專(zhuān)利名稱(chēng)：：一種產(chǎn)白僵菌素的盾葉薯蕷內(nèi)生鐮孢菌及其抗細(xì)菌活性的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及微生物
技術(shù)領(lǐng)域：
，特別是涉及一種其代謝產(chǎn)物為白僵菌素的微生物一盾葉薯蕷內(nèi)生鐮孢菌o
背景技術(shù)：
植物內(nèi)生真菌(plantendophyticfongi)是指那些在其生活史中的某一階段或全部階段生活在健康植物組織或器官內(nèi)部，宿主植物不表現(xiàn)外在病害癥狀的真菌。植物內(nèi)生真菌是一種新的微生物資源，能產(chǎn)生生物堿類(lèi)、肽類(lèi)、甾體類(lèi)、萜類(lèi)、酚類(lèi)、醌類(lèi)、脂肪族類(lèi)、異香豆素類(lèi)等多種結(jié)構(gòu)類(lèi)型的代謝產(chǎn)物，具有抗菌、抗病毒、抗腫瘤、抗蟲(chóng)、調(diào)節(jié)植物生長(zhǎng)等多種生物活性。由于植物內(nèi)生真菌能產(chǎn)生結(jié)構(gòu)新穎、功能獨(dú)特的代謝產(chǎn)物而成為新化合物、新藥物的潛在資源，它們?cè)谵r(nóng)業(yè)、醫(yī)藥、工業(yè)、食品等領(lǐng)域具有重要的應(yīng)用前景。白僵菌素(beauvericin)是一種具有抗菌、殺蟲(chóng)、抗癌、抑制膽甾醇?；D(zhuǎn)移酶活性、引發(fā)細(xì)胞程序性凋亡等生物活性的脂肽類(lèi)化合物，最早在真菌球孢白僵菌(5eam^^6aw/朋a)中發(fā)現(xiàn)。白僵菌素具有環(huán)狀的化學(xué)結(jié)構(gòu)，由3個(gè)2-羥基異戊酸和3個(gè)N+甲基苯丙氨酸通過(guò)肽鍵和酯鍵交錯(cuò)相連而成，分子式為C45H57N309，分子量為783.4。白僵菌素的活性研究集中在殺蟲(chóng)活性上，對(duì)微生物抑制活性的報(bào)道較少。盾葉薯蕷(Dioscoreazi'"g沾erensfsC.H.Wright)在分類(lèi)上屬于單子葉百合目薯蕷科(Dioscoreaceae)，為我國(guó)特有的藥用植物，分布于湖南、湖北、四川、甘肅等省區(qū)，其根狀莖多年生長(zhǎng)在地下，對(duì)土傳病原菌具有強(qiáng)的抵抗能力，這很可能與其共生的內(nèi)生菌有關(guān)。目前尚未見(jiàn)從盾葉薯蕷內(nèi)生真菌中分離純化單一化合物的報(bào)道。本發(fā)明著重于內(nèi)生真菌提取物抗菌活性的研究，為探討內(nèi)生真菌的生理生態(tài)功能(如提髙宿主的抗病性等)提供依據(jù)。本發(fā)明的目的是提供一種經(jīng)發(fā)酵培養(yǎng)能產(chǎn)生白僵菌素成分的微生物，即盾葉薯蕷內(nèi)生鐮孢菌。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明涉及一種鐮孢菌(尸uwwv'wmsp.)，菌株代號(hào)為DzC,現(xiàn)保藏在中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，保藏日期為2008年1月16日，登記入冊(cè)編號(hào)為2340。本發(fā)明提供如下的技術(shù)方法。1、內(nèi)生鐮孢菌DzC的分離釆集新鮮的盾葉薯蕷根狀莖，釆用內(nèi)生真菌的分離和純化技術(shù)，獲得一株內(nèi)生真菌，編號(hào)為Dzf2。2、內(nèi)生鐮孢菌Drf2的形態(tài)特征(l)無(wú)性世代菌株Dzf2在PDA培養(yǎng)基上25。C培養(yǎng)，產(chǎn)生大量的氣生菌絲，白色，邊緣菌絲稀疏，菌落背面桔黃色，分生孢子梗單生或輪生，瓶梗狀，基部有分隔，大孢子近鐮刀形，2-3個(gè)隔，小孢子卵圓形，橢圓形，腎形無(wú)隔或者l個(gè)隔，孢子大小4.3-24fimx2.4-5拜。