培養(yǎng)板2時(shí)，其桶下端的底表面 16可以與多孔培養(yǎng)板的底表面21處于同一水平面(如圖3a)，也可以與 多孔培養(yǎng)板底板的上表面完全接觸(如圖3b)，也可以與多孔培養(yǎng)底板的 上表面保留一定的距離，即懸掛型(如圖3c)。無論采用什么方式，均要 保證懸浮細(xì)胞(分裂細(xì)胞)能自由通過內(nèi)孔復(fù)制板細(xì)胞生長表面。細(xì)胞能穿過內(nèi)孔復(fù)制板1和多孔培養(yǎng)板2間界面。例如在內(nèi)孔復(fù)制板 l上生長的細(xì)胞復(fù)制后，能到達(dá)多孔培養(yǎng)板2，并能在其表面生長。相反， 在多孔培養(yǎng)板2上生長的細(xì)胞復(fù)制后，能到達(dá)內(nèi)孔復(fù)制板l，并能在其表 面生長。請參閱圖4。內(nèi)孔復(fù)制板l的形狀、大小和分布可以根據(jù)細(xì)胞的種類 的需求調(diào)節(jié)。對于帶篩孔桶底面為圓形的內(nèi)孔復(fù)制板來說，其篩孔17的 孔徑大小在0.05毫米到10毫米之間。同一個(gè)內(nèi)孔復(fù)制板上的篩孔17的 大小、形狀和分布也可以是不同的，不同的篩孔17的大小和個(gè)數(shù)可以調(diào) 節(jié)內(nèi)孔復(fù)制板和多孔培養(yǎng)板上細(xì)胞的比例(如圖4a、 b、 c所示)，同時(shí)，
內(nèi)孔復(fù)制板上由不同大小篩孔n交錯(cuò)分布，以改善細(xì)胞生長的均勻度(如 圖4d所示)。本實(shí)用新型釆用的多孔培養(yǎng)板是目前市場常見的培養(yǎng)皿，具有1孑L、4孔、6孔、12孔、24孔、48孔、96孔、或384孔等。
權(quán)利要求1、一種細(xì)胞復(fù)制培養(yǎng)板，其特征在于，由內(nèi)孔復(fù)制板置于多孔培養(yǎng)板中組成；其中內(nèi)孔復(fù)制板為一體成型，其上端為一平板，連接多個(gè)桶狀結(jié)構(gòu)，桶底面為任意形狀。
2、 如權(quán)利要求1所述的細(xì)胞復(fù)制培養(yǎng)板，其特征在于，所述桶底面 為環(huán)形、半圓形或圓形。
3、 如權(quán)利要求1或2所述的細(xì)胞復(fù)制培養(yǎng)板，其特征在于，所述桶 底面帶有篩孔。
4、 如權(quán)利要求1的所述的細(xì)胞復(fù)制培養(yǎng)板，其特征在于，所述的內(nèi) 孔復(fù)制板置于多孔培養(yǎng)板中時(shí)，內(nèi)孔復(fù)制板的桶底表面與多孔培養(yǎng)板的底 表面處于同一水平面。
5、 如權(quán)利要求1的所述的細(xì)胞復(fù)制培養(yǎng)板，其特征在于，所述的內(nèi) 孔復(fù)制板置于多孔培養(yǎng)板中時(shí)，內(nèi)孔復(fù)制板的桶底表面與多孔培養(yǎng)板底板 的上表面完全接觸。
6、 如權(quán)利要求1所述的細(xì)胞復(fù)制培養(yǎng)板，其特征在于，所述的細(xì)胞 復(fù)制培養(yǎng)板，其中內(nèi)孔復(fù)制板置于多孔培養(yǎng)板中時(shí)，內(nèi)孔復(fù)制板的桶底表 面懸掛在多孔培養(yǎng)板上，內(nèi)孔復(fù)制板的底表面與多孔培養(yǎng)底板的上表面有 一間隙。
7、 如權(quán)利要求6所述的細(xì)胞復(fù)制培養(yǎng)板，其特征在于，所述的間隙 為2微米到5毫米。
8、 如權(quán)利要求1所述的細(xì)胞復(fù)制培養(yǎng)板，其特征在于，所述的內(nèi)孔復(fù)制板的桶底面篩孔的孔徑為0.05毫米到10毫米之間。
9、 如權(quán)利要求1所述的細(xì)胞復(fù)制培養(yǎng)板，其特征在于，所述的內(nèi)孔 復(fù)制板的桶底面篩孔為均勻分布。
10、 如權(quán)利要求1所述的細(xì)胞復(fù)制培養(yǎng)板，其特征在于，所述的內(nèi)孔 復(fù)制板的桶底面篩孔為不均勻分布。
專利摘要一種細(xì)胞復(fù)制培養(yǎng)板，由內(nèi)孔復(fù)制板置于多孔培養(yǎng)板中組成；其中內(nèi)孔復(fù)制板為一體成型，其上端為一平板，連接多個(gè)桶狀結(jié)構(gòu)，桶底面可為任意形狀，一般取環(huán)形、半圓形或圓形，可以帶篩孔。內(nèi)孔復(fù)制板置于多孔培養(yǎng)板中時(shí)，內(nèi)孔復(fù)制板的桶底表面與多孔培養(yǎng)板的底表面處于同一水平面，或與多孔培養(yǎng)板底板的上表面完全接觸，或與多孔培養(yǎng)底板的上表面有2微米到5毫米的間隙。內(nèi)孔復(fù)制板的桶底面帶篩孔時(shí)，篩孔孔徑為0.05毫米到10毫米之間，篩孔為均勻或不均勻分布。無論采用何種桶底面形狀，內(nèi)孔復(fù)制板以何種方式置于多孔培養(yǎng)板中方式，以及篩孔的孔徑大小，均要保證懸浮細(xì)胞(分裂細(xì)胞)能自由通過內(nèi)孔復(fù)制板細(xì)胞生長表面。
文檔編號C12M3/00GK201049949SQ20072014906
公開日2008年4月23日 申請日期2007年5月10日 優(yōu)先權(quán)日2007年5月10日
發(fā)明者樂志操, 席建忠, 莊峰鋒, 璜 黃 申請人:北京博雅生納科技有限公司