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包含長(zhǎng)鏈多不飽和脂肪酸的食品及其制備方法

文檔序號(hào):438603閱讀:632來(lái)源:國(guó)知局

專(zhuān)利名稱(chēng)::包含長(zhǎng)鏈多不飽和脂肪酸的食品及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域
:本發(fā)明涉及食用油組合物(foodoilcomposition)、制備食物的方法和包含長(zhǎng)鏈多不飽和脂肪酸(longchainpolyunsaturatedfattyacid)尤其是co-3長(zhǎng)鏈多不飽和脂肪酸、co-6長(zhǎng)鏈多不飽和脂肪酸及其混合物的食品(foodproduct)。
背景技術(shù)
:增加有益的co-3多不飽和脂肪酸(co-3PUFA)和co-3長(zhǎng)^T連多不飽和脂肪酸(LCPUFA)的膳食攝取是人們所希望的。其他有益的營(yíng)養(yǎng)素有co-6長(zhǎng)鏈多不飽和脂肪酸。本文中所述長(zhǎng)鏈多不飽和脂肪酸或LCPUFA指具有20或更多個(gè)碳原子的多不飽和脂肪酸。已知co-3PUFA為重要的膳食化合物,其能夠預(yù)防動(dòng)脈硬化和冠心病,減輕炎性病癥、認(rèn)知在夾損和癡呆相關(guān)疾病,以及延緩肺瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)。co-3LCPUFA是一類(lèi)重要的co-3PUFA。co-6LCPUFA不僅是人體內(nèi)的結(jié)構(gòu)性脂質(zhì),也是炎癥中多種因子如前列腺素和白三烯的前體。脂肪酸為羧酸化合物,其根據(jù)碳鏈的長(zhǎng)度和飽和度進(jìn)行分類(lèi)。短鏈脂肪酸具有2至約6個(gè)碳原子,并且通常是飽和的。中鏈脂肪酸具有約6至約18個(gè)碳原子,并且可以是飽和的或不飽和的。長(zhǎng)鏈脂肪酸具有20至24或更多個(gè)碳原子,并且也可以是飽和的或不飽和的。在較長(zhǎng)鏈脂肪酸中可能有一個(gè)或多個(gè)不飽和位點(diǎn),分別稱(chēng)為"單不飽和"和"多不飽和"。本發(fā)明特別涉及長(zhǎng)鏈PUFA(LCPUFA)。根據(jù)脂肪酸中雙鍵的數(shù)目和位置,采用公認(rèn)的命名法對(duì)LCPUFA進(jìn)行分類(lèi)?;诰嘀舅釙趸俗罱碾p鍵位置,有兩個(gè)系列或家族的LCPUFA:ro-3(或n-3或co-3)系列在第三個(gè)碳含有雙4建,而w-6(或n-6或co-6)系列在第6個(gè)碳之前沒(méi)有任何雙鍵。這樣,二十二碳六烯酸("DHA,,)的鏈長(zhǎng)為22個(gè)碳,具有從曱基端第三個(gè)碳開(kāi)始的6個(gè)雙鍵,其寫(xiě)作"22:6n-3"。另一種重要的LCPUFA是二十碳五烯酸("EPA"),其寫(xiě)作"20:5n-3"。co-3和co-6脂肪酸例如DHA和ARA(花生四烯酸)在人體內(nèi)不能從頭或9"全新"合成;然而人體可以將較短鏈脂肪酸轉(zhuǎn)化成LCPUFA例如DHA和ARA,盡管效率很低。co-3和co-6脂肪酸都是營(yíng)養(yǎng)攝取的必需部分,因?yàn)槿梭w不能在比從分子co端數(shù)起的第7個(gè)碳原子更接近c(diǎn)o端的地方插入雙鍵。這樣,各種代謝轉(zhuǎn)化都在不改變含有co-3和co-6雙4建的分子的co端的情況下進(jìn)行。因此,co-3和co-6脂肪酸是兩類(lèi)不同的必需脂肪酸,這是由于它們?cè)谌梭w內(nèi)不能相互轉(zhuǎn)化。在過(guò)去的20年中,健康專(zhuān)家推薦攝入更少的飽和脂肪以及更多的多不飽和脂肪。