內(nèi)生真菌Dzf2的形態(tài)特征(見(jiàn)圖l、圖2、圖3和圖4)符合鐮孢菌屬(Fww'鵬)真菌的形態(tài)特征。(2)有性世代未發(fā)現(xiàn)。3、內(nèi)生鐮孢菌Drf2的分子生物學(xué)特征運(yùn)用PCR技術(shù)，擴(kuò)增采用ITS通用引物ITS1(5'-TCCGTAGGTGAACCTGCGG-3')禾BITS4(5'-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3')。將Dzf2菌株的ITS序列提交到GenBank核酸序列庫(kù)中注冊(cè)獲得序列號(hào)(accessionnumber)DQ4462U。同時(shí)將Dzf2菌株的ITS序列與GenBank中其他真菌的ITS序列進(jìn)行比對(duì)，找出相似性最高，親緣關(guān)系最近的真菌，Dzf2菌株的ITS序列與芬芳鐮孢菌(Fusan'wmmto/ens)X94169的ITS序列相似度為99.5%,其同源性的系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)圖見(jiàn)圖5。4、內(nèi)生鐮孢菌Dzf2的發(fā)酵培養(yǎng)特征培養(yǎng)基液體馬鈴薯-葡萄糖(PD)培養(yǎng)基。培養(yǎng)溫度25±1°C。發(fā)酵時(shí)間7天。搖床轉(zhuǎn)速120rpm。發(fā)酵培養(yǎng)特征培養(yǎng)第2天，菌液無(wú)色；培養(yǎng)第5天，菌液略帶橙黃色；培養(yǎng)第7天，菌液為灰黑色。5、內(nèi)生鐮孢菌Drf2粗提物的抗菌活性采用瓊脂打孔藥劑擴(kuò)散法，內(nèi)生真菌Dzf2菌液和菌絲提取物均表現(xiàn)出一定的抗菌活性，菌液提取物的活性強(qiáng)于菌絲提取物。采用多孔板液體稀釋法，噻唑藍(lán)(MTT)為顯色劑，測(cè)定了內(nèi)生真菌Dzf2菌液和菌絲提取物的最低抑菌濃度(MIC),菌液提取物對(duì)大腸桿菌、番茄細(xì)菌斑點(diǎn)病菌、枯草芽孢桿菌和溶血葡萄球菌的MIC值分別為0.03125mg/ml、0.0625mg/ml、0.0625mg/ml和0.125mg/ml。6、白僵菌素的追蹤分離特征通過(guò)薄層層析-生物自顯影抗菌活性檢測(cè)，對(duì)內(nèi)生真菌Dzf2培養(yǎng)物的提取物進(jìn)行反復(fù)的柱層析，包括常規(guī)的硅膠柱層析、S印hadexLH-20凝膠柱層析、RP-18反相柱層析，分離到一純的抗菌化合物，該化合物為白色針狀晶體。7、白僵菌素的結(jié)構(gòu)特征白僵菌素為一具有環(huán)狀化學(xué)結(jié)構(gòu)的脂肽類(lèi)化合物，由3個(gè)2-羥基異戊酸和3個(gè)N-甲基苯丙氨酸通過(guò)肽鍵和酯鍵交錯(cuò)相連而成，分子式為C4SH57N309,分子量為783.4。8、白僵菌素的抗菌活性特征采用多孔板-MTT比色法測(cè)定白傻菌素對(duì)4種革蘭氏陰性細(xì)菌(大腸桿菌、根癌土壤桿菌、黃瓜角斑病菌、番茄細(xì)菌斑點(diǎn)病菌)和兩種革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌(枯草芽孢桿菌、溶血葡萄球菌)的抑制活性。白便菌素對(duì)大腸桿菌、根癌土壤桿菌、黃瓜角斑病菌、番茄細(xì)菌斑點(diǎn)病菌、枯草芽孢桿菌、溶血葡萄球菌的半抑制濃度(IC5o)分別為55.59^ig/ml、21.23jig/ml、70.71pg/ml、18.97ng/ml、18.45pg/ml、26.57fig/ml，而陽(yáng)性對(duì)照硫酸鏈霉素對(duì)大腸桿菌、根癌土壤桿菌、黃瓜角斑病菌、番茄細(xì)菌斑點(diǎn)病菌、枯草芽孢桿菌、溶血葡萄球菌的半抑制濃度分別為18.75ng/ml、21.23ng/ml、17.51ng/ml、18.97fig/ml、12.05ng/ml、36.76ng/ml。