專利名稱：痢疾桿菌腹瀉糞便增菌培養(yǎng)基的制作方法
痢疾桿菌腹瀉糞便增菌培養(yǎng)基
技術(shù)領(lǐng)域 本發(fā)明涉及一種痢疾桿菌腹瀉糞便增菌培養(yǎng)基，其主要成分是胰蛋
白胨、枸櫞酸鈉、去氧膽酸鈉、磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀、氯化鈉、小牛血清、葡萄糖、甘露醇經(jīng)一定的工藝制成。用以供糞便增菌培養(yǎng)痢疾桿菌。利用培養(yǎng)試驗鑒別細(xì)菌的種類，其關(guān)鍵在于準(zhǔn)確、快速、簡便。而細(xì)菌接種量大小，會直接影響檢測結(jié)果。往往需要將樣本通過不同方法進(jìn)行增菌培養(yǎng)，來進(jìn)行細(xì)菌種類的鑒別，這是目前微生物實驗室最常用的手段。由于目前培養(yǎng)條件的應(yīng)用范圍所限，供糞便痢疾桿菌增菌培養(yǎng)的培養(yǎng)基沒有特效的，存在所需接種量大、培養(yǎng)時間長、易出現(xiàn)假陽性或假陰性等問題。隨著生物研究的進(jìn)展，國內(nèi)外對細(xì)菌鑒別的增菌培養(yǎng)基研究也在不斷的發(fā)展中。生物工作者一直希望能有一種能克服上述不足的增菌培養(yǎng)基 一一 痢疾桿菌腹瀉糞便增菌培養(yǎng)基。
技術(shù)背景 本發(fā)明的目的在于提供一種能克服已有鑒別培養(yǎng)基不足的痢疾桿
菌腹瀉糞便增菌培養(yǎng)基。與其它同類培養(yǎng)基相比具備下列特點所需接種量小，少量細(xì)菌即可迅速繁殖，在通常室溫下或37t:培養(yǎng)5-6小時即可觀察結(jié)果；不易出現(xiàn)假陽性和假陰性；能破壞標(biāo)本中存在的抑菌物質(zhì)，使細(xì)菌生長不受抑制。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的要點在于選擇合適的組分，并進(jìn)行合理混配，經(jīng)加溫、溶
解、混合、冷卻、分裝、高溫滅菌等工藝而成一種痢疾桿菌腹瀉糞便增菌培養(yǎng)基。
本發(fā)明選擇的配方如下(組分及其重量百分比％ ):胰蛋白胨(1.8-2.2)、枸
櫞酸鈉(0.4-0. 5)、去氧膽酸鈉(0.04-0.06)、磷酸二氫鉀(0. 14-0. 16)、磷酸氫二鉀
(0. 38-0. 42)、氯化鈉(0. 4-0. 5)、葡萄糖(0. 10-0. 12)、甘露醇(0. 15-0. 25)、小牛血清
(0. 4-0. 5)、蒸餾水加至100ml。 本培養(yǎng)基含有枸櫞酸鈉和去氧膽酸鈉，對革蘭氏陰性菌有抑制作用，大腸桿菌，綠膿桿菌及變形桿菌，在接種6小時內(nèi)生長緩慢，而痢疾桿菌可相對地得到增殖.氯化鈉用于調(diào)整滲透壓；磷酸二氫鉀用于調(diào)節(jié)pH。胰蛋白胨、小牛血清、葡萄糖、甘露醇是培養(yǎng)基中的營養(yǎng)和支持成分。標(biāo)本接種后即計算時間，在通常室溫下或37t:培養(yǎng)，均有增菌作用.增菌培養(yǎng)6小時后，即用劃線法移種到腸道選擇性培養(yǎng)基上以分離致病菌。
本發(fā)明產(chǎn)品的制備方法是 1)、將胰蛋白胨、枸櫞酸鈉、去氧膽酸鈉、磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀、氯化鈉、葡萄糖、甘露醇按比例加入蒸餾水中，再加熱溶解，矯正pH至7. 0矯正pH至6. 8，用濾紙過濾；
2)、壓力蒸汽滅菌0. 70kgl5分鐘； 3)、無菌條件下，加入無菌小牛血清，分裝安培瓶，每瓶約5ml，存于冰箱中備用。
本發(fā)明具有以下優(yōu)點(l)所需接種量小，培養(yǎng)時間短，少量細(xì)菌即可迅速繁殖，在通常室溫下或37t:培養(yǎng)5-6小時即可觀察結(jié)果；(2)不易出現(xiàn)假陽性或假陰性；(3)能破壞標(biāo)本中存在的四環(huán)素、金霉素、土霉素、新霉素、多粘菌素及鏈霉素的抑菌作用。
具體實施方式