盡管該建議被廣大消費(fèi)者所采納,但心臟病、癌癥、糖尿病和多種其他虛弱性疾病的發(fā)病率仍然持續(xù)穩(wěn)步上升??茖W(xué)家們同意多不飽和脂肪的種類(lèi)和來(lái)源與脂肪的總量一樣重要。最常見(jiàn)的多不飽和脂肪來(lái)自植物,但其缺乏長(zhǎng)鏈脂肪酸(尤其是co-3LCPUFA)。此外,對(duì)多不飽和脂肪進(jìn)行的氫化產(chǎn)生合成脂肪,這使得某些疾病增多,并且加劇了某些必需脂肪酸的缺乏。實(shí)際上,已經(jīng)驗(yàn)證多種醫(yī)療病癥受益于co-3的補(bǔ)充。這些醫(yī)療病癥包括粉刺、過(guò)敏、阿爾茨海默病、關(guān)節(jié)炎、動(dòng)脈粥樣硬化、乳腺?lài)澳[、癌癥、囊性纖維化、糖尿病、濕滲、高血壓、活動(dòng)過(guò)度、腸病癥、腎功能障礙、白血病和多發(fā)性硬化。眾所周知的是,世界衛(wèi)生組織已推薦在嬰兒配方中添加co-3和(o-6脂肪酸。來(lái)自肉類(lèi)的多不飽和物質(zhì)含有顯著量的co-6但幾乎沒(méi)有co-3。盡管co-6和co-3脂肪酸均為健康所必須的,^f旦必須以約4:1的平衡關(guān)系消耗它們。如今西方世界的膳食嚴(yán)重失衡,在其當(dāng)前的平均消耗中,(o-6為co-3的20倍。相關(guān)的消費(fèi)者已開(kāi)始尋求健康的食物補(bǔ)充以恢復(fù)所述平衡。co-3的主要來(lái)源是亞麻籽油和魚(yú)油。在過(guò)去的十年中,亞麻籽油和魚(yú)油的生產(chǎn)獲得了迅速的發(fā)展。這兩種油均被認(rèn)為是Q)-3多不飽和脂肪的良好膳食來(lái)源。亞麻籽油不含有任何EPA、DHA或DPA,但其含有亞麻酸一一種可以被人體延長(zhǎng)以構(gòu)建更長(zhǎng)鏈PUFA的"積木"。然而,有證據(jù)顯示代謝轉(zhuǎn)化的速率可能是緩慢且不穩(wěn)定的,尤其是在那些健康受損的患者中。魚(yú)油在脂肪酸成分的類(lèi)型和水平上出入很大,這取決于具體的物種和其膳食。例如水產(chǎn)養(yǎng)殖的魚(yú)類(lèi)含有的(o-3脂肪酸要低于野生的魚(yú)類(lèi)。考慮到上述co-3和co-6LCPUFA的健康益處,提供含有上述脂肪酸的食物是人們所希望的。由于缺乏co-3LCPUFA的來(lái)源,在典型的自制(home-prepared)食品和方便食品中,①-3PUFA和(o-3LCPUFA(鏈長(zhǎng)度超過(guò)20)(例如二十二碳六烯10酸、二十二碳五烯酸和二十碳五烯酸)均很低。考慮到上述co-3LCPUFA(鏈長(zhǎng)度超過(guò)20)的健康益處,提供含有上述脂肪酸的食物是人們所希望的。盡管用LCPUFA制備的食物和膳食補(bǔ)劑可以是更健康的,但其也更容易受酸敗的影響。脂質(zhì)例如不飽和脂肪酸的酸敗與氧化異臭形成(oxidationoff-flavordevelopment)有關(guān)。氧化異臭形成涉及影響特定食物的味道、香氣和營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的食物變質(zhì)。脂質(zhì)中氧化異臭形成的主要來(lái)源以及含有其的產(chǎn)物在于脂質(zhì)與氧氣的化學(xué)反應(yīng)。所述氧化反應(yīng)的速率普遍認(rèn)為與溫度、月旨質(zhì)的不飽和度、氧氣水平、紫外線暴露、痕量促氧化金屬(例如鐵、銅或鎳)的存在、脂肪氧化酶等因素有關(guān)。尤其是在不飽和度增加后,不飽和脂肪酸的易感性和氧化速率可顯著地提高。就此而言,EPA和DHA分別含有5和6個(gè)雙鍵。高度的不飽和使得co-3脂肪酸容易被氧化。上述油的天然不穩(wěn)定性導(dǎo)致其甚至在相對(duì)短時(shí)期的貯存時(shí)間內(nèi)就產(chǎn)生不良的氣味和難吃的味道。PUFA可以從微生物來(lái)源提取,用作營(yíng)養(yǎng)品和/或藥品。