其中白僵菌素對(duì)溶血葡萄球菌的抑制活性要強(qiáng)于硫酸鏈霉素，對(duì)根癌土壤桿菌和番茄細(xì)菌斑點(diǎn)病菌的抑制活性與硫酸鏈霉素相當(dāng)。圖1為內(nèi)生真菌Dzf2菌落正面。圖2為內(nèi)生真菌Dzf2菌落背面。圖3為內(nèi)生真菌Dzf2的菌絲、分生孢子梗、分生孢子。圖4為內(nèi)生真菌Dzf2的分生孢子。圖5為內(nèi)生真菌Dzf2同源性的系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)圖。圖6為內(nèi)生真菌Dzf2提取物和已分離純化的白僵菌素薄層層析-生物自顯影檢測(cè)結(jié)果[l為溶劑前沿；2和3為有白色斑點(diǎn)，表示有抗菌活性成分的存在；4為點(diǎn)樣點(diǎn)，樣品為分純的抗菌活性成分；5為點(diǎn)樣點(diǎn)，樣品為發(fā)酵培養(yǎng)物的總提取物；供試菌株為黃瓜角斑病菌(Psewdo;nomK/ac/io^ans);TLC條件正相硅膠板，展開(kāi)劑為氯仿:甲醇=10:1(v/v)]。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)本發(fā)明首次明確了具有廣譜抗菌活性的內(nèi)生鐮孢菌Dzf2菌株的微生物學(xué)分類(lèi)地位，同時(shí)發(fā)現(xiàn)該菌提取物對(duì)大腸桿菌、番茄細(xì)菌斑點(diǎn)病菌、枯草芽孢桿菌和溶血葡萄球菌的生長(zhǎng)具有明顯的抑制作用。采用活性追蹤的分離方法，從Dzf2菌株中分離到具有明顯抗菌活性的化合物白僵菌素。目的是利用植物內(nèi)生真菌資源，以求獲得天然抗生素類(lèi)成分，為探討內(nèi)生真菌的生理生態(tài)功能提供依據(jù)。為了更好地理解本發(fā)明，下面結(jié)合本發(fā)明的實(shí)施例進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明的實(shí)質(zhì)性?xún)?nèi)容，但本發(fā)明的內(nèi)容并不局限于此。具體實(shí)施方式實(shí)施例l:內(nèi)生真菌Drf2的分離采集新鮮的盾葉薯蕷根狀莖，表面先用70%乙醇處理303，然后用0.2。/。氯化汞處理20min以進(jìn)行徹底的表面滅菌，無(wú)菌條件下去除表皮，將根狀莖分成約0.5cmx0.5cmx0.5cm大小的塊段，擺放在PDA培養(yǎng)基上，每皿1塊，在25""C,光照條件下培養(yǎng)至第7^20天，從每個(gè)菌落的邊緣挑取一小段菌絲接種到PDA培養(yǎng)基上進(jìn)行純化，連續(xù)純化4-5次，至菌落形態(tài)一致。將純化后的菌株在PDA斜面上保存，其中一株內(nèi)生真菌的編號(hào)為Dzf2。實(shí)施例2:內(nèi)生真菌Dzf2菌株提取物的抗菌活性采用瓊脂打孔藥劑擴(kuò)散法，分別對(duì)內(nèi)生真菌Dzf2菌液和菌絲提取物進(jìn)行了檢測(cè)，結(jié)果見(jiàn)表l。表l內(nèi)生真菌Df2提取物的抗細(xì)菌活性<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>注表中數(shù)據(jù)為抑菌圈直徑±標(biāo)準(zhǔn)誤差(cm);每孔中內(nèi)生真菌提取物量為2.5噸硫酸鏈霉素(陽(yáng)性對(duì)照)為每孔10昭；陰性對(duì)照為每孔加50(iL二甲基亞砜，未表現(xiàn)出抑制活性，采用多孔板液體稀釋法，以噻唑藍(lán)(MTT)為顯色劑，測(cè)定了內(nèi)生真菌Dzf2菌液和菌絲提取物對(duì)細(xì)菌生長(zhǎng)的最低抑制濃度(MIC)，結(jié)果見(jiàn)表2。