下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作進(jìn)一步的詳細(xì)說明
按照下表所列數(shù)據(jù)(重量百分比％ )及其所述步驟進(jìn)行配置配方一
胰蛋白胨1. 8-2. 2
枸櫞酸鈉0. 4-0. 5
去氧膽酸鈉0. 04-0. 06
磷酸二氫鉀0. 14-0. 16
磷酸氫二鉀0. 38-0. 42
氯化鈉0. 4-0. 5
葡萄糖0. 10-0. 12
甘露醇0. 15-0. 25
小牛血清0. 4-0. 5
蒸餾水加至100
配方二
胰蛋白胨1. 8-2. 0
枸櫞酸鈉0. 4-0. 45
去氧膽酸鈉0. 04-0. 05
磷酸二氫鉀0. 14-0. 15
磷酸氫二鉀0. 38-0. 40
氯化鈉0. 4-0. 45
葡萄糖0. 10-0. 11
甘露醇0. 15-0. 20
小牛血清0. 4-0. 45
蒸餾水加至100
配方三
胰蛋白胨2. 0-2. 2
枸櫞酸鈉0. 45-0. 5
去氧膽酸鈉0. 05-0. 06
磷酸二氫鉀0. 15-0. 16
磷酸氫二鉀0. 40-0. 42
氯化鈉0. 45-0. 5
葡萄糖0. 11—0.12
甘露醇0. 18-0. 25
小牛血清0. 45—0. 5
蒸餾水加至100配方四
胰蛋白胨1, 9-2. 1
枸櫞酸鈉0. 42-0. 45
去氧膽酸鈉0. 05-0. 06
磷酸二氫鉀0, 15-0. 16
磷酸氫二鉀0. 39-0. 40
氯化鈉0. 42-0. 45
葡萄糖0. 11-0. 12
甘露醇0. 17-0. 22
小牛血清0. 42-0. 45
蒸餾水加至100
權(quán)利要求
本發(fā)明涉及一種痢疾桿菌腹瀉糞便增菌培養(yǎng)基，其主要成分是胰蛋白胨、枸櫞酸鈉、去氧膽酸鈉、磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀、氯化鈉、小牛血清、葡萄糖、甘露醇經(jīng)一定的工藝制成；其特征在于具有如下配方(組分及其重量百分比％)胰蛋白胨(1.8-2.2)、枸櫞酸鈉(0.4-0.5)、去氧膽酸鈉(0.04-0.06)、磷酸二氫鉀(0.14-0.16)、磷酸氫二鉀(0.38-0.42)、氯化鈉(0.4-0.5)、葡萄糖(0.10-0.12)、甘露醇(0.15-0.25)、小牛血清(0.4-0.5)、蒸餾水100ml。
2. —種權(quán)利要求1所述痢疾桿菌腹瀉糞便增菌培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于具有如下的步驟1) 、將胰蛋白胨、枸櫞酸鈉、去氧膽酸鈉、磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀、氯化鈉、葡萄糖、甘露醇按比例加入蒸餾水中，再加熱溶解，矯正pH至7. 0矯正pH至6. 8，用濾紙過濾；2) 、壓力蒸汽滅菌0. 70kgl5分鐘；3) 、無菌條件下，加入無菌小牛血清，分裝安培瓶，每瓶約5ml，存于冰箱中備用。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種痢疾桿菌腹瀉糞便增菌培養(yǎng)基，其主要成分是胰蛋白胨、枸櫞酸鈉、去氧膽酸鈉、磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀、氯化鈉、小牛血清、葡萄糖、甘露醇經(jīng)一定的工藝制成。用以供糞便增菌培養(yǎng)痢疾桿菌。本發(fā)明具有以下優(yōu)點(1)所需接種量小，培養(yǎng)時間短，少量細(xì)菌即可迅速繁殖，在通常室溫下或37℃培養(yǎng)5-6小時即可觀察結(jié)果；(2)不易出現(xiàn)假陽性或假陰性；(3)能破壞標(biāo)本中存在的四環(huán)素、金霉素、土霉素、新霉素、多粘菌素及鏈霉素的抑菌作用。
文檔編號C12Q1/10GK101698875SQ20081009344
公開日2010年4月28日 申請日期2008年4月21日 優(yōu)先權(quán)日2008年4月21日
發(fā)明者曲奕 申請人:曲奕