例如,富含DHA的微生物油從曱藻即對(duì)隱曱藻(Co^/7eco^m'wmco/zm'z')生產(chǎn),而富含ARA的油從絲狀真菌即Mw^we//"a/戸'"fl生產(chǎn),二者均用作營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)劑以及在食品例如嬰兒配方中使用。類(lèi)似地,來(lái)自裂殖壺菌屬CSc/n'zoc/^n'Mm)的富含DHA的微生物油也用作營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)劑或食物成分。典型地,所述LCPUFA從生物體中提取并純化。提取和純化的油可進(jìn)一步加工,以獲得用于食品的特異性配方(例如干粉或液體乳液)??紤]到對(duì)含co-3LCPUFA和/或co-6LCPUFA的補(bǔ)充食物的需求以及現(xiàn)有技術(shù)中提供所述食物時(shí)的不足之處,有必要提供使食物富集co-3LCPUFA和/或co-6LCPUFA的方法以及有必要提供含有co-3LCPUFA和/或co-6LCPUFA的食用油組合物和食品。本發(fā)明滿足了上述和其他需求。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明涉及食用油組合物及其在食品中的用途。所述食用油組合物通常包括含第一種油和第二種油的共混物,所述第一種油含有LCPUFA,優(yōu)選含有①-3LCPUFA、co-6LCPUFA或其混合物,以及所述第二種油基本上不含任何LCPUFA,優(yōu)選基本上不含任何co-3LCPUFA并且基本上不含任何co-6LCPUFA,并且其在室溫為液體。在第一個(gè)實(shí)施方案中,所述食用油組合物包括含第一種油和第二種油的共混物,所述第一種油含有LCPUFA,優(yōu)選含有co-3LCPUFA、co-6LCPUFA或其混合物,以及所述第二種油基本上不含任何LCPUFA,優(yōu)選基本上不含任何o)-3LCPUFA,其中所述第二種油在室溫為液體。在另一個(gè)實(shí)施方案中,所述食用油組合物包括含第一種油和第二種油的共混物,所述第一種油含有LCPUFA,優(yōu)選含有(D-3LCPUFA、co-6LCPUFA或其混合物,以及所述第二種油基本上不含任何LCPUFA,優(yōu)選基本上不含任何①-6LCPUFA,其中所述第二種油在室溫為液體。在這些實(shí)施方案中,所述共混物含有約0.01%至約5%的LCPUFA。在另一個(gè)實(shí)施方案中,所述共混物含有約0.08%至約3%的LCPUFA或約0.1%至約0.5%的LCPUFA。本發(fā)明的第一個(gè)實(shí)施方案在制備油煎食品(skillet-friedfoodproduct)中特別有用。上述產(chǎn)品在每份食品中可包含的co-3LCPUFA、0>6LCPUFA或其混合物的量為約5mg至約150mg。該實(shí)施方案的另一個(gè)方面是用能夠被油煎的食物原料(fooditem)制備食物的方法。所述方法包括將所述食物原料和油放入煎鍋(skillet)內(nèi)。所述油包括上述第一個(gè)食用油組合物實(shí)施方案。充分加熱煎鍋以加熱食物原料,從而對(duì)食物進(jìn)行油煎(fry)。在另一個(gè)實(shí)施方案中,所述食用油組合物可用于制備深度油煎(deep-fiy)的食品例如天麩羅(tempura)或油炸食品,以及可用于以下方法,在所述方法中,用能夠被深度油煎的食物原料制備食物。所述方法包括將所述食物原料浸入油中。所述油包括上述第一個(gè)食用油組合物實(shí)施方案。充分加熱油以加熱食物原料,從而對(duì)食物進(jìn)行深度油煎。