表2內(nèi)生真菌Dzf2提叫物對(duì)細(xì)菌生長(zhǎng)的最低抑制濃度<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>注硫酸鏈每素為陽(yáng)性對(duì)照；表明沒(méi)有檢測(cè)到MIC值實(shí)施例3:內(nèi)生真菌Drf2菌株的形態(tài)特征觀(guān)察內(nèi)生真菌Dzf2在PDA培養(yǎng)基上25。C培養(yǎng)，產(chǎn)生大量的氣生菌絲，白色，邊緣菌絲稀疏，菌落背面桔黃色，分生孢子梗單生或輪生，瓶梗狀，基部有分隔，大孢子近鐮刀形，2-3個(gè)隔，小孢子卵圓形，橢圓形，腎形無(wú)隔或者l個(gè)隔，孢子大小4.3-24nmx2.4-5nm。形態(tài)特征圖分別見(jiàn)圖1~圖4。在培養(yǎng)條件下，未發(fā)現(xiàn)Dzf2的有性世代。實(shí)施例4:內(nèi)生真菌Dzf2菌株ITS序列分析與分子鑒定首先將在平板上活化的Dzf2菌株的菌絲轉(zhuǎn)移到PDA液體培養(yǎng)基中,懸浮培養(yǎng)5天后獲得新鮮的菌絲,釆用常規(guī)的分子生物學(xué)方法提取基因組DNA。運(yùn)用PCR技術(shù)，DNA擴(kuò)增采用ITS通用引物ITS1(5'-TCCGTAGGTGAACCTGCGG-3')和ITS4(5，'TCCTCCGCTTATTGATATGC-3')。DNA測(cè)序所用的引物分別為ITS1和ITS4，采用ABIPRISM3730淵序儀，分別進(jìn)行正向(5'—3')和反向(3'—5')雙向測(cè)序。反向序列經(jīng)DNAMAN軟件反向互補(bǔ)后與正向序列拼接形成5'—3'完整序列。把所得的ISTrDNA序列提交至!lGenBank數(shù)據(jù)庫(kù)(NationalCenterforBiotechnologyInformationWebsite,http:〃www.ncbi.nlm.nih.gov)，獲得序列號(hào)(accessionnumber)DQ4462U。利用Blast工具進(jìn)行序列比對(duì)，找出與該序列相似度最髙的菌的序列信息。Dzf2菌株的ITS序列與芬芳鐮孢菌(尸usW函mto/e/w)X94169的ITS序列相似度為99.5%。根據(jù)Blast比對(duì)結(jié)果，從中抽取與所分離的內(nèi)生真菌Dzf2菌株序列相似性高的菌株的序列，采用ClustalX1.8軟件進(jìn)行序列對(duì)準(zhǔn)，再用MEGA軟件計(jì)算遺傳距離，然后利用距離依靠法中的鄰位相連法(Neighbor-joining,NJ)構(gòu)建進(jìn)化樹(shù)，計(jì)算Bootstrap值來(lái)評(píng)價(jià)系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)的可靠性。Dzf2同源性的系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)圖見(jiàn)圖5實(shí)施例5:內(nèi)生真菌DzC的發(fā)酵工藝本發(fā)明采用的是搖床發(fā)酵，1000ml體積的三角瓶中盛馬鈴薯-葡萄糖(PD)培養(yǎng)基400ml,將預(yù)先培養(yǎng)好的Dzf2菌絲接種到已滅菌的培養(yǎng)基中，在25士1。C、120rpm下暗培養(yǎng)7天，得總發(fā)酵液40L，通過(guò)減壓過(guò)濾獲得菌絲和菌液，菌液用等體積的正丁醇萃取，重復(fù)3次，合并萃取液，在50。C下減壓濃縮，得菌液提取物16g。菌絲在50。C下烘干后，得干重260g，研磨成粉，用2000ml正丁醇-浸泡24h后，再用超聲波提取，過(guò)濾，重復(fù)3次，合并濾液，在5(TC下減壓濃縮，得菌絲提取物31g。實(shí)施例6:內(nèi)生真菌Dzf2白倕菌素的追蹤分離對(duì)實(shí)施例5中所獲得的發(fā)酵培養(yǎng)物提取物，通過(guò)薄層層析(TLC)和薄層層析-生物自顯影(TLC-bioautography)抗菌活性檢測(cè)，表明菌絲提取物和菌液提取物所含成分一致，將菌絲和菌液提取物合并成總提取物，總提取物的TLC-生物自顯影抗菌活性測(cè)定結(jié)果見(jiàn)圖6。