本發(fā)明的第二個(gè)食用油組合物實(shí)施方案包括含第一種油和第二種油的共混物,所述第一種油含有LCPUFA,優(yōu)選含有co-3LCPUFA、co-6LCPUFA或其混合物,以及所述第二種油基本上不含任何LCPUFA,優(yōu)選基本上不含任何co-3LCPUFA并且基本上不含任何co-6LCPUFA,其中所述第二種油在室溫為液體。在該實(shí)施方案中,所述共混物的LCPUFA含量為約1%至約30%。在該實(shí)施方案中,所述油共混物的LCPUFA含量也可以是約10%至約20%或約1%至約5%。第二個(gè)食用油組合物實(shí)施方案可用于制備食品的方法,所述方法包括使油與添加的食物組分接觸。上述食品可包括任何可食用的含脂質(zhì)的食物調(diào)味料(foodsauce)例如沙拉調(diào)料(saladdressing),腌泡汁(marinade)、力口誶十蛋黃醬(remoulade)、蔬菜調(diào)p未豸牛(vegetablesauce)、水果調(diào)p未泮牛(fruitsauce)、魚(yú)調(diào)p未津+(fishsauce)和肉調(diào)p未沖牛(meatsauce)例如禽肉調(diào)味料(poultrysauce)、牛肉調(diào)味料(beefsauce)、小牛肉調(diào)味料(vealsauce)和,萬(wàn)、羊肉調(diào)p木津+(lambsauce)。本發(fā)明的第三個(gè)食用油組合物實(shí)施方案包括局部使用的食用油組合物,其包括含第一種油和第二種油以及抗氧化劑的共混物,所述第一種油含有LCPUFA,優(yōu)選含有co-3LCPUFA、co-6LCPUFA或其混合物,以及所述第二種油基本上不含任何LCPUFA,優(yōu)選基本上不含任何co-3LCPUFA并且基本上不含任何①-6LCPUFA,并且其在室溫為液體。在該實(shí)施方案中,所述共混物含有約0.25%至約10%的LCPUFA。在該實(shí)施方案中,所述共混物的LCPUFA含量也可以是約1%至約5%。本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案為含有第三個(gè)食用油組合物實(shí)施方案的食品。所述食品可選自先前烹制的食品,例如先前烘焙的、油煎的或深度油煎的食品。所述食品可選自烘焙點(diǎn)心(bakedgood)、鹽制零食(saltedsnack)、專(zhuān)業(yè)零食(specialtysnack)、糖果零食(confectionarysnack)以及天然零食食物(naturallyoccurringsnackfood)。例如,所述食品可選自餅干(cooky)、薄脆餅干(cracker)、甜食(sweetgood)、松餅(muffm)、谷物(cereal)、零食蛋糕(snackcake)、派(pie)、燕麥花巻/小吃棒(granola/snackbar)、烤制賴(lài)、々并(toasterpastry)、薯片(potatochip)、玉米片(cornchip)、麥片(wheatchip)、高粱片(sorghumchip)、大豆片(soychip)、#齊壓零食(extrudedsnack)、爆米花(popcorn)、椒鹽巻餅(pretzel)、薯?xiàng)l(potatocrisp)、水果干零食(driedfruitsnack)、肉類(lèi)零食(meatsnack)、豬肉脯(porkrind)、健康食品條(healthfoodbar)、年糕(ricecake)、玉米餅(corncake)、糖果(candy)、堅(jiān)果(nut)、水果干(driedfruit)和蔬菜干(driedvegetable)。本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案為制備食物的方法,其包括將第三個(gè)食用油組合物實(shí)施方案局部應(yīng)用于食品。局部應(yīng)用的步驟可選自噴射、浸漬和刷涂。該方法可進(jìn)一步包括在應(yīng)用所述食用油組合物后對(duì)食品進(jìn)行包裝。包裝的步驟可包括在惰性氣體氣氛中包裝所述食品。