首先對(duì)提取物進(jìn)行粗分離，柱層析條件為環(huán)己垸:乙酸乙酯梯度(環(huán)己烷:乙酸乙酯=100:0，4L;100:1,4L;100:2,4L;100:3，4L;100:5，4L;100:10，4L;100:204L;100:50，4L,100:100，4Land0:100，4L)洗脫，洗脫部分通過(guò)TLC檢測(cè)，合并，分別得到10個(gè)組分(F-1:2.21g，F(xiàn)-2:1.21g，F(xiàn)-3:1.20g,F-4:0.92g,F-5:1.95g,F-6，2.48g，F(xiàn)-7,3.56g，F(xiàn)-8:4.13g,F-9，4.46g，F(xiàn)-10:6.18g)，其中，F(xiàn)-8組分表現(xiàn)出較強(qiáng)的抗菌活性，繼續(xù)通過(guò)SephadexLH-20柱層析，氣仿:甲醇(1:1，v/v)洗脫，最后通過(guò)RP-18反相硅膠柱層析，得到一純化合物，為白色針狀晶體，實(shí)施例7:白傻苗素的結(jié)構(gòu)鑒定用實(shí)施例6所述的方法制各到一白色針狀晶體(甲酵).m.p.91-93°C;ESI-MS(positive)w/z806.7[M+Na]+，(negative)w/z，782.4[M-H]-。NMR(MeOD，300MHz)<5(ppm),0.23(9H，d，《^6.5取H-14，14'，14")，0.83(9H，d,H:^H-15，15',15")，1.83(3H，m，H-13，13'，13"),2.98(3H，dd，^14.5,12.0HaH-3b,3b',3b"),3.02(9H，s，H陽(yáng)IO，10'，10"),3.35(3H，dd,^R5,5.0Hz^H-3a,3a',3a"),4.82(3H，dd，>12.0，5.0H-2,2'，2")，5.76(3H，d,>/=8.6Hz,H-12,12'，12"),7.25-7.15(15H，m,H-5,6,7,8，9,5'，6',7'，8'，9',5",6",7"，8",9");13CNMR(MeOD,75MHz)3(ppm),173.0(C-l，l',l")，57.8(C-2,2',2")，35.5(C-3,3'，3"),138.1(C-4,4'，4")，129.7(C-5,5',5"，9,9',9"),129.8(C-6,6'，6",8，8'，8"),128.0(C-7,7'，7")，32.2(C-10,10',10")，171.0(C-ll，11',ir)，77.2(C-12,12'，12")，31.2(C-13,13',13")，19.3(C-14，14',14")，17.3(C-15,15'，15")。根據(jù)理化常數(shù)和波譜數(shù)據(jù)，該化合物鑒定為白僵菌素，其結(jié)構(gòu)式如下<formula>formulaseeoriginaldocumentpage8</formula>實(shí)施例8:白傻菌素的抗菌活性測(cè)定用實(shí)施例6所述的方法，從內(nèi)生真菌Dzf2中分離到的白僵菌素進(jìn)行抗細(xì)菌活性測(cè)定。(1)活性測(cè)定的細(xì)菌菌株枯草芽孢桿菌(5flc,7/m犯6ft'toATCC11562)(革蘭氏陽(yáng)性)；溶血葡萄球菌(5topA>>/ococatf/we加o/沖'cusATCC29970)(革蘭氏陽(yáng)性)；黃瓜角斑病菌(尸seufito/wonos/oc/wymansATCC11921)(革蘭氏陰性)；根癌土壤桿菌C4g^toc/m'柳fWMe/acfewATCC11158)(革蘭氏陰性)；大腸桿菌(&c/wrtcAtoco//ATCC25922)(革蘭氏陰性)；番茄細(xì)菌斑點(diǎn)病菌(Xa"rto加onosvew'ca/ortaATCC11633)(革蘭氏陰性)。