所述氣氛可包括氮?dú)猓蚩砂ǖ獨(dú)夂投趸?。本發(fā)明的所有食用油組合物實(shí)施方案可進(jìn)一步包含抗氧化劑,其可選自維生素E、BHT、BHA、TBHQ、沒(méi)食子酸丙酯、維生素C、磷脂和天然抗氧化劑或它們的組合。優(yōu)選的抗氧化劑包括BHA、BHT、TBHQ、BHA/BHT的共混物及它們的組合,特別是TBHQ。在優(yōu)選的實(shí)施方案中,所述抗氧化劑在油共混物中的量為約0.01%至約1%或約0.1%至約0.5%。在食用油組合物的各種實(shí)施方案中,所述第二種油可選自琉璃苣油(borageoil)、黑醋栗籽油(blackcurrantseedoil)、玉米油(cornoil)、椰子油(coconutoil)、蕓莒油(canolaoil)、大豆油(soybeanoil)、紅花油(saffloweroil)、高油酸的紅花油(higholeicsaffloweroil)、向日葵油(sunfloweroil)、高油酸的向曰葵油(higholeicsunfloweroil)、橄沖覽油(oliveoil)、月見(jiàn)草油(eveningprimroseoil)、沖帛沖予油(cottonseedoil)、米斗泉油(ricebranoil)、葡萄泮予油(grapeseedoil)、亞麻籽油(flaxseedoil)、大蒜油(garlicoil)、花生油(peanutoil)、杏仁油(almondoil)、胡杉匕油(walnutoil)、麥芽油(wheatgermoil)、芝麻油(sesameoil)、動(dòng)4勿月旨肪(animalfat)、動(dòng)4勿油(animaloil)、海洋生凈勿月旨肪(marinefat)、海洋生物油(marineoil)、微生物油(microbialoil)、前述任何油的氫化油及它們的混合物。本發(fā)明的各種實(shí)施方案中的Q>3LCPUFA和/或o>6LCPUFA可選自二十二碳六烯酸、二十碳五烯酸、二十二碳五烯酸和花生四烯酸(ARA)。在各種實(shí)施方案中,所述第一種油可來(lái)自孩i生物來(lái)源,例如藻類(lèi)、原生動(dòng)物、細(xì)菌和真菌。所述微生物來(lái)源可以是含油微生物(oleaginousmicroorganism)。所述孩i生物來(lái)源可選自破嚢壺菌屬(77zrai^oc/^n'wmX效生物、裂殖壺菌屬孩t生物、J/Aw72/a屬微生物、J//a"oc/^n'wm屬孩i生物、Ja/7。"oc/y^n'M附屬孩吏生4勿、五/z'"fl屬孩i生4勿、0_y//^cc(i/"/MW屬樣i生4勿和肘0"^^//"屬微生物。在優(yōu)選的實(shí)施方案中,所述微生物選自裂殖壺菌屬微生物、C,//zecc^/m.wm屬微生物和MoWere〃a屬微生物。所述第一種油也可來(lái)自植物來(lái)源,例如經(jīng)遺傳修飾以產(chǎn)生LCPUFA的植物,其中所述植物選自大豆、玉米、紅花、向日葵、蕓苔、亞麻、花生、芥菜、葡萄籽、鷹嘴豆(chickpea)、棉花、小扁豆(lentil)、白三葉草(whiteclover)、橄欖、棕櫚、琉璃苣、月見(jiàn)草、亞麻籽和煙草。在另一個(gè)實(shí)施方案中,所述第一種油可來(lái)自動(dòng)物來(lái)源(其可選自水生動(dòng)物)、從動(dòng)物組織中提取的脂質(zhì)以及動(dòng)物產(chǎn)品。而且,所述第一種油可包含至少約20%的co-3LCPUFA和/或co-6LCPUFA或至少約60%的co-3LCPUFA和/或co-6LCPUFA。圖1顯示了本發(fā)明食品(油煎馬鈴薯(friedpotato)、煎蛋餅(omelet)和油煎法式烤面包片(friedFrenchtoast))的消費(fèi)者測(cè)試結(jié)果。圖2顯示了將各種植物油與含(0-3LCPUFA的油共混對(duì)OSI誘導(dǎo)期的影響。圖3顯示了在有和沒(méi)有抗氧化劑的情況下將各種植物油與含co-3LCPUFA的油共混對(duì)OSI誘導(dǎo)期的影響。圖4顯示了在有和沒(méi)有抗氧化劑的情況下將玉米油與含①-3LCPUFA的油共混對(duì)主要氧化產(chǎn)物形成的影響。圖5顯示了在有和沒(méi)有抗氧化劑的情況下將玉米油與含co-3LCPUFA的油共混對(duì)次要氧化產(chǎn)物形成的影響。圖6顯示了將玉米油與含-3LCPUFA的油共混對(duì)OSI誘導(dǎo)期的影響。圖7顯示了將大豆油與含co-3LCPUFA的油共混對(duì)OSI誘導(dǎo)期的影響。圖8顯示了將蕓苔油與含co-3LCPUFA的油共混對(duì)OSI誘導(dǎo)期的影響。圖9顯示了將紅花油與含co-3LCPUFA的油共混對(duì)OSI誘導(dǎo)期的影響。圖10顯示了將向日葵油與含(0-3LCPUFA的油共混對(duì)OSI誘導(dǎo)期的影響。圖11顯示了玉米油與含co-3LCPUFA油的共混物的過(guò)氧化物值(peroxidevalue)與時(shí)間的關(guān)系。圖12顯示了玉米油與含co-3LCPUFA油的共混物的烯烴值(alkenalvalue)與時(shí)間的關(guān)系。圖13顯示了玉米油與含co-3LCPUFA油的共混物的DHA含量與時(shí)間的關(guān)系。具體實(shí)施例方式本發(fā)明教導(dǎo)的食用油和食品組合物、制備食物的方法以及提高預(yù)制食品中LCPUFA含量?jī)?yōu)選提高預(yù)制食品中co-3LCPUFA和/或o>-6LCPUFA含量的方法增加了LCPUFA的攝取尤其是co-3LCPUFA和/或co-6LCPUFA的攝取。這種改善可有利于食用所述產(chǎn)品的消費(fèi)者的健康。本發(fā)明也提供了使食品和食用油組合物中LCPUFA的氧化降解最小化的方法。在各種實(shí)施方案中,本發(fā)明包括食用油組合物,其包含第一種油和第二種油的共混物,所述第一種油含有LCPUFA,優(yōu)選含有co-3LCPUFA和/或co-6LCPUFA,并且所述第二種油基本上不含任何LCPUFA,優(yōu)選基本15上不含任何co-3LCPUFA并且基本上不含任何①-6LCPUFA,其在室溫為液體。在第一個(gè)實(shí)施方案中,所述共混物包含約0.01%至約5%的LCPUFA。該食用油組合物實(shí)施方案特別可用于快速油煎食物(例如在煎鍋中),以使LCPUFA優(yōu)選為co-3LCPUFA、co-6LCPUFA或其混合物進(jìn)到膳食中。在另一個(gè)實(shí)施方案中,所述食用油組合物用于制備深度油煎的食品例如天麩羅或油炸食品,其中將食物原料浸入所述油中。在第二個(gè)食用油組合物實(shí)施方案中,所述共混物的LCPUFA含量?jī)?yōu)選為co-3LCPUFA和/或co-6LCPUFA含量為約1%至約30%。第二個(gè)食用油組合物實(shí)施方案特別可用于以下食品例如可食用的含脂質(zhì)的食物調(diào)味料(如沙拉調(diào)料、腌泡汁、加料蛋黃醬、蔬菜調(diào)味料、水果調(diào)味料、魚(yú)調(diào)味料以及肉調(diào)味料)。在第三個(gè)食用油組合物實(shí)施方案中,所述共混物包含約0.25%至約10%的LCPUFA(優(yōu)選為Q)-3LCPUFA和/或co-6LCPUFA),并且所述組合物還包括抗氧化劑。第三個(gè)實(shí)施方案特別可用于將該組合物局部應(yīng)用于以下食物例如烘焙點(diǎn)心、鹽制零食、專(zhuān)業(yè)零食、糖果零食以及天然零食食物。典型地,局部應(yīng)用所述油組合物的上述食物為包裝的產(chǎn)品,并且在惰性氣氛中進(jìn)行包裝。食用油優(yōu)選含有多于約卯重量%的脂肪酸,而諸如人造黃油和黃油那樣的產(chǎn)品通常為脂肪和水的乳液,其脂肪酸含量為約80重量%至約95重量%。