(2)培養(yǎng)基采用LB瓊脂培養(yǎng)基(酵母浸裔5g/L,蛋白胨10g/L,氯化鈉5g/L,瓊脂20g/L,pH7.0)和LB液體培養(yǎng)基(酵母浸膏5g/L，蛋白胨10g/L,氯化鈉5g/L,pH7.0)。(3)抗菌活性測(cè)定采用多孔板-MTT比色法測(cè)定白僵菌素對(duì)細(xì)菌的抑制活性，結(jié)果見(jiàn)表3。具體步驟為每孔加入濃度為106cfii/mL的供試菌液90jiL,然后加入不同濃度的藥液10uL，28°C暗培養(yǎng)24h后,每孔中加入5mg/mL的MTT溶液10nL,繼續(xù)培養(yǎng)411后加入10%二甲基亞砜100nL，繼續(xù)振蕩30min,以終止反應(yīng)并助其溶解.將顯色的菌懸液在3000g下離心10min,上演液轉(zhuǎn)到另一多孔板中，用酶標(biāo)儀測(cè)定其在590nm處的吸光值(OD590nm),按下式計(jì)算藥物抑制率(％):無(wú)藥對(duì)照孔Oi)590mn-藥液孔OZ)590nm抑制率(％)-xlOO無(wú)藥對(duì)照孔OD外o,根據(jù)抑制率，査機(jī)率值表，可得抑制率機(jī)率值a),將藥液濃度(mg/mL)換算成濃度對(duì)數(shù)a),即可求出線(xiàn)性方程r-aZ+b，根據(jù)線(xiàn)性方程可求出半數(shù)抑制濃度(IC5)。本發(fā)明中的數(shù)據(jù)均為3次重復(fù)平均值。表3多孔板-MTT比色法測(cè)定白僵菌素的抗細(xì)菌活性供試細(xì)菌白僵菌素的半抑制濃度(IC50)Oig/ml)陽(yáng)性對(duì)照硫酸鏈霉素的半抑制濃度(IC50)(pg/ml)大腸桿菌55.5918.75根癌土壤桿菌21.2321.23黃瓜角斑病菌70.7117.51番茄細(xì)菌斑點(diǎn)病菌18.9718.97枯草芽孢桿菌18.4512.05溶血葡萄球菌26.5736.7權(quán)利要求1、一株產(chǎn)白僵菌素的盾葉薯蕷內(nèi)生真菌，其特征是命名為鐮孢菌(Fusariumsp.)，已保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，登記入冊(cè)編號(hào)為CGMCCNo.2340。2、一種按權(quán)利要求1所述的內(nèi)生真菌的分離方法，通過(guò)嚴(yán)格的表面消毒，從植物內(nèi)都分離出來(lái)的，并通過(guò)形態(tài)和分子鑒定，將ITSrDNA序列提交到GenBank數(shù)據(jù)庫(kù)，獲得序列號(hào)DQ446211。3、一種從按權(quán)利要求1所述的內(nèi)生真菌中分離白僵菌素的方法，白僵菌素具有抗細(xì)菌活性，其化學(xué)結(jié)構(gòu)式如下白僵菌素全文摘要本發(fā)明涉及一種產(chǎn)白僵菌素的盾葉薯蕷內(nèi)生鐮孢菌。本發(fā)明所述的內(nèi)生真菌Dzf2是從盾葉薯蕷中采用內(nèi)生真菌分離技術(shù)分離獲得的，經(jīng)微生物分類(lèi)鑒定為鐮孢菌(Fusariumsp.)，該菌株已保藏在中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，登記入冊(cè)編號(hào)為CGMCCNo.2340。本發(fā)明首次從盾葉薯蕷中分離出產(chǎn)白僵菌素的內(nèi)生真菌，并明確了白僵菌素的抗菌活性。目的是利用植物內(nèi)生真菌資源，獲得天然活性成分。文檔編號(hào)C12P17/14GK101240249SQ20081005684公開(kāi)日2008年8月13日申請(qǐng)日期2008年1月25日優(yōu)先權(quán)日2008年1月25日發(fā)明者周立剛,姜微波,彭友良,徐利劍,王明安,趙江林,黃永富申請(qǐng)人:中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)