除非另有說(shuō)明,本文使用的所有百分比均為重量百分比。本發(fā)明的油共混物包括含LCPUFA優(yōu)選含co-3LCPUFA、co-6LCPUFA或其混合物的第一種油。優(yōu)選的co-3LCPUFA包^^舌例如二十二石友六烯酸C22:6(n-3)(DHA)、二十碳五烯酸C20:5(n-3)(EPA)和二十二碳五烯酸C22:5(n-3)(DPA)。DHA是尤其優(yōu)選的。優(yōu)選的co-6LCPUFA包括花生四烯酸C20:4(n-6)(ARA)。所述PUFA可以是天然脂質(zhì)中發(fā)現(xiàn)的任何常見(jiàn)形式,包括但不限于三?;视?、二?;视汀⒘字?、游離脂肪酸、酯化脂肪酸或這些脂肪酸的天然或合成衍生物形式(例如脂肪酸的鈣鹽、乙基酯等)。本發(fā)明使用的包含co-3LCPUFA和/或①-6LCPUFA的第一種油可以指僅包含單獨(dú)的co-3LCPUFA和/或co-6LCPUFA(例如DHA)的油或包含co-3LCPUFA和/或①-6LCPUFA的混合物(例如DHA和EPA或DHA和ARA)的油。在本發(fā)明的組合物和方法中,包含LCPUFA優(yōu)選為co-3LCPUFA和/或co-6LCPUFA的油的優(yōu)選來(lái)源包括^t生物來(lái)源。;微生物來(lái)源以及4吏包含16M/craWo/ogy<a"<i5z.她c/wo/ogy,第2版,1999,AmericanSocietyforMicrobiology)。優(yōu)選地,在發(fā)酵罐中,在發(fā)酵培養(yǎng)基中培養(yǎng)所述微生物。本發(fā)明的方法和組合物適用于任何能產(chǎn)生任何種類(lèi)營(yíng)養(yǎng)素或所需成分的工業(yè)微生物,例如藻類(lèi)、原生動(dòng)物、細(xì)菌和真菌(包括酵母)。微生物來(lái)源可包括以下微生物例如藻類(lèi)、細(xì)菌、真菌和/或原生動(dòng)物。優(yōu)選的生物體包括選自以下的生物體金藻(goldenalgae)(例如萆鞭生物界(Stramenopiles)孩i生物)、鄉(xiāng)錄藻(greenalgae)、石圭藻(diatoms)、曱藻(dinoflagellates)(例如曱藻纟岡(Dinophyceae)孩i生物,包4舌Ojp^zeco^m'wm屬成員,例如對(duì)隱曱藻)、酵母以及Mwcor屬和MoWere〃a屬真菌(包括但不限于MWere〃aa///""和MoWere〃asect.sc/z羅cAer/)。萆鞭生物界微生物的成員包括微藻(microalgae)和藻樣微生物(algae-likemicroorganism),包括以下微生物Hamatores、原滴蟲(chóng)目(Proteromonads)、Opalines、Develpayella、Diplophrys、Labrinthulids、石皮嚢壺菌(Thraustochytrids)、Biosecids、卵菌纟岡(Oomycetes)、Hypochytridiomycetes、Commation、Reticulosphaera、Pelagomonas、Pelagococcus、Ollicola、Aureococcus、Parmales、桂藻(Diatoms)、黃藻門(mén)(Xanthophytes)、Phaeophytes(褐藻(brownalgae))、Eustigmatophytes、Raphidophytes、Synurids、Axodines(包括Rhizochromulinaales、Pedinellales和Dictyochales)、Chrysomeridales、Sarcinochrysidales、Hydmrales、Hibberdiales和Chromulinales。本發(fā)明的說(shuō)明書(shū)將對(duì)使能產(chǎn)生包含co-3和/或co-6多不飽和脂肪酸的脂質(zhì)的微生物尤其是能產(chǎn)生DHA(或極其相關(guān)的化合物例如DPA、EPA或ARA)的孩i生物生長(zhǎng)的方法進(jìn)行詳細(xì)的討論。其它優(yōu)選的孩i生物有藻類(lèi),例如破嚢壺菌目(Thraustochytriales)的破嚢壺菌,更具體地,破嚢壺菌目包括破嚢壺菌屬、裂殖壺菌屬和C/汰ew'a屬,并且除j欣wm'a屬、4p/a"oc/z3^n'w附屬、J"a/o"oc/z;;/n'wm屬和屬及其';昆合菌才朱夕卜還包才舌共同指定的授予Barclay的美國(guó)專(zhuān)利5,340,594和5,340,742所公開(kāi)的破嚢壺菌目,在此將所述專(zhuān)利完整引入作為參考。更優(yōu)選地,所述微生物選自具有ATCC編號(hào)20888、ATCC編號(hào)20889、ATCC編號(hào)20890、ATCC編號(hào)20891和ATCC編號(hào)20892鑒別特征的孩i生物、MoWe〃asc/wwcfeW和Mw"ere〃aa/;/"a菌林、對(duì)隱曱藻菌抹、源于任何上述菌抹的突變菌抹及它們的混合菌林。應(yīng)當(dāng)注意的是,許多專(zhuān)家認(rèn)為t/汰em'a屬不是獨(dú)立于破嚢壺菌屬的屬。因此,本文使用的破嚢壺菌屬包括C/汰em'a屬。含油微生物也是優(yōu)選的。本文使用的"含油微生物"定義為超過(guò)其細(xì)胞重量的20%能積累為脂質(zhì)形式的微生物。能產(chǎn)生LCPUFA的遺傳修飾的微生物也適于本發(fā)明。這些微生物可包括經(jīng)遺傳修飾的天然產(chǎn)生LCPUFA的微生物以及不能天然產(chǎn)生LCPUFA但經(jīng)遺傳工程化能產(chǎn)生LCPUFA的微生物(包括酵母、細(xì)菌、真菌、藻類(lèi)和/或原生動(dòng)物)。合適的生物體可以得自多種可用的來(lái)源,包括從自然環(huán)境中收集。例如,美國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心當(dāng)前列出了多種公眾可獲得的上述微生物菌林。本文使用的任何生物體或任何特殊類(lèi)型的生物體包括野生菌林、突變菌抹或重組菌抹。培養(yǎng)或生長(zhǎng)所述生物體的生長(zhǎng)條件是本領(lǐng)域已知的,并且適于至少某些所述生物體的生長(zhǎng)條件記載在例如美國(guó)專(zhuān)利5,130,242、5,407,957、5,397,591、5,492,938和5,711,983中,在此將所述專(zhuān)利完整引入作為參考。含有LCPUFA的油的另一個(gè)優(yōu)選來(lái)源包括植物來(lái)源,例如含油種子植物。由于植物不能天然產(chǎn)生LCPUFA,所以產(chǎn)生LCPUFA的植物是經(jīng)遺傳工程化為對(duì)產(chǎn)生LCPUFA的基因進(jìn)行表達(dá)的那些植物。所述基因可包括對(duì)經(jīng)典脂肪酸合成酶途徑所涉及的蛋白質(zhì)進(jìn)行編碼的基因或?qū)UFA聚酮化合物合成酶(PKS)途徑所涉及的蛋白質(zhì)進(jìn)行編碼的基因。經(jīng)典脂肪酸合成酶途徑所涉及的基因和蛋白質(zhì)以及用這些基因進(jìn)行轉(zhuǎn)化的遺傳修飾的生物體例如植物可參見(jiàn)Napier和Sayanova,iVoceWwgso/Ae7VmW"ow5bc/e(y(2005),64:387-393、Robert等人,F(xiàn)柳c"owa/尸/朋f說(shuō)o/ogy(2005)32:473-479或美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)發(fā)明者杰瑟斯·R·阿布里爾,米歇爾·克蘭德?tīng)柹暾?qǐng)人:馬泰克生物